宋孟霜，張 希，栗嘉琪，李虹霞，許 枬

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院?遼寧 大連?116600)

天南星具有燥濕化痰、祛風(fēng)止痙的作用，用藥歷史二千余年[1]。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，其有良好的抗腫瘤、抗驚厥、抗心律失常、鎮(zhèn)靜止痛、抗菌、抗炎等活性[2]。除可治療中風(fēng)和外傷疼痛外，對肺癌、面神經(jīng)麻痹也頗有療效[3,4]。而且，天南星還被用于農(nóng)業(yè)殺蟲、殺螺[5]?；钚院Y查表明，其黃酮碳苷具有殺線蟲作用，生物堿類、苯丙素類成分具有對人類白細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，還有一些成分具有抗腫瘤、抗炎作用[5]。正品天南星原植物雖有3 種基源，但因自然分布面積小，對生長環(huán)境要求較高，因此天南星的野生資源一直比較稀缺，尤其是異葉天南星，其相關(guān)研究報道極少[6]。因市場需求的不斷增加，一些科研人員開展了天南星的人工種植研究工作，目前已經(jīng)取得成功，極大地緩解了天南星的資源問題。為了更好地揭示天南星的活性與成分關(guān)系，以及不同品種天南星的成分差異，為臨床用藥提供依據(jù)，本研究對異葉天南星(Arisaema.heterophyllum Blume.)塊莖抗炎活性部位的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從中分離得到18 個成分，化合物1 為新化合物，化合物1，2，4，9～15 從該種植物中首次分離。

1 儀器與材料

AVANCE 600 超導(dǎo)核磁共振儀(德國布魯克公司)；6550iFunnel Q-TOF LC/MS 質(zhì)譜儀(美國安捷倫公司)；高效液相制備色譜儀(艾杰爾公司)；硅膠柱色層析用硅膠(青島海洋化工有限公司)；Sephadex LH-20 凝膠(瑞士法瑪西亞公司)；MCI CHP-20 樹脂(日本三菱公司)；半制備柱(ODS，5μm，20×250 nm，艾杰爾公司)；TLC 薄層板(德國默克公司)；分析純試劑(天津科密歐試劑有限公司)；色譜甲醇(美國天地公司)；液相用水(杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司)；氘代試劑(北京恒思公司)；天南星采自貴州省貴定縣，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)趙蓉副教授鑒定為異葉天南星(Arisaema.heterophyllum Blume.)的塊莖，標(biāo)本保存于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)教研室(編號：20201112)。

2 提取與分離

2.1 活性部位的制備

取異葉天南星塊莖4 kg，研碎，加80%乙醇滲漉3 天。提取液經(jīng)減壓回收得稠膏物，加水混懸，用氯仿萃取，得氯仿萃取物54.6 g，剩余水層經(jīng)大孔吸附樹脂柱分離，依次用10%、30%、50%、70%、100%乙醇洗脫，分別得到10%乙醇洗脫部位162.3 g，30%乙醇洗脫部位30.5 g，50%乙醇洗脫部位52.4 g，70%乙醇洗脫部位44.7 g，100%乙醇洗脫部位173.6 g。將上述不同部位樣品分別配制成50μg?mL-1、100 μg?mL-1的溶液，加入預(yù)先用1μg?mL-1LPS 刺激的5×104個/孔RAW264.7 細(xì)胞的48 孔板中，置于二氧化碳培養(yǎng)箱37 °C 恒溫培養(yǎng)24 h。平行設(shè)置空白對照組、陽性對照組（槲皮素），每組3 個復(fù)孔。24 h 后采用CCK-8 法與ELISA 法，考察被測樣品對細(xì)胞的毒性及抗炎活性。結(jié)果表明，大孔吸附樹脂的30%、50%洗脫部分均能抑制LPS 刺激后RAW264.7 細(xì)胞的IL-6 與TNF-α的分泌，且無明顯細(xì)胞毒性。由此確定大孔吸附樹脂的30%、50%洗脫部分為抗炎活性部位。

2.2 化學(xué)成分分離

將上述大孔吸附樹脂30%與50%乙醇洗脫物合并，取其中80 g，分次用Sephadex LH-20 色譜柱純化（30×300 nm，甲醇洗脫），每100 mL 收集一瓶，洗脫液濃縮后用FeCl3顯色檢查，合并FeCl3顯色部分（25.1 g）與FeCl3不顯色部分（52.8 g）。上述FeCl3不顯色部分（50 g）經(jīng)硅膠柱分離，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（100∶0，80∶1，50∶1，10∶1，2∶1）→甲醇梯度洗脫，得6 個流分（Fr.I～Fr.VI）。其中Fr.III（6.2 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以正己烷-乙酸乙酯（48∶1）洗脫，經(jīng)硅膠薄層檢識，合并相同斑點洗脫液，再經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜純化（以氯仿-甲醇洗脫，體積比1∶1），得化合物1（9.2 mg）、2（6.4 mg）。Fr.VI（5.4 g）以SephadexLH-20純化（甲醇洗脫），得化合物17（53.1 mg）、化合物18（185.7 mg）；剩余物經(jīng)硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（20∶1→0∶1），得化合物16（22.8 mg）。取FeCl3顯色部分24 g，經(jīng)MCI 色譜柱純化，以10%甲醇→100%甲醇梯度洗脫，得到6 個組分(Fr.1～Fr.6）。Fr.5（4.4 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-丙酮梯度洗脫（體積比60∶120∶1），得到5 個組分（Fr.5-1～Fr.5-5）。其中，F(xiàn)r.5-4 經(jīng)MCI 吸附樹脂柱純化，以30%甲醇→80%甲醇梯度洗脫，收集70%甲醇洗脫部分，再用反相半制備色譜分離，以78%甲醇-水為流動相，得化合物3（7.7 mg）。Fr.2（3.6 g）經(jīng)反相半制備色譜分離，以25%乙腈-0.1%甲酸水為流動相（流速3.0 mL?min-1），得化合物4（6.6 mg）、化合物5（5.7 mg）、化合物6(6.2 mg）。Fr.3（6.7 g）經(jīng)反相半制備色譜分離，以32%乙腈-0.1%甲酸水為流動相（流速3.0 mL?min-1），得化合物7（8.6 mg）、化合物10（6.2 mg）、化合物11（11.2 mg）、化合物15（9.6 mg）。Fr.4（4.1 g）經(jīng)MCI 色譜柱純化，再反相半制備色譜分離，以28%乙腈-0.1%甲酸水為流動相（流速3.0 mL?min-1），得化合物8(8.3 mg）、化合物9（10.5 mg）、化合物12（7.9 mg）、化合物13（10.4 mg）、化合物14（8.2 mg）。依據(jù)理化性質(zhì)與波譜數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)，具體結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 化合物1 的HMBC 主要相關(guān)關(guān)系

2.3 單體化合物抗炎活性研究

將化合物1，2，7，10 配成1、5、10、25、50 μg/mL濃度梯度的溶液，按照“2.1” 項下方法進(jìn)行試驗，測定其抗炎活性及IC50值。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色粉末。HR-ESI-MS 給出準(zhǔn)分子離子m/z 403.2699[M+H]+(403.2701,C21H39O7)，提示其分子式為C21H38O7。1H-NMR (600 MHz,CDCl3) 譜中δH4.14(1H,dd,J=9.4,4.2Hz)，4.07(1H,dd,J=9.4,6.0Hz)，3.83(1H,dd,J=6.0,4.2Hz)，3.56(2H,m)的質(zhì)子信號結(jié)合13C-NMR(150MHz,CDCl3)譜中δC65.1，69.7，62.7 的碳信號，提示結(jié)構(gòu)存在甘油鏈。13C-NMR 譜共出現(xiàn)21個碳信號，除甘油鏈信號外，剩余的18 個碳信號包括4 個烯碳信號（δC125.0，129.6，133.0，135.1），1 個羰基碳信號δC174.1 和13 個sp3 雜化碳信號，提示結(jié)構(gòu)中有1 個十八碳烯?；?。依據(jù)1H-NMR 譜中δH5.71(2H,dd,J=15.7,5.7 Hz)，5.47 (2H,ddd,J=11.0,5.6,6.0Hz)的2 組質(zhì)子信號，確定十八碳烯?；杏袃山M雙鍵，取代模式分別為反式與順式。綜上分析，推測該化合物為十八碳烯酸甘油酯。由于文獻(xiàn)中未檢索到該化合物，為確定碳烯酸與甘油的連接位置測試其2D NMR 譜，并通過HSQC 譜歸屬碳?xì)湫盘?。HMBC 譜顯示，H-1 分別與C-2，C-3，C-1′相關(guān)；H-3 與C-1，C-2相關(guān)，證實結(jié)構(gòu)存在甘油酯片段。由于H-2′與C-1′，C-3′，C-4′相關(guān)，H-3′與C-1′，C-4′，C-5′相關(guān)，H-7′與C-5′，C-6′相關(guān)，H-8′與C-6′，C-7′相關(guān)，H-9′與C-7′，C-8′，C-10′，C-11′相關(guān)，H-10′與C-8′，C-9′，C-11′，C-12′相關(guān)，H-11′與C-9′，C-10′，C-11′相關(guān)，H-13′與C-11′，C-12′，C-14′，C-15′相關(guān)，H-15′與C-14′，C-17′相關(guān)，H-16′與C-17′，C18′相關(guān)，H-17′與C15′，C16′，C18′相關(guān)，H-18′與C-16′，C-17′相關(guān)（見圖1），進(jìn)一步證實結(jié)構(gòu)存在十八碳二烯?；沂颂枷；?D NMR 譜數(shù)據(jù)與(10E,15Z)-9,12,13-trihydroxyoctadeca-10,15-dienoic acid[7]十分相近。由此，鑒定化合物1 的結(jié)構(gòu)為1-O-(10E,15Z)-9,12,13-trihydroxyoctadeca-10,15-dienoyl glycerol，其光譜數(shù)據(jù)見表1。

表1 化合物物1 的NMR 數(shù)據(jù)(in CD3OD)

化合物2：無色油狀物，EI-MS m/z：411.3[M+H]+。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ：5.42 (4H,m,H-5′,6′,9′,10′)，5.33(1H,m,H-2)，4.30(2H,m,H-3)，2.35(2H,m,H-3′)，2.11 (4H,m,H-7′,8′)，2.83 (2H,m,H-4′)，1.6(2H,m,H-2′)，1.37(20H,m,H-11′～H-19′)，0.95(3H,t,J=7.2 Hz,H-1′)；13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ：173.1(C-1) 69.2(C-2)，62.2(C-3)，14.1(C-1′)，25.8(C-2′～C-3′)，34.2(C-4′)，128.1(C-5′)，128.3(C-6′)，27.4(C-7′,8′)，130.2(H-9′)，130.0(C-10′)，25.1 (C-11′)，29.2 (C-12′～C-19′)。該化合物的光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]基本一致，故鑒定該化合物為2-hydroxyethyl carboxylic acid-5,9-eicodien-carboxylate。

化合物3：白色粉末，香草醛-硫酸試液顯紫紅色。ESI-MS m/z：357.1 [M-H]-。1H-NMR (600MHz，CD3OD)δ：6.89(4H,m,H-2,5,2′,5′)，6.82(2H,dd,J=1.9,8.0 Hz，H-6,6′)，4.74 (2H,d,J=4.2 Hz，H-7,7′)，4.24(2H,dd,J=7.0,9.2 Hz,H -9a,9a′)，3.90 (6H,s,-OCH3)，3.87 (2H,dd,J=3.8,9.2 Hz,H-9b,9b′)，3.10(2H,m,H-8,8′)；13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ：133.0(C-1,1′)，108.6(C-2,2′)，147.1(C-3,3′)，145.3(C-4,4′)，119.0(C-5,5′)，114.3(C-6,6′)，85.9(C-7,7′)，54.2(C-8,8′)，71.7(C-9,9′)，56.0(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]基本一致，故鑒定為松脂素。

化合物4：無色粉末，溴甲酚藍(lán)顯黃色。ESI-MS m/z：193.1[M-H]-。1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ：7.54(1H,dd,J=8.4,1.8 Hz,H-6)，7.53(1H,d,J=1.8Hz,H-2)，6.81(1H,J=8.4 Hz,H-5)，3.88(3H,s,-OCH3)；13CNMR (150 MHz,CD3CD)δ：122.1 (C-1)，114.4 (C-2)，147.2(C-3)，151.1(C-4)，112.4(C-5)，123.8(C-6)，168.9(C-7)，55.0(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報道基本一致，故鑒定為香草酸。

化合物5：無色粉末。ESI-MS m/z：193.1[M-H]-。1H-NMR (600MHz,CD3OD)δ：7.54 (1H,d,J=15.6 Hz,H-7)，7.17(1H,br.s,H-2)，7.05(1H,br.d,J=8.0Hz,H-6)，6.80(1H,d,J=8.0Hz,H-5)，6.22(1H,d,J=15.6 Hz,H-8)，3.90(6H,s,-OCH3)。13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ：126.4 (C-1)，122.6 (C-2)，149.1 (C-3)，148.0 (C-4)，110.3 (C-5)，115.0 (C-6)，145.5 (C-7)，114.5 (C-8)，δC169.6(C-9)，55.0(OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]基本一致，故鑒定為阿魏酸。

化合物6：無色粉末，三氯化鐵顯藍(lán)色。ESI-MS m/z：193.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ：7.59(1H,d,J=15.9 Hz,H-7)，7.17 (1H,br.s,H-2)，7.05(1H,br.d,J=8.0Hz,H-6)，6.80 (1H,d,J=8.0Hz,H-5)，6.30(1H,d,J=15.9Hz,H-8)；13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ：128.0(C-1)，115.2(C-2)，146.9(C-3)，149.5(C-4)，116.3(C-5)，123.0(C-6)，147.1(C-7)，115.9(C-8)，171.3(C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]基本一致，故鑒定為咖啡酸。

化合物7：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性。ESIMS m/z：563.3[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ：13.67 (1H,brs,5-OH)，8.02(2H,brd,J=8.4 Hz,H-2′,6′)，6.91(2H,d,J=8.4 Hz,H-3′,5′)，6.80(1H,s,H-3)，4.71(1H,d,J=9.6 Hz,H-1′′)，4.75(1H,d,J=9.0 Hz,H-1″′)，3.20～3.91 (11H,sugar-H)；13C-NMR (150MHz,DMSO-d6)δ：164.5 (C-2)，104.1 (C-3)，182.8 (C-4)，158.7(C-5)，108.6(C-6)，161.7(C-7)，105.6(C-8)，155.7(C-9)，103.0(C-10)，121.9(C-1′)，129.5(C-2′，6′)，116.3(C-3′,5′)，161.7(C-4′)，74.7(C-1″)，71.4(C-2′′)，74.4(C-3″)，68.9(C-4″)，70.6(C-5″)，73.8(C-1″′)，71.0(C-2″′)，79.4(C-3″′)，70.0(C-4″′)，82.4(C-5″′)，61.7(C-6″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]基本一致，故鑒定為異夏佛托苷。

化合物8：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性。ESIMS m/z：563.3[M-H]-。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：13.82 (1H,s,5-OH)，8.03 (2H,d,J=8.0 Hz,H-2′,H-6′)，6.92(2H,d,J=8.0 Hz,H-3′,H-5′)，6.80(1H,s,H-3)，4.72(1H,d,J=9.6 Hz,H-1″)，4.76(1H,d,J=9.5 Hz,H-1"′)，3.20～3.91(11H,sugar-H)；13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：164.8(C-2)，102.5(C-3)，182.8(C-4)，158.7(C-5)，108.5(C-6)，161.7(C-7)，105.6(C-8)，155.7(C-9)，104.1(C-10)，121.5(C-1′)，129.2(C-2′)，116.4(C-3′)，161.7(C-4′)，116.4(C-5′)，129.2(C-6′)，74.3(C-1″)，68.7(C-2″)，78.3(C-3″)，70.6(C-4″)，81.1(C-5″)，61.7(C-6″)，74.6(C-1"′)，69.7(C-2"′)，74.3 (C-3"′)，70.6(C-4"′)，68.7(C-5"′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]基本一致，故鑒定為夏佛托苷。

化合物9：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESIMS m/z：563.1[M-H]-。1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ：13.68(1H,s,5-OH)，7.93(2H,d,J=8.7 Hz,H-2′,6′)，6.93(2H,d,J=8.7 Hz,H-3′,5′)，6.80(1H,s,H-3)，4.75(1H,d,J=9.6 Hz,H-1″)，4.70(1H,d,J=9.8 Hz,H-1″′)，3.20～3.91(11H,sugar-H)；13C-NMR(150 MHz,DMSOd6)δ：164.2(C-2)，103.1(C-3)，182.6(C-4)，161.7(C-5)，109.0(C-6)，161.7(C-7)，105.4(C-8)，155.5 (C-9)，103.7(C-10)，122.0(C-1′)，129.0(C-2′,6′)，116.4(C-3′,5′)，158.8(C-4′)，74.2(C-1″)，68.9(C-2″)，74.9(C-3″)，70.1(C-4″)，79.5(C-5″)，61.3(C-6″)，75.1(C-1″′)，70.7(C-2″′)，74.9(C-3″′，70.6(C-4″′)，71.1(C-5″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]基本一致，故鑒定為6-C-α-L-arabinosyl-8-C-β-Dgalactosyl apigenin。

化合物10：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESI-MS m/z：563.1[M-H]-。1H-NMR(600 MHz,DMSOd6)δ：13.72(1H,brs,5-OH)，7.93(2H,brd,J=8.4Hz,H-2′,6′)，6.92 (2H,d,J=8.4Hz,H-3′,5′)，6.75 (1H,s,H-3)，4.74 (1H,d,J=9.6Hz,H-1′′)，4.74 (1H,d,J=9.0Hz,H-1″′)，3.20～3.91 (11,sugar-H)；13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ：163.8(C-2)，104.1(C-3)，182.3(C-4)，158.7(C-5)，108.6(C-6)，159.5(C-7)，105.2(C-8)，155.5(C-9)，103.0(C-10)，122.1(C-1′)，129.0(C-2′,6′)，116.4(C-3′,5′)，161.6(C-4′)，75.4(C-1″)，70.6(C-2″)，78.7(C-3″)，71.0(C-4″)，69.9(C-5″)，74.5(C-1″′)，71.9(C-2″′)，79.4(C-3″′)，71.7(C-4″′)，81.5(C-5″′)，60.7(C-6″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]基本一致，故鑒定為維采寧1。

化合物11：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESI-MS m/z：563.1 [M-H]-。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ：13.70(1H,s,5-OH)，7.94(2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′)，6.94 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′)，6.80 (1H,s,H-3)，4.77(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″)，4.75(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″′)，3.20～3.91 (11,sugar-H)；13C-NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ：164.2 (C-2)，103.1 (C-3)，182.6 (C-4)，159.4 (C-5)，108.4 (C-6)，161.7 (C-7)，105.2 (C-8)，155.3(C-9)，103.9(C-10)，121.9(C-1′)，129.1(C-2′,6′)，115.8(C-3′,5′)，161.7(C-4′)，74.4(C-1″)，71.0(C-2″)，79.1(C-3″)，70.5 (C-4″)，81.6(C-5″)，60.6(C-6″)，75.2(C-1″′)，72.0(C-2″′)，78.5(C-3″′)，71.6(C-4″′)，69.8(C-5″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]基本一致，故鑒定為維采寧3。

化合物12：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESI-MS m/z：595.1577 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ：13.70(1H,s,5-OH)，7.94(2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′)，6.94 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′)，6.80 (1H,s,H-3)，4.77(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″)，4.75(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″′)，3.20～3.91 (12H,sugar-H)。13C-NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ：164.2 (C-2)，103.2 (C-3)，182.6 (C-4)，158.9 (C-5)，109.0 (C-6)，161.7 (C-7)，105.2 (C-8)，155.5(C-9)，103.9(C-10)，121.9(C-1′)，129.1(C-2′,6′)，116.4(C-3′,5′)，161.7(C-4′)，74.2(C-1″)，68.9(C-2″)，75.0(C-3″)，70.2(C-4″)，79.5(C-5″)，61.3(C-6″)，74.2(C-1″′)，68.9(C-2″′)，75.0(C-3″′)，70.2(C-4″′)，79.6(C-5″′)，61.3(C-6″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]基本一致，故鑒定為6,8-di-C-β-D-galactosyl apigenin。

化合物13：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESI-MS m/z：595.1 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ：13.78(1H,s,5-OH)，8.31(2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′)，6.89 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′)，6.85 (1H,s,H-3)，4.74(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″)，4.44(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″′)，3.20～3.91 (11H,sugar-H)；13C-NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ：164.8 (C-2)，102.5 (C-3)，182.8 (C-4)，158.7 (C-5)，108.5 (C-6)，161.8 (C-7)，105.6 (C-8)，155.7(C-9)，104.1(C-10)，121.4(C-1′)，130.2(C-2′,6′)，116.4(C-3′,5′)，161.8(C-4′)，74.6(C-1″)，70.6(C-2″)，78.2(C-3″)，68.9 (C-4″)，68.8(C-5″)，74.3(C-1″′)，70.0(C-2″′)，74.6(C-3″′)，70.0 (C-4″′)，81.1(C-5″′)，61.7(C-6″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]基本一致，故鑒定為6-C-β-D-xylosyl-8-C-β-D-galactosyl apigenin。

化合物14：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESI-MS m/z：595.1 [M+H]+。1H-NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ：13.68 (1H,brs,5-OH)，7.90 (2H,d,J=8.7Hz,H-2′,6′)，6.85 (2H,d,J=8.7Hz,H-3′,5′)，6.41(1H,brs,H-3)，4.62 (1H,d,J=9.8Hz,H-1″)，4.82(1H,brd,J=9.6Hz,H-1″′)，3.84～3.20 (12H,sugar-H)；13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ：164.7(C-2)，102.5 (C-3)，182.8(C-4)，158.7(C-5)，108.85C-6)，161.6(C-7)，106.4(C-8)，155.6(C-9)，105.2(C-10)，121.4(C-1′)，103.6(C-3)，129.8(C-2′,6′)，116.4 (C-3′,5′)，74.2(C-1″)，70.7(C-2″)，78.8(C-3″)，70.3(C-4″)，80.5(C-5″)，61.0(C-6″)，74.4(C-1″′)，71.8(C-2″′)，79.0(C-3′)，70.7(C-4″′)，81.3(C-5″′)，61.3(C-6″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]基本一致，故鑒定為維采寧2。

化合物15：黃色粉末，鹽酸鎂粉反應(yīng)呈陽性，ESI-MS m/z：563.1[M-H]-。1H-NMR(600 MHz,DMSOd6)δ：13.80(1H,s,5-OH)，7.97(2H,d,J=8.7 Hz,H-2′,6′)，6.91 (2H,d,J=8.7Hz,H-3′,5′)，6.84 (1H,s,H-3)，4.75(1H,d,J=9.6 Hz,H-1″)，4.69(1H,d,J=9.8 Hz,H-1″′)，3.20～3.91(11H,sugar-H)；13C-NMR(150 MHz,DMSOd6)δ：164.7(C-2)，103.1(C-3)，182.8(C-4)，161.7(C-5)，109.0(C-6)，161.6(C-7)，105.3(C-8)，155.5(C-9)，102.9(C-10)，121.5(C-1′)，130.0(C-2′,6′)，116.5(C-3′,5′)，158.8(C-4′)，74.2(C-1″)，68.7(C-2″)，75.1(C-3″)，69.5(C-4″)，79.6(C-5″)，61.3(C-6″)，75.5(C-1″′)，70.7(C-2″′)，74.9(C-3″′)，69.0(C-4″′)，71.5(C-5″′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]基本一致，故鑒定為6-C-β-D-galactosyl-8-Cα-L-arabinosyl apigenin。

化合物16：無色粉末，ESI-MS m/z：579.5 [M+H]+。該化合物在氯仿-甲醇（體積比1∶1）的溶劑中溶解度良好，與胡蘿卜苷對照品進(jìn)行TLC 對照，硫酸顯色紫紅色，Rf 值一致，故鑒定為胡蘿卜苷。

化合物17：白色粉末。1H-NMR (600 MHz,D2O)δ：4.20 (1H,d,J=7.5Hz,H-1)，3.25～3.89 (12H,m,sugar-H)。13C-NMR(150 MHz,D2O)δ：97.4(C-1)，74.1(C-2)，76.8(C-3)，70.4(C-4)，76.7(C-5)，61.3(C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]基本一致，故鑒定為葡萄糖。

化合物18：白色粉末。1H-NMR (600 MHz,D2O)δ：5.40(1H,d,J=3.9 Hz,H-1′)，4.2(1H,d,J=7.5Hz,H-1)，4.30 (1H,t,J=8.4Hz,H-3′)，3.45～4.03 (12H,m,sugar-H)。13C-NMR(150 MHz,D2O)δ：92.2(C-1)，71.1(C-2)，76.3(C-3)，69.2(C-4)，74.0(C-5)，61.3(C-6)，60.1(C-1′)，103.7(C-2′)，81.4(C-3′)，72.6(C-4′)，72.4(C-5′)，62.4(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]基本一致，故鑒定為蔗糖。

4 抗炎作用

結(jié)果表明，化合物1，2，7，10 均能抑制LPS 誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞RAW264.7 的IL-6 與TNF-α 的釋放，表現(xiàn)出具有抗炎活性，詳見表2。

表2 分離化合物的抗LPS 誘導(dǎo)RAW264.7 細(xì)胞釋放炎癥因子的活性

5 討論

目前已從天南星中發(fā)現(xiàn)苯丙素，黃酮，甘油酯，凝集素等成分，因夏佛陀苷含量較高，且具有良好活性，已作為指標(biāo)性成分用于天南星的鑒定。但現(xiàn)有研究表明，《中國藥典》收錄的3 種天南星的成分差異較大[5]，但相關(guān)品種與質(zhì)量鑒別研究報道較少，主要原因是三種天南星的成分研究還不系統(tǒng)[6]。本課題組利用LCMS 分析發(fā)現(xiàn)，3 種天南星的黃酮碳苷差異尤為突出，主要表現(xiàn)為異葉天南星中黃酮碳苷類成分較為豐富。本研究從異葉天南星的抗炎活性部位中鑒定了9 種黃酮碳苷，為天南星的品種鑒定提供參考。同時，抗炎活性成分的研究也為天南星的開發(fā)應(yīng)用提供了依據(jù)。但不同基源天南星的成分與活性的系統(tǒng)研究還有待進(jìn)一步深入。