張莉莉 甄飛

原發(fā)性肝癌(PHC)在我國(guó)發(fā)病率較高,PHC可增加患者發(fā)生肝功能衰竭、多器官功能障礙的風(fēng)險(xiǎn),提高病死率[1]。盡管可以通過(guò)手術(shù)及微創(chuàng)介入治療PHC,但其復(fù)發(fā)率仍然較高,患者5年生存率也較低。影響PHC患者預(yù)后的因素也較多,如腫瘤細(xì)胞分化程度低、發(fā)生轉(zhuǎn)移、門(mén)靜脈侵犯等,均可導(dǎo)致不良預(yù)后[2]。三重基序蛋白3(TRIM3)及叉頭轉(zhuǎn)錄因子O家族1(FoxO1)是與腫瘤相關(guān)的基因蛋白,已被證實(shí)其表達(dá)缺失可導(dǎo)致多種惡性腫瘤,但TRIM3及FoxO1與PHC的關(guān)系研究較少[3-4]。因此本研究旨在探討組織內(nèi)TRIM3及FoxO1表達(dá)與PHC患者病理特征及預(yù)后間的關(guān)系。

資料與方法

一、納入標(biāo)準(zhǔn)

①PHC診斷符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[5];②肝功能Child A或B級(jí);③經(jīng)術(shù)后病理學(xué)檢查證實(shí);④臨床資料完整。

二、排除標(biāo)準(zhǔn)

①人類免疫缺陷病毒感染;②轉(zhuǎn)移性肝癌;③接受過(guò)放化療治療;④合并其他惡性腫瘤;⑤長(zhǎng)期應(yīng)用免疫抑制劑;⑥繼發(fā)性肝癌;⑦有合并性腦病。

三、一般資料

回顧性分析2018年1月—2019年12月南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院119例PHC患者的臨床資料。本研究獲得南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(2018-04號(hào))。

四、方法

(一)收集資料 收集患者的臨床資料。

(二)TRIM3、FoxO1檢測(cè) 采用免疫組化染色法檢測(cè)患者肝癌組織與癌旁組織內(nèi)TRIM3、FoxO1表達(dá),癌旁組織取腫瘤周圍5 cm內(nèi)的肝組織。判斷標(biāo)準(zhǔn)：TRIM3主要分布于胞漿中,FoxO1主要分布于細(xì)胞核中,顯微鏡下均出現(xiàn)棕黃色顆粒判定為陽(yáng)性細(xì)胞,依據(jù)染色強(qiáng)度評(píng)分：0分(未染色)、1分(淡黃色)、2分(棕黃色)、3分(褐色),依據(jù)染色細(xì)胞占比評(píng)分：1分(≤10%)、2分(11%～50%)、3分(51%～75%)、4分(>75%),兩者之積≥3分為陽(yáng)性,<3分為陰性。

(三)隨訪觀察 電話或門(mén)診隨訪3年,觀察患者的3年生存情況。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料用百分比(%)表示,采用χ2檢驗(yàn),采取Kaplan-Meier法繪制生存曲線。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、PHC患者肝癌組織與癌旁組織TRIM3、FoxO1表達(dá)比較

PHC患者肝癌組織中TRIM3、FoxO1陽(yáng)性率顯著低于癌旁組織(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 PHC患者肝癌組織與癌旁組織TRIM3、FoxO1表達(dá)比較[n(%)]

二、肝癌組織內(nèi)TRIM3及FoxO1表達(dá)與PHC患者病理特征間的關(guān)系

TRIM3陽(yáng)性患者腫瘤大小<5 cm、高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的占比顯著高于TRIM3陰性患者(P<0.05),FoxO1陽(yáng)性患者腫瘤大小<5 cm、單發(fā)、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的占比顯著高于FoxO1陰性患者(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 肝癌組織內(nèi)TRIM3及FoxO1表達(dá)與PHC患者病理特征間的關(guān)系[n(%)]

三、肝癌組織內(nèi)不同TRIM3及FoxO1表達(dá)PHC患者預(yù)后比較

對(duì)119例PHC患者行3年隨訪,3年生存率為45.38 %(54/119);55例肝癌組織TRIM3陽(yáng)性患者3年生存率為61.82 %(34/55),64例肝癌組織TRIM3陰性患者3年生存率為31.25 %(20/64),Kaplan-Meier生存分析顯示,兩組的3年生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Log Rank=10.242,P=0.001);50例肝癌組織FoxO1陽(yáng)性患者3年生存率為60.00 %(30/50),69例肝癌組織FoxO1陰性患者3年生存率為34.78 %(24/69),Kaplan-Meier生存分析顯示,兩組的3年生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Log Rank=6.978,P=0.008)。見(jiàn)圖1。

圖1 肝癌組織內(nèi)不同TRIM3及FoxO1表達(dá)PHC患者3年生存曲線

討 論

近年來(lái)有較多研究報(bào)道表明,基因等位突變、基因缺失等遺傳因素在PHC的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中具有重要作用[6-7]。因此在早期診斷PHC時(shí)對(duì)其遺傳基因進(jìn)行研究,可能為PHC的早期發(fā)現(xiàn)及治療提供新的方法。研究發(fā)現(xiàn)[8-10],TRIM3、FoxO1表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌等多種惡性腫瘤相關(guān),TRIM3減少可增加食管鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及微淋巴管密度,FoxO1可影響卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌患者的腫瘤細(xì)胞形態(tài)及分期,但TRIM3、FoxO1與PHC的相關(guān)研究較少。

本研究結(jié)果顯示,TRIM3、FoxO1均在肝癌組織中陰性表達(dá)較多,在癌旁組織中陽(yáng)性表達(dá)較多,提示TRIM3及FoxO1表達(dá)缺失或低表達(dá)對(duì)PHC的發(fā)生、發(fā)展具有重要作用。腫瘤的惡化和進(jìn)展離不開(kāi)單個(gè)或多個(gè)基因突變的發(fā)生,TRIM3屬于抑癌基因,其陽(yáng)性表達(dá)有助于延緩肝癌細(xì)胞增殖。有研究證實(shí)[11],TRIM3在其他惡性腫瘤中也有抑癌效果,也有研究顯示[12-14],TRIM家族的其他蛋白,如TRIM19、TRIM21、TRIM24等,與細(xì)胞的周期、分化、凋亡相關(guān)。FoxO1具有穩(wěn)定癌細(xì)胞周期的作用,其水平變化可以調(diào)控癌細(xì)胞的分化成熟及黏附能力[15]。FoxO1陰性表達(dá)可使肝癌細(xì)胞的增殖調(diào)控異常,增強(qiáng)其持續(xù)性自我增殖能力;同時(shí)改變肝癌細(xì)胞的侵襲能力,顯著提高上皮細(xì)胞突破基底膜的風(fēng)險(xiǎn)[16]。

本研究在觀察TRIM3表達(dá)與PHC患者病理特征的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn),TRIM3表達(dá)與腫瘤大小、病理分級(jí)、TNM分期具有相關(guān)性,FoxO1表達(dá)與腫瘤大小、數(shù)量、TNM分期具有相關(guān)性。TRIM3陰性或低表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng),TRIM3陽(yáng)性及高表達(dá)可能通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞克隆形成、遷移和侵襲,使肝癌細(xì)胞在細(xì)胞周期G1期出現(xiàn)生長(zhǎng)阻滯,并調(diào)節(jié)p21蛋白的表達(dá)及獲細(xì)胞的敏感性,導(dǎo)致肝癌細(xì)胞凋亡,從而對(duì)腫瘤大小、病理分級(jí)及TNM分期產(chǎn)生影響[17]。FoxO1表達(dá)與PHC患者病理特征的關(guān)系主要體現(xiàn)在其對(duì)腫瘤大小、數(shù)量、TNM分期的影響,FoxO1陰性表達(dá)可以使肝癌細(xì)胞侵襲正常肝臟上皮組織的能力增強(qiáng),擴(kuò)大癌栓深度和癌栓范圍,從而提高患者臨床分期;FoxO1表達(dá)缺失可能通過(guò)改變肝臟上皮細(xì)胞增殖特性影響腫瘤的大小和數(shù)量[18-20]。

另外,本研究結(jié)果顯示,TRIM3及FoxO1陽(yáng)性的患者3年生存率均顯著高于TRIM3及FoxO1陰性的患者,提示TRIM3及FoxO1表達(dá)與PHC患者預(yù)后顯著相關(guān),TRIM3及FoxO1陽(yáng)性表達(dá)可延長(zhǎng)患者生存時(shí)間,這可能是因?yàn)門(mén)RIM3及FoxO1蛋白陽(yáng)性表達(dá)有利于腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特征的穩(wěn)定,從而可使腫瘤細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)降低,進(jìn)而影響患者的預(yù)后。

綜上所述,組織內(nèi)TRIM3及FoxO1表達(dá)與PHC的疾病進(jìn)展相關(guān),可能起到抑癌作用,同時(shí)TRIM3、FoxO1可用于PHC患者預(yù)后的評(píng)估,為PHC的診治提供新的思路。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。