丁潔 張勝

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇 蘇州 215026)

近年來(lái),受到環(huán)境污染、人口老齡化、吸煙、飲食作息不規(guī)律等多種因素影響,導(dǎo)致肺癌的發(fā)病率及死亡率呈逐年上升趨勢(shì)。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示,有超過(guò)1/2的肺癌患者確診時(shí)年齡超過(guò)60歲,有1/3的患者年齡超過(guò)70歲〔1〕。非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是最為常見(jiàn)的肺癌類型,占全部肺癌的85%～90%,其中老年NSCLC患者約占其中的47%,NSCLC也成為典型的老年疾病之一〔2〕。針對(duì)老年NSCLC患者,化療是目前綜合治療的主要方法,但受到毒副反應(yīng)、耐藥等因素影響,患者在接受化療治療的整體預(yù)后效果仍較差〔3〕。因此,尋找可以有效預(yù)測(cè)化療效果及預(yù)后情況的血清分子標(biāo)志物,對(duì)提高老年NSCLC患者的治療效果有重要意義。趨化因子是由細(xì)胞分泌的信號(hào)蛋白或小細(xì)胞因子,具有誘導(dǎo)細(xì)胞定向遷移的作用,而有研究發(fā)現(xiàn),血清趨化因子在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用〔4〕。本研究通過(guò)分析老年NSCLC患者行一線化療前及化療后的趨化因子水平,探討其對(duì)患者化療效果的影響。

1 資料和方法

1.1一般資料 回顧性收集蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院2020年5月至2022年8月收治的320例接受一線化療治療的老年NSCLC患者臨床資料,將無(wú)法手術(shù)治療的Ⅲ～Ⅳ期老年NSCLC患者接受一線化療后出現(xiàn)進(jìn)展的患者納入進(jìn)展組(n=184),未出現(xiàn)進(jìn)展的患者納入非進(jìn)展組(n=136),本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),并通過(guò)患者及其家屬知情同意且簽署知情同意書(shū)。320例NSCLC患者中,男249例,女71例,年齡60～86歲,平均(74.22±4.25)歲;病理類型：腺癌142例,鱗狀細(xì)胞癌92例,腺鱗癌69例,大細(xì)胞癌17例;臨床分期：Ⅲ期218例,Ⅳ期102例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)活檢、病理學(xué)檢查、臨床影像符合《中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南(2018版)》〔5〕原發(fā)性NSCLC診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)根據(jù)美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)第8版〔6〕肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)診斷為Ⅲ～Ⅳ期;(3)年齡≥60歲;(4)入院前未接受放化療及靶向治療;(5)預(yù)期生存時(shí)間超過(guò)6個(gè)月。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有手術(shù)禁忌或麻醉禁忌;(2)合并患有肝腎功能異常;(3)合并患有嚴(yán)重的感染性疾病;(4)合并患有精神疾病,無(wú)法溝通;(5)合并嚴(yán)重并發(fā)癥需要專科治療。非進(jìn)展組年齡、性別、病理類型與進(jìn)展組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);非進(jìn)展組臨床分期Ⅳ期占比明顯低于進(jìn)展組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較〔n(%)〕

1.2治療方法 一線化療方案：AP：培美曲塞〔國(guó)藥準(zhǔn)字H20213204,吉斯美(武漢)制藥有限公司,規(guī)格：按C20H21N5O6計(jì)500 mg〕聯(lián)合順鉑(國(guó)藥準(zhǔn)字H53021740,云南植物藥業(yè)有限公司,規(guī)格：2 ml∶10 mg)方案的一線化療。注射用培美曲塞二鈉劑量為500 mg/m2體表面積,靜脈輸注10 min以上,每21 d為1個(gè)周期,每個(gè)周期第1天給藥。順鉑劑量為75 mg/m2體表面積,靜脈輸注時(shí)間超過(guò)2 h,在每個(gè)周期的第1天培美曲塞用藥結(jié)束約30 min后再給予順鉑;GP：吉西他濱(國(guó)藥準(zhǔn)字H20213298,山東睿鷹制藥集團(tuán)有限公司,規(guī)格：0.2 g按C9H11F2N3O4計(jì))聯(lián)合順鉑,吉西他濱1 000 mg/m2體表面積靜脈滴注30 min,在第1、8天用藥,休息1 w,每3 w重復(fù)1次,吉西他濱用藥的同時(shí)使用順鉑化療,劑量為75 mg/m2體表面積,靜脈輸注時(shí)間超過(guò)2 h;化療3個(gè)周期后進(jìn)行全身評(píng)估。

1.3療效評(píng)估 根據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)〔7〕進(jìn)行療效評(píng)估：將全部病灶消失,無(wú)新發(fā)病灶,腫瘤標(biāo)志物降至正常,并維持4 w定義完全緩解(CR);將腫瘤直徑縮小≥30%,并維持4 w定義為部分緩解(PR);將腫瘤直徑未縮小且為增大定義為穩(wěn)定(SD);將腫瘤直徑增大≥20%或者出現(xiàn)新發(fā)病灶定義為疾病進(jìn)展(PD)。CR、PR、SD患者為非進(jìn)展組,PD患者為進(jìn)展組。

1.4血清趨化因子采集 抽取老年晚期NSCLC患者化療前空腹外周血2 ml,室溫下以2 500 r/min離心7 min,離心后取上層血清存于-80 ℃保存?zhèn)溆?。使用美?guó)Millipore公司生產(chǎn)的Human High Sensitivity T Cell MAP試劑盒及液相芯片檢測(cè)儀,檢測(cè)患者巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-3α、白細(xì)胞介素(IL)-8及γ干擾素誘導(dǎo)趨化因子配體(CXCL)9水平。

1.5腫瘤壞死因子(TNF)-α水平檢測(cè) 抽取老年晚期NSCLC患者化療后空腹外周血2 ml,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清TNF-α。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS25.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn);兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)或連續(xù)校正χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法,多組間整體率的比較采用χ2檢驗(yàn),存在2個(gè)及以上期望計(jì)數(shù)<5,采用Fisher精確檢驗(yàn);采用Logistic回歸分析血清趨化因子對(duì)晚期NSCLC患者一線化療效果的影響。

2 結(jié) 果

2.1兩組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及血清趨化因子表達(dá)水平比較 進(jìn)展組MIP-3α、IL-8、TNF-α水平明顯高于非進(jìn)展組,CXCL9水平明顯低于非進(jìn)展組(P<0.001)。見(jiàn)表2。

表2 兩組血清趨化因子與TNF-α表達(dá)水平比較

2.2老年晚期NSCLC患者一線化療結(jié)果影響因素的Logistic回歸分析 將接受一線化療方案治療的老年NSCLC患者隨訪結(jié)局作為因變量(未進(jìn)展=0,進(jìn)展=1),將表1、2中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)作為自變量,進(jìn)行Logistic回歸分析結(jié)果顯示,MIP-3α、IL-8均是影響接受一線化療方案治療的老年晚期NSCLC患者疾病進(jìn)展的危險(xiǎn)因素(OR>1,P<0.05),臨床分期、CXCL9是影響接受一線化療方案治療的老年晚期NSCLC患者疾病進(jìn)展的保護(hù)因素(OR<1,P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 老年晚期NSCLC患者一線化療結(jié)果多因素的Logistic回歸分析

3 討 論

老年NSCLC患者因生理功能退化、免疫功能下降,且受到糖尿病、高血壓、冠心病等基礎(chǔ)疾病困擾,在接受抗腫瘤治療時(shí),其治療效果及預(yù)后存在差異〔8〕。因此尋找合適的生物標(biāo)志物,判斷患者治療效果及預(yù)后情況,根據(jù)患者機(jī)體情況制定更加優(yōu)化的治療方案具有重要意義。腫瘤細(xì)胞通過(guò)分泌趨化因子及細(xì)胞因子,對(duì)腫瘤細(xì)胞周圍的免疫細(xì)胞的分泌、代謝與功能產(chǎn)生影響,進(jìn)而維持自身的生存與發(fā)展,導(dǎo)致腫瘤的進(jìn)一步發(fā)生與發(fā)展〔9〕。因此,通過(guò)研究免疫微環(huán)境中的免疫抑制分子,為臨床治療腫瘤提供新途徑。

MIP-3α屬于小細(xì)胞因子CC基因的亞家族,主要表達(dá)于肺、結(jié)腸、肝臟及皮膚之中。主要作用是對(duì)免疫及炎癥過(guò)程的調(diào)節(jié),促使淋巴細(xì)胞產(chǎn)生趨化活性,抑制髓系祖細(xì)胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn),MIP-3α在卵巢癌、結(jié)直腸癌中有高度表達(dá)〔10〕。分析本研究結(jié)果原因,MIP-3α對(duì)T淋巴細(xì)胞與未成熟樹(shù)突細(xì)胞具體趨化作用,而T細(xì)胞與未成熟樹(shù)突細(xì)胞可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲作用,進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物產(chǎn)生抵抗,導(dǎo)致化療效果不佳,引起腫瘤的發(fā)生與發(fā)展〔11,12〕。

IL-8是一種促學(xué)管生成因子,屬于趨化因子CXC家族,主要作用是趨化并刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的活性,通過(guò)自身分泌與旁支分泌的方式促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖,進(jìn)而參與腫瘤血管的形成與轉(zhuǎn)移〔13〕。分析本研究結(jié)果中IL-8是影響老年晚期NSCLC患者接受一線化療效果的原因是,IL-8與其特異性受體結(jié)合,參與并調(diào)節(jié)機(jī)體生殖生理與病理過(guò)程,在參與腫瘤細(xì)胞的上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程中,IL-8水平升高可以刺激腫瘤細(xì)胞表面的E-鈣黏蛋白表達(dá)下調(diào),增強(qiáng)波形蛋白表達(dá),促進(jìn)上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化,改變腫瘤細(xì)胞形態(tài)、骨架,進(jìn)而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的遷移與侵襲能力,同時(shí)預(yù)示機(jī)體對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑產(chǎn)生耐藥,進(jìn)而影響化療效果〔14,15〕。此外,IL-8可以激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路,促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶-2與基質(zhì)金屬蛋白酶-9表達(dá),破壞細(xì)胞外基質(zhì),降低細(xì)胞與細(xì)胞之間的連接,進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移,導(dǎo)致不良預(yù)后〔16,17〕。

CXCL9是由單核細(xì)胞與巨噬細(xì)胞分泌,起到趨化活化T細(xì)胞的作用。分析本研究結(jié)果原因,CXCL9可以增強(qiáng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的反應(yīng),進(jìn)而促進(jìn)CD4+與CD8+T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)至腫瘤細(xì)胞區(qū)域,殺死腫瘤細(xì)胞,形成有效的抗腫瘤免疫微環(huán)境,進(jìn)而通過(guò)促進(jìn)免疫反應(yīng)達(dá)到抗腫瘤活性的目的;同時(shí)CXCL9與其受體CXCR3結(jié)合,起到抗血管生成作用,通過(guò)與血管內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用,招募T細(xì)胞或自然殺傷(NK)細(xì)胞,增強(qiáng)腫瘤局部淋巴細(xì)胞特異性增殖能力,進(jìn)而破壞腫瘤血管形成,抑制腫瘤的形成與發(fā)展〔18,19〕。此外,臨床分期反應(yīng)患者病情發(fā)展程度,分期越高表明患者病情程度越嚴(yán)重,機(jī)體的免疫力及抵抗力都嚴(yán)重下降,對(duì)化療藥物無(wú)法耐受,因此影響化療效果〔20〕。

綜上,血清趨化因子MIP-3α、IL-8、CXCL9可以作為老年晚期NSCLC一線化療療效及癌癥進(jìn)展與復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的敏感指標(biāo),通過(guò)監(jiān)測(cè)其水平變化,對(duì)老年晚期NSCLC患者的治療及預(yù)后具有重要意義。