蒲云月 劉 冬 張 云 于思涵

蘇州綠葉日用品有限公司，江蘇蘇州，215151

隨著生活壓力的增加，中國90%以上人群存在掉發(fā)、發(fā)質(zhì)干枯分叉、頭屑、脫發(fā)等頭皮和頭發(fā)問題[1]。燙發(fā)、染發(fā)、空氣污染和太陽輻射等都會造成頭發(fā)損傷，甚至斷發(fā)、脫發(fā)。目前頭發(fā)的損傷可以分為四種類型：①物理損傷；②化學(xué)損傷；③熱損傷；④日光損傷及氣候老化[2-4]。頭發(fā)受損導(dǎo)致的角蛋白網(wǎng)絡(luò)被破壞、水分流失從而造成發(fā)質(zhì)干枯、分叉，是掉發(fā)、斷發(fā)的重要原因[5]。

現(xiàn)在越來越多的消費(fèi)者追求健康、柔韌、自然的秀發(fā)。本研究利用實(shí)驗(yàn)室自制的一款以角蛋白、蠶絲蛋白和泛醇為主要活性成分的洗發(fā)水，通過體外測試和人體測試來評估其保濕、修護(hù)和護(hù)發(fā)功效，為評價(jià)修護(hù)類洗發(fā)水的功效提供參考[6-7]。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 樣品與儀器

1.1.1 測試樣品的制備

洗發(fā)水配方見表1，其樣品由實(shí)驗(yàn)室自制。具體的配制步驟為：將1和2加入燒杯，攪拌溶解均勻；加入3、4，升溫至80～85 ℃，攪拌溶解至透明均一；依次加入5、6、7、8、9，攪拌溶解至透明均一；降溫至40～45 ℃，依次加入10、11、12、13、14、15，攪拌溶解至透明均一；加入16，攪拌均勻；用17或18調(diào)節(jié)pH值至5.50～6.50（25 ℃），用19調(diào)節(jié)黏度值?？瞻讓φ战M配方不加入角蛋白、蠶絲蛋白和泛醇，配制步驟同樣品組。

表1 產(chǎn)品配方組成

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

皮膚水分含量測定儀Dermalab Hydration Probe（丹麥Cortex），經(jīng)皮水分流失測量儀VapoMeter（芬蘭Delfin），皮膚光澤度測試儀Glossymeter GL200（德國CK），頭發(fā)多功能測試系統(tǒng)fibra.one（英國Dia-Stron），掃描電子顯微鏡SU8010（日本HITACH），中度損傷發(fā)束：15 cm×3 cm，4 g。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 理化指標(biāo)和穩(wěn)定性測試

按照GB/T 13531.1—2008《化妝品通用檢驗(yàn)方法 pH值的測定》規(guī)定方法進(jìn)行pH值測定。按照GB/T 29679—2013《洗發(fā)液、洗發(fā)膏》的要求進(jìn)行穩(wěn)定性測試。

1.2.2 安全性測試

人體皮膚斑貼試驗(yàn)是人體安全性試驗(yàn)，可以檢測受試物引起人體皮膚不良反應(yīng)的潛在可能性。按照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015年版）進(jìn)行33人的皮膚封閉性斑貼試驗(yàn)。將受試物稀釋成1%水溶液，取適量加于斑試器內(nèi)，將斑試器貼敷于受試者前臂曲側(cè)，24 h后去除受試物，分別于去除后0.5 h、24 h、48 h、72 h觀察皮膚反應(yīng)。

1.2.3 毛鱗片修復(fù)效果測試

樣品組用修護(hù)洗發(fā)水處理發(fā)束，對照組用對照樣品處理。將樣品均勻涂抹在已受損發(fā)束上，按摩1 min，停留5 min后，用37 ℃自來水均勻沖洗1 min。待頭發(fā)晾干后進(jìn)行電鏡掃描。

1.2.4 頭發(fā)干梳理性能測試

測定樣品處理前發(fā)束梳理過程的最大載荷(P前)，取10束發(fā)束，分為兩組，樣品組用修護(hù)洗發(fā)水處理發(fā)束，對照組用對照樣品處理發(fā)束。發(fā)束晾干后測定樣品處理后發(fā)束梳理過程的最大載荷（P后）。計(jì)算處理前后最大載荷減少值：ΔP＝P前-P后。

1.2.5 頭發(fā)光澤度測試

測定樣品處理前發(fā)束的光澤度（G前），取20束發(fā)束，分為兩組，樣品組用修護(hù)洗發(fā)水處理發(fā)束，對照組用對照樣品處理發(fā)束。發(fā)束晾干后測定樣品處理后發(fā)束的光澤度（G后）。計(jì)算處理前后光澤度增加值：ΔG＝G后-G前。

1.2.6 人體功效評價(jià)測試

受試者篩選工作參考2015版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》。受試者的選擇遵守倫理學(xué)原則要求，所有受試者的測試均必須出于受試者本人自愿，并在測試前簽署知情同意書。

選取健康受試者33例，18～45歲女性（妊娠或哺乳期女性除外），頭發(fā)長度不小于10 cm，頭發(fā)存在干枯易斷、暗啞受損等問題；無嚴(yán)重系統(tǒng)疾病、無免疫缺陷或自身免疫性疾病，受試部位沒有接受過皮膚治療、美容以及其他可能影響結(jié)果的測試，且同意在試驗(yàn)期間不進(jìn)行剪發(fā)、染發(fā)、燙發(fā)，只使用試驗(yàn)需要提供的產(chǎn)品。

受試者每次洗發(fā)時(shí)取適量樣品輕揉頭發(fā)和頭皮，然后用清水沖洗干凈，使用頻率為2～3 d/次，持續(xù)28 d。使用0 d、14 d、28 d時(shí)，使用Dermalab Hydration Probe、VapoMeter儀器，測量頭皮水分含量、經(jīng)皮水分丟失量。

第28天回訪時(shí)完成感官評價(jià)問卷，按照自身感受對此款洗發(fā)水的使用感、功效滿意度等方面進(jìn)行評價(jià)。

1.2.7 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。統(tǒng)計(jì)分析前對各參數(shù)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，若測試數(shù)據(jù)為正態(tài)分布，正態(tài)分布組內(nèi)采用配對樣本T檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；若測試數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布，則采用秩和檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)方法均采用雙尾檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

顯著性標(biāo)注方法：“＊”表示有顯著性差異（0.01≤P＜0.05）；“＊＊”表示有明顯顯著性差異（0.001≤P＜0.01）；“＊＊＊”表示有極顯著性差異（P＜0.001）。

2 結(jié)果與討論

2.1 理化指標(biāo)和穩(wěn)定性測試結(jié)果

樣品理化指標(biāo)及穩(wěn)定性結(jié)果見表2。

表2 理化指標(biāo)及穩(wěn)定性結(jié)果

2.2 安全性測試結(jié)果

產(chǎn)品按照要求進(jìn)行人體皮膚斑貼試驗(yàn)，分別于去除斑試器后0.5 h、24 h、48 h、72 h觀察皮膚反應(yīng)。結(jié)果顯示為0例陽性，33人均無皮膚不良反應(yīng)，證明該樣品安全性良好。

2.3 頭發(fā)毛鱗片修復(fù)效果

頭發(fā)由復(fù)雜的角質(zhì)纖維構(gòu)成，橫切面從外到里可分為毛表皮、毛皮質(zhì)和毛髓質(zhì)三部分[8]。毛表皮由鱗片或瓦狀的角質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成，保護(hù)頭發(fā)不受外界環(huán)境影響，保護(hù)皮脂并抑制水分蒸發(fā)，保護(hù)頭發(fā)烏黑、亮澤和柔韌[5]。圖1列出了對照組和樣品組頭發(fā)表面形態(tài)的SEM圖。通過圖片分析可以看出，對照組處理后的頭發(fā)毛鱗片翹起并且排列混亂，樣品組處理后的頭發(fā)毛鱗片表面平整并且排列比較整齊。這表明使用樣品后，頭發(fā)毛鱗片得到了修復(fù)。

圖1 頭發(fā)表面形態(tài)SEM圖片

2.4 樣品對頭發(fā)干梳理性能的影響

頭發(fā)的梳理性是檢驗(yàn)洗發(fā)水護(hù)發(fā)效果的一項(xiàng)重要指標(biāo)，它是指當(dāng)梳子通過頭發(fā)時(shí)遇到阻力的大小。利用頭發(fā)測試儀測試梳理過程的最大載荷（peak load），對樣品組和對照組頭發(fā)進(jìn)行干發(fā)梳理性能測試。最大載荷越小，表明頭發(fā)可梳理性越好。由表3可知，樣品組與對照組比較，ΔP有極顯著性差異（P＜0.001），說明使用產(chǎn)品后能明顯改善頭發(fā)梳理性能，具有柔順頭發(fā)的效果。

表3 頭發(fā)干梳理測試結(jié)果

2.5 樣品對頭發(fā)光澤度的影響

頭發(fā)光澤度也是檢驗(yàn)洗發(fā)水護(hù)發(fā)效果的一項(xiàng)重要指標(biāo)。一頭光澤亮麗的頭發(fā)給人一種健康、充滿活力的美感。如果頭發(fā)用洗發(fā)水洗過之后干枯發(fā)黃那就說明受到了較嚴(yán)重的損傷。利用皮膚光澤度測試儀對樣品組和對照組頭發(fā)進(jìn)行干發(fā)光澤度測試。光澤度值越大，表明發(fā)質(zhì)越好。由表4可知，樣品組與對照組比較，ΔG具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），表明洗發(fā)水具有顯著提高頭發(fā)光澤度的作用。

表4 頭發(fā)光澤度測試結(jié)果

2.6 樣品對頭皮保濕的影響

頭皮不同于其他部位的皮膚，覆蓋有濃密的毛發(fā)，其水分含量測試相較于其他部位更困難、操作更煩瑣，毛發(fā)的存在會影響測試值，目前運(yùn)用得比較多的測試方法是通過剃除頭發(fā)后用Corneometer進(jìn)行測量[9]。Dermlab Hydration Probe針式探頭可以不用剃發(fā)即可測試頭皮部位，通過電導(dǎo)測量法測量皮膚最上層的導(dǎo)電性能，提供皮膚中水分狀態(tài)的信息[10]。測量值越大，頭皮水分越高。頭皮水分含量測試結(jié)果如圖2所示，測試前頭皮角質(zhì)含水量最低，連續(xù)使用產(chǎn)品14 d后，受試者頭皮水分含量顯著性提高了11.23%（P＜0.05），連續(xù)使用產(chǎn)品28 d后，受試者皮膚頭皮水分含量顯著性提高了19.02%（P＜0.001），說明該產(chǎn)品能增加皮膚水分含量，具有較好的保濕效果。

圖2 頭皮水分含量

2.7 樣品對頭皮屏障修護(hù)的影響

VapoMeter探頭較小，受試者可以避免剃發(fā)，內(nèi)有一個(gè)濕度傳感器的圓柱形測量室，通過將測量室貼合皮膚檢測測量室內(nèi)的相對濕度變化，計(jì)算經(jīng)皮水分流失率[10]。經(jīng)皮水分丟失（transepidermal water loss，TEWL）測試值越低，說明皮膚鎖水能力越好，皮膚屏障功能越好。從圖3可以看出，0周時(shí)TEWL值最高，為（26.37±15.91）g/（m2·h）；其中14 d、28 d與0 d相比，分別降低7.89%和19.80%（P＜0.05），且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明測試樣品可以改善頭皮經(jīng)皮水分丟失量，增強(qiáng)皮膚屏障。

圖3 頭皮經(jīng)皮水分丟失量

2.8 受試者主觀評價(jià)

受試者主觀評價(jià)內(nèi)容包含洗發(fā)水對頭發(fā)的順滑度、光澤度、滋潤度、蓬松感和改善頭發(fā)和頭皮的整體效果，結(jié)果見表5，受試者對頭發(fā)和頭皮整體改善效果滿意度為88%。

表5 使用洗發(fā)水28 d后受試者自評結(jié)果

3 結(jié)論

本研究采用體外測試和人體測試，共同對洗發(fā)水的功效和安全性進(jìn)行了評價(jià)。發(fā)束的干發(fā)梳理最大荷載顯著降低、光澤度顯著提升，頭發(fā)的毛鱗片修復(fù)明顯。受試者使用產(chǎn)品28 d后，頭皮水分含量顯著提高19.02%，TEWL顯著減少了19.80%，結(jié)合受試者主觀評價(jià)結(jié)果，說明該產(chǎn)品具有很好的保濕、護(hù)發(fā)和修護(hù)的功效。