王崇文 江西省九江市濂溪區(qū)人民醫(yī)院 332005

潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerativecolitis,UC)是一種慢性結(jié)腸炎,主要發(fā)生于結(jié)腸黏膜,病理多表現(xiàn)為潰瘍,據(jù)國內(nèi)外流行病學(xué)調(diào)查顯示[1],近年來炎癥性腸病呈上升趨勢,并以UC最為常見。有研究認(rèn)為[2],UC主要與性格情志、飲食結(jié)構(gòu)、吸煙史、生命早期感染史等因素有關(guān),但目前對于該病的誘發(fā)機(jī)制尚未能夠完全明確。大部分UC患者臨床主要表現(xiàn)為腹瀉、便秘、便血等,如不能及時治療,尤其是活動期患者不能及時有效地診斷與治療,可進(jìn)一步導(dǎo)致上皮細(xì)胞變性壞死、脫落,造成下消化道出血、潰瘍穿孔等。目前,促進(jìn)黏膜愈合是治療UC的基本原則,通過黏膜愈合能夠減少疾病的復(fù)發(fā)與手術(shù)風(fēng)險,而這就需要對患者黏膜愈合情況進(jìn)行評估。當(dāng)前結(jié)腸鏡檢查則是評估UC疾病和黏膜活動性的金標(biāo)準(zhǔn),但這是一種有創(chuàng)操作,并且還具有耗時長、操作復(fù)雜、昂貴等特點(diǎn),難以在UC疾病活動性評估中頻繁操作。故而尋找有效、快捷、經(jīng)濟(jì)且能夠連續(xù)獲得的生物學(xué)標(biāo)志物以判斷UC活動性具有重要意義。伴隨蛋白質(zhì)組學(xué)研究的深入與日益成熟,血清三葉因子3(Trefoil factor family3,TFF3)作為一種分泌蛋白,屬于較新的腸黏膜保護(hù)因子,主要起到腸黏膜保護(hù)與修復(fù)作用,研究認(rèn)為[3]其在結(jié)直腸癌診斷中能夠反映腸黏膜活動情況。而本次研究將TFF3作為UC活動性的預(yù)測指標(biāo),通過回顧性分析2022年1月—2023年1月收治的緩解期與活動期患者與健康人群TFF3水平情況,旨在為UC活動性評估選取合理且有效的生物學(xué)標(biāo)志物。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2022年1月—2023年1月醫(yī)院消化科收治的60例UC患者為對象,并以結(jié)腸鏡檢查為金標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)疾病分期將患者分為緩解期組(30例)和活動期組(30例),同時選取同一時期體檢中心的30例健康體檢者為健康對照組。緩解期組中,男18例、女12例;年齡31～65歲,平均年齡(44.12±6.71)歲?；顒悠诮M中,男17例、女13例;年齡30～64歲,平均年齡(43.87±6.85)歲。對照組中,男15例、女15例;年齡28～67歲,平均年齡(45.15±6.93)歲。三組研究對象的性別、年齡分布經(jīng)校正Pearson χ2或單因素方差分析,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在對資料進(jìn)行回顧性選取與研究過程中,均嚴(yán)格遵循《赫爾辛基宣言》要求。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有研究對象均接受TFF3水平檢測;②緩解期組、活動期組患者均行結(jié)腸鏡檢查,并符合《潰瘍性結(jié)腸炎診療指南》[4]中對UC的診斷標(biāo)準(zhǔn);③對需要進(jìn)行的檢查或檢驗均知情并自愿同意。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病或其他感染性疾病;②合并克羅恩病;③因重癥感染造成的便血或嗜酸性胃腸炎導(dǎo)致腹痛、白蛋白降低;④資料不完整。

1.3 方法 所有研究對象均抽取空腹?fàn)顟B(tài)下的肘靜脈血5mL,常溫下靜置30min后,采用貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的Avanti JXN-30型離心機(jī),以3 000r/min進(jìn)行離心分離15min,獲得血清樣本后將之保存于-40℃冰箱中待檢。隨后,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)對研究對象血清TFF3水平進(jìn)行檢測,采用上海篤瑪生物科技有限公司提供的人TFF3 ELISA試劑盒,嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作,收集所有研究對象TFF3檢測結(jié)果。在完成TFF3檢測后,對UC患者行結(jié)腸鏡檢查,根據(jù)檢查結(jié)果鑒別緩解期和活動期患者;同時對UC活動期患者進(jìn)行內(nèi)鏡分級(Baron)。

1.4 觀察指標(biāo) 以結(jié)腸鏡檢查為“金標(biāo)準(zhǔn)”以鑒別緩解期、活動期UC患者,收集并對比UC患者與健康對照組三組研究對象TFF3水平,評估血清TFF3在UC疾病活動性中的預(yù)測效果。同時對比活動期患者不同Baron分級血清TFF3水平,并分析兩者相關(guān)性。Baron分級標(biāo)準(zhǔn)參考相關(guān)文獻(xiàn)[5]：內(nèi)鏡下表現(xiàn)為血管紋理清晰、無自發(fā)性或接觸性出血,為Ⅰ級;內(nèi)鏡下表現(xiàn)為黏膜粗糙、不正常但無出血情況,為Ⅱ級;內(nèi)鏡下表現(xiàn)為黏膜接觸性出血,為Ⅲ級;內(nèi)鏡下表現(xiàn)為黏膜自發(fā)性或接觸性出血嚴(yán)重,為Ⅳ級;內(nèi)鏡下表現(xiàn)為自發(fā)性出現(xiàn)且伴有明顯的潰瘍形成,為Ⅴ級。

2 結(jié)果

2.1 三組血清TFF3水平對比 經(jīng)檢測,對照組、緩解期組、活動期組TFF3水平[(1.62±0.65)ng/mL、(1.97±0.71)ng/mL、(5.68±1.36)ng/mL]有統(tǒng)計學(xué)差異(F=136.744,P<0.001),其中活動期組患者TFF3水平高于緩解期組、對照組(P<0.05),緩解期組與對照組TFF3水平相當(dāng)(P>0.05)。

2.2 血清TFF3在UC疾病活動性中的預(yù)測效果 根據(jù)TFF3水平繪制ROC曲線圖(見圖1),ROC曲線顯示,TFF3在預(yù)測UC疾病活動性中具有較高的特異度、敏感度,曲線下降面積(AUC)為0.958。

圖1 TFF3對UC疾病活動性預(yù)測的ROC曲線

2.3 活動期組患者Baron分級及TFF3水平對比 30例活動期UC患者Baron分級中,Ⅲ級12例,TFF3水平(2.79±0.74);Ⅳ級9例,TFF3水平(4.86±1.25);Ⅴ級9例,TFF3水平(6.38±1.39);不同Baron分級TFF3水平對比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=22.023,P<0.001)。

2.4 Baron分級與TFF3水平的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析顯示,Baron分級與TFF3水平呈正相關(guān)性(r=0.398,P=0.009)。

3 討論

UC具有慢性、反復(fù)性發(fā)作特點(diǎn),病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,根據(jù)疾病分期,可分為活動期和緩解期,臨床對于UC的治療,需要根據(jù)疾病分期采取相應(yīng)的治療方案才能達(dá)到理想的治療效果。既往觀念對于UC的治療,常以臨床癥狀消失、實驗室檢驗結(jié)果正常為目標(biāo),但在近年來的研究中發(fā)現(xiàn)[6],只有臨床黏膜緩解、黏膜愈合才達(dá)到真正的緩解,部分患者臨床疾病活動指數(shù)雖然提示緩解,但經(jīng)結(jié)腸鏡復(fù)查發(fā)現(xiàn),黏膜仍未愈合或緩解,這類黏膜未達(dá)到愈合患者,伴隨病情發(fā)展復(fù)發(fā)風(fēng)險較高,且不少還伴有手術(shù)風(fēng)險。因此,有效預(yù)測UC的疾病活動性,準(zhǔn)確鑒別活動期和緩解期患者,對指導(dǎo)臨床治療尤為關(guān)鍵。

結(jié)腸內(nèi)鏡檢查是目前診斷和評估炎癥性腸病的“金標(biāo)準(zhǔn)”,在結(jié)腸內(nèi)鏡下能夠?qū)颊吣c黏膜變化情況進(jìn)行觀察,并通過鉗取組織完成病理診斷,從而實現(xiàn)對黏膜愈合程度的評估,以此準(zhǔn)確反映疾病活動程度。但結(jié)腸內(nèi)鏡作為一種入侵式評估方式,對患者帶來的創(chuàng)傷較大,并且對設(shè)備和操作人員具有較高的要求,如操作不當(dāng)容易出現(xiàn)腸道穿孔等并發(fā)癥,存在一定的風(fēng)險。除此之外,UC的反復(fù)發(fā)作性決定了臨床需要對患者進(jìn)行反復(fù)檢查以更準(zhǔn)確地評估疾病進(jìn)展,結(jié)腸內(nèi)鏡反復(fù)操作的創(chuàng)傷性與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)在很大程度上限制了其在UC疾病活動性評估中的應(yīng)用。因此,尋找方便、快捷、經(jīng)濟(jì)且可反復(fù)操作的非侵入性評估方式,對UC的治療尤為關(guān)鍵。在近年來的研究中,不少研究[7-8]采用了非侵入性分子標(biāo)志物對潰瘍性結(jié)腸炎內(nèi)鏡活動度或疾病程度進(jìn)行評估,如糞鈣衛(wèi)蛋白、血清炎性標(biāo)志物、低免疫球蛋白G等,且均具有一定的預(yù)測價值。但在Nakov R等學(xué)者[9]研究發(fā)現(xiàn),血清TFF3水平在UC活動期鑒別中具有較高的診斷效能,對預(yù)測UC疾病活動性的價值較高。本次研究就通過回顧性分析“金標(biāo)準(zhǔn)”診斷后的緩解期和活動期UC患者以及健康人群的血清TFF3水平表達(dá)情況,以此進(jìn)一步分析血清TFF3水平在UC疾病活動性預(yù)測中應(yīng)用價值。經(jīng)本次研究結(jié)果顯示,活動期UC患者血清TFF3水平明顯高于緩解期UC患者與健康對照組;通過繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn),AUC達(dá)到0.958,說明血清TFF3水平在活動期UC患者中呈高表達(dá)狀態(tài),對預(yù)測UC疾病活動性效能較好。這是因為TFF3是由胃腸道黏液細(xì)胞分泌的一種小分子肽,其能夠與黏液糖蛋白結(jié)合起到保護(hù)腸道黏膜的作用;同時TFF3還具有驅(qū)動上皮細(xì)胞遷移的作用,從而發(fā)揮快速修復(fù)損傷黏膜、保護(hù)黏膜完整性的效果[10]。因此TFF3能夠反映腸道黏膜愈合情況,但UC患者處于活動期時,有黏膜損傷、潰瘍情況,黏膜屏障被破壞后,機(jī)體需要對黏膜進(jìn)行快速修復(fù)以保護(hù)黏膜組織,使之能夠抵御有害物質(zhì)損傷。而黏膜早期修復(fù)關(guān)鍵就是細(xì)胞遷移,因此,當(dāng)黏膜損傷時,TFF3大量分泌以驅(qū)動上皮細(xì)胞遷移到損傷區(qū)周邊,重建上皮的完整和黏膜屏障;同時,TFF3通過大量分泌與黏液糖蛋白形成相互作用,繼而形成彈性的黏液凝膠層,阻止蛋白酶及有害物質(zhì)對黏膜的損傷,達(dá)到增強(qiáng)黏膜屏障的防御功能的作用[11]。當(dāng)黏膜逐漸愈合,也就是UC達(dá)到緩解時,黏膜修復(fù)作用減弱,TFF3減少分泌。為進(jìn)一步驗證血清TFF3對UC疾病活動性預(yù)測的價值,本次研究對活動期UC患者進(jìn)行Baron分級,并對兩者進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果顯示,在不同Baron分級UC患者中,Baron分級越高,患者血清TFF3水平越高,且Baron分級與TFF3水平呈正相關(guān)性,該結(jié)果說明血清TFF3水平隨著UC患者黏膜損傷越嚴(yán)重,血清中的表達(dá)越高。這主要是因為,當(dāng)黏膜損傷越嚴(yán)重時,機(jī)體需要發(fā)揮的黏膜修復(fù)作用越強(qiáng),從而進(jìn)一步刺激TFF3的表達(dá)。但目前針對血清TFF3水平與UC疾病活動性預(yù)測的相關(guān)研究較少,并且因研究條件有限,研究樣本量較少,對于本次研究結(jié)果與結(jié)論仍需進(jìn)一步深入探究,本次研究僅供參考。

綜上所述,血清TFF3在UC活動期中呈高表達(dá),在預(yù)測UC疾病活動性中具有較好的效能,同時在活動期UC患者中,伴隨著血清TFF3水平的升高,提示病情程度越嚴(yán)重,通過觀察血清TFF3水平可有助于指導(dǎo)臨床治療UC患者。