嚴(yán)浩東,張臣臣,2,徐晶晶,陳大衛(wèi),2,康文麗,潘麗娜,唐溶雪,李威,顧瑞霞,2*

1(揚(yáng)州大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州,225000)

2(揚(yáng)州大學(xué),江蘇省乳品生物技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 揚(yáng)州,225000)

3(澳優(yōu)乳業(yè)(中國(guó))有限公司,湖南 長(zhǎng)沙,410127)

4(人體微生態(tài)制品湖南省工程研究中心,湖南 長(zhǎng)沙,410127)

人體是由真核細(xì)胞與體內(nèi)共生的微生物共同組成的“超級(jí)生物體”[1]。腸道菌群與宿主健康密切相關(guān),甚至被認(rèn)為是“被忽略的人體器官”。腸道菌群通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能[2]、保護(hù)腸道[3]、調(diào)節(jié)各類(lèi)營(yíng)養(yǎng)素代謝[4]等對(duì)機(jī)體健康產(chǎn)生重要影響。大量疾病和身體不適與腸道微生物息息相關(guān)。

益生菌可以定植在腸道內(nèi),從而影響腸道菌群的組成,其對(duì)于外源病原微生物的抵抗作用得到越來(lái)越多的重視。益生菌抑菌的作用機(jī)理包括競(jìng)爭(zhēng)性代謝相互作用、宿主的免疫反應(yīng)和抑制腸道黏附[5];此外,也有研究發(fā)現(xiàn),有些益生菌存在信號(hào)分子干擾機(jī)制,通過(guò)釋放某些信號(hào)分子從而將病原微生物從腸道內(nèi)排除[6]。

益生元是一類(lèi)可以供益生菌選擇性利用的基質(zhì),可以賦予某些健康益處[7],最為常見(jiàn)的益生元有低聚果糖(fructooligosaccharides,FOS)和低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS),它們發(fā)揮作用的主要方式是定向的增殖乳酸桿菌或雙歧桿菌。這些低聚糖很容易被乳酸菌中普遍存在的β-果糖苷酶、β-半乳糖苷酶降解[8],通過(guò)定向的被某些菌株利用,從而增加這部分菌株在腸道微生物群落中的占比。另外,來(lái)自母乳的低聚糖也被認(rèn)為對(duì)新生兒腸道微生物群和免疫系統(tǒng)發(fā)育有著至關(guān)重要的作用[9-10],2′-巖藻糖基乳糖(2′-focusllactose,2′-FL)是常見(jiàn)的一類(lèi)人乳低聚糖,2′-FL在腸胃道水平上具有增強(qiáng)腸道免疫和屏障的功能[11-12]。但是不同低聚糖對(duì)不同益生菌菌株抑菌能力的影響作用仍待探究。

植物乳桿菌AUH2103是一株分離自母乳的菌株,本研究擬探究2′-FL等低聚糖對(duì)植物乳桿菌AUH2103致病菌的抑制能力的影響作用和機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

低聚果糖(FOS)、低聚半乳糖(GOS):純度>95%,量子高科(中國(guó))生物股份有限公司;(2′-FL):純度>95%,德國(guó)BASF公司。

MRS培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖 20,蛋白胨 10,無(wú)水乙酸鈉 5,MgSO4·7H2O 0.2,MnSO4·7H20 0.05,K2HPO4·7H2O 2,檸檬酸二銨 2,酵母膏 5,牛肉膏 10,吐溫-80 1 mL。固體培養(yǎng)基添加2%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))瓊脂粉。

低聚糖MRS培養(yǎng)基:以20 g/L的低聚糖代替MRS培養(yǎng)基中的葡萄糖。

LB培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖10,酵母粉5,氯化鈉10。固體培養(yǎng)基添加2%瓊脂粉。

DMEM完全培養(yǎng)液:80%(體積分?jǐn)?shù))DMEM,20%(體積分?jǐn)?shù))優(yōu)質(zhì)胎牛血清。

1.2 儀器與設(shè)備

BXP-16恒溫培養(yǎng)箱,上海力辰邦儀器科技有限公司;JF-SX-500型全自動(dòng)滅菌鍋,日本TOMY公司;SW-CJ-1FD型超凈工作臺(tái),蘇州凈化設(shè)備有限公司;HERACELL二氧化碳培養(yǎng)箱,美國(guó)Thermo公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 菌株和細(xì)胞株的培養(yǎng)

植物乳桿菌AUH2103是由江蘇省乳品生物技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室分離自母乳(CGMCC 23527)。將該菌株以3%的接種量在37 ℃的MRS肉湯中培養(yǎng)18 h,在MRS固體平板中分離純化3次后,備用。

大腸桿菌ATCC 25922T,鼠傷寒沙門(mén)氏菌CMCC 50115T,蠟樣芽胞桿菌ATCC 11778T和金黃色葡萄球菌ATCC 6538T是由江蘇省乳品生物技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保存的,將這些菌株在LB肉湯搖床培養(yǎng)12 h后,在LB固體平板中分離純化3次后,備用。

Caco-2(人結(jié)腸腺癌)細(xì)胞是由江蘇省乳品生物技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保存。Caco-2細(xì)胞在補(bǔ)充有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后,使用無(wú)菌PBS清洗3次,從塑料培養(yǎng)瓶中去除未貼壁的細(xì)胞,然后用0.25%(體積分?jǐn)?shù))的胰蛋白酶處理,傳代至15～20代。將細(xì)胞密度調(diào)整為5×106cells/mL,接種200 μL至24孔板中,在37 ℃ 5%(體積分?jǐn)?shù))CO2的條件下允許細(xì)胞完全生長(zhǎng)分化并形成完整的屏障。

1.3.2 植物乳桿菌AUH2103的培養(yǎng)抑菌能力

采用單層瓊脂平板擴(kuò)散法[13],將30 mL滅菌的LB固體培養(yǎng)基傾注于培養(yǎng)皿中,待其充分凝固后用無(wú)菌三角涂布棒將預(yù)先稀釋至1×107CFU/mL的4種致病菌菌懸液100 μL均勻涂布。用打孔器均勻等距打孔,向各孔內(nèi)注入200 μL待測(cè)樣品,并做好標(biāo)記。加樣結(jié)束后將培養(yǎng)皿正置于18 ℃培養(yǎng)箱,待其充分?jǐn)U散過(guò)夜,再將平板移至37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)束后測(cè)量抑菌圈直徑。

1.3.3 植物乳桿菌AUH2103的黏附能力測(cè)定

參照文獻(xiàn)方法[14]并改進(jìn),補(bǔ)充有10%(體積分?jǐn)?shù))FBS的DMEM用于培養(yǎng)細(xì)胞。將Caco-2細(xì)胞接種在24孔板中,并在37 ℃下孵育直至形成單層膜。在含有不同種類(lèi)不同濃度的低聚糖的PBS中洗滌菌體2次,并以終濃度109CFU/mL進(jìn)行重懸;將100 μL細(xì)菌懸浮液加入Caco-2培養(yǎng)板孔中,并在37 ℃下孵育2 h;用PBS洗滌Caco-2細(xì)胞3次以去除未黏附的細(xì)菌,然后加入50 μL 0.25%胰蛋白酶-EDTA以裂解細(xì)胞。最后,將每個(gè)孔的混合物接種在MRS瓊脂平板上以計(jì)數(shù)黏附的細(xì)菌。

1.3.4 低聚糖對(duì)黏附能力的影響

為了研究不同種類(lèi),不同質(zhì)量濃度的低聚糖對(duì)于植物乳桿菌AUH2103對(duì)Caco-2細(xì)胞的黏附能力的影響,將不同質(zhì)量濃度不同種類(lèi)的低聚糖進(jìn)行復(fù)配,觀察復(fù)配后低聚糖是否具有更好的促進(jìn)Caco-2細(xì)胞黏附能力的作用。使用含有不同質(zhì)量濃度的低聚糖組合的PBS溶液洗滌菌體(表1),并以終濃度109CFU/mL進(jìn)行重懸,按照1.3.3節(jié)的方法培養(yǎng)細(xì)胞并進(jìn)行黏附試驗(yàn)。

表1 復(fù)配低聚糖各組別中的低聚糖占比

1.3.5 致病菌黏附

按照以往的研究進(jìn)行改進(jìn)[15],植物乳桿菌AUH2103在37 ℃下培養(yǎng)18 h后,離心取菌體,使用PBS清洗2次后,使用對(duì)應(yīng)的低聚糖溶液重懸菌體,備用。

大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌和蠟樣芽胞桿菌在搖床上培養(yǎng)以37 ℃,160 r/min的條件下培養(yǎng)12 h后,離心取菌體,使用PBS溶液清洗2次后,使用對(duì)應(yīng)的低聚糖溶液重懸菌體,備用。

單獨(dú)黏附:用PBS(pH 7.2)清洗單層細(xì)胞2次,每孔加入200 μL的致病菌懸液(約為1.5×109CFU),懸浮溶液分別為PBS、含2′-FL PBS以及含低聚糖組合PBS,在37 ℃,5%CO2和95%相對(duì)濕度的條件下與細(xì)胞共同孵育2 h。用PBS(pH 7.2)洗滌3次單層膜,以除去未結(jié)合的細(xì)菌,加入150 μL 0.25%胰蛋白酶消化液,在37 ℃下消化 15 min后,向每個(gè)孔中加入350 μL補(bǔ)充有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液終止消化。連續(xù)10倍梯度稀釋,采用平板菌落計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)活菌數(shù),所計(jì)活菌數(shù)即為黏附于細(xì)胞上的細(xì)菌數(shù)目。

競(jìng)爭(zhēng)黏附:用PBS(pH 7.2)清洗單層細(xì)胞2次,每孔加入200 μL的致病菌和AUH2103混合菌懸液(指示菌約為1.5×109CFU),懸浮溶液分別為PBS、含2′-FL PBS(5 g/L)以及含低聚糖組合PBS,在37 ℃,5% CO2和95%相對(duì)濕度的條件下與細(xì)胞共同孵育2 h。用PBS(pH 7.2)洗滌3次單層膜,以除去未結(jié)合的細(xì)菌,加入150 μL 0.25%胰蛋白酶消化液,在37 ℃下消化15 min后,向每個(gè)孔中加入350 μL補(bǔ)充有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液終止消化。連續(xù)10倍梯度稀釋,采用平板菌落計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)活菌數(shù),所計(jì)活菌數(shù)即為黏附于細(xì)胞上的細(xì)菌數(shù)目。

排斥黏附:用PBS(pH 7.2)清洗單層細(xì)胞2次,每孔先后加入200 μL的致病菌(經(jīng)測(cè)定含致病菌約為1.5×109CFU)和AUH2103混合菌,懸液懸浮溶液分別為PBS、含2′-FL PBS以及含低聚糖組合PBS,在37 ℃,5% CO2和95%相對(duì)濕度的條件下與細(xì)胞共同各孵育1 h。用PBS(pH 7.2)洗滌3次單層膜,以除去未結(jié)合的細(xì)菌,加入150 μL 0.25%胰蛋白酶消化液,在37 ℃下消化15 min后,向每個(gè)孔中加入350 μL補(bǔ)充有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液終止消化。連續(xù)10倍梯度稀釋,采用平板菌落計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)活菌數(shù),所計(jì)活菌數(shù)即為黏附于細(xì)胞上的細(xì)菌數(shù)目。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物乳桿菌AUH2103發(fā)酵液的抑菌能力

為了評(píng)估不同低聚糖對(duì)于植物乳桿菌AUH2103發(fā)酵液抑制致病菌能力的影響,本實(shí)驗(yàn)將MRS培養(yǎng)基中的碳源由葡萄糖替換為等比例的低聚糖進(jìn)行發(fā)酵,最后使用單層瓊脂擴(kuò)散法測(cè)試發(fā)酵液的抑菌能力。測(cè)試結(jié)果如表2所示,替換碳源對(duì)于發(fā)酵液抑菌效果的能力影響較小,對(duì)于蠟樣芽孢桿菌而言,將碳源替換GOS后的抑菌效果與MRS組無(wú)顯著性差異(P>0.05),對(duì)于金黃色葡萄球菌而言,將碳源替換為FOS或GOS后的抑菌效果均與MRS組無(wú)顯著性差異(P>0.05),對(duì)于大腸桿菌和沙門(mén)桿菌而言,結(jié)果與上述的情況類(lèi)似,MRS組均具有較好的抑菌效果,碳源替換為GOS和FOS后的抑菌效果出現(xiàn)了變化,但這種變化較小,但是,對(duì)于所有4種指示菌而言,將碳源替換為2′-FL后,抑菌效果均不明顯。這與植物乳桿菌AUH2103對(duì)碳源的利用能力有關(guān),植物乳桿菌AUH2103在以2′-FL作為碳源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)不良[16],發(fā)酵液的pH值無(wú)法降低,從而沒(méi)有抑菌效果。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,植物乳桿菌AUH2103發(fā)酵液的主要抑菌原理為產(chǎn)酸抑制,對(duì)于培養(yǎng)基中碳源的利用能力是影響發(fā)酵液pH的主要因素。對(duì)GOS和FOS的利用可能并未產(chǎn)生額外的抑菌物質(zhì)。

表2 不同碳源對(duì)于植物乳桿菌AUH2103抑菌能力的影響

2.2 低聚糖對(duì)植物乳桿菌AUH2103細(xì)胞黏附的促進(jìn)作用

2.2.1 單種低聚糖的作用

以往的研究表明,益生菌與致病菌在體內(nèi)的相互作用,除了直接產(chǎn)酸抑制致病菌生長(zhǎng)外,還可以通過(guò)黏附腸道細(xì)胞形成腸道屏障后,阻止致病菌與腸道細(xì)胞的接觸,例如中性高分子質(zhì)量和低分子質(zhì)量的寡糖(主要是巖藻糖基化的)抑制了單核細(xì)胞增生李斯特菌對(duì)Caco-2的黏附力[17]。細(xì)菌對(duì)于上皮細(xì)胞的黏附被認(rèn)為是益生菌菌株的選擇標(biāo)準(zhǔn)之一,而Caco-2細(xì)胞是目前應(yīng)用較為廣泛的細(xì)胞系[18-20]。本試驗(yàn)考察在不同濃度、不同種類(lèi)的低聚糖存在的情況下,植物乳桿菌AUH2103對(duì)于Caco-2細(xì)胞黏附能力的影響,這可以模擬體內(nèi)益生菌形成保護(hù)腸道細(xì)胞的腸道黏膜的情況。表3結(jié)果顯示,在添加FOS的組別中,當(dāng)FOS的濃度為5 g/L時(shí),植物乳桿菌AUH2103的黏附能力最強(qiáng),黏附后的活菌數(shù)達(dá)到了6.43×107CFU/mL;在添加GOS的組別中,當(dāng)GOS濃度為5 g/L時(shí),植物乳桿菌AUH2103的黏附能力最強(qiáng),黏附后的活菌數(shù)達(dá)到了6.13×107CFU/mL;在添加2′-FL的組別中,當(dāng)2′-FL濃度為5 g/L時(shí),植物乳桿菌AUH2103的黏附能力最強(qiáng),黏附后的活菌數(shù)達(dá)到了5.68×107CFU/mL。黏附機(jī)制則通常分為兩方面,一些菌株可以與細(xì)胞上的特定位點(diǎn)進(jìn)行特異性的相互作用而結(jié)合,而另一些菌株則是由于非特異性作用所導(dǎo)致的[21]。部分研究發(fā)現(xiàn),乳酸菌通常是通過(guò)表面相關(guān)蛋白或其他因素與宿主細(xì)胞進(jìn)行黏附或直接作用從而引發(fā)下游反應(yīng)[22]。因此,可能低聚糖通過(guò)觸發(fā)與細(xì)胞相互作用的表面黏附蛋白的基因表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)乳酸菌對(duì)Caco-2細(xì)胞的黏附能力[23]。

表3 植物乳桿菌AUH2103進(jìn)行細(xì)胞黏附時(shí)添加低聚糖的影響

2.2.2 復(fù)配低聚糖對(duì)黏附的促進(jìn)作用

低聚糖經(jīng)過(guò)復(fù)配后,可能存在協(xié)同作用,由表4可知,在所有組別中,組別B對(duì)于植物乳桿菌AUH2103的黏附能力提高效果最好,黏附的活菌數(shù)達(dá)到了1.45×108CFU/mL,顯著高于其他組別(P<0.05)。在植物乳桿菌AUH2103孵育時(shí)添加復(fù)配低聚糖可以顯著提高菌株細(xì)胞黏附能力,其中植物乳桿菌AUH2103在組別B的黏附的活菌數(shù)最高,即FOS含量為0.5 g/L、GOS含量為0.5 g/L和2′-FL 含量為2 g/L時(shí),可以顯著提高植物乳桿菌AUH2103對(duì)于Caco-2細(xì)胞的體外黏附能力。這項(xiàng)結(jié)果顯示,在Caco-2細(xì)胞與植物乳桿菌AUH2103共同孵育時(shí)添加低聚糖,可以提高植物乳桿菌AUH2103的黏附能力。

表4 添加復(fù)配低聚糖對(duì)植物乳桿菌AUH2103對(duì)細(xì)胞黏附能力的影響

2.3 復(fù)配低聚糖和植物乳桿菌AUH2103對(duì)致病菌黏附的抑制

益生菌在腸道細(xì)胞中形成腸道屏障后,可以有效阻止侵襲型的腸道病原菌與腸道細(xì)胞接觸,從而降低病原菌侵襲腸道從而導(dǎo)致疾病的概率。此前通過(guò)Caco-2細(xì)胞黏附試驗(yàn)已經(jīng)證明,在低聚糖存在的情況下,植物乳桿菌AUH2103對(duì)于Caco-2細(xì)胞的黏附能力有所提高。選擇此前試驗(yàn)中已經(jīng)確認(rèn)可以顯著提高黏附能力的低聚糖配方和目前研究較多的2′-FL作為低聚糖干預(yù)組,觀察其是否具有保護(hù)Caco-2細(xì)胞免受病原微生物黏附的能力。黏附試驗(yàn)?zāi)M2種常見(jiàn)的情況,第一種為競(jìng)爭(zhēng)性黏附,即乳酸菌與病原微生物同時(shí)存在的情況下,觀察乳酸菌的存在是否會(huì)降低病原微生物的黏附效果。第二種為排斥性黏附,即乳酸菌先對(duì)Caco-2細(xì)胞進(jìn)行黏附后,觀察致病菌的黏附是否有所降低。

2.3.1 低聚糖對(duì)于致病菌黏附的影響

結(jié)果圖1所示,對(duì)比不添加低聚糖的單獨(dú)黏附組,對(duì)于大腸桿菌和蠟樣芽孢桿菌而言,添加2′-FL干預(yù)可以促進(jìn)其黏附能力;而添加復(fù)配低聚糖則可以促進(jìn)沙門(mén)氏菌對(duì)于細(xì)胞的黏附;金黃色葡萄球菌的黏附則被2種添加的低聚糖抑制。結(jié)果顯示出了明顯的菌株特異性,這種情況在目前的研究中較為常見(jiàn),例如FACINELLI等[24]的研究顯示,在存在6′-巖藻糖基乳糖和2′-唾液酸乳糖的情況下,大腸桿菌對(duì)于Caco-2細(xì)胞的黏附顯著降低。2種低聚糖對(duì)非傷寒沙門(mén)氏菌未觀察到積極影響。CILIEBORG等[25]的研究顯示,使用2′-FL可以抑制大腸桿菌F18對(duì)于腸上皮細(xì)胞的體外黏附。

圖1 低聚糖對(duì)致病菌黏附能力的影響

2.3.2 低聚糖對(duì)植物乳桿菌AUH2103與致病菌競(jìng)爭(zhēng)黏附影響

競(jìng)爭(zhēng)性黏附試驗(yàn)如圖2所示,添加2′-FL后,致病菌的黏附數(shù)下降的最多,顯著低于其他組別(P<0.05)。沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌的黏附結(jié)果顯示,低聚糖干預(yù)可以有效降低沙門(mén)氏菌的黏附量,但是兩種低聚糖干預(yù)后的結(jié)果并無(wú)顯著性差異(P>0.05)。蠟樣芽胞桿菌的結(jié)果則顯示,無(wú)論添加低聚糖與否,對(duì)于其黏附能力均無(wú)顯著影響。結(jié)果顯示出了明顯的菌株特異性。

圖2 低聚糖對(duì)植物乳桿菌AUH2103競(jìng)爭(zhēng)黏附抑菌能力的影響

此外,JANKOWSKA等[26]的研究發(fā)現(xiàn),益生菌對(duì)于致病菌的競(jìng)爭(zhēng)性抑制存在著時(shí)效性,當(dāng)孵化時(shí)間不同時(shí),競(jìng)爭(zhēng)性抑制的效果會(huì)發(fā)生變化。競(jìng)爭(zhēng)性抑制存在著較為明顯的菌株特異性,不同的益生菌對(duì)于不同的致病菌菌株的結(jié)果差異較大。

2.3.3 低聚糖對(duì)植物乳桿菌AUH2103與致病菌排斥黏附的影響

排斥黏附的結(jié)果如圖3所示,提前使用植物乳桿菌AUH2103進(jìn)行黏附后,對(duì)于所有致病菌的黏附效果均有顯著的降低效果。這種降低效果也存在的很明顯的菌株特異性,對(duì)于大腸桿菌和沙門(mén)氏菌而言,添加低聚糖與直接使用菌株干預(yù)并無(wú)顯著性差異(P>0.05),蠟樣芽胞桿菌的黏附結(jié)果顯示,使用2′-FL干預(yù)后,其黏附數(shù)量與其他項(xiàng)組別相比顯著下降(P<0.05)。金黃色葡萄球菌的結(jié)果則顯示,低聚糖可以有效降低其黏附數(shù),但是量種低聚糖之間并無(wú)顯著性差異(P>0.05)。在JAYASHREE等[27]的研究中,發(fā)現(xiàn)一株發(fā)酵乳桿菌也具有排斥耐甲氧西林金黃色葡萄球菌黏附Caco-2細(xì)胞的現(xiàn)象,而COCONNIER等[28]的研究則發(fā)現(xiàn),一株嗜酸乳桿菌以濃度依賴(lài)性的方式抑制了鼠傷寒沙門(mén)氏菌和腸道致病性大腸桿菌(EPEC)對(duì)于Caco-2細(xì)胞的結(jié)合,這種抑制的機(jī)制可能是是由于乳酸菌阻止了致病菌與細(xì)胞上的受體相結(jié)合,而不是通過(guò)特異性的阻斷受體導(dǎo)致的。

3 結(jié)論與討論

植物乳桿菌AUH2103在以不同低聚糖為主要碳源時(shí),對(duì)致病菌的抑制能力與低聚糖的利用能力有關(guān)。在低聚糖存在的情況下,植物乳桿菌AUH2103可以更好地黏附Caco-2細(xì)胞;競(jìng)爭(zhēng)性黏附和排斥性黏附試驗(yàn)表明,在低聚糖存在的情況下,植物乳桿菌AUH2103可以有效抑制致病菌對(duì)于Caco-2細(xì)胞的黏附效果。低聚糖,尤其是2′-FL通過(guò)協(xié)助黏附,與植物乳桿菌AUH2103發(fā)揮協(xié)同抑菌作用。本文提供了植物乳桿菌AUH2103在體外對(duì)致病菌黏附細(xì)胞具有抑制效果的作用,以此為基礎(chǔ)可以進(jìn)一步進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)植物乳桿菌AUH2103在體內(nèi)是否具有相關(guān)作用進(jìn)行探索。