文│高健 （山東省臨沭縣動物疫病預防控制中心）

肝吸蟲病由肝吸蟲屬的Fasciola hepatica和Fasciola gigantica引起，這兩個物種的大小不同，但在兩個物種重疊的地方可能會出現(xiàn)雜交。據(jù)估計，全世界約有5.5億頭牛和羊感染了Fasciola hepatica。人感染肝吸蟲病是一個嚴重的公共衛(wèi)生問題，估計有5000萬至1億人可能通過受污染的水和蔬菜感染。

肝吸蟲感染影響動物生產(chǎn)力和動物福利，給養(yǎng)羊業(yè)造成相當大的經(jīng)濟損失，亞臨床損失占損失的很大一部分，包括產(chǎn)奶量、生育力和生長率下降。羊肝吸蟲病還與多種疾病密切相關(guān)，包括羊黑疫（Clostridium novyi感染）、寄生蟲性胃腸炎、代謝性疾病、乳腺炎和肝損傷引起的炎癥等，特別是在羔羊期易發(fā)生低鈣血癥和妊娠毒血癥。

一、生命周期

肝吸蟲生命周期包括不同的發(fā)育階段：卵—纖毛幼蟲—孢子囊—孢子—尾蚴—囊蚴—幼蟲—成蟲。一條肝吸蟲每天可產(chǎn)約25000個卵。在0～10℃的溫度下，卵可以存活至少2年，但如果暴露在-5℃以下的溫度下超過兩周卵就會死亡。在溫度高于10℃的情況下，卵孵化向纖毛幼蟲階段發(fā)育，在15℃下，發(fā)育時間約為6周，在22℃下為10天，光對孵化是必不可少的。孵化后，纖毛幼蟲通過纖毛移動，尋找蝸牛。片形吸蟲的間接宿主是Lymnaeidae科的淡水蝸牛，其中歐洲的主要宿主是池塘蝸牛Galba truncatula。雖然Galba truncatula通常依賴于水，但它可以在干旱時期生存。

在蝸牛體內(nèi)，纖毛幼蟲發(fā)育成孢子囊，再發(fā)育成孢子，最后發(fā)育成尾蚴。每個纖毛幼蟲可產(chǎn)生超過600條尾蚴，在進入蝸牛體內(nèi)約5周后，如果溫度和濕度適宜，尾蚴可脫落。尾蚴附著在牧草上，失去尾巴，分泌堅硬的囊壁，成為囊蚴。在最佳條件下可以存活超過一年，但許多由于干燥和凍結(jié)而死亡。

囊蚴一旦被羊采食，會在十二指腸中出囊并釋放幼蟲，幼蟲穿過腸黏膜，穿過腹膜腔到達肝包膜，并穿透肝包膜。它們通過肝實質(zhì)遷移進入膽管，在那里它們成熟成為成年吸蟲，呈葉狀，長約2.5厘米。肝吸蟲是雌雄同體，在初次感染后10～12周開始產(chǎn)卵。在膽管里可以存活很多年。

感染主要發(fā)生在牧場，但通過采食青貯飼料也可發(fā)生感染，盡管適當?shù)膮捬醢l(fā)酵會導致囊蚴在兩周內(nèi)喪失生存能力，而在變質(zhì)或青貯不完全的青貯飼料中它們可以存活長達10周。此外，囊蚴能在干草中存活超過50天。

在歐洲，反芻動物感染肝吸蟲可分為兩個主要的感染高峰，即“冬季”感染和“夏季”感染。夏季感染的特點是纖毛幼蟲5、6月感染蝸牛，8、9月產(chǎn)生囊蚴，“冬季”感染的特點是纖毛幼蟲深秋感染蝸牛?！跋募尽备腥舅坪跏侵饕母腥灸Ｊ剑鶕?jù)氣候變化推測，未來“冬季”感染將會不斷增加。在不同的地區(qū)，特別是在放牧期較長的地區(qū)可能會出現(xiàn)相當大的感染重疊。感染的發(fā)生和頻率還將取決于當?shù)氐沫h(huán)境因素，如蝸牛棲息地和放牧管理。

二、發(fā)病機理

幼年吸蟲和成年吸蟲有外表面被皮，它保護吸蟲免受酶和免疫攻擊，也抑制宿主的免疫系統(tǒng)。被皮上有刺，可以用來刺穿血管。吸蟲以肝組織為食，在運動時還會對肝組織造成機械損傷。吸蟲的快速移動是逃避免疫系統(tǒng)的一種方式。在急性期，肝吸蟲會產(chǎn)生混合的細胞免疫反應和體液免疫反應。隨著感染的進展，體液免疫反應增強，細胞免疫反應減弱。此外，肝吸蟲釋放免疫調(diào)節(jié)分子，保障急性和慢性感染階段的生存。當吸蟲最終進入膽管時，它們開始以血液、膽汁、淋巴和組織為食，并發(fā)展為貧血和低蛋白血癥。羊不能對肝吸蟲產(chǎn)生保護性免疫。

三、臨床癥狀

肝吸蟲病通常根據(jù)臨床表現(xiàn)分為急性、亞急性或慢性，主要與肝中存在的肝吸蟲的數(shù)量和感染階段有關(guān)，但也有相當大的重疊，急性和慢性感染可能同時發(fā)生。急性病與大量幼蟲在短時間內(nèi)遷移有關(guān)，通常會因急性大出血而導致猝死。對羊群的檢查可能出現(xiàn)嗜睡的個體黏膜蒼白，并表現(xiàn)出呼吸困難。粗暴處理可能導致肝破裂和隨后的死亡，但可能被鑒別診斷為血液病、梭狀芽孢桿菌感染和急性巴氏桿菌病。

在亞急性期，健康狀況逐漸喪失，對受影響動物的檢查將顯示出黏膜蒼白。血液樣本將顯示低色素性大細胞貧血、低堆積細胞體積、低白蛋白血癥和肝酶（如天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和谷氨酸脫氫酶等）升高。也可能發(fā)生死亡，尸檢時，在肝實質(zhì)中檢測到大量未成熟的吸蟲，盡管成年吸蟲也可能存在于膽管中。在秋天，許多被屠宰的羔羊患有亞急性肝吸蟲病，這種病表現(xiàn)出相當廣泛的肝變化，但沒有明顯的臨床癥狀。

慢性肝吸蟲病是肝吸蟲病最常見的表現(xiàn)形式。貧血可能很嚴重，黏膜通常非常蒼白。死亡可能會發(fā)生，尤其是在妊娠晚期。此外，下頜水腫是典型的慢性肝吸蟲病，糞便中會出現(xiàn)吸蟲卵。慢性肝吸蟲病還表現(xiàn)為低蛋白血癥、嗜酸性粒細胞增多和肝酶升高。鑒別診斷包括血液病、營養(yǎng)不良、缺鈷和其他與健康狀況不良有關(guān)的疾病，如約翰氏病和瘙癢。

四、病理學

肝吸蟲病早期會影響肝包膜和肝表面，尤其是左膈表面。幼蟲入侵后，肝表面出現(xiàn)纖維蛋白和線狀出血區(qū)，這些幼蟲將通過薄壁組織遷移。亞急性肝吸蟲病，肝表面可見局灶性至多灶性蒼白壞死區(qū)及出血，肝實質(zhì)可見幼蟲。如果入侵很多，可能會發(fā)生更大的致命出血。在這種情況下，黏膜、胴體和器官變得蒼白。肝破裂可能會有大的血凝塊，腹部會有游離血。在亞急性肝吸蟲病的后期，肝的變化可能從局灶性絲狀蒼白遷移模式，到相當廣泛的影響壁和肝表面的變化，左肝葉通常比右肝葉受影響更大。慢性肝吸蟲病可見纖維化疤痕，表面可見細長的淺凹陷，與亞急性肝吸蟲病的病理變化相符。膽管擴張，管壁增厚，這對流入膽囊頸部的膽囊管和肝門區(qū)域的導管尤其明顯。在切面上可以很容易地看到壁增厚的擴張導管。在膽管和膽囊中會發(fā)現(xiàn)成熟的吸蟲。肝組織的薄壁組織中可以包裹少量的吸蟲。囊腫最常見于肝表面，在那里它們可能經(jīng)歷干酪樣壞死和礦化過程。在嚴重和晚期慢性病例中可能有廣泛的纖維化區(qū)域和肝組織損失。

在慢性病例的尸檢中可見蒼白、貧血的尸體。發(fā)病動物的身體狀況通常很差，經(jīng)常有皮下水腫，集中在頭部和頸部。由于低蛋白血癥，通常在腹部、胸部和心包中發(fā)現(xiàn)漿液。肺部蒼白，表面潮濕，氣道中有液體和泡沫。治療后可能會出現(xiàn)急性死亡，最有可能是由于吸蟲的大規(guī)模破壞，隨后釋放出有毒化合物，盡管主要原因尚不清楚。有時吸蟲會意外進入肝靜脈，最終進入肺部和子宮等不尋常部位，進而導致膿腫。

急性和亞急性肝吸蟲病的肝吸蟲遷移通道為出血區(qū)，有纖維蛋白和退化肝細胞，直徑通常為2～3毫米。壞死和變性組織將被巨噬細胞清除，取而代之的是富含淋巴細胞和嗜酸性粒細胞的肉芽組織。在慢性病例中，門靜脈纖維化伴膽管增生，單核細胞和嗜酸性粒細胞浸潤明顯。

五、診斷與治療

所有的診斷方法都有局限性，特別是在早期感染時。糞便浮選技術(shù)通常用于診斷當前的感染，在寄生蟲負擔較低時使用具有挑戰(zhàn)性。此外，糞便浮選技術(shù)不能檢測出肝吸蟲未成熟階段，不適合大規(guī)模群體檢測。血清學技術(shù)提高了診斷靈敏度，肝吸蟲抗體可在采食囊蚴2～4周后被檢測到。但該測試無法區(qū)分當前和以前的感染，因為抗體可能在消滅寄生蟲后持續(xù)數(shù)月，羊羔體內(nèi)的母體抗體可以持續(xù)12周。分子方法可用于糞便樣本中的肝吸蟲檢測，如PCR、環(huán)介導等溫擴增（LAMP）和重組酶聚合酶擴增（RPA）。基于糞便樣本的PCR可以在感染后兩周檢測到感染，而LAMP方法的檢測時間最早可以是感染后一周，RPA對設(shè)備和專業(yè)人員的要求較高。

用殺吸蟲劑治療往往是控制羊肝吸蟲感染的惟一選擇，最終目的是在正確的時間使用正確的殺蟲劑和殺蟲劑量，以實現(xiàn)對肝吸蟲的控制。三氯苯達唑被認為是治療肝吸蟲的首選藥物，其他有效的殺蟲劑包括阿苯達唑、氯舒?。╟lorsulon）、closantel、oxyllosantel、nitroxynil和rafoxanide。但傳統(tǒng)的重復且過量的殺蟲劑治療方案會導致廣泛的耐藥性。在三氯苯達唑存在廣泛耐藥性的情況下，其他殺吸蟲劑（如nitroxynil和closantel）在某些地區(qū)仍保留其作用。缺乏殺吸蟲效果并不一定意味著耐藥性，因為給藥不足、殺蟲劑儲存不當和殺蟲劑應用不當均可被誤解為耐藥性。目前沒有可用的疫苗，肝吸蟲的免疫抑制阻止了宿主保護性免疫的發(fā)展，幾十年來疫苗的研發(fā)效率不足。