張建營(yíng) 茅利明 李雪松

流感是由流行性感冒病毒引起的急性呼吸道傳染病，作為獨(dú)立于新冠病毒的呼吸道病毒，其周期性的暴發(fā)或散發(fā)流行，對(duì)人類的健康造成了嚴(yán)重的影響。根據(jù)病毒顆粒蛋白及膜蛋白的基因特性及抗原特性，將流感分為甲、乙、丙、丁四個(gè)亞型[1]。為了解新冠疫情3 年來(lái)本地區(qū)流感病毒隨不同季節(jié)的流行情況以及流行期間的優(yōu)勢(shì)流感病毒基因類型，本次研究對(duì)2019 年11 月至2023 年3 月期間采集的51 233 例流感樣疑似病例進(jìn)行流感病毒的篩查檢測(cè)，同時(shí)定期送流感疑似病例樣本到區(qū)疾病控制中心做流感基因分型檢測(cè)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019 年11 月到2023 年3 月在紹興市中心醫(yī)院發(fā)熱門診及急診、兒科門診就診的患者。根據(jù)《流行性感冒診療方案2020 版》[2]定義，患者體溫在38 ℃以上且伴咳嗽、咽痛等癥狀而就診的流感樣病例均納入檢測(cè)對(duì)象。研究期間共計(jì)對(duì)51 233 例流感樣病例標(biāo)本進(jìn)行甲/乙型流感病毒核酸檢測(cè)，其中男性27 642 例、女性23 591 例。排除：合并惡性腫瘤或免疫缺陷等疾病者；拒絕配合流行病學(xué)調(diào)查者；新冠疫情期間根據(jù)防控要求，所有發(fā)熱患者均要進(jìn)行新冠核酸檢測(cè)，排除陽(yáng)性患者。每一年的四季劃分按照中國(guó)歷法的立春、立夏、立秋、立冬作為四季的開始。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本的采集與處理 檢測(cè)方法以鼻腔及咽喉拭子采樣為主。試子從口腔內(nèi)完全插入咽喉中，以咽后壁、上顎扁桃體等發(fā)紅部位為中心，摩擦10余次，以便采集到黏膜表皮，或者經(jīng)鼻腔旋轉(zhuǎn)采集。采集的標(biāo)本4 h內(nèi)應(yīng)盡快送檢。部分標(biāo)本同步采集并送區(qū)疾控中心做流感基因分型檢測(cè)。

1.2.2 口、鼻咽拭子流感核酸檢測(cè)

1.2.2.1 甲、乙型流感病毒聯(lián)合測(cè)定 采用美國(guó)ABI的ViiTM7 型實(shí)時(shí)定量熒光聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）分析儀，檢測(cè)試劑為流感病毒甲/乙核酸雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑，擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)為：45 ℃10 min；95 ℃5 min；95 ℃15 s、60 ℃45 s共45 個(gè)循環(huán)。

1.2.2.2 甲型、乙型流感病毒分型檢測(cè) 采用美國(guó)ABI 提供的Quant Studio DX 型實(shí)時(shí)定量熒光PCR分析儀，檢測(cè)試劑為甲型H1N1 亞型/季節(jié)性H3 亞型人類流感病毒雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)試劑、Yamagata 型/Victoria 型乙型流感病毒雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)試劑，擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)為：45 ℃10 min；95 ℃5 min；95 ℃15 s、60 ℃45 s 共45 個(gè)循環(huán)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用GraphPad Prism 8.01 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。設(shè)P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2019～2023 年期間，51 233 例流感樣病例標(biāo)本經(jīng)檢測(cè)共檢出18 226 例陽(yáng)性標(biāo)本，陽(yáng)性檢出率為35.57%。不同變量流感病毒陽(yáng)性檢出率比較見(jiàn)表1。

表1 不同變量流感病毒陽(yáng)性檢出率比較/例（%）

由表1可見(jiàn)，不同年齡、標(biāo)本類型和季節(jié)的陽(yáng)性檢出率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別=458.12、859.71、939.23，P均＜0.05），而不同性別間的陽(yáng)性檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.47，P＞0.05）。其中5～15 歲組陽(yáng)性率高于其它年齡段（χ2分別=115.10、215.60、182.00、173.70，P均＜0.05）；與傳統(tǒng)流感高發(fā)季冬季比較，春季和夏季的陽(yáng)性檢出率高于冬季（χ2分別=311.40、174.80，P均＜0.05）。

2.2 2019～2023年不同季度的流感病毒檢出率比較見(jiàn)表2

由表2 可知，2019 年冬～2023 年春，本地區(qū)大規(guī)模流感高峰節(jié)點(diǎn)期分別是2019年冬季、2022年夏季和2023 年春季。其中2019 年冬的流感季，甲型流感病毒和乙型流感病毒混合感染，兩者檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=577.22，P＜0.05）。2019 年冬～2023 年春，甲型流感和乙型流感病毒檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8214.00，P＜0.05）。

2.3 2019～2023年不同季節(jié)甲/乙型流感病毒構(gòu)成比較見(jiàn)表3

由表3 可知，2019 年冬季大流行期間以甲型H3N2 和乙型Victoria 型混合流行為主，2022 年夏季以甲型H3N2流行為主，2023年春季以甲型H1N1混合H3N2 流行為主。甲型H3N2 的陽(yáng)性檢出率和乙型Victoria 型陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=22.23，P＜0.05）。

3 討論

根據(jù)中國(guó)國(guó)家流感中心的歷年監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，由于地區(qū)及氣候差異因素，中國(guó)南方和北方流感流行的時(shí)間和優(yōu)勢(shì)流感株有時(shí)候會(huì)有差異。甲型流感病毒由于其血凝素和神經(jīng)氨酸酶大部分氨基酸均可發(fā)生改變，因此經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)新的流感病毒亞型流行，而人群又普遍缺乏對(duì)其缺乏免疫力，因此易造成區(qū)域大流行。與甲型流感患者比較，乙型流感病毒沒(méi)有亞型的區(qū)分，但是根據(jù)病毒內(nèi)部的核蛋白和基質(zhì)蛋白抗原性不同分為Victoria 和Yamagata 兩個(gè)譜系[3]。乙型流感病毒一般引起小范圍的暴發(fā)流行，但有文獻(xiàn)報(bào)道，近些年乙型流感病毒的陽(yáng)性檢出率呈逐漸上升趨勢(shì)[1]。

本次研究結(jié)果顯示，不同變量的流感陽(yáng)性檢出率分布情況來(lái)看，在男女性別組成上，流感的陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從不同年齡段的流感檢出率來(lái)看，5～15 歲年齡段的陽(yáng)性檢出率明顯高于0～4 歲及其它年齡段（P均＜0.05），這與謝仁芬等[4]的研究結(jié)果一致。這主要是因?yàn)檫@個(gè)年齡階段是學(xué)前及義務(wù)教育時(shí)期，學(xué)校作為人群密集場(chǎng)所，其空間及空氣流通的限制為流感的傳播提供了較好的傳播條件。同時(shí)0～4 歲和5～15 歲這兩個(gè)流感主要感染群體，還受機(jī)體免疫力發(fā)育不成熟，以及流感疫苗的未廣泛接種普及等因素影響。標(biāo)本類型上，口咽拭子由于受到幼年患者的抵觸而未能完全采集到咽后壁等正確部位，以及由于唾液的稀釋，都會(huì)影響陽(yáng)性檢出率。本次研究提示鼻腔拭子的陽(yáng)性檢出率要高于咽喉拭子。從季節(jié)上分析，冬季和春季是流感的高發(fā)季節(jié)，調(diào)查周期內(nèi)該兩季度的陽(yáng)性病例占總發(fā)病率的70.53%。

本次研究通過(guò)對(duì)流感樣病例的監(jiān)測(cè)顯示，2019～2023年紹興地區(qū)新冠疫情時(shí)期的流感活動(dòng)具有明顯季節(jié)性，呈現(xiàn)冬春季高峰，符合全國(guó)南北地區(qū)流感發(fā)病規(guī)律。但在2022年夏天爆發(fā)過(guò)以甲型流感病毒H3N2為主的區(qū)域大流行，這符合南方地區(qū)流感的活動(dòng)規(guī)律[5、6]。2019年冬本地區(qū)爆發(fā)了以甲型流感病毒H3N2為主，伴隨乙型流感病毒（Victoria型）的混合感染，這也是新型冠狀病毒肺炎第一次在全球范圍開始流行爆發(fā)的時(shí)間節(jié)點(diǎn)。2020～2021年受新型冠狀病毒肺炎疫情的影響，以及國(guó)家對(duì)于個(gè)人防護(hù)措施的嚴(yán)格要求和采取減少人群聚集的措施，這些措施在有效地阻斷了新冠病毒傳播的同時(shí)也有效阻止了流感病毒的人群傳播，流感樣病例報(bào)告數(shù)和流感發(fā)病率處于極低水平，這與魏柯雯等[7]的報(bào)道結(jié)果一致。從2019～2023年春季開始，出現(xiàn)以乙型流感病毒（Victoria型）為主要流行趨勢(shì)的散發(fā)流行狀態(tài)，規(guī)模低于2019年冬、2022年夏和2023年春季。2023年開春以來(lái)的流感季，是以甲型流感亞型H1N1 混合H3N2流行為主的大規(guī)模流行，未檢測(cè)到乙型流感兩個(gè)相關(guān)譜系的流行。從基因分型數(shù)據(jù)可知，H3N2在2019年冬到2023年春均有較高的活躍度，提示該亞型可能存在不同程度的變異，以逃脫機(jī)體免疫的監(jiān)視[8]。本次研究調(diào)查也存在一定不足之處：因?yàn)獒t(yī)院及本地疾控條件設(shè)施所限，沒(méi)有能力做后續(xù)流感亞型分型及基因測(cè)序等深入研究工作。

綜上所述，紹興地區(qū)2019～2023年的流感病毒陽(yáng)性檢出類型主要以甲型流感為主，且甲型流感流行周期相對(duì)集中，而乙型流感的流行周期長(zhǎng)且呈散發(fā)流行狀態(tài)。在不同流感季，甲型流感病毒兩個(gè)亞型H1N1與H3N2可以獨(dú)立成為優(yōu)勢(shì)亞型，也可以共同流行，而乙型流感一直是以Victoria型為優(yōu)勢(shì)流行株。因此，對(duì)流感普遍易感，孕婦、嬰幼兒、老年人和慢性病患者等高危易感人群應(yīng)加強(qiáng)接種流感疫苗，做好相關(guān)防護(hù)知識(shí)的宣傳，是有效的預(yù)防流感，減少并發(fā)癥和死亡率的主要措施。此外，新冠疫情時(shí)期實(shí)行的勤帶口罩、勤洗手、非必要不要大規(guī)模聚集等措施對(duì)于疫情結(jié)束后的減少流感的爆發(fā)仍舊是行之有效的方法手段。