李思媛，閆花麗，張強

陜西省藥品和疫苗檢查中心 （陜西西安 710065）

即時檢驗（point-of-care testing，POCT）概念于20 世紀90 年代起源于自美國，2000 年后進入中國。POCT 是體外診斷行業(yè)的一個細分領域，是指在采樣現(xiàn)場即刻進行的快速診斷，省去了標本在實驗室檢驗的復雜處理，利用便攜式分析儀器及配套試劑即可快速得到檢測結果的一種檢測方式。POCT是基于醫(yī)學、免疫學、分析生物學、機械、光學等多學科綜合發(fā)展而產(chǎn)生的現(xiàn)代醫(yī)學檢測方法[1-4]。

2023 年5 月29 日，國家衛(wèi)生健康委、國家中醫(yī)藥局聯(lián)合印發(fā)了《全面提升醫(yī)療質量行動計劃（2023-2025 年）》[5]，文件指出“建立健全覆蓋檢查、檢驗全過程的質量管理制度，加強室內質量控制，重點關注POCT 質量管理，配合做好室間質量評價工作，充分發(fā)揮質量管理對于推進醫(yī)療機構檢查檢驗結果互認的重要作用?！北狙芯恐饕獜姆肿覲OCT 產(chǎn)品的發(fā)展現(xiàn)狀和應用方面進行分析和探討，旨在為該產(chǎn)品行業(yè)相關企業(yè)、機構提供參考。

1 分子POCT 產(chǎn)品的概述

分子POCT 是指通過技術創(chuàng)新與優(yōu)化，進行全自動、一體化設計以符合即時檢測要求的分子生物學檢測系統(tǒng)。該系統(tǒng)為整合一體化封閉系統(tǒng)，其核酸提取、擴增檢測均在同一封閉、便攜式儀器完成，無需人工配制試劑、無需樣本人工處理。樣本上機后至結果報告過程中無需其他手工操作，可有效防止生物樣本及其遺傳物質污染環(huán)境。此系統(tǒng)還兼具微型化、易攜帶、自動化、全封閉、速度快、操作簡易等特點，同時能保證檢測性能的高特異性和敏感性，使其能夠適用于醫(yī)院急診、基層醫(yī)療單位、家庭等多種檢驗場景。分子POCT 產(chǎn)品的優(yōu)點為儀器或試劑體積小、便于攜帶，且能縮短實驗結果周轉時間。對于急診治療和搶救的患者，醫(yī)師可根據(jù) POCT 信息，為患者及時作出初步診斷并擬定救治方案，有利于減少住院時間，降低發(fā)病率、死亡率[1-3]。例如： 核酸檢測較抗原檢測靈敏度高，對于氣溶膠污染和樣本交叉污染較敏感。因此，為了確保核酸檢測結果的準確性，應盡可能的規(guī)避污染。傳統(tǒng)的核酸檢測多在標準PCR 實驗室進行。PCR 實驗室有獨立的房間及相應的空氣流道設計，同時PCR 擴增間通過負壓設計，可規(guī)避氣溶膠污染。另外，整個核酸檢測要求操作人員持證上崗，采集的鼻咽拭子樣本要統(tǒng)一送PCR 實驗室集中檢測，導致傳統(tǒng)的核酸檢測等待結果時間長。分子POCT 產(chǎn)品解決了傳統(tǒng)核酸檢測對環(huán)境要求嚴格和需要專業(yè)操作人員的兩大難點。分子POCT要求“樣本進結果出”和全密閉，使分子POCT產(chǎn)品在理論上脫離PCR 實驗室使用。此外，分子POCT 產(chǎn)品可實現(xiàn)整個核酸檢測全過程的自動化，對操作人員的要求較低。 POCT 產(chǎn)品的試劑劑量較小、檢測儀器也可重復利用，制備成本相對較低，檢測成本大幅降低，對于日常疾病檢測具有重大意義。

2 分子POCT 產(chǎn)品的發(fā)展現(xiàn)狀

近年來，全球分子診斷POCT 市場加速發(fā)展。根據(jù)《2023-2029 年中國分子診斷行業(yè)市場發(fā)展?jié)摿巴顿Y風險預測報告》[6]，2021 年，全球分子診斷POCT 行業(yè)市場規(guī)模達53.02 億美元，同比增長13%；細分mPOC 領域和“近患”分子診斷領域的市場規(guī)模分別為10.08 億美元、42.94 億美元。

2.1 國外分子POCT 產(chǎn)品的發(fā)展現(xiàn)狀

根據(jù)國際市場劃分，分子診斷POCT 可分為 現(xiàn)場即時診斷（molecular point of care，mPOC）和“近患”分子診斷2 個領域。其中，mPOC 是在便攜式設備上運行PCR 或其他DNA 和RNA 檢測的設備，占地面積小，可攜帶，檢測速度快，可在醫(yī)師辦公室或患者旁邊進行檢測，獲得FDA 實驗室豁免；也可以在實驗室以外使用，強調非實驗區(qū)域進行操作，操作人員可為非專業(yè)人士、臨床醫(yī)師?！敖肌狈肿釉\斷是指分子診斷系統(tǒng)可以接近患者，但仍需在實驗室操作，不符合mPOC 的定義，可能是被FDA 根據(jù)臨床實驗室改進修正案而授權豁免資格或沒有豁免的產(chǎn)品，操作人員為需要有一定的基礎且經(jīng)過簡單培訓的檢驗人員[3-4]。根據(jù)《2023—2029 年中國分子診斷行業(yè)市場發(fā)展?jié)摿巴顿Y風險預測報告》（以下簡稱報告）發(fā)布的最新數(shù)據(jù)，mPOC 領域代表企業(yè)有美國賽沛、美國梅里埃、雅培、羅氏等?！敖肌狈肿釉\斷領域代表企業(yè)有美國賽沛、美國梅里埃等。目前GeneXpert 全球裝機量已經(jīng)超過20 000 臺，在美國醫(yī)院分子診斷同類型設備的裝機量中，美國賽沛發(fā)布的GeneXpertPCR 分析儀占比接近25%，超過美國梅里埃等。2020 年新型冠狀病毒疫情期間，美國賽沛成為全美裝機量和新型冠狀病毒檢測試劑盒出貨最多的企業(yè)，其次是美國梅里埃，該公司分子診斷系統(tǒng)FilmArray銷售額達4.83 億歐元，分子生物學業(yè)務成為其增長最快的主要部門，80%增長來自FilmArray 多重PCR 分析系統(tǒng)[5-8]。

2.2 國內分子POCT 產(chǎn)品的發(fā)展現(xiàn)狀

根據(jù)《報告》顯示，疫情前，我國涉足分子POCT 領域的企業(yè)僅有賽沛、優(yōu)思達、博暉、博奧，全國分子POCT 診斷市場容量僅8 億～10 億元。自2020 年新型冠狀病毒疫情爆發(fā)以來，市場分子檢測需求急速增長，我國分子POCT 診斷產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)企業(yè)數(shù)量大增[9-12]。但由于我國分子POCT診斷行業(yè)正處于初步發(fā)展階段，市場暫時無法根據(jù)國際市場進行區(qū)分，將擁有體積小、具備PCR 實驗室外操作能力、檢測快速的樣本處理-核酸提取-擴增檢測一體機生產(chǎn)能力的體外診斷企業(yè)劃歸為分子POCT 診斷企業(yè)。按照國內行業(yè)中分子POCT 診斷產(chǎn)品應用領域進行劃分，我國分子POCT 診斷產(chǎn)業(yè)大致細分為新型冠狀病毒核酸快檢、公共衛(wèi)生檢測、婦幼檢測及寵物醫(yī)院檢測四大領域。其中，新型冠狀病毒核酸快檢領域所占市場份額為58%，以達安基因、圣湘生物、卡尤迪、優(yōu)思達、博奧等企業(yè)為主；以結核分枝桿菌為主的公共衛(wèi)生檢測領域所占市場份額達29%，以人乳頭瘤病毒為主等婦幼檢測領域所占市場份額達6%，寵物醫(yī)院等領域所占市場份額達5%。近年來，我國分子POCT 診斷產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)企業(yè)數(shù)量大增，行業(yè)市場快速發(fā)展。截至2022 年底，國內行業(yè)市場規(guī)模達34 億～52 億元，2019—2022 年，產(chǎn)業(yè)市場規(guī)模復合增長51.01%[13]。

3 分子POCT 產(chǎn)品的應用分析

3.1 國外分子POCT 產(chǎn)品的應用

美國賽沛GeneXpert 平臺目前已開展超過40 個檢測項目，涵蓋醫(yī)療相關感染、危重感染、性健康、婦女健康、病毒和腫瘤、遺傳等應用領域，其中包含結核及利福平耐藥、淋球菌、沙眼衣原體、甲型流感，乙型流感、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐萬古霉素的腸球菌、碳青霉烯類抗生素耐藥腸桿菌科細菌、艾滋病、快速定量檢測丙肝病毒、乙肝病毒載量監(jiān)測九大經(jīng)典產(chǎn)品檢測。

美國梅里埃的FilmArray 平臺主要應用于體外定性檢測具有腦膜炎及（或）腦炎體征及（或）癥狀人群的腦脊液樣本中的 14 種細菌、病毒和隱球菌的核酸，包括：大腸埃希菌 K1 株、流感嗜血桿菌、單核細胞增生李斯特菌、腦膜炎奈瑟菌（有莢膜）、無乳鏈球菌、肺炎鏈球菌；巨細胞病毒、腸道病毒、單純皰疹病毒1 型、單純皰疹病毒2 型、人皰疹病毒6 型、人雙?？刹《?、水痘-帶狀皰疹病毒；新型隱球菌。

雅培PRISMnEXT 免疫分析儀應用于對癌癥、傳染性疾病、心血管疾病和甲狀腺疾病等的免疫分析； ARCHITECTc4000 臨床化學分析儀對癌癥、心血管疾病和甲狀腺疾病、藥物濫用、生育能力、肝炎和傳染病的免疫分析。雅培的傳染病免疫分析包括皰疹病毒組DNA 病毒、風疹、弓形蟲、甲型肝炎、乙型肝炎等。

羅氏的Cobas Liat 系統(tǒng)是一種快速、易用的PCR 平臺，應用于床旁按需檢查，如醫(yī)師辦公室、藥房、以及醫(yī)院和衛(wèi)星實驗室，主要用于流感A/B病毒和呼吸道合胞病毒檢測[14-16]。

3.2 國內分子POCT 產(chǎn)品的應用

從應用領域看，POCT 產(chǎn)品可應用于臨床檢驗、慢病監(jiān)測、災害醫(yī)學救援、傳染病監(jiān)測、檢驗檢疫、食品安全、毒品檢驗等公共衛(wèi)生領域[17]。

從應用場景看，POCT 產(chǎn)品可出現(xiàn)在多種場合，包括大型醫(yī)院的病房、門診、急診、檢驗科、手術室、監(jiān)護室；基層醫(yī)院、社區(qū)門診和私人診所；體檢中心；衛(wèi)生服務中心、疾病預防控制中心、災害醫(yī)學救援現(xiàn)場、食品安全檢測現(xiàn)場、環(huán)境保護現(xiàn)場；海關檢疫、違禁藥品快速篩查；法醫(yī)學現(xiàn)場；生物反恐現(xiàn)場等[17-18]。

2021 年7 月發(fā)布的《病原體核酸即時檢測質量管理要求專家共識》對于分子POCT 的應用場景以及主要用途表述較詳細[19]，見表1。

表1 分子POCT 的應用場景

國產(chǎn)分子POCT 產(chǎn)品的的應用簡介如下。（1）全自動核酸檢測分析系統(tǒng)：在臨床上對來源于人體生殖道分泌物、呼吸道拭子、血清/血漿、糞便、尿波樣本中的靶核酸（DNAJRNA）進行定性、定量檢測，包括人類基因檢測項目和病原體核酸檢測項目。（2）芯片核酸擴增分析儀：臨床上用于對來源于人體的痰液拭子洗脫液、肺泡灌洗液等樣本中的靶核酸進行定性檢測，包括病毒、細菌、真菌、非典型病原菌、耐藥基因等項目。（3）恒溫核酸擴增分析儀：采用基于熒光檢測的恒溫核酸擴增原理，與配套的檢測試劑共同使用，用于對來源于人體呼吸道樣本中的被分析物進行定性檢測，包括呼吸道病原菌核酸檢測試劑盒、耐藥基因檢測試劑盒項目；其中，呼吸道病原菌核酸檢測試劑盒用于定性檢測痰液中，包括肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等8 種臨床常見下呼吸道病原菌。

3.3 我國分子POCT 產(chǎn)品的應用需求

3.3.1 基層醫(yī)療機構

盡管我國基本公共衛(wèi)生服務有了長足的進步和改善，但基層醫(yī)療機構的醫(yī)療資源短缺、設備配置水平偏低，還存在功能少、性能低等問題?；鶎俞t(yī)療機構對分子POCT 平臺也有較大需求，尤其是設備投入不足時，分子POCT 產(chǎn)品在基層應用較廣，包括床邊、急診、門診等，可為患者提供更好的服務。分子POCT 產(chǎn)品更適合多數(shù)基層醫(yī)療機構，更好的滿足基層的臨床需求，降低基層醫(yī)院對實驗室和人力的投入[15-16]。

3.3.2 發(fā)熱門診

在發(fā)熱門診建設過程中，提高檢測能力是重中之重。除了基礎的救治類、檢驗類設備外，還需要高效便捷的輔助診斷工具。針對上呼吸道感染病原體，如甲型乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、肺炎鏈球菌、A 群鏈球菌、肺炎支原體、肺炎衣原體等，使用快速抗原檢測試劑進行初篩，無需設備，即來即測，采樣、檢測、出報告 0.5 h 內完成，為臨床醫(yī)師提供快速準確的診斷依據(jù)。同時，此類抗原快速檢測試劑，不僅適用于實驗室檢測，還適用于各種復雜的一線場景，助力各級醫(yī)療機構發(fā)熱門診的高效檢測[17-18]。

3.3.3 防控傳染病

艾滋病、肝炎（乙肝、丙肝）等傳染性疾病的初期癥狀極不明顯，導致感染者易錯失最佳治療時期，并成為潛在感染源，加重了我國的傳染病防控負擔。現(xiàn)階段，快速診斷試劑已在部分地區(qū)性大規(guī)模篩查及部分疾病預防控制中心、門診等場景中應用。此外，利用快速診斷試劑由特定社會組織或潛在感染者自行檢測，更大范圍的將高危人群納入檢測，從而提高檢出率。另外，在部分特定場合公安稽查以及部分場合的職業(yè)暴露方面，快速診斷試劑也可發(fā)揮其相應的作用。快速診斷試劑在更多場景的覆蓋，使更多的潛在感染者知曉自身感染情況，發(fā)現(xiàn)潛在傳染源，阻斷相關血源性傳染病傳播[18-19]。

3.3.4 健康居家自檢

新型冠狀病毒抗原檢測作為 POCT 由專業(yè)實驗室開展逐步進入健康居家自檢的一個縮影，見證了快速診斷產(chǎn)品在流行疾病診斷和公眾健康防護方面的積極作用。健康居家自檢解決了患者長時間就診等候的痛點，僅需在家中自主完成取樣、檢測，即刻獲取檢測結果，或居家完成取樣環(huán)節(jié)后再將樣本寄送至專業(yè)檢驗機構，遠程查看檢測結果，獲得診療服務。居家自檢擁有便捷、私密、無接觸、不受環(huán)境限制、節(jié)約醫(yī)療資源等特點。目前國外自檢試劑種類更豐富，歐美批準了部分尿液指標檢測產(chǎn)品（如尿液白蛋白數(shù)量、亞硝酸鹽含量等）以及獨具歐美特色的毒品自我檢測類產(chǎn)品等。參照國外自檢產(chǎn)品的發(fā)展，在我國流感、艾滋病、肝炎、腫瘤早篩及維生素等多個項目均為具有較大應用潛力居家場景的自檢產(chǎn)品[20]。

4 總結和展望

目前，分子POCT 檢測技術的應用領域不斷擴展，包括發(fā)熱門診、急診、兒科、呼吸內科等臨床科室均對分子診斷技術有剛性需求。雖有不少報道[1-10]證明POCT 的優(yōu)越性，但其仍還存在一些不足，如質量控制體系不完善、操作者的技術水平參差不齊、臨床管理不夠完善，職責分工不明及操作者專業(yè)知識欠缺等嚴重影響結果的準確性和可重復性等。POCT 產(chǎn)品作為一種新的檢驗模式，因其設備便攜，獲得結果迅速，可在社區(qū)等基層醫(yī)療機構及經(jīng)濟落后地區(qū)開展，有利于腫瘤標志物的早期篩查，實現(xiàn)對腫瘤早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，降低死亡率，且可對術后患者的腫瘤標記物進行及時監(jiān)測[20-22]。

未來的POCT 檢測技術將不僅局限于疫情防控，還將在許多其他領域得到廣泛應用，包括社區(qū)醫(yī)療、體檢中心、家庭保健、海關、軍隊、學校等社會部門對POCT 技術的需求較高。隨著新技術、新思維、新模式在POCT 的廣泛應用，POCT 產(chǎn)品已不再是傳統(tǒng)的POCT，而是集新技術、人工智能、智慧診斷為一體的高度智能化、精準化、云端化、共享化、人工智能化為核心的新一代智慧POCT 設備，其應用場景會更廣泛。與現(xiàn)有傳統(tǒng)IVD 大型設備互相補充，互相協(xié)同，全方位打通檢驗科、臨床、患者、醫(yī)療機構、政府等全鏈條，為婦幼保健、慢性病管理、健康監(jiān)測、傳染病預防等提供更廣泛的數(shù)據(jù)支持[20-23]。目前，分子POCT 檢測市場正在迅速增長。中國的POCT 檢測市場也受益于人口老齡化和慢性病的增加，以及醫(yī)療衛(wèi)生改革的推進[24-26]。