湯 思,陳學(xué)杰,2

(1.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科,廣西 南寧 530000;2.廣西醫(yī)科大學(xué))

直接抗人球蛋白試驗(yàn)(DAT),是為了檢測紅細(xì)胞表面存在不完全抗體或補(bǔ)體的方法[1],該檢測方法可用于診斷機(jī)體是否存在溶血性貧血。通常情況下,DAT的陽性結(jié)果出現(xiàn)在多種疾病中,如溶血性貧血、新生兒溶血、輸血反應(yīng)、應(yīng)用人源血制品及器官移植后等情況。各種疾病或情況可能引發(fā)DAT陽性[2],通過DAT醫(yī)療人員可以確定是否存在免疫性溶血。大部分DAT陽性伴貧血患者[3],由于紅細(xì)胞破壞速度超過身體造血速度,所以需要輸入紅細(xì)胞治療。本文分析DAT陽性分型與輸血療效的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取2021年7月～2022年6月廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院DAT試驗(yàn)陽性且輸注紅細(xì)胞的患者128例,男71例,女57例;年齡16～86歲,平均(51.67±2.15)歲,輸血次數(shù)共197次,微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)主側(cè)陰性,次側(cè)(+)～()。128例患者中有11例抗體篩查試驗(yàn)陽性,強(qiáng)度(+)～()。所有患者均未發(fā)生輸血不良反應(yīng)。128例DAT陽性輸血患者疾病類型分別為血液病[51例(39.84%)]、感染性疾病[39例(30.47%)]、腎臟疾病[10例(7.81%)]、腫瘤[5例(3.91%)]、SLE[7例(5.47%)]、心臟疾病[5例(3.91%)]和其他不明原因[11例(8.59%)]。DAT分型后,IgG陽性者107例(83.59%),凝集以(±)～()為主;IgG+C3d陽性者13例(10.16%),凝集以為主;C3d陽性者8例(6.25%),凝集以為主。選擇同期DAT陰性且輸注紅細(xì)胞的患者作對照,男73例,女55例,年齡15～87歲,平均(52.33±2.08)歲。實(shí)驗(yàn)對象均明確實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,得到倫理委員會審批同意。兩組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn):納入與排除標(biāo)準(zhǔn):①配合性良好的患者;②具有完整的臨床資料。排除標(biāo)準(zhǔn):①有藥物過敏史的患者;②有傳染類疾病患者;③患有惡性腫瘤患者。

1.2方法

1.2.1試劑與儀器:抗人球蛋白(抗-IgG、抗-C3d),采用微柱凝膠法,產(chǎn)商:江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司;低離子抗人球蛋白,方法為微柱凝膠法,產(chǎn)商:美國Bio-Rad公司;ABO、RhD血型,方法為微柱凝色膠法,產(chǎn)商:長春博迅生物技術(shù)公司;抗體篩選,使用紅細(xì)胞試劑盒,產(chǎn)商:上海血液生物醫(yī)藥;湘儀L500離心機(jī),產(chǎn)商:湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器公司;ID-Incubator37SI離心機(jī),產(chǎn)商:美國Bio-Rad公司;TD-A型血清檢測離心機(jī),產(chǎn)商:長春博研科學(xué)儀器公司。

1.2.2檢測方法:交叉配血時,采用微柱凝膠法,包括DAT、血型鑒定、抗體篩查等。

1.3紅細(xì)胞輸注效果判定:評估細(xì)胞輸注效果。輸注第2天,檢查血紅蛋白(Hb),并與之前結(jié)果對比,倘若Hb沒有獲得預(yù)期升高,并排除失血、被稀釋情況,也未出現(xiàn)溶血反應(yīng),說明本次輸血無效。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:選擇SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1DAT陽性組與陽性組Hb、RBC、Hct水平比較:DAT陽性組輸血前RBC和Hct值明顯低于陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);輸血后,DAT陽性組Hb、RBC、Hct上升值/U均明顯低于陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 DAT陽性組與DAT陰性兩組Hb、RBC、Hct水平比較

2.2不同抗體陽性組患者Hb水平及上升值比較 輸血前,DAT陽性組IgG+C3d陽性者Hb水平為(43.26±9.76)g/L,明顯低于IgG陽性者[(56.46±11.65)g/L]、C3d陽性者[(61.81±18.62)g/L]和DAT陰性組[(53.46±11.13)g/L],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。輸血后,DAT陽性組C3d陽性者Hb上升值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(2.31±2.43)g/L]明顯低于DAT陰性組[(7.12±3.16)g/L]、DAT陽性組IgG+C3d陽性者[(8.31±4.61)g/L]和IgG陽性者[(5.92±3.98)g/L] ,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);IgG陽性者輸血后Hb上升值/U明顯低于DAT陰性組與IgG+C3d陽性者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3不同類型DAT陽性患者輸血有效率比較:IgG+C3d陽性者、IgG陽性者、C3d陽性者分別為88.89%(16/18)、65.48%(110/168)、18.18%(2/11),各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.125,P=0.001)。

3 討論

DAT陽性一直是研究者關(guān)注的一個問題[4],因?yàn)樗鼘τ谳斞熜в兄匾挠绊?。要了解DAT陽性的原因,我們需要進(jìn)行詳細(xì)的分析[5]。AIHA、HDN、DIHA、應(yīng)用血制品、器官移植,同種異型抗原或藥物性抗原的刺激,都可能導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,從而引起DAT陽性的情況[6-7]。在DAT陽性的分類中,IgG型是最常見的,主要出現(xiàn)在白血病和感染性疾病患者中。這一情況的原因可能是因?yàn)檫@些患者長期接受血液制品的輸注,同時也可能與感染以及某些藥物的誘導(dǎo)有關(guān)。另一種情況是IgG+C3d復(fù)合型抗體,它主要出現(xiàn)在AIHA和SLE患者中。這可能與患者的免疫功能紊亂以及自身抗體生成增多有關(guān)。輸入紅細(xì)胞是臨床有效的治療措施,目的是為了增強(qiáng)患者體內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量、Hb水平,以改善貧血或緩解其他疾病所引起的貧血癥狀[8-9]。但是,輸血效果和患者身體素質(zhì)有直接關(guān)聯(lián)。首先,患者的疾病診斷對于輸血效果具有重要意義。某些疾病如白血病和感染性疾病可能導(dǎo)致特定類型的抗體,這可能在DAT測試中呈陽性[10]。在這些情況下,輸血后患者的Hb、RBC和Hct水平可能會有所提升,但上升的幅度相對較低。然而,這并不一定代表輸血無效,而是反映了患者的疾病特點(diǎn)。其次,另一個關(guān)鍵因素是患者是否有過長時間輸血情況。因此,在評估輸血效果時,需要考慮輸血史,有助于增強(qiáng)輸血效果。妊娠史也可能影響輸血效果,妊娠期間,患者的生理狀態(tài)可能發(fā)生變化,包括血容量的增加。因此,孕婦接受輸血時可能需要更多的紅細(xì)胞單位,以達(dá)到治療的期望效果。最后,患者的藥物史對輸血效果也有潛在的影響。因此,醫(yī)生需要綜合考慮患者的藥物史,以便更好地預(yù)測輸血效果?？傊?紅細(xì)胞輸注效果的評估是一個綜合性過程[11],需要考慮患者的疾病診斷、輸血史、妊娠史和藥物史等因素。雖然DAT陽性表明可能有紅細(xì)胞與抗體或補(bǔ)體產(chǎn)生反應(yīng),但無法說明輸血無效。每位患者的情況都應(yīng)該根據(jù)其個體特點(diǎn)進(jìn)行評估,以確保輸血能夠取得預(yù)期的治療效果。DAT陽性患者接受異體紅細(xì)胞輸注后,雖然Hb水平會有所提升,但通常不能達(dá)到DAT陰性組的輸血效果[12]?？赡芘cIgG組輸血有效率高于C3d組有關(guān),原因如下:①IgG亞類的作用:IgG亞類包括IgG1和IgG3型,這兩種亞類可能導(dǎo)致更為嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。因此,如果患者的DAT陽性與IgG抗體有關(guān),那么輸注DAT陽性的紅細(xì)胞可能會引起較嚴(yán)重的溶血,導(dǎo)致Hb的上升效果相對有限。②C3d的作用:C3d容易出現(xiàn)在冷凝集素綜合征(CAS)中。它造成紅細(xì)胞破壞是因補(bǔ)體介導(dǎo)的[13],因此紅細(xì)胞在肝臟發(fā)生嚴(yán)重的血管外溶血。輸血后,C3d可能繼續(xù)破壞紅細(xì)胞,造成輸血無效。本研究中不同DAT陽性患者亞類之間存在不同的輸血效果,展現(xiàn)了輸血效果的多樣性和復(fù)雜性。所以需要更精細(xì)地區(qū)分患者DAT陽性亞類,有助于提高輸血效果,提升治療有效性。研究表明,DAT的凝集強(qiáng)度與溶血以及貧血的程度之間存在關(guān)聯(lián)[14],這也導(dǎo)致了輸血的有效率會隨著抗體強(qiáng)度的增加而逐漸降低。不過,根據(jù)本研究的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)DAT陽性分型后,不同的凝集強(qiáng)度似乎對輸注紅細(xì)胞的治療效果沒有明顯影響。這一發(fā)現(xiàn)可能暗示在某些情況下,凝集強(qiáng)度并不是唯一影響輸血效果的因素。盡管我們尚未完全了解DAT陽性對輸入異體紅細(xì)胞的影響機(jī)制,但不能因?yàn)榛颊叱尸F(xiàn)DAT陽性而完全拒絕為其輸血。相反,我們需要謹(jǐn)慎而仔細(xì)地掌握輸血的適應(yīng)證,以確保在輸血過程中避免發(fā)生溶血反應(yīng)或輸血無效。此外,如果有必要,我們應(yīng)該進(jìn)行額外的實(shí)驗(yàn)室測試[15],如抗體鑒定、放散試驗(yàn)以及流式細(xì)胞術(shù)等,來更深入地分析DAT陽性的具體情況。

綜上所述,DAT陽性通常出現(xiàn)在血液病和感染性疾病中,對于DAT陽性患者,紅細(xì)胞輸注后的療效往往降低,這一現(xiàn)象可能與DAT陽性分型相關(guān)。所以輸血期間要嚴(yán)格遵守患者身體癥狀,從而確保輸血安全、有效。