范星晨，祁玉芳，張科衛(wèi)，汪思晨，戴桂鈺，陸兔林，毛春芹

南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 210023

梔子GardeniaeFructus為茜草科梔子屬植物梔子GardeniajasminoidesEllis 的干燥成熟果實(shí)，是中國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源品種之一[1-2]。其性寒，味苦，具有瀉火除煩、涼血解毒、消腫止痛、清熱利濕的功效?，F(xiàn)代研究表明，梔子中所含的梔子苷、西紅花苷等成分具有保肝利膽、抗炎、抗抑郁等作用[3-7]。

有關(guān)梔子的炮制最早見于東漢，稱為“擘”，即敲擊梔子使其裂開[8]。到了宋代，《產(chǎn)寶雜錄》首載“姜汁炒焦黃”[9]。姜梔子的炮制方法自此不斷改良和完善，姜汁炙法也一直沿用至今。《中國(guó)藥典》2020年版收載的越鞠保和丸、黃連上清顆粒、導(dǎo)赤丸等14 種成方制劑均以姜梔子組方配伍入藥，但歷版《中國(guó)藥典》梔子項(xiàng)下均未收錄姜梔子這一飲片。查閱國(guó)家及各省市的炮制規(guī)范發(fā)現(xiàn)，北京、天津、山西、河南、福建、山東、重慶等省市均收錄了姜梔子飲片及其炮制方法，但是不同地區(qū)姜梔子的炮制方法有所不同，且均缺少細(xì)化統(tǒng)一的炮制工藝參數(shù)。故有必要對(duì)姜梔子的炮制工藝參數(shù)進(jìn)行細(xì)化，以使其質(zhì)量穩(wěn)定可控，從而保證臨床用藥安全有效。

本研究采用 Box-Behnken 設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法（Box-Behnken design-response surface methodology，BBD-RSM）考察姜梔子炮制工藝，以外觀性狀與內(nèi)在指標(biāo)性成分的含量相結(jié)合，以此細(xì)化姜梔子炮制工藝參數(shù)，為中藥飲片炮制工藝的規(guī)范化研究提供一定的參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Agilent 1260 型高效液相色譜儀，美國(guó)Agilent公司；MS-105D 型1/10 萬(wàn)電子分析天平，瑞士梅特勒-托利多集團(tuán)；CM-5 型分光測(cè)色儀，日本柯尼卡美能達(dá)有限公司；KQ-500E 型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；H1650-W 型臺(tái)式高速離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；FA1104N 型電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；美的C21-RT2170 型勻火電磁爐，廣東美的生活電器制造有限公司；JYL-C93T 型榨汁攪拌機(jī)，九陽(yáng)股份有限公司；BO-400Y 型多功能粉碎機(jī)，中國(guó)永康鉑政五金廠；H1650-W 型臺(tái)式高速離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；Milli-Q Integral 3 型超純水器，南京漢隆實(shí)驗(yàn)器材有限公司。

1.2 試劑與藥品

對(duì)照品梔子苷（批號(hào)21092708，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.11%）、西紅花苷I（批號(hào)20022801，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.29%）、京尼平龍膽雙糖苷（批號(hào)21090604，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.20%）、西紅花苷II（批號(hào)19102303，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.84%）均購(gòu)于成都普菲德生物技術(shù)有限公司；甲醇、甲酸、乙腈為色譜純；實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)Milli-Q Integral 3 型超純水器處理后所得的超純水。

16 批梔子藥材（編號(hào)Z01～Z16）購(gòu)于8 個(gè)不同的省份，分別為浙江金華（Z01）、蒼南（Z02），四川成都（Z03），山西晉城（Z04），安徽亳州（Z05）、六安（Z06），江西井岡山（Z07）、九江（Z08）、上饒（Z09）、樟樹（Z10），湖北神農(nóng)架（Z11）、蘄春（Z12），福建三明（Z13）、福安（Z14），湖南岳陽(yáng)（Z15）、湘潭（Z16）；分別取上述梔子藥材按照《中國(guó)藥典》2020 年版飲片項(xiàng)下制備成相對(duì)應(yīng)的凈梔子飲片（ZP01～ZP16）；輔料生姜購(gòu)于江蘇南京。經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)陳建偉教授鑒定，分別為茜草科梔子屬植物梔子GardeniajasminoidesEllis 的干燥成熟果實(shí)、姜科姜屬植物姜ZingiberofficinaleRosc.的新鮮根莖。經(jīng)檢測(cè)均符合《中國(guó)藥典》2020 年版的質(zhì)量要求。

2 方法與結(jié)果

2.1 梔子姜炙制備方法

2.1.1 輔料姜汁的制備 取生姜100 g，洗凈，搗碎，加水適量榨汁，用4 層紗布濾過(guò)。姜渣再加水適量，重復(fù)壓榨2 次，合并汁液，最后得生姜汁100 mL（每1 mL 生姜汁相當(dāng)于生姜1 g）。

2.1.2 姜梔子的制備 取100 g 凈梔子飲片，加入一定量的姜汁拌勻，潤(rùn)透，置于已設(shè)定相應(yīng)功率的炒制容器內(nèi)，翻炒至規(guī)定程度，取出，晾涼，即得。其中姜汁用量以凈梔子飲片質(zhì)量的百分比表示。如10%的姜汁用量即指100 g 凈梔子飲片所用姜汁量為10 g。

2.2 指標(biāo)成分的含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件 色譜柱為Agilent C-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液-乙腈，梯度洗脫：0～15 min，96%～88%乙腈；15～30 min，88%～80%乙腈；30～35 min，80%～74%乙腈；35～45 min，74%～60%乙腈；45～60 min，60%～96%乙腈；體積流量1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm 和440 nm；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL。經(jīng)上述色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，樣品中梔子苷和西紅花苷I 色譜峰的保留時(shí)間與對(duì)照品的保留時(shí)間相一致，均能達(dá)到很好的分離效果。對(duì)照品及樣品的HPLC圖見圖1。

圖1 混合對(duì)照品 (254 nm, A; 440 nm, B) 和姜梔子樣品(254 nm, C; 440 nm, D) 的HPLC 圖Fig.1 HPLC of mixed reference substances (254 nm, A; 440 nm, B) and Gardeniae Fructus processed with ginger juice(254 nm, C; 440 nm, D)

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取對(duì)照品京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷、西紅花苷I 和西紅花苷II適量，配制成質(zhì)量濃度為1.904、1.816、1.991、1.211 mg/mL 的混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.2.3 供試品溶液的制備 取按“2.1.2”項(xiàng)下制成的姜梔子飲片，打粉。精密稱取其粉末（過(guò)四號(hào)篩）0.1 g，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇20 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理40 min（功率250 W、頻率40 kHz），放冷，稱定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，高速（12 000 r/min）離心（離心半徑5 cm）10 min，取上清液過(guò)0.22 μm微孔濾膜，即得供試品溶液。

2.2.4 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品儲(chǔ)備液，按倍比稀釋原則制備成系列混合對(duì)照品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積平均值（Y）對(duì)質(zhì)量濃度（X）進(jìn)行線性回歸，計(jì)算回歸方程分別為京尼平龍膽雙糖苷Y＝647.030X＋1.517 2，r＝0.999 9，線性范圍59.6～952.0 μg/mL；梔子苷Y＝2 843.000X＋2.697 1，r＝0.999 5，線性范圍56.8～908.0 μg/mL；西紅花苷IY＝2 460.700X－22.152，r＝0.999 4，線性范圍62.2～996.0 μg/mL；西紅花苷IIY＝1 012.800X－12.951，r＝0.999 6，線性范圍75.7～605.5 μg/mL。

2.2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6 次，記錄各色譜峰峰面積，根據(jù)目標(biāo)化合物峰面積計(jì)算其RSD。結(jié)果京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷、西紅花苷I、西紅花苷II 峰面積的RSD 分別為0.66%、0.52%、0.47%、0.67%，結(jié)果表明儀器系統(tǒng)精密度良好。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取編號(hào)為Z06 的梔子藥材，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制成姜梔子飲片，精密稱取姜梔子樣品粉末6 份，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算出各目標(biāo)化合物的含量，并計(jì)算得各目標(biāo)化合物含量的RSD。結(jié)果京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷、西紅花苷I、西紅花苷II 的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為2.706 8%、8.052 3%、6.095 2%、1.213 8%，其RSD 分別為1.40%、0.22%、0.71%、0.68%，結(jié)果表明所建立的試驗(yàn)方法重復(fù)性良好。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取編號(hào)為Z06 的梔子藥材，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制成姜梔子飲片，精密稱取同一份樣品粉末，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備成供試品溶液，分別在制備后0、2、4、8、12、24 h 按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，根據(jù)目標(biāo)化合物峰面積計(jì)算其RSD。結(jié)果京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷、西紅花苷I、西紅花苷II 峰面積RSD 分別為0.80%、0.73%、0.63%、0.92%，結(jié)果表明供試品溶液在室溫密閉條件下放置24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.8 加樣回收率試驗(yàn) 取編號(hào)為Z06 的梔子藥材，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制成姜梔子飲片，精密稱取0.05 g 已知各指標(biāo)成分含量的姜梔子粉末9 份，分成3 組，每組分別精密加入0.5、1.0、1.5 mL 的混合對(duì)照品溶液（其中1.0 mL 混合對(duì)照品溶液中指標(biāo)成分質(zhì)量濃度與樣品中指標(biāo)成分質(zhì)量濃度總體相當(dāng)），按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算各目標(biāo)化合物的加樣回收率及其RSD。結(jié)果京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷、西紅花苷I、西紅花苷II 的平均加樣回收率分別為100.12%、100.09%、99.99%、100.21%，RSD 分別為1.20%、0.90%、0.80%、1.30%，結(jié)果表明該試驗(yàn)所建立的含量測(cè)定方法準(zhǔn)確度良好。

2.3 姜梔子炮制工藝考察

2.3.1 BBD-RSM 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)本課題組前期研究情況[10]，選擇炒制火力（X1）、炒制時(shí)間（X2）、姜汁用量（X3）3 個(gè)因素設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，Y為綜合評(píng)分。炮制工藝評(píng)價(jià)選擇梔子苷、西紅花苷I、醇溶性浸出物的含量及外觀性狀（顏色＋氣味）作為指標(biāo)。BBD-RSM 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見表1，外觀性狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

表1 BBD-RSM 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table 1 Design and results of BBD-RSM

表2 姜梔子外觀性狀評(píng)分Table 2 Evaluation of appearance of Gardeniae Fructus processed with ginger juice

按照Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，根據(jù)各指標(biāo)重要程度確定綜合評(píng)分的方法，具體計(jì)算方法見如下公式。

i表示組別編號(hào)，S1i、S2i、S3i分別對(duì)應(yīng)各組別姜梔子飲片梔子苷含量、西紅花苷I 含量、醇溶性浸出物含量，S1max、S2max、S3max分別對(duì)應(yīng)所有組別姜梔子飲片梔子苷含量、西紅花苷I含量、醇溶性浸出物含量的最大值，Pi為各組別姜梔子飲片性狀評(píng)分（顏色＋氣味）（分），Pmax為所有組別姜梔子飲片性狀評(píng)分最大值（分）

2.3.2 梔子姜炙外觀性狀研究

（1）色澤評(píng)價(jià)：根據(jù)響應(yīng)面法設(shè)計(jì)的試驗(yàn)分組進(jìn)行測(cè)色試驗(yàn)，按“2.1”項(xiàng)下方法制備姜梔子飲片并粉碎過(guò)三號(hào)篩，備用。測(cè)色儀測(cè)定光源D65，視角測(cè)量口徑φ3 mm，測(cè)定試場(chǎng)10°，測(cè)量波長(zhǎng)360～740 nm，測(cè)量波長(zhǎng)間隔10 nm，照明光源脈沖氙燈，SCE 模式（不包含鏡面反射光），30 mm。零校正（放置透明片、黑筒）與用戶校正（放置透明片、白板）。將4.0 g 樣品粉末均勻平鋪在測(cè)試皿內(nèi)采集圖像并記錄色度值，平行測(cè)定3 次取平均值。

以明度值（L*）、紅綠值（a*）和黃藍(lán)值（b*）來(lái)表示色號(hào)并計(jì)算總色度值（Eab*），公式為Eab*＝(L*2＋a*2＋b*2)1/2，Eab*越大顏色越淺[11]。其中L*由0～100 表示顏色由黑到白；a*由正到負(fù)表示顏色由紅到綠色；b*由正到負(fù)表示顏色由黃到藍(lán)[12-13]?？捎每偵钪担éab*）[11]表示2 個(gè)色號(hào)之間的色差，計(jì)算公式為ΔEab*＝(ΔL*2＋Δa*2＋Δb*2)1/2，規(guī)定當(dāng)ΔEab*＞1.5 時(shí)，表示待測(cè)樣品顏色間有明顯差異[14]。顏色評(píng)分范圍見表3，不同炮制程度姜梔子飲片見圖2。由表3 可知，評(píng)分4 的總體亮度最高，顏色最淺，總體偏紅偏黃，符合主體紅黃色的外觀性狀描述；相比評(píng)分4，評(píng)分5 的姜梔子亮度、紅色度、黃色度均較小，故呈現(xiàn)金黃色的外觀；評(píng)分3、2、1 的姜梔子亮度、紅色度、黃色度隨著評(píng)分降低其下降幅度很大，其亮度逐漸變暗，顏色也逐漸加深，與肉眼所見的主觀感受相符合。取各個(gè)評(píng)分L*、a*、b*的平均值代入ΔEab*的計(jì)算公式，各個(gè)評(píng)分之間的ΔEab*按照評(píng)分順序從高到低分別為3.657、5.207、8.678、7.533 均遠(yuǎn)大于規(guī)定所述的1.5，說(shuō)明不同評(píng)分的姜梔子飲片顏色有明顯差異，故采用電子眼測(cè)色評(píng)價(jià)姜梔子的炮制程度是可行的。

表3 姜梔子顏色評(píng)分范圍Table 3 Color rating range of Gardeniae Fructus processed with ginger juice

圖2 不同炮制程度姜梔子飲片F(xiàn)ig.2 Different processing degrees of Gardeniae Fructus processed with ginger juice

（2）氣味評(píng)價(jià)：隨機(jī)選取15 名嗅覺(jué)正常的健康人員對(duì)炮制后的姜梔子飲片進(jìn)行氣味測(cè)評(píng)，取其平均值作為氣味評(píng)分（評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表2）。氣味評(píng)分結(jié)果見表1。

2.3.3 BBD-RSM 試驗(yàn)結(jié)果 按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算，得出梔子苷、西紅花苷I 的含量；浸出物測(cè)定按照《中國(guó)藥典》2020 年版測(cè)定方法（通則2201），采用熱浸法提取醇溶性浸出物，提取溶劑為乙醇。結(jié)果見表1。

利用Design-Expert 10.0 軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)各因素分別進(jìn)行多元線性回歸和二項(xiàng)擬合，得到回歸方程Y＝?201.590 8＋0.652 9X1＋24.569 9X2＋24.661 8X3＋0.006 5X1X2－0.006 1X1X3－0.081 1X2X3－0.000 8X12－2.933 7X22－1.139 5X32，判定系數(shù)（R）0.982 0?；貧w模型具體數(shù)據(jù)見表4，本次建立的模型P＜0.001，F(xiàn)值為42.441 4，表明此響應(yīng)回歸模型達(dá)到了極顯著性水平，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且失擬項(xiàng)P值為0.095 6＞0.05，F(xiàn)值為4.321 9，失擬項(xiàng)不顯著，表明無(wú)失擬因素存在。因此，該回歸方程可對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。根據(jù)模型的判定系數(shù)（R2＝0.982 0）、調(diào)整判定系數(shù)（Radj2＝0.958 9）和預(yù)測(cè)判定系數(shù)（Rpre2＝0.943 3），可知有4.11%的變異不能用該模型解釋，說(shuō)明該模型擬合性較好；變異系數(shù)（CV）2.58%＜10%表明試驗(yàn)精確度可信度高。精密度是有效信號(hào)與噪聲的比值，為19.099 5＞4，說(shuō)明試驗(yàn)較為合理。

表4 Box-Behnken 回歸模型方差與顯著性分析Table 4 Analysis of variance and significance of Box-Behnken regression model

擬合模型中各系數(shù)的絕對(duì)值大小直接反映各因素對(duì)指標(biāo)值的影響程度，X1、X2、X3、X12、X22、X32項(xiàng)P值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.05），對(duì)綜合評(píng)分均有影響。其中單因素項(xiàng)的X1（炒制火力）和X2（炒制時(shí)間）對(duì)模型的影響表現(xiàn)出極顯著性水平（P＜0.001），對(duì)綜合評(píng)分影響較大，表明這2 項(xiàng)是影響姜梔子飲片質(zhì)量的主要因素。X3（姜汁用量）雖然不是影響姜梔子飲片質(zhì)量的主要因素，但仍表現(xiàn)出顯著性水平（P＜0.05）。根據(jù)F值大小得3 個(gè)因素對(duì)姜梔子炮制品質(zhì)量影響的貢獻(xiàn)率為X2＞X1＞X3。

根據(jù)擬合回歸方程，運(yùn)用Origin 2018 軟件建立矩陣并繪制三維效應(yīng)面圖和等高線圖，結(jié)果見圖3。右側(cè)各影響因素兩兩交互的等高線均呈現(xiàn)橢圓形，說(shuō)明各因素交互作用較為顯著。結(jié)合左側(cè)三維效應(yīng)面圖可知，炒制火力（X1）、炒制時(shí)間（X2）的三維圖傾斜度較高，坡度較陡，顏色加深變化顯著，說(shuō)明這2 個(gè)因素對(duì)姜梔子炮制工藝綜合評(píng)分影響較為顯著，該結(jié)論與方差分析結(jié)果一致。

圖3 炒制溫度 (X1)、炒制時(shí)間 (X2)、姜汁用量 (X3) 3 因素對(duì)綜合評(píng)分的三維效應(yīng)面圖和等高線圖Fig.3 Response and contour surface plots of processing firepower (X1), frying time (X2) and the amount of ginger juice (X3)three factors to composite score

利用軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)可知，姜梔子的最優(yōu)炮制工藝為炒制火力368.543 W，炒制時(shí)間4.459 min，姜汁用量9.677%，綜合評(píng)分為92.805 分。結(jié)合實(shí)際操作，將最佳工藝修正為炒制火力400 W，炒制時(shí)間4.5 min，姜汁用量10%。

2.4 姜炙工藝驗(yàn)證試驗(yàn)

按照上述優(yōu)化工藝制備3 份樣品，樣品表面呈金黃色，具姜辣味。具體評(píng)分結(jié)果見表5，結(jié)果表明本研究?jī)?yōu)選出的姜梔子炮制工藝穩(wěn)定可行。

表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Results of verification test

2.5 梔子姜炙前后化學(xué)成分變化

取“1.2”項(xiàng)下的凈梔子飲片（ZP01～ZP16）；按照優(yōu)選工藝制備姜梔子飲片（JZP01～JZP16），按“2.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算各成分含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6。梔子飲片經(jīng)姜炙后其中的京尼平龍膽雙糖苷、梔子苷的含量均有上升；西紅花苷I、II的含量顯著降低，尤以西紅花苷II 含量下降最為顯著，平均下降幅度約為46%。

表6 16 批梔子飲片和姜梔子飲片樣品中4 種成分含量測(cè)定 (n = 3)Table 6 Contents of four compounds in Gardeniae Fructus samples (n = 3)

3 討論

目前，針對(duì)姜梔子的研究較少且研究?jī)?nèi)容基本都以單個(gè)成分含量檢測(cè)為主，缺少其他的代表性成分。本研究引入電子眼測(cè)色這一技術(shù)，將外觀評(píng)價(jià)的色澤進(jìn)行量化，減少了主觀因素帶來(lái)的評(píng)判失誤，這樣就能更加科學(xué)合理地對(duì)姜梔子飲片的炮制程度進(jìn)行客觀評(píng)判。

本研究發(fā)現(xiàn)梔子在姜炙過(guò)程中其外觀性狀與內(nèi)在化學(xué)成分均發(fā)生了變化。梔子在姜炙不及時(shí)呈現(xiàn)原本的紅黃色，在姜炙得當(dāng)后呈現(xiàn)金黃色，在姜炙太過(guò)時(shí)顏色逐漸呈棕褐色；梔子經(jīng)姜炙后，其中所含的梔子苷與京尼平龍膽雙糖苷的含量均有上升，該結(jié)果與其他學(xué)者的研究相一致[10,15]；西紅花苷I、II 的含量顯著降低，尤以西紅花苷II 下降最為顯著，可能與其作為長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的化合物性質(zhì)不穩(wěn)定，較易轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)有關(guān)[16-17]。

在進(jìn)行氣味評(píng)價(jià)試驗(yàn)時(shí)，本實(shí)驗(yàn)參考姜炙工藝的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[18-20]，發(fā)現(xiàn)目前尚未見測(cè)試氣味時(shí)所采用的測(cè)試人員的相關(guān)信息（健康狀況、人數(shù)）。為了使得氣味評(píng)分結(jié)果更具客觀性，本實(shí)驗(yàn)選擇15名具有正常嗅覺(jué)的健康人員進(jìn)行測(cè)試評(píng)分，然后取平均值的方法來(lái)獲得最終的氣味測(cè)試結(jié)果，從而保證氣味評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)的合理性。

本實(shí)驗(yàn)將顏色變化以客觀量化方式納入考察范疇，使得試驗(yàn)結(jié)果更加科學(xué)、準(zhǔn)確、客觀。在考察指標(biāo)方面選用了梔子中的梔子苷、西紅花苷等具有生理活性的物質(zhì)作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，相比于單一化學(xué)成分的考察更加合理，且這些指標(biāo)成分在實(shí)際測(cè)定過(guò)程中耗費(fèi)的資源成本較低，符合企業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)的要求。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突