饒海琴 黃婷

1 高安市婦幼保健院檢驗(yàn)科 （江西 高安 330800）

2 高安市婦幼保健院婦科 （江西 高安 330800）

內(nèi)容提要： 目的：探討人乳頭瘤病毒（HPV）-DNA分型檢測聯(lián)合宮頸薄層液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢查用于宮頸癌篩查的臨床價(jià)值。方法：選擇2021年6月～2022年12月本院收治的宮頸病變患者256例，所有入選者均行HPV-DNA分型、TCT。以陰道鏡活檢為金標(biāo)準(zhǔn)，分析HPV-DNA分型檢測、TCT檢查單項(xiàng)與聯(lián)合診斷宮頸癌的價(jià)值，并計(jì)算一致性。結(jié)果：256例宮頸病變患者，經(jīng)陰道鏡檢查發(fā)現(xiàn)156例陽性，檢出率為60.94%。TCT、HPV-DNA聯(lián)合診斷的靈敏度96.15%、特異度95.00%、準(zhǔn)確度95.70%、陽性預(yù)測值96.77%、陰性預(yù)測值94.06%均高于TCT、HPV-DNA，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。TCT、HPV-DNA聯(lián)合診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性優(yōu)于TCT與HPV-DNA。結(jié)論：宮頸癌篩查中使用HPV-DNA分型檢測聯(lián)合TCT檢查可提高診斷準(zhǔn)確率，為臨床診療提供更多參考信息。

宮頸癌在臨床較為常見，在女性惡性腫瘤中其發(fā)生率居首位，且呈現(xiàn)出年輕化趨勢，對女性健康及生命安全造成較大威脅[1]。宮頸癌有一個(gè)較長的癌前病變過程即子宮頸上皮內(nèi)瘤變（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN），從發(fā)病到癌變時(shí)間較長，可反映宮頸癌前期病變的整個(gè)過程，若在此階段進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒別診斷，并予以積極有效的治療方法，可預(yù)防癌變發(fā)生，改善患者預(yù)后[2]。既往臨床診斷宮頸病變多以巴氏細(xì)胞學(xué)技術(shù)為主，但受樣本取材等因素影響導(dǎo)致假陽性較高，涂片質(zhì)量不理想，準(zhǔn)確率有待提高。近些年，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)快速發(fā)展，宮頸癌篩查技術(shù)得到革新與完善，人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）、宮頸薄層液基細(xì)胞學(xué)（Cervical thin layer liquid based cytology，TCT）均在臨床得到廣泛應(yīng)用，并展現(xiàn)出一定優(yōu)勢[3,4]。相比以往巴氏細(xì)胞學(xué)技術(shù)，TCT的取材方式與制作方法均有了很大改良，標(biāo)本質(zhì)量有所提高，一定程度上降低了假陽性發(fā)生率。CIN、宮頸癌的發(fā)生發(fā)展均與HPV感染關(guān)系密切，高危HPV持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸病變的重要原因，故檢測HPV-DNA分型在宮頸癌疾病篩查中有重要意義[5]。本研究旨在探討HPV-DNA分型檢測聯(lián)合TCT檢查用于宮頸癌篩查的臨床價(jià)值。具示如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，選擇2021年6月～2022年12月本院收治的宮頸病變患者256 例，年齡28～67 歲，平均（38.41±5.56）歲；體重39～75kg，平均（58.77±4.45）kg；婚姻狀況：198例已婚，15例離異，6例喪偶，37例未婚；學(xué)歷：53例初中及以下，108例中專及高中，95例大專及以上。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①入選者均自愿進(jìn)行HPV-DNA分型、TCT檢查；②均有性生活史；③無宮頸疾病治療史或盆腔照射史；④同意書由患者自愿簽署。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期或哺乳期；②近3d有陰道用藥或性生活；③伴有生殖系統(tǒng)感染者；④臟器功能衰竭；⑤交流障礙；⑥拒絕參與本次研究。

1.2 方法

入選者均進(jìn)行HPV-DNA分型、TCT、陰道鏡檢查，避開經(jīng)期，近3d未同房、陰道未用藥，檢查前向受檢者簡單說明檢查步驟，取得受檢者理解與配合，囑咐受檢者放松身心，保持平穩(wěn)呼吸，配合操作者。

HPV-DNA分型檢查：以膀胱截石位進(jìn)行檢查，完全暴露宮頸，擦拭宮頸表面分泌物，可使用無菌棉簽擦拭，自外口插入取樣器，旋轉(zhuǎn)5圈，以順時(shí)針的方式進(jìn)行，需停留10s，將取樣器取出折斷，置入標(biāo)本保存液內(nèi)送檢，首先進(jìn)行離心操作，沉淀物檢測方法為PCR-反向點(diǎn)雜交法。檢測16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82等15種高危型HPV。首先PCR擴(kuò)增待檢測樣品，將膜條上的特異性探針與所得的PCR產(chǎn)物雜交，特異性結(jié)合后進(jìn)行顯色和結(jié)果分析。

TCT檢查：受檢者取膀胱截石位，盡可能暴露宮頸，擦拭宮頸表面分泌物，擦拭工具為無菌棉簽，向?qū)m頸管內(nèi)插入采樣刷，深度以1cm為宜，旋轉(zhuǎn)5圈，以順時(shí)針的方式進(jìn)行，取樣器使用Thinprep細(xì)胞保存液保存，振蕩10次，進(jìn)行標(biāo)本分離，將標(biāo)本中的上皮細(xì)胞與黏液、血液分泌物、炎細(xì)胞均分離，使用HZ-18T液基薄層制片機(jī)制備薄層細(xì)胞涂片，制片機(jī)購三明市和眾生物技術(shù)有限公司，隨后進(jìn)行染色，使用顯微鏡進(jìn)行觀察。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：非典型腺細(xì)胞（ atypical glandular cells，AGC）、單純炎癥未見上皮細(xì)胞病變（intraepithelial or malignant lesions，NILM）、鱗狀細(xì)胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）、高度瘤變（high degree squamous intraepithelial lesion，HSIL）、不典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells with unclear significance，ASCUS）、不能排除高級別鱗狀上皮內(nèi)病變的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（atypical squamous cells: cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion，ASC-H）、腺癌（ acinic cell carcinoma，ACC）、低度瘤變（low degree squamous intraepithelial lesion，LSIL）。除NILM外均為陽性。

陰道鏡檢查：取膀胱截石位，盡可能暴露宮頸，擦拭宮頸表面分泌物，擦拭工具為無菌棉簽，以低倍鏡觀察宮頸外形、顏色，濾鏡觀察血管特點(diǎn)，濕敷宮頸，濕敷液為冰醋酸液，對顏色、血管形態(tài)進(jìn)行觀察，一旦發(fā)現(xiàn)異常需取此處標(biāo)本組織送檢，若無明顯典型異常表現(xiàn)可取3、6、9、12處組織送病理檢查，病理科醫(yī)師進(jìn)行獨(dú)立閱片。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)

以陰道鏡活檢結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析HPV-DNA分型檢測、TCT檢查單項(xiàng)與聯(lián)合診斷宮頸癌的價(jià)值，并計(jì)算與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性。真陽性用a表示，真陰性用d表示，假陽性用c表示，假陰性用b表示。靈敏性=a/(a+c)，準(zhǔn)確度=(a+d)/n，特異性=d/(b+d)，陰性預(yù)測值=d/(c+d)，陽性預(yù)測值=a/(a+b)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)；一致性采用Kappa檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 陰道鏡檢查結(jié)果

256例宮頸病變患者，經(jīng)陰道鏡檢查發(fā)現(xiàn)100例為炎癥病變，83例CIN Ⅰ，38例CIN Ⅱ，30例CIN Ⅲ，5例SCC，陽性檢出率為60.94%（156/256）。

2.2 診斷結(jié)果

TCT、HPV-DNA聯(lián)合診斷的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均高于TCT、HPV-DNA，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1～2。

表1.TCT、HPV-DNA單項(xiàng)及聯(lián)合診斷結(jié)果(n)

表2.TCT、HPV-DNA單項(xiàng)及聯(lián)合診斷效能對比

2.3 HPV-DNA、TCT單項(xiàng)與聯(lián)合診斷與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性

TCT 診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性差（Kappa=0.245，P＜0.05），HPV-DNA 診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性理想（Kappa=0.425，P＜0.05），TCT、HPV-DNA聯(lián)合診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性極好（Kappa=0.910，P＜0.05）。

3.討論

隨著生活節(jié)奏加快以及女性工作壓力增加，宮頸癌的發(fā)病率逐年升高，對女性生殖健康造成較大影響，患者早期若能獲得系統(tǒng)高效的治療可控制疾病進(jìn)展，預(yù)后較為理想，因此需盡早明確診斷[6]。常規(guī)巴氏涂片法為常用方法，但受取材因素影響，標(biāo)本污染率高，導(dǎo)致誤診情況頻發(fā)，診斷效能不盡如人意。因此，臨床需積極尋找更加準(zhǔn)確的診斷方法[7]。

隨著細(xì)胞學(xué)篩查用于臨床，宮頸癌疾病早期篩查檢出率有所提高，TCT取材、制片等操作均嚴(yán)格按照工藝流程進(jìn)行，對標(biāo)本進(jìn)行系統(tǒng)化處理，減少外界因素帶來的干擾，便于清晰、均勻的觀察細(xì)胞分布，細(xì)胞辨識度隨之增加，可防止細(xì)胞丟失或污染，獲得高質(zhì)量制片，利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常的宮頸上皮細(xì)胞[8,9]。但隨著臨床研究發(fā)現(xiàn)，性生活規(guī)律的成年女性進(jìn)行TCT檢查陽性檢出率為6%左右，導(dǎo)致存在一定的誤診情況，臨床應(yīng)用仍有局限性[10]。宮頸癌前病變與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展均與HPV感染存在密切關(guān)系，臨床已將HPVDNA分型檢測作為重要的篩查手段。本研究結(jié)果顯示，256例宮頸病變患者，經(jīng)陰道鏡檢查發(fā)現(xiàn)100例為炎癥病變，83例CIN Ⅰ，38例CIN Ⅱ，30例CIN Ⅲ，5例SCC，陽性檢出率為60.94%（156/256）。TCT、HPV-DNA聯(lián)合診斷的靈敏度96.15%、特異度95.00%、準(zhǔn)確度95.70%、陽性預(yù)測值96.77%、陰性預(yù)測值94.06%均高于TCT、HPV-DNA。TCT診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性差，HPV-DNA診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性理想，TCT、HPV-DNA聯(lián)合診斷宮頸癌與陰道鏡檢查結(jié)果的一致性極好。表明宮頸癌篩查中使用HPV-DNA分型檢測聯(lián)合TCT檢查應(yīng)用價(jià)值較高，靈敏度、特異度均優(yōu)于各項(xiàng)單一診斷，利于提高診斷準(zhǔn)確率，為臨床鑒別診斷提供更多參考信息。黃艷等[11]研究顯示，宮頸病變與高危型HPV感染存在密切關(guān)系，HPV基因分型檢測在早期宮頸癌及癌前病變篩查中的靈敏度、準(zhǔn)確度均高于TCT，在臨床應(yīng)用具有較高價(jià)值，可為早期診斷提供更多有價(jià)值的參考，與本研究結(jié)果存在相似之處，進(jìn)一步佐證HPV基因分型檢測的應(yīng)用價(jià)值。分析其原因?yàn)椋琀PV由環(huán)形DNA病毒構(gòu)成，是重要的病原體，包含低危型與高危型，數(shù)十種高危型HPV均與宮頸癌有密切關(guān)系，而癌前病變患者均伴有HPV感染，故HPV檢測敏感度較高，為臨床診斷與治療均提供較多的參考信息[12]。HPV-DNA分型檢測聯(lián)合TCT檢查可提高宮頸癌檢出率，診斷效能較高，為臨床鑒別診斷提供更多參考依據(jù)，便于制定治療方案。

綜上所述，宮頸癌篩查中使用HPV-DNA分型檢測聯(lián)合TCT檢查應(yīng)用價(jià)值較高，靈敏度、特異度均優(yōu)于各項(xiàng)單一診斷，利于提高診斷準(zhǔn)確率，為臨床鑒別診斷提供更多參考信息。