郭華　武報佳　邢慧敏　趙?！O波　馬冬　張麗娜

摘要 目的：探討葡萄籽原花青素提取物（GSPE）對心肌梗死大鼠腎素血管緊張素－系統(tǒng)及水通道蛋白2（AQP2）表達的影響。方法：將55只無特定病原體（SPF）級Sprague－Dawley（SD）大鼠按照隨機數(shù)字表法分為健康組、模型組、辛伐他汀組、GSPE低劑量組及GSPE高劑量組，每組11只。除健康組外其余大鼠均采用冠狀動脈結扎法制備心肌梗死模型，建模成功后，GSPE低劑量組、高劑量組大鼠分別灌胃100 mg/kg、400 mg/kg葡萄籽原花青素溶液，辛伐他汀組灌胃40 mg辛伐他汀溶液。蘇木精－伊紅（HE）染色后觀察心肌組織形態(tài)；末端脫氧核苷酸轉移酶介導的原位缺口末端轉移酶標記法（TUNEL）檢測心肌細胞凋亡；超聲心動圖監(jiān)測心功能；放射免疫法檢測血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、血漿腎素活性（PRA）、醛固酮水平；免疫印跡法檢測心肌組織中AQP2、B細胞淋巴瘤/白血病2號基因（Bcl－2）及半胱天冬氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）蛋白水平。結果：與健康組比較，模型組大鼠左心室收縮末期內徑（LVESD）、左心室舒張末期內徑（LVEDD）升高，左心室射血分數(shù)（LVEF）和左心室短軸縮短分數(shù)（LVFS）降低（P＜0.05）；與模型組比較，GSPE低劑量組、GSPE高劑量組及辛伐他汀組LVEDD、LVESD降低，LVEF、LVFS升高（P＜0.05），GSPE低劑量組、GSPE高劑量組間比較差異有統(tǒng)計學意義，而GSPE高劑量組與辛伐他汀組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。與健康組比較，模型組大鼠AngⅡ、PRA、醛固酮升高（P＜0.05）；與模型組比較，GSPE低劑量組、GSPE高劑量組及辛伐他汀組AngⅡ、PRA、醛固酮降低（P＜0.05）。健康組、模型組、GSPE低劑量組、GSPE高劑量組及辛伐他汀組的心肌細胞凋亡率分別為（5.11±0.33）%、（46.22±3.97）%、（28.46±3.77）%、（15.42±2.33）%及（16.34±2.57）%，各組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與健康組比較，模型組大鼠心肌組織中AQP2、Caspase－3蛋白水平升高，Bcl－2蛋白水平降低（P＜0.05）；與模型組比較，GSPE低劑量組、GSPE高劑量組、辛代他汀組大鼠心肌組織中AQP2、Caspase－3蛋白水平降低，Bcl－2蛋白水平升高（P＜0.05）。結論：GSPE對心肌梗死有保護作用，可改善心功能水平，減少心肌細胞凋亡，其作用機制可能與調控AQP2蛋白表達有關。

關鍵詞 心肌梗死；葡萄籽原花青素提取物；水通道蛋白2；腎素－血管緊張素系統(tǒng)；大鼠；實驗研究

doi：10.12102/j.issn.1672－1349.2024.01.011

Effect of Grape Seed Proanthocyanidin Extract on Renin－angiotensin System and AQP2 Protein Expression in Rats with Myocardial Infarction

GUO Hua， WU Baojia， XING Huimin， ZHAO Rui， SUN Bo， MA Dong， ZHANG Lina

Jizhong Energy North China Medical Health Group Fengfeng General Hospital， Handan 056200， Hebei， China， E－mail： jiqueluan96170@163.com

Abstract Objective：To study the effect of grape seed proanthocyanidin extract （GSPE） on the renin－angiotensin system and aquaporin－2（AQP2） protein expression in myocardial infarction（MI） rats.Methods：Fifty－five specific pathogen free（SPF） Sprague－Dawley rats were randomly divided into healthy group，model group，simvastatin group，low－dose GSPE group，and high－dose GSPE group，with 11 rats in each group.Except for the healthy group，the other rats were prepared by coronary artery ligation to establish the MI model.After successful modeling.the rats in low－ and high－dose GSPE groups were orally administered with GSPE solution at doses of 100 mg/kg and 400 mg/kg，respectively.The rats in simvastatin group were orally administered with 40 mg simvastatin solution.Hematoxylin－eosin（HE） staining was used to observe the morphology of myocardial tissue.Terminal deoxynucleotidyl transferase－mediated dUTP nick end labeling（TUNEL） assay was used to detect myocardial cell apoptosis.Echocardiography was used to monitor cardiac function.Radioimmunoassay was used to detect angiotensin Ⅱ（Ang Ⅱ），plasma renin activity（PRA），and aldosterone levels.Immunoblotting was used to detect the protein levels of AQP2，B－cell lymphoma/leukemia－2（Bcl－2），and Caspase－3 in myocardial tissue.Results：Compared with the healthy group，the left ventricular end－diastolic diameter（LVEDD） and left ventricular end－systolic diameter（LVESD） of rats in model group? increased，while the ejection fraction（LVEF） and fractional shortening（LVFS） decreased（P＜0.05）.Compared with model group，LVEDD and LVESD in low－ and high－dose GSPE groups and simvastatin group decreased，while LVEF and LVFS? increased（P＜0.05）.There were differences between low－ and high－dose GSPE groups，but no significant difference between high－dose GSPE group and simvastatin group（P＞0.05）.Compared with healthy group，the levels of Ang Ⅱ，PRA，and aldosterone in model group increased（P＜0.05）.Compared with model group， the levels of Ang Ⅱ，PRA，and aldosterone in low－ and high－dose GSPE groups and simvastatin group decreased（P＜0.05）.The apoptosis rates of myocardial cells in healthy group，model group，low－dose GSPE group，high－dose GSPE group，and simvastatin group were （5.11±0.33）%， （46.22±3.97）%，（28.46±3.77）%，（15.42±2.33）%，and （16.34±2.57）%，respectively，with statistically significant differences between the groups（P＜0.05）.Compared with healthy group，the levels of AQP2 and Caspase－3 proteins in myocardial tissue of rats in model group? increased，while the level of Bcl－2 protein? decreased（P＜0.05）.Compared with model group，the levels of AQP2 and Caspase－3 proteins in myocardial tissue of rats in low－dose GSPE group，high－dose GSPE group，and simvastatin group? decreased，while the level of Bcl－2 protein? increased （P＜0.05）.Conclusion：GSPE shows a protective effect on MI，which can improve cardiac function， reduce myocardial cell apoptosis，and its mechanism may be related to the regulation of AQP2 protein expression.

Keywords myocardial infarction; grape seed proanthocyanidin extract; aquaporin－2， AQP2; renin－angiotensin system; rats; experimental study

心肌梗死是指冠狀動脈急性、持續(xù)性缺血缺氧所導致的心肌壞死，心臟自身供血渠道因各種原因阻塞，心肌組織出現(xiàn)供氧和需氧失衡，導致心肌壞死［1－2］。病人常見癥狀表現(xiàn)為乏力、胸部不適、心悸、氣促、煩躁、心前區(qū)疼痛等［3－4］。葡萄籽原花青素是從葡萄籽中提取的一種含有大量酚羥基的多酚化合物，是由兒茶素或表兒茶素聚合而成。研究指出，葡萄籽原花青素提取物（GSPE）在抗細胞凋亡、抗血栓形成、抗氧化應激、心血管保護效應等方面均具有重要作用［5］，但目前有關GSPE在心肌梗死中的研究文獻相對較少。心肌梗死病人心室重構會啟動腎素－血管緊張素系統(tǒng)（RAS），其中血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）的作用較為重要，可通過對細胞作用影響心臟功能。AngⅡ與其受體結合引起全身的微動脈、靜脈收縮，血壓升高，回心血量增多，會增加交感縮血管纖維遞質釋放，使交感縮血管中樞緊張，刺激腎上腺合成和釋放醛固酮［6］。AngⅡ可調節(jié)血液代謝以及血壓激素，對心血管腎病內分泌疾病的診斷和治療有著重要的意義。心肌梗死病人常伴有腎功能不全，腎功能損傷主要表現(xiàn)為水重吸收異常等，水通道蛋白2（AQP2）在腎臟水的重吸收中發(fā)揮主要作用。研究表明AQP2蛋白表達在充血性心力衰竭動物模型中增加，提示AQP2蛋白表達在充血性心力衰竭的水潴留中起著關鍵作用［7］。本研究探討GSPE對心肌梗死大鼠腎素－血管緊張素系統(tǒng)及AQP2蛋白表達的作用機制。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

無特定病原體（SPF）級Sprague－Dawley（SD）大鼠，2～4月齡，體質量210～225（213.25±12.37）g，購自億鳴復興（北京）公司，動物合格證編號：SCSK（京）2017－0004，飼養(yǎng)7 d后開始實驗，大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，室溫維持在23.3～27.2 ℃? ，相對濕度在51%～62%，保持12 h光照，正常飲食、飲水。

1.2 實驗儀器及試劑

辛伐他汀購自山東羅欣藥業(yè)集團股份有限公司，國藥準字H20065120；GSPE95%購自西安耀康源生物科技有限公司，貨號：YKY－0197；戊巴比妥鈉購自上海新亞藥業(yè)有限公司，國藥準字H31021725；青霉素購自上海易佰聚經(jīng)貿有限公司，貨號1031；末端脫氧核苷酸轉移酶介導的原位缺口末端轉移酶標記法（TUNEL）試劑盒購自翌聲生物科技（上海）股份有限公司，貨號：40308ES20；AQP2抗體購自愛必信（上海）生物科技有限公司，貨號：abs137041；B細胞淋巴瘤/白血病2號基因（Bcl－2）購自美國BioVision公司，貨號：3033－100；半胱天冬氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）抗體購自美國BioVision公司，貨號：3004－100；辣根過氧化物酶標記羊抗兔IgG抗體，購自北京百奧萊博科技有限公司，貨號：F050322；小動物呼吸機購自美國Kent公司；BK－1200全自動生化分析儀，購自山東BIOBASE公司；Allegra X－30高速離心機，購自美國貝克曼庫爾特公司。

1.3 分組及心肌梗死大鼠模型的建立

將55只大鼠按照隨機數(shù)字表法分為健康組、模型組、辛伐他汀組、GSPE低劑量組及GSPE高劑量組，每組11只。除健康組外，其余大鼠采用冠狀動脈結扎法制備心肌梗死模型，具體方法參照文獻［8］制作：戊巴比妥鈉麻醉，固定于手術臺上，插入氣管，鏈接小動物呼吸機，監(jiān)測心電圖。于大鼠胸部左側第3肋與第4肋骨切開，擴開胸腔，暴露心臟，打開心包，于主動脈根部2～3 mm處用6－0絲線穿過，結扎。待心肌顏色變淺、蒼白，且心電圖顯示≥2個導聯(lián)ST段呈弓背向上抬高認為建模成功，術后給予青霉素抗感染治療。

1.4 給藥方法

建模后次日，GSPE低劑量組大鼠灌胃100 mg/kg GSPE溶液，GSPE高劑量組大鼠灌胃400 mg/kg GSPE溶液，辛伐他汀組灌胃40 mg辛伐他汀溶液，每日1次，連續(xù)干預30 d。健康組及模型組灌胃等體積的生理鹽水。

1.5 心臟結構與功能指標檢測

末次灌胃后，各組大鼠以1%戊巴比妥鈉按40 mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉后固定于恒溫手術板上，胸前區(qū)備皮，MP150多通道監(jiān)測，應用超聲心動圖儀檢查心臟結構和功能。超聲儀獲取左心室長軸和乳頭肌水平短軸切面。檢查指標包括左心室收縮末期內徑（LVESD）、左心室舒張末期內徑（LVEDD）、左心室射血分數(shù)（LVEF）和左心室短軸縮短分數(shù)（LVFS）。

1.6 檢測血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、 血漿腎素活性（PRA）、醛固酮水平

各組大鼠處死前，從心臟取血5 mL，1 250 r/min離心5 min，取上清，采用放射免疫法檢測AngⅡ、PRA和醛固酮水平，具體操作方法嚴格按照試劑盒按說明書進行。

1.7 蘇木精－伊紅（HE）染色觀察大鼠心肌組織形態(tài)學

各組大鼠處死后取心臟組織，洗凈，切取部分心肌組織，置于4%甲醛緩沖液中固定，石蠟切片，脫蠟，乙醇水合處理，洗滌后進行染色，光鏡下觀察。

1.8 TUNEL檢測各組大鼠心肌細胞凋亡率

取各組心肌組織，切片浸入TUNEL反應液中，磷酸緩沖鹽溶液（PBS）清洗。過氧化氫沖洗淬滅酶活性，后聯(lián)合抗生物蛋白過氧化氫酶和聚偏二氟乙烯（PVDF）膜覆蓋，光學高倍顯微鏡下觀察凋亡細胞核呈現(xiàn)棕黃色，隨機選擇5個視野下的凋亡細胞進行計數(shù)。

1.9 蛋白免疫印跡法檢測AQP2、Bcl－2及Caspase－3蛋白表達水平

取各組大鼠心肌組織，胰酶消化，離心，取上清液。放入樣孔中，進行電泳實驗。電泳后將樣品轉至PVDF膜上，清洗樣品，將其放置在三倍磷酸緩沖鹽水－Tween 20（TBST）溶液中室溫下混勻10 min，封閉蛋白1 h后，將其置于4 ℃環(huán)境孵育過夜。將一抗AQP2、Bcl－2及Caspase－3以1∶500和二抗1∶2 500孵育45 min，TBST溶液將蛋白樣品清洗3次，凝膠成像系統(tǒng)曝光成像后進一步分析。

1.10 統(tǒng)計學處理

應用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間比較采用LSD－t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 各組大鼠心臟結構和功能指標變化

與健康組比較，模型組大鼠LVEDD、LVESD升高，LVEF、LVFS降低（P＜0.05），與模型組比較，GSPE低劑量組大鼠LVEDD、LVESD降低，LVEF、LVFS升高（P＜0.05），與GSPE低劑量組比較，GSPE高劑量組大鼠LVEDD、LVESD降低，LVEF、LVFS升高（P＜0.05），GSPE高劑量組與辛伐他汀組比較，LVEDD、LVESD、LVEF、LVFS差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。詳見表1。

2.2 各組大鼠血清AngⅡ、PRA、醛固酮水平比較

與健康組比較，模型組大鼠血清AngⅡ、PRA、醛固酮水平升高（P＜0.05），與模型組比較，GSPE低劑量組大鼠血清AngⅡ、PRA、醛固酮水平降低（P＜0.05），與GSPE低劑量組比較，GSPE高劑量組大鼠血清AngⅡ、PRA、醛固酮水平降低（P＜0.05），GSPE高劑量組AngⅡ、PRA、醛固酮水平低于辛伐他汀組（P＜0.05）。詳見表2。

2.3 各組大鼠心肌組織形態(tài)學比較

與健康組比較，模型組大鼠心肌纖維雜亂無章，心肌細胞壞死，有炎性細胞浸潤；GSPE低劑量組、GSPE高劑量組及辛伐他汀組大鼠心肌纖維、心肌細胞壞死有所改善。詳見圖1。

2.4 各組大鼠心肌細胞凋亡率比較

健康組、模型組、GSPE低劑量組、GSPE高劑量組及辛伐他汀組的心肌細胞凋亡率分別為（5.11±0.33）%、（46.22±3.97）%、（28.46±3.77）%、（15.42±2.33）%及（16.34±2.57）%，各組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與健康組比較，模型組大鼠心肌細胞凋亡率升高（P＜0.05），與模型組比較，GSPE低劑量組心肌細胞凋亡率降低（P＜0.05），與GSPE低劑量組比較，GSPE高劑量組大鼠心肌細胞凋亡率降低（P＜0.05），GSPE高劑量組與辛伐他汀組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。各組心肌細胞凋亡情況見圖2。

2.5 各組大鼠心肌組織AQP2、Bcl－2、Caspase－3蛋白表達水平比較

與健康組比較，模型組大鼠心肌組織中AQP2、Caspase－3蛋白水平升高，Bcl－2蛋白水平降低（P＜0.05）。與模型組比較，GSPE低劑量組大鼠心肌組織中AQP2、Caspase－3蛋白水平降低，Bcl－2蛋白水平升高（P＜0.05）。與GSPE低劑量組比較，GSPE高劑量組大鼠心肌組織中AQP2、Caspase－3蛋白水平降低，Bcl－2蛋白水平升高（P＜0.05）。與GSPE高劑量組比較，辛伐他汀組AQP2蛋白水平升高（P＜0.05），Bcl－2、Caspase－3蛋白水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。詳見表3、圖3。

3 討 論

近年來，我國心肌梗死發(fā)病率呈上升趨勢，每年新發(fā)約50萬例，隨著人口老齡化加劇，心肌梗死發(fā)病率還有逐漸升高趨勢，嚴重威脅病人生命安全。GSPE是從葡萄籽中提取出來的一種天然化合物，主要成分有原花青素，是強抗氧化活性的多酚化合物，具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗炎癥等多種功效。本研究探討GSPE對心肌梗死大鼠腎素－血管緊張素系統(tǒng)及AQP2蛋白表達的作用機制，為相關研究提供參考依據(jù)。

心肌梗死后缺血性應激促使梗死邊緣的心肌細胞凋亡數(shù)量增加，阻礙心功能恢復，造成心室重構等，所以減少心肌細胞凋亡的發(fā)生對于保護心臟功能、改善病人生存質量具有重要意義。Bcl－2是細胞抗凋亡因子，Caspase－3是細胞凋亡因子，激活凋亡因子可促進心肌細胞凋亡［9］。西醫(yī)治療急性心肌梗死主要采取抗凝、抗血小板聚集等常規(guī)方法，辛伐他汀是近年來常用藥物，具有調脂、抗炎、改善內皮功能的作用，但臨床上仍有部分病人無法獲益。

本研究結果表明，在經(jīng)過GSPE干預后，心肌細胞凋亡減少，且呈現(xiàn)劑量依賴性，這一結果也證實GSPE可抑制心肌梗死大鼠心肌細胞凋亡。GSPE是天然的多酚化合物，具有抑制炎癥反應、細胞凋亡、活血化瘀等作用，目前，已有研究證實其治療心力衰竭大鼠效果顯著。研究發(fā)現(xiàn)GSPE具有抗細胞凋亡的作用，通過抑制氧化應激和減少自由基的產生，保護細胞免受氧化應激引起的損傷。另外，GSPE還能夠抑制炎癥反應和免疫細胞的活化，從而減少細胞凋亡的發(fā)生。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，與健康組比較，心肌梗死大鼠心肌組織中Bcl－2水平降低、Caspase－3水平升高，在經(jīng)過GSPE干預后，Bcl－2水平有所升高、Caspase－3水平有所降低，且呈現(xiàn)出劑量依賴性。占天為等［10］研究表明在心肌梗死大鼠體內，Bcl－2水平降低，Caspase－3水平升高；張中喜等［11］研究表明，GSPE通過降低Caspase－3水平，提高Bcl－2的表達來抑制心肌細胞凋亡。心肌梗死發(fā)生后，心肌細胞凋亡導致心肌收縮功能異常，增加了心肌耗氧量，心室重構是導致心肌梗死產生的基礎。心室重構產生后，心臟會從代償期發(fā)展為心功能不全后心臟衰竭。LVESD、LVEDD可反映心室收縮功能，LVEF、LVFS是評價心功能的特異性指標［12］。有研究表明GSPE可保護心功能［13］。本研究中，心肌梗死大鼠較健康大鼠LVEDD、LVESD水平有所升高，LVEF、LVFS水平有所下降，在經(jīng)過GSPE干預后表達相反，且以GSPE高劑量組效果更為顯著，說明GSPE可改善心肌功能。GSPE具有強大的抗氧化活性，可以清除自由基，減輕氧化應激，保護心臟細胞免受氧化損傷，同時，GSPE能夠促進血管舒張和增加一氧化氮（NO）的產生，改善血管功能，降低血壓，發(fā)揮心臟功能保護作用。徐赟晟等［14］對心肌梗死大鼠研究顯示，與健康大鼠比較，LVEDD、LVESD水平升高，LVEF、LVFS水平下降。Ruan等［15］對心肌梗死大鼠研究后提出，GSPE通過調節(jié)LVEDD、LVESD、LVEF、LVFS表達保護心功能。本研究結果與相關文獻研究結果相似。

AngⅡ、PRA、醛固酮是維持體內血壓及體液平衡的重要指標。AngⅡ能夠促進心臟纖維母細胞增殖和細胞外基質的產生，是心肌肥大的主要因素。AngⅡ可抑制基質金屬蛋白酶的活性，而后者是降解心臟間質中膠原纖維的關鍵酶，除此之外，AngⅡ還可通過促進交感神經(jīng)興奮釋放內皮素1，使血管阻力升高、誘導心肌細胞凋亡、促進心室重構。近年來，國外對GSPE的研究發(fā)現(xiàn)有心血管保護作用，自由基清除能力可抗心肌缺血再灌注損傷，通過抑制低密度脂蛋白的氧化作用而抗動脈粥樣硬化，并具有降低血壓、調節(jié)血脂等心血管方面的疾?。?6］。在本研究中，心肌梗死大鼠體內Ang Ⅱ、PRA、醛固酮表達均有所升高，經(jīng)過藥物干預后水平下降；熊力等［17］實驗后提出AngⅡ、PRA、醛固酮量正相關，在心肌梗死病人體內水平升高；張先杰［18］對高血壓大鼠左心室重構的研究匯總提出，GSPE通過降低AngⅡ表達緩解心室重構。本研究與以上研究結果相似。GSPE通過降低AngⅡ水平，從而抑制PRA、醛固酮表達，進而達到保護心血管、修復心肌的作用。

心肌梗死后腎臟膠原合成與降解失衡，腎血流減少，腎臟纖維化與液體潴留產生，影響腎臟功能。AQP2 參與多種器官組織液體轉運過程，可調節(jié)腎臟水重吸收作用。相關研究發(fā)現(xiàn)，AQP2在慢性心力衰竭病人體內水平增加，且其在水潴留過程中發(fā)揮著重要作用［19］。有研究表明，GSPE可改善高血壓大鼠腎臟結構，保護腎功能［20］。本研究中，AQP2水平在心肌梗死大鼠中高于健康大鼠，經(jīng)過GSPE治療后水平有所下降。路瓊瓊等［21］對心力衰竭大鼠研究中發(fā)現(xiàn)，降低AngⅡ、AQP2水平可改善慢性心力衰竭病情，提示苓桂術甘湯聯(lián)合腎氣丸可通過降低AngⅡ表達抑制心臟纖維化，抑制AQP2水平進而抑制病人心肌梗死導致的腎臟損傷的進程；俞瑞群等［22］提出AQP2與心力衰竭的發(fā)生發(fā)展密切相關，嚴氏溫陽化瘀利水方通過降低AQP2水平，減少心肌細胞凋亡、修復心肌損傷；王紅珊等［23］心肌缺血再灌注大鼠的實驗顯示，GSPE通過降低AQP2水平，進而改善心功能，對心肌缺血再灌注起保護作用；管若蘭［24］運用大鼠建立急性腎損傷模型，給予GSPE干預后發(fā)現(xiàn)，大鼠腎損害傷有所改善，提示GSPE治療可干預腎損傷。本研究結果也支持上述研究成果。

綜上所述，GSPE對心肌梗死具有保護作用，可改善心功能水平，減少心肌細胞凋亡，其作用機制可能與調控AQP2蛋白表達有關。

參考文獻：

［1］MURPHY A，GOLDBERG S.Mechanical complications of myocardial infarction［J］.The American Journal of Medicine，2022，135（12）：1401－1409.

［2］BUONO A，PEDROTTI P，SORIANO F，et al.Myocardial infarction with non－obstructive coronary arteries（MINOCA）：diagnosis，pathogenesis，therapy and prognosis［J］.G Ital Cardiol（Rome），2019，20（9）：499－511.

［3］AOUN J，KLEIMAN N S，GOEL S S.Diagnosis and management of late－presentation ST－elevation myocardial infarction and complications［J］.Interventional Cardiology Clinics，2021，10（3）：369－380.

［4］ALMEIDA I，MIRANDA H，SANTOS H，et al.Cocaine－associated myocardial infarction：features of diagnosis and treatment［J］.J Electrocardiol，2021（67）：11－12.

［5］杜月梅，韓何丹，郭卓雨，等.葡萄籽原花青素對順鉑誘導小鼠睪丸支持細胞TM4細胞凋亡的影響［J］.食品科學，2020，41（9）：98－104.

［6］代淑紅.血清AngⅡ、KLK1水平及ACE和KLK1基因多態(tài)性與急性心肌梗死的關聯(lián)研究［D］.濟南：山東大學，2017.

［7］林琴琴，耿元文，田振軍.間歇有氧運動激活miR－21/SIRT1/NF－κB通路改善心梗大鼠腎功能研究［J］.體育科學，2017，37（7）：44－49.

［8］韓安邦，張健，路迎冬，等.芪藶強心膠囊對心肌梗死大鼠心肌纖維化及TGF－β1/Smad3信號通路的影響［J］.北京中醫(yī)藥大學學報，2017，40（1）：41－47.

［9］于麗芳，周大亮，耿碩，等.曲美他嗪對心肌缺血再灌注損傷后大鼠Bcl－2及Caspase－3蛋白表達影響［J］.中華實用診斷與治療雜志，2015，29（9）：855－857.

［10］占天為，郭書文，陳曦，等.益氣活血方對心肌梗死大鼠心肌細胞凋亡影響的研究［J］.環(huán)球中醫(yī)藥，2020，13（4）：540－545.

［11］張中喜，曾令紅，陳永衡，等.葡萄籽原花青素提取物對心肌梗死大鼠心肌功能的影響及其機制研究［J］.臨床和實驗醫(yī)學雜志，2019，18（20）：2157－2160.

［12］ZHANG D Y，WANG B J，MA M，et al.microRNA－325－3p protects the heart after myocardial infarction by inhibiting RIPK3 and programmed necrosis in mice［J］.BMC Molecular Biology，2019，20（1）：17.

［13］涂幸，羅利，劉藝琳，等.葡萄籽原花青素提取物對HT22細胞糖氧剝奪損傷的保護作用［J］.神經(jīng)解剖學雜志，2020，36（1）：57－64.

［14］徐赟晟，王伊麗，李瀾，等.龍鉆顆粒對心肌梗死大鼠心功能及NF－κB介導的炎癥反應的影響［J］.中草藥，2018，49（19）：4586－4590.

［15］RUAN Y，JIN Q，ZENG J，et al.Grape seed proanthocyanidin extract ameliorates cardiac remodelling after myocardial infarction through PI3K/AKT pathway in mice［J］.Frontiers in Pharmacology，2020，4（11）：585984.

［16］徐銀川，陳曉鋒，Alan Daugherty，等.腎素血管緊張素系統(tǒng)與動脈粥樣硬化［J］.中華高血壓雜志，2017，25（6）：511－512.

［17］熊力，羅斌華，王南麗，等.腎素－血管緊張素－醛固酮系統(tǒng)與急性心肌梗死短期預后關系的研究［J］.中國循證心血管醫(yī)學雜志，2014，6（1）：92－94.

［18］張先杰.葡萄籽原花青素對自發(fā)性高血壓大鼠左室重塑和氧化應激及血管活性物質的影響［D］.遵義：遵義醫(yī)學院，2015.

［19］KONG Y L，F(xiàn)ENG W J，ZHAO X D，et al.Statins ameliorate cholesterol－induced inflammation and improve AQP2 expression by inhibiting NLRP3 activation in the kidney［J］.Theranostics，2020，10（23）：10415－10433.

［20］LU R H，QIN C B，YANG F，et al.Grape seed proanthocyanidin extract ameliorates hepatic lipid accumulation and inflammation in grass carp（Ctenopharyngodon idella）［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2020，46（5）：1665－1677.

［21］路瓊瓊，韓軍，曾百惠，等.基于慢性心力衰竭大鼠模型的苓桂術甘湯和腎氣丸“同病異治”之內涵研究［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2019，34（2）：573－576.

［22］俞瑞群，喬亮，吳鳳珠，等.嚴氏溫陽化瘀利水方對心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能及腎臟水通道蛋白2表達的影響研究［J］.實用心腦肺血管病雜志，2019，27（4）：38－41.

［23］王紅珊，曹毅敏，楊晉，等.葡萄籽原花青素對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用［J］.中國生化藥物雜志，2012，32（2）：161－162.

［24］管若蘭.葡萄籽原花青素對小鼠急性腎損傷的干預效果［D］.哈爾濱：東北農業(yè)大學.2017.

（收稿日期：2022－03－14）

（本文編輯王雅潔）

基金項目 河北省醫(yī)學科學研究課題計劃項目（No.20210854）；河北省邯鄲市研發(fā)投入引導計劃項目（No.19422083012）

引用信息 郭華，武報佳，邢慧敏，等.葡萄籽原花青素提取物對心肌梗死大鼠腎素－血管緊張素系統(tǒng)及AQP2蛋白表達的影響［J］.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志，2024，22（1）：62－67.