劉義滿 魏玉翔 王蕓 張聚敏

2 荸薺枯萎病

2.1 為害癥狀

荸薺枯萎病 （Chinese Water Chestnut Wilt，F(xiàn)usarium Wilt of Chinese Water Chestnut，F(xiàn)usarium Wilt ofEleocharis dulcis），又稱基腐病。 浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)（現(xiàn)屬浙江大學(xué)）蔣冬花等[36，37]最早描述該病癥狀。此病從催芽至成株期均可發(fā)生。出土前受害，芽變褐腐爛、枯死；苗期與成株期受害，初期基部變褐色、植株矮化、變黃，以后少數(shù)分蘗開始枯萎，最后遍及全株，維管束變成褐色，進(jìn)而根及莖基部變成黑褐色、軟腐，植株枯死倒伏且極易拔起?？菟乐仓昵o基部布滿粉紅色黏狀物，為病菌分生孢子座及分生孢子。 為害重者不能形成球莖，為害輕者球莖變小，導(dǎo)致減產(chǎn)。

浙江賴小芳[38]對該病癥狀亦有描述。 病菌主要侵染葉狀莖基部引起發(fā)黑腐爛，地上部枯死。 發(fā)病株叢先是少數(shù)分蘗發(fā)黃、枯萎（俗稱“半邊枯”），繼而整叢枯死（俗稱“死蔸”“整棵死”）。 病害嚴(yán)重時(shí)，近根處的維管束和根狀莖維管束變褐， 根狀莖細(xì)小，葉狀莖失水干枯發(fā)黃，易拔起，并有水稻蔸漚爛的氣味。后期進(jìn)入發(fā)病盛期，地下莖腐爛加速，葉狀莖失水青枯，俗稱“青枯死”（圖2）。

圖2 荸薺枯萎病

2.2 病原菌

①蔣冬花等的病原菌鑒定結(jié)果 1984-1986年，蔣冬花等[36，37]從浙江省11 個(gè)縣市采集的荸薺樣本中，共分離出7 種鐮刀菌屬（Fusarium）菌（表3）。表3 中，從240 個(gè)荸薺枯萎株標(biāo)樣中鑒定出鐮刀菌4 種，其中尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）分離率高達(dá)80.83%，為優(yōu)勢種，認(rèn)為是荸薺枯萎病的主要病原菌，是一種之前未見報(bào)道的荸薺新記錄病害。 1986年浙江部分產(chǎn)區(qū)發(fā)病率在40%～50%。 寄主范圍試驗(yàn)表明，分離出的尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）僅能侵害荸薺，為一新的?；停蚨鴮⑵涠麨榧怄哏牭毒┧j?；停‵.oxysporumf.sp.eleocharidis）。 表3中的銳頂鐮刀菌（F.acuminatum）雖分離率低，但人工接種致病性強(qiáng)，存在潛在危險(xiǎn)性；層出鐮刀菌（F.proliferatum）和茄病鐮刀菌（F.solani）為引起貯藏期球莖腐爛的主要病原； 半裸鐮刀菌（F.semitectum）、禾谷鐮刀菌（F.gramincarum）及木賊鐮刀菌（F.equiseti）等僅具微弱致病性或無致病性。福建李本金等[39]、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)劉愛媛[40]、安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)院王文相等[41]及長江大學(xué)魯紅學(xué)等[42，43]報(bào)道的鑒定結(jié)果，與蔣冬花等的鑒定結(jié)果一致。

表3 蔣冬花等[37]的荸薺枯萎病病原菌鑒定結(jié)果

②朱志賢等的病原菌鑒定結(jié)果 2011年，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)朱志賢等[44]曾經(jīng)報(bào)道鑒定結(jié)果，湖北團(tuán)風(fēng)縣和沙洋縣荸薺枯萎病的病原為尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）。 但在朱志賢[45]后來的博士論文和相關(guān)論文[46]中，對2009-2012年間采自湖北、安徽、湖南、福建、浙江和江蘇等6 省荸薺主產(chǎn)區(qū)的227 株發(fā)病植株的鑒定結(jié)果表明， 在變褐的葉狀莖基部，鐮刀菌分離率達(dá)100%。 采用形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)特征鑒定方法， 對獲得的69 株單孢分離菌株鑒定發(fā)現(xiàn)，有64 個(gè)菌株鑒定為F.commune（尖孢鐮孢[47]）（占92.8%），廣泛分布在這6 個(gè)省，是引起荸薺枯萎病的主要病原菌；4 個(gè)菌株來自湖北孝感和浙江金華，鑒定為藤倉赤霉復(fù)合種（Gibberella Fujikuroi Species Complex，GFSC）的新種（占5.8%），同時(shí)在湖北發(fā)現(xiàn)了一種未知的鐮刀菌F. sp.（占1.4%）。 這是首次發(fā)現(xiàn)F.commune、 藤倉赤霉復(fù)合種（GFSC）的新種和1 個(gè)未鑒定種（F. sp.）能引起荸薺枯萎病。其中，F(xiàn).commune是最主要的荸薺枯萎病病原菌。朱志賢等的病原菌鑒定結(jié)果與前述蔣冬花等的鑒定結(jié)果出現(xiàn)差異，朱志賢認(rèn)為可能原因包括：a.菌株的來源不同；b.由于鐮刀菌的形態(tài)學(xué)差異小，形態(tài)學(xué)鑒定可能會(huì)出錯(cuò)， 之前的DNA 鑒定技術(shù)缺乏或沒有進(jìn)行DNA 鑒定，因而將F.commune錯(cuò)誤鑒定為尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）。

2.3 侵染循環(huán)

荸薺枯萎病屬于土壤傳播病害， 主要以在種球、病殘?bào)w或土壤中越冬的菌絲體、分生孢子或厚垣孢子為初侵染源， 病菌可隨植株病殘?bào)w及球莖、灌水、地下害蟲活動(dòng)等傳播。 病原菌多從根部直接侵入或從傷口侵入，經(jīng)由根狀莖向分蘗株及周圍健康植株蔓延。第1年種植荸薺的田塊一般不發(fā)病或發(fā)病較輕，連作田病害逐年加重，至第3年往往病重。 老病田多年輪作其他作物后，再種荸薺仍會(huì)發(fā)病。 發(fā)病田的水串灌至相鄰新種植荸薺田，可致病害發(fā)生[38，48]。

2.4 發(fā)病條件及其為害

劉愛媛[40]研究發(fā)現(xiàn)，荸薺枯萎病病原菌分生孢子萌發(fā)的溫度范圍為8～36℃， 最適溫度28～30℃。菌絲生長溫度為8～34℃，最適溫度26～28℃。 分生孢子萌發(fā)的pH 值為3～10，最適pH 值為5～7。菌絲生長的pH 值為3～10，最適pH 值為6。 浙江賴小芳[38]、福建李本金等[49，50]亦有類似生物學(xué)研究報(bào)道。 朱志賢等[45，46]研究結(jié)果表明，荸薺枯萎病植株葉狀莖中主要病原菌的DNA 含量與發(fā)病嚴(yán)重度呈顯著正相關(guān)，不同發(fā)病級別植株下土壤中的主要病原菌的含量與發(fā)病嚴(yán)重度無顯著相關(guān)性。病情指數(shù)均與溫度呈負(fù)相關(guān)，但各年份的病情指數(shù)與相對濕度和降雨量無顯著相關(guān)性。有人認(rèn)為，氮肥施用過量（致植株綠嫩，抵抗力低；分蘗過多，植株密閉，通風(fēng)不良）、長期保持深水（致根系發(fā)育不良，抗性降低）及過度烤田（土壤開裂通氣，有利于病菌生長，因該病原菌為好氣性菌）亦皆有利于發(fā)病[41]。

荸薺枯萎病是一種毀滅性病害，在許多地方造成嚴(yán)重為害。 賴小芳[38]調(diào)查顯示，荸薺枯萎病在浙江4月初至5月上旬催芽期較少發(fā)生，秧田期的6月初始見病株，7月上中旬至8月初移栽大田的帶病植株死亡或緩慢生長。 7～8月氣溫高，田間零星發(fā)生病株。 9月下旬至10月中旬為發(fā)病高峰期，10月中旬以后病害停止發(fā)展。劉愛媛[40]1994年調(diào)查發(fā)現(xiàn)，廣東南海區(qū)重病地塊發(fā)病率30%～40%，嚴(yán)重時(shí)成片枯死。9月中旬至10月中旬為盛病期。李本金等[49，50]調(diào)查結(jié)果顯示，福建龍海8月上旬大田定植后，9月上旬零星發(fā)病，9月下旬至10月下旬為發(fā)生盛期，病害可持續(xù)至11月中旬。 朱志賢等[45，46]2010-2012年在湖北調(diào)查結(jié)果顯示，病害8月中旬零星發(fā)生，8 下旬9月上旬緩慢增長，9月下旬至10月中旬為發(fā)病高峰期，之后呈不斷增長趨勢至最后1 次調(diào)查（10月底）。 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)院王文相等[41]介紹，無為縣荸薺產(chǎn)區(qū)育苗秧田一般6月中下旬始見病株，7月中旬零星發(fā)生。7月上中旬定植大田后的帶菌植株死亡，或生長緩慢，后期死亡。 大田植株7～9月零星發(fā)生。 9月發(fā)展迅速，表現(xiàn)為暴發(fā)性，數(shù)日內(nèi)即出現(xiàn)成片“青枯死”，重者死亡率達(dá)70%。 9月下旬10月上旬為發(fā)病高峰期，10月中旬后隨氣溫下降，逐漸停止發(fā)展。

2.5 防治方法

①農(nóng)業(yè)防治 荸薺枯萎病病菌在土壤中存活時(shí)期長，化學(xué)藥劑防治效果大多不理想，應(yīng)重點(diǎn)采用農(nóng)業(yè)綜合防治方法。 實(shí)行3年以上輪作（尤其水旱輪作）、進(jìn)行土壤消毒（如結(jié)合整地，每667 m2先施新鮮生石灰100 kg，5～7 天后結(jié)合施基肥撒施敵磺鈉2.5 kg[38]）、做好田園清潔（及時(shí)清除并銷毀植株殘茬，減少病原）、選用抗病品種、培育無病種苗（組培苗）、選用未種植過荸薺的田塊育苗、冬季采收后及時(shí)排水耕翻凍垡、 夏季定植前盡量耕翻曬垡、合理施肥、防止引入病田水灌溉、及時(shí)拔除病株、從無病田塊選留種球、種球貯藏期間避免使用病田土壤覆蓋。

②化學(xué)防治 a. 種球消毒。 催芽前用25%或50%多菌靈可濕性粉劑500 倍液，或40%氟硅唑乳油8 000 倍液浸泡球莖12 h，晾干后催芽[38，45，46]。 種球催芽后，于移栽秧田前再用藥劑浸根1 天[50]。

b.催芽期和秧田期藥劑防治。 用50%多菌靈可濕性粉劑500 倍液在催芽期噴施1 次；秧田期及時(shí)清除病株的同時(shí)噴霧2～3 次防治，其中最后1 次于移栽前5～7 天噴霧。

c.大田期藥劑防治。 一般宜于發(fā)病盛期前的8月下旬9月上旬開始噴藥， 每7～10 天噴1 次，共3～4 次。 可選用50%多菌靈可濕性粉劑800 倍液、30%丙環(huán)唑乳油2 000 倍液、40%托福靈（甲基硫菌靈）可濕性粉劑800 倍液、5%菌毒清水劑250 倍液、25%施保克（咪鮮胺）乳油1 000 倍液及36%粉霉靈懸浮劑（由多菌靈、三唑酮，加植物生長調(diào)節(jié)劑和高效助劑復(fù)配而成）500 倍液等（表2，見上期）交替噴霧，施藥期間保持3～4 cm 淺水層[38]。

3 荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病

荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病是一種新病害，首先發(fā)現(xiàn)于湖北團(tuán)風(fēng)縣荸薺產(chǎn)區(qū)。 至今，查閱到的荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病研究文獻(xiàn)均出自華中農(nóng)業(yè)大學(xué)。

3.1 主要癥狀

在我國，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)呂茹婧等[51～53]最早對荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病癥狀進(jìn)行描述報(bào)道。荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病主要為害莖稈， 初期產(chǎn)生較小的紅褐色病斑，而后逐漸擴(kuò)大， 后期嚴(yán)重時(shí)造成莖上部全部枯死（圖3）。

圖3 荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病田間癥狀[53]

3.2 病原菌

2010年，呂茹婧等[51～53]在湖北團(tuán)風(fēng)縣采集荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病病稈標(biāo)本，經(jīng)鑒定，首次證實(shí)荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病的病原菌為莖點(diǎn)霉屬的Phoma bellidisNeerg.。

3.3 侵染循環(huán)

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)趙玳琳等[54，55]報(bào)道，荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病病殘?bào)w越冬菌絲體可在土壤中越冬，但存活率很低，且埋土越深，存活率越低。 在室外土表越冬，110 天后菌絲體的存活率為2.8%；在土表下10 cm 越冬，病原菌存活期為110 天；在土表下20 cm越冬，病原菌的存活期為94 天。病原菌分生孢子最初在葉狀莖上萌發(fā)，產(chǎn)生的芽管可直接侵染寄主細(xì)胞或通過形成墊狀附著胞侵染寄主，同時(shí)也可經(jīng)打開的氣孔侵染，病原菌侵入后逐漸造成寄主細(xì)胞的潰解。

3.4 發(fā)病條件及其為害

呂茹婧等[51，52]報(bào)道，荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病菌在5～35℃均可生長， 適宜溫度20～25℃； 在pH 值4～10時(shí)均能生長，最適pH 值6；在供試碳、氮源中，病菌分別對淀粉和蛋白胨的利用效果最好；菌絲的最低致死溫度為50℃、10 min。 趙玳琳等[54，55]研究發(fā)現(xiàn)，荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病的病情指數(shù)與日均溫度呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與當(dāng)年累積降雨量呈正相關(guān)（P＜0.05），病情指數(shù)與相對濕度無顯著相關(guān)性。 不同品種，對荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病的抗性存在較大差異。 荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病病菌分生孢子接種荸薺抗病品種、感病品種后， 在葉狀莖上孢子萌發(fā)率無顯著差異，但萌發(fā)芽管長度和侵入能力方面存在顯著差異。在抗病品種上分生孢子萌發(fā)產(chǎn)生芽管，許多芽管會(huì)沿寄主表皮細(xì)胞繼續(xù)生長，形成較長芽管而不侵染寄主細(xì)胞；而在感病品種上萌發(fā)產(chǎn)生芽管后很快開始侵入寄主，并在侵入點(diǎn)迅速分支，分支菌絲又重復(fù)侵染寄主。

呂茹婧等[51，52]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2010年以來荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病在湖北團(tuán)風(fēng)荸薺產(chǎn)區(qū)大量發(fā)生。該病8月中旬開始零星發(fā)生，9月中旬至10月下旬為發(fā)生高峰期，發(fā)病植株顯著增多，至11月病害發(fā)展趨于平穩(wěn)。 夏秋季節(jié)，溫度下降時(shí)，若出現(xiàn)連續(xù)降雨，則發(fā)病加重。 2009年8月至2010年12月，湖北團(tuán)風(fēng)縣受荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病影響的荸薺面積估計(jì)每年超過1 300 hm2，荸薺球莖產(chǎn)量平均減產(chǎn)20%，重者減產(chǎn)60%。2014-2015年，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)陳威[56]在團(tuán)風(fēng)縣的調(diào)查結(jié)果顯示，8月上旬至9月上旬為發(fā)病初期，9月下旬病害快速增長，10月中下旬為病害高峰期。

3.5 藥劑防治

呂茹婧[51]進(jìn)行的室內(nèi)抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示，己唑醇乳油的抑菌效果最好，EC50僅為0.217 1 μg/mL；其次為10%苯醚甲環(huán)唑乳油、25%丙環(huán)唑乳油、12.5%腈菌唑乳油、12.5%戊唑醇乳油及80%多菌靈可濕性粉劑，EC50分別為1.512 0、3.335 5、4.167 3、5.208 3 及8.717 8 μg/mL；70%甲基托布津（甲基硫菌靈）可濕性粉劑、70%代森鋅可濕性粉劑及75%百菌清可濕性粉劑的抑菌效果相對較差。 趙玳琳[54]室內(nèi)抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示，206.7 g/L 萬興（噁酮·氟硅唑）乳油、25%多菌靈可濕性粉劑、400 g/L 福星（氟硅唑）乳油、10%世高（苯醚甲環(huán)唑）水分散粒劑和70%代森錳鋅可濕性粉劑均對荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病菌有較好抑菌效果。 田間防治試驗(yàn)結(jié)果顯示，206.7 g/L 萬興（噁酮·氟硅唑）乳油的防效最好，防效為90.84%，顯著高于25%多菌靈可濕性粉劑、400 g/L 福星（氟硅唑）乳油、10%世高（苯醚甲環(huán)唑）水分散粒劑和70%代森錳鋅可濕性粉劑等4 種農(nóng)藥的防效（63.01%～73.25%）。 陳威[56]進(jìn)行的田間防治試驗(yàn)中，10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑的防效明顯高于70%代森錳鋅可濕性粉劑700 倍液和25%多菌靈可濕性粉劑500 倍液（后二者的防效僅為40.3%～57.2%）。10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 500 倍液噴施2 次（9月7日和9月17日），在最后1 次施藥后10 天和20 天的防效分別為98.72%、94.79%，持效期長，可有效防治荸薺莖點(diǎn)霉稈枯病。

4 荸薺線蟲病

據(jù)美國文獻(xiàn)報(bào)道，為害荸薺的線蟲有異頭錐線蟲 （Awl Nematodes，Dolichodorus eterocephalusCobb.）。 異頭錐線蟲最早由美國學(xué)者Cobb[57]于1914年描述并命名。該線蟲可為害多種植物[58]，包括水生淡水植物，分布較廣。 其寄生方式為外寄生，且為移動(dòng)型寄生。 取食時(shí)， 不進(jìn)入植物體內(nèi)，用口針穿刺抽吸植物營養(yǎng)，僅為害寄主細(xì)根表皮細(xì)胞，喜在根冠上部附近集中取食，并沿表皮擴(kuò)展為害， 使根尖活力下降，引起寄主發(fā)育不良[59]。

美國Tarjan[60]進(jìn)行的溫室盆栽接種試驗(yàn)中，每盆栽植3株荸薺，分別接種0（對照，未接種）、750、1 500 頭異頭錐線蟲，3.5 個(gè)月后的調(diào)查結(jié)果表明，未接種（對照）和接種植株間的癥狀差異在根系中表現(xiàn)明顯，其中，未接種植株的白色、肉質(zhì)營養(yǎng)吸收根數(shù)量多，根系較大，而接種植株的根系出現(xiàn)變色、病癥，且數(shù)量少。 就植株總質(zhì)量、根質(zhì)量而言，未接種植株均極顯著高于接種植株，但接種750 頭和1 500 頭異頭錐線蟲的處理間幾乎沒有差異。 球莖數(shù)量和質(zhì)量，處理間亦無顯著差異。 在球莖抽生的葉狀莖周圍檢測到異頭錐線蟲，但在根組織內(nèi)未檢測到，亦未見取食根組織。一旦根系受到干擾，可能會(huì)從進(jìn)食部位脫落。一些荸薺植株表現(xiàn)出的衰退癥狀， 可能并不完全是由于異頭錐線蟲的寄生所致，但如果植株根部周圍的異頭錐線蟲種群數(shù)量過大，則很可能會(huì)造成嚴(yán)重的傷害。

Fisher 等[61]在美國尚普蘭湖（Lake Champlain）采集植株根系和土壤樣品調(diào)查發(fā)現(xiàn)，異頭錐線蟲均伴隨荸薺屬植物（Eleocharisspp.）的存在而存在；7月中旬以前采集的樣品中沒有發(fā)現(xiàn)，9月中旬以后采集的樣品中僅偶爾發(fā)現(xiàn)，主要在7月中旬至9月中旬采集的樣品中發(fā)現(xiàn)。

此外，美國Hodge 等[7]在美國佛羅里達(dá)州不僅發(fā)現(xiàn)異頭錐線蟲為害荸薺， 還發(fā)現(xiàn)莖線蟲（Stem Nematodes，Ditylenchussp.）為害荸薺。 不過，有關(guān)莖線蟲為害荸薺的文獻(xiàn)報(bào)道較少見。我國對包括荸薺在內(nèi)的水生蔬菜線蟲為害問題的研究均較少開展，今后需加強(qiáng)這方面的工作。