袁明貴,徐志宏,彭新宇,唐興剛,八曉敏,田 雅,向 蓉,2*,楊 希

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學院動物衛(wèi)生研究所,廣東省畜禽疫病防治研究重點實驗室,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸用藥物與診斷技術(shù)廣東科學觀測實驗站,廣東 廣州 510640; 2.嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學與技術(shù)廣東省實驗室茂名分中心,廣東 茂名 525000;3.廣東省農(nóng)業(yè)科學院動物科學研究所,廣東 廣州 510640)

白花鬼針草為鬼針草屬(BidensLinn.)一年或多年生草本植物,原產(chǎn)熱帶美洲,現(xiàn)已入侵我國高溫高濕的嶺南地區(qū),對當?shù)厣锒鄻有栽斐蓢乐赜绊慬1-2]。目前,我國對白花鬼針草的研究集中在生態(tài)防控方面[3],主要采用滅生性除草劑對其進行噴霧防除[4],或利用物種之間的化感作用對其進行競爭抑制[5]。白花鬼針草含有豐富的聚炔類和黃酮類等活性成分[3],使其具有較強的抗炎活性[6],其蛋白提取物可以通過產(chǎn)生活性氧物質(zhì)和降低谷胱甘肽濃度的方式誘導結(jié)腸癌細胞SW480凋亡[7]。對入侵植物進行開發(fā)利用才是一種更加積極的防控策略[8],但是關(guān)于白花鬼針草的應用研究依然比較缺乏。為了促進入侵植物白花鬼針草資源化利用,本試驗將白花鬼針草和車前草[9-10],以及少量的生姜和大蒜組成復方,經(jīng)過水煎等工藝做成制劑,飼喂杜長大生長豬,研究其對動物生長功能,肝臟、腎臟和胰腺功能的影響,為白花鬼針草在畜牧業(yè)中的應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物制備

《中華本草》(1999年版)記載了鬼針草與車前草10∶3比例,以及少量生姜和大蒜組成的復方具有緩解腸胃炎癥的作用。稱取4.00 kg白花鬼針草干粉,1.20 kg車前草干粉,0.10 kg生姜,0.25 kg大蒜,加入去離子水50 L,用氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)為13.0,90 ℃保溫2 h,過濾出提取液。重復3次,合并提取液。將提取液濃縮至50 L,用5 mol/L的鹽酸將pH調(diào)節(jié)至6.0。過濾除去沉淀后,繼續(xù)濃縮至10 L,離心去除沉淀,上清加入95%的酒精,使酒精終濃度為70.3%,靜置過夜。離心收集下層沉淀,80 ℃減壓干燥,最后得產(chǎn)品0.15 kg。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

選取精神狀況良好,體重相近,健康的70日齡,體重約19 kg的杜長大生長豬32頭,隨機分為4個處理,每個處理8頭,每頭豬打耳標。在生長豬的配合飼料基礎(chǔ)上,添加不同劑量的白花鬼針草復方提取物構(gòu)成試驗豬的日糧。按照添加量的不同分為4個處理,分別為對照組(C,0 mg/kg)、低劑量組(L,125 mg/kg)、中劑量組(M,250 mg/kg)、高劑量組(H,500 mg/kg)?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

將每個處理組飼養(yǎng)于同一欄中,舍溫保持在25 ℃左右,適當通風,自由飲水。試驗期間,每組每餐限量飼喂等量日糧。按豬場常規(guī)免疫操作程序進行免疫及飼養(yǎng)管理,正試期20 d。

1.3 樣品采集與指標測定

1.3.1 生產(chǎn)性能 試驗第1天空腹測量體重為初始體重,第10天空腹體重為中期體重,第20天空腹體重為終末體重。以圈為單位,每天記錄飼喂量和剩料量。計算生長豬的平均日重(ADG)和料重比。

1.3.2 血液生化 于飼喂本試驗日糧的第1天,每組隨機選取1頭進行前腔靜脈采血,共4頭;于第10天,第20天每組8頭全部進行前腔靜脈采血。采集的血液樣品注入血液促凝管中,待血清析出后,3 000 r/min離心10 min收集血清。利用全自動愛德士(IDEXX)血液生化分析儀,24 h內(nèi)進行血液生化分析。

1.4 統(tǒng)計分析

利用SPSS21.0,進行單因素方差分析(One-way ANOVA),采用Duncan多重比較法,以P<0.05為差異顯著性標準,以P<0.01為差異極顯著性標準。試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準偏差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 白花鬼針草復方提取物對生長性能的影響

從表2可以看出,高劑量組的ADG,在前期和后期均高于對照組(P>0.05);中劑量組的前期和總ADG,高于對照組(P>0.05);低劑量組的前后兩階段ADG數(shù)據(jù)差異較大,但是總ADG與對照組相近。與對照組相比,高、中劑量組的料重比分別降低4.52%,2.08%。

表2 白花鬼針草復方提取物對生長豬生長性能的影響

2.2 白花鬼針草復方提取物對血液生化的影響

2.2.1 白花鬼針草復方提取物對生長豬第一階段的血液生化指標影響 飼喂10 d后,血液生化指標見表3。從表3可以看出,高劑量組與對照組的腘固醇(CHOL)濃度無顯著差異,但是極顯著高于中劑量組(P<0.01);高劑量組的堿性磷酸酶(ALKP)活性極顯著高于中劑量組(P<0.01);低劑量組與對照組的谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶(GGT)活性無顯著差異,但是顯著高于中劑量組(P<0.05);高劑量組血清磷(PHOS)濃度顯著高于低劑量組(P<0.05)。

表3 白花鬼針草復方提取物對生長豬第一階段的血液生化影響

2.2.2 白花鬼針草復方提取物對生長豬第二階段的血液生化影響 飼喂20 d后,血液生化指標見表4。從表4可以看出,高、中、低劑量組球蛋白(GLOB)含量顯著高于對照組(P<0.05),ALKP活性極顯著高于對照組(P<0.01);高、中劑量組肌酐(CREA)含量顯著高于對照組(P<0.05);高劑量組的CHOL含量和GGT活性顯著高于對照組(P<0.05);中劑量組的PHOS含量顯著高于低劑量組和對照組(P<0.05)。高劑量組白蛋白(ALB)含量顯著低于對照組(P<0.05);高劑量組的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性顯著低于對照組(P<0.05),而低劑量組的ALT活性顯著高于對照組(P<0.05)。

表4 白花鬼針草復方提取物對生長豬第二階段的血液生化影響

3 討 論

3.1 白花鬼針草復方提取物對脂肪和能量代謝的影響

本試驗中,添加白花鬼針草復方提取物飼喂20 d后,高劑量組CHOL濃度顯著高于對照組(P<0.05),中、低劑量組CHOL濃度也均比對照組高(P<0.10),且在正常范圍1.37～3.18 mmol/L[11]內(nèi),與唐武等[12]報道一致。說明白花鬼針草復方提取物可以促進生長豬脂肪代謝。

血糖(GLU)為新陳代謝和生命活動提供能量,正常情況下其主要來源于食物中淀粉水解提供的葡萄糖。本試驗中,飼喂20 d后,高、中、低劑量組GLU濃度均比對照組降低(P>0.05)。由于每組生長豬同時限量飼喂等量日糧,如果允許試驗豬自由采食,添加白花鬼針草復方提取物的試驗組日采食量和日增重可能有所增加。

3.2 白花鬼針草復方提取物對蛋白質(zhì)代謝的影響

血液中尿素氮(UN)濃度降低,說明氨基酸在動物體內(nèi)分解作用減弱,氮沉積率增加,蛋白質(zhì)合成作用增強[13]。飼喂10 d后,高、中、低劑量組的UN濃度均比對照組低;飼喂20 d后,高、中、低劑量組的UN濃度劑量依賴性地降低(P=0.012)。唐武等[12]發(fā)現(xiàn),在仔豬基礎(chǔ)日糧中添加0.05%的丁酸梭菌,35日齡時和65日齡時UN濃度均比對照組低(P>0.05),這一結(jié)果與本試驗結(jié)果一致。試驗組UN濃度比對照組降低,說明白花鬼針草復方提取物可以促進生長豬對蛋白質(zhì)的合成代謝。

ALKP的活性可以反映動物對蛋白質(zhì)和脂類的代謝效率,反映出動物的生長速度和生產(chǎn)性能[14]。添加白花鬼針草提取物飼喂20 d后,高、中、低劑量組ALKP的活性極顯著高于對照組(P<0.01),且在正常范圍180～813 U/L[11]內(nèi),說明白花鬼針草復方提取物能夠促進生長豬蛋白質(zhì)與脂肪代謝。Cappai等[15]報道,隨著年齡的增長,小馬駒血清ALKP的活性逐漸降低,在本試驗中,添加白花鬼針草提取物飼喂10 d與飼喂20 d后,對照組生長豬的ALKP活性分別為330.25和257.00 U/L,這與小馬駒ALKP活性隨年齡增大而降低的變化趨勢一致。然而,飼喂白花鬼針草提取物相同時間后,生長豬ALKP活性隨著添加水平提高而增加,說明白花鬼針草提取物具有延緩生長豬生長性能隨日齡增長而減弱的作用。

3.3 白花鬼針草復方提取物對磷吸收的影響

血清磷(PHOS)含量降低可以導致骨對鈣和PHOS的吸收減少,進而降低日增重和動物生長性能[16]。本試驗中,飼喂20 d后,高、中劑量組血清PHOS濃度比對照組高,說明白花鬼針草復方提取物對PHOS吸收有促進作用。由于ALKP可以催化核酸反應生成磷酸,在本試驗中,其活性隨著白花鬼針草復方提取物的濃度升高而極顯著升高,這可能是導致血清中PHOS濃度升高的原因之一。

3.4 白花鬼針草復方提取物對肝臟功能的影響

肝臟是新陳代謝的重要器官,當肝臟出現(xiàn)病變時,ALT和GGT活性異常升高,而ALB和總蛋白(TP)濃度顯著降低。本試驗中,飼喂20 d后,高、中劑量組ALT活性均比對照組低;高、中劑量組GGT活性均比對照組高,但是在正常范圍0～82 U/L內(nèi)[17]。Verheyen等[18]報道,初產(chǎn)母豬由于自身身體發(fā)育的需要,在產(chǎn)前和產(chǎn)后的各兩周內(nèi)GGT活性普遍高于經(jīng)產(chǎn)母豬,說明GGT在正常范圍內(nèi)升高可能是動物快速生長發(fā)育的反映。

血清TP濃度的高低反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成、消化、吸收能力以及機體的生長性能和免疫力狀況。血清TP濃度越高,組織蛋白合成作用越強,越能促進組織器官的生長[19]。TP降低常見于營養(yǎng)不良和消耗增加,以及肝硬化等蛋白合成障礙。ALB是檢測肝臟疾病的重要指標之一。本試驗中,飼喂20 d后,盡管高、中、低劑量組ALB濃度劑量依懶性地緩慢降低(P>0.05),但是均在正常范圍18～33 g/L內(nèi),而且GLOB顯著增高(P<0.05),造成TP濃度劑量依賴性地緩慢升高(P>0.05)。本試驗的TP與GLOB變化趨勢李燕舞等[20]報道一致。高、中劑量組ALT活性比對照組低,GGT活性在正常范圍內(nèi)升高,ALB和TP濃度都在正常范圍內(nèi),說明白花鬼針草復方提取物對生長豬的肝臟功能沒有損傷。

3.5 白花鬼針草復方提取物對腎臟功能的影響

CREA是肌酸在體內(nèi)代謝的產(chǎn)物,血清中CREA濃度的變化主要取決于肌酸的合成速度和動物肌肉的多少[21]。運動等導致CREA濃度的變化,與腎臟病變引起的CREA濃度變化是不相同的。本試驗中,飼喂20 d后,高、中劑量組的CREA濃度顯著高于對照組(P<0.05),且在正常范圍44～186 μmol/L內(nèi)[22]。王寧等[23]研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)過訓練后的速步馬在賽后25 min內(nèi),血清中CREA濃度均極顯著高于賽前,該研究結(jié)果支持了本試驗高、中劑量組CREA濃度顯著高于對照組的結(jié)果。CREA在正常范圍內(nèi)劑量依賴性地提高,反映出肌肉生成量隨著白花鬼針草復方提取物的添加水平劑量依賴性地增加。且本試驗發(fā)現(xiàn),隨著白花鬼針草復方提取物添加量的增加,血清UN濃度在逐漸降低,說明白花鬼針草復方提取物對生長豬的腎臟功能沒有損傷。

3.6 白花鬼針草復方提取物對胰腺功能的影響

本試驗中,高、中、低劑量組淀粉酶和脂肪酶活性以及鈣濃度與對照組無顯著差異(P>0.05),說明白花鬼針草復方提取物對胰腺功能沒有損傷。

4 結(jié) 論

本試驗結(jié)果表明,白花鬼針草復方提取物可以促進生長豬對蛋白質(zhì)、能量和脂肪的新陳代謝,促進生長豬對磷和鈣礦物質(zhì)的吸收,從而提高生長豬的生長性能。