王 娜，鮑 娟

（遵義職業(yè)技術(shù)學(xué)院 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)系，貴州 遵義 563000）

黔北麻羊又名麻羊，主要產(chǎn)自貴州省北部，是貴州省較為獨特的地方山羊品種。主產(chǎn)于貴州北部的仁懷、習(xí)水兩（市）縣，鄰近的赤水市、遵義縣以及金沙縣、桐梓縣也有分布。產(chǎn)區(qū)歷史悠久，發(fā)祥較早。近年來，在相關(guān)政策的引領(lǐng)下，黔北麻羊養(yǎng)殖業(yè)取得了較快發(fā)展，逐漸成為貴州農(nóng)村山地生態(tài)養(yǎng)羊業(yè)主導(dǎo)之一，推動黔北麻羊產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。習(xí)水縣加大羊主要疫病的防控力度，為了解黔北麻羊主要疫病的防控效果，對采集的50份羊全血樣品進(jìn)行山羊傳染性胸膜肺炎、山羊痘和羊口瘡等10種主要疫病的病原學(xué)檢測，以期為習(xí)水縣黔北麻羊針對性綜合防控措施的制定提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

50份羊全血采集自習(xí)水縣兩個規(guī)?；B(yǎng)殖場。

1.2 主要儀器和試劑

Ezup柱式病毒DNA抽提試劑盒，購自賽默飛世爾科技公司；DL-2000 Marker，購自天根生化科技（北京）有限公司；2×Taq PCR Master Mix購自碧云天生物技術(shù)有限公司；移液器購自eppendorf公司；基因擴(kuò)增儀購自杭州柏恒科技有限公司。

1.3 血液采集與處理

采用頸靜脈采血方式進(jìn)行采血，對每個樣品進(jìn)行編號，于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 核酸提取

按照柱式DNA提取試劑盒說明書提取。

1.5 病原核酸檢測

以提取的DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測，建立25微升擴(kuò)增體系即2×Taq PCR Master Mix 12.5微升；上、下游引物（10微摩爾/升）各1微升；模板2微升；ddH20 8.5微升。反應(yīng)結(jié)束后取擴(kuò)增產(chǎn)物10微升，在1.2%瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳后于凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

由表1可知，50份全血樣品中，嗜血支原體病檢出2份陽性，檢出率為4%（2/50），呂氏泰勒蟲病檢出10份陽性，檢出率為20%（10/50）。山羊傳染性胸膜肺炎、綿羊肺炎支原體、羊結(jié)核病、多殺性巴氏桿菌病、沙門氏菌病、山羊痘、產(chǎn)氣莢膜梭菌病和羊口瘡病原核酸檢測均為陰性。

3 討論

在大力倡導(dǎo)優(yōu)先發(fā)展農(nóng)業(yè)農(nóng)村與全面推進(jìn)鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略下，貴州省發(fā)展優(yōu)質(zhì)高效畜牧業(yè)，而養(yǎng)羊業(yè)則是重要組成部分。羊傳染性胸膜肺炎、山羊痘和羊口瘡等主要疫病在羊群中傳播迅速，發(fā)病率高，給貴州的養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。因此，通過對黔北麻羊主要疫病進(jìn)行病原學(xué)核酸檢測，有利于降低病原傳播風(fēng)險，有利于黔北麻羊產(chǎn)業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展，對解決種業(yè)發(fā)展“卡脖子”關(guān)鍵技術(shù)難題具有重大意義，為疫病的最終控制和消滅奠定了基礎(chǔ)。

本研究對貴州省習(xí)水縣黔北麻羊規(guī)模場采集的50份全血樣品進(jìn)行主要疫病檢測，結(jié)果顯示，嗜血支原體病檢出率為4%（2/50），呂氏泰勒蟲病檢出率為20%（10/50），其余疾病均為陰性，表明黔北麻羊存在病毒性疾病與寄生蟲感染，且可能出現(xiàn)病毒與寄生蟲混合感染情況。從檢測結(jié)果來看，習(xí)水縣規(guī)模養(yǎng)羊場主要疫病防控工作取得了初步成效，但還存在嗜血支原體病與呂氏泰勒蟲病感染，建議在已有控制工作的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步完善落實黔北麻羊疫病防控措施，加大政策與技術(shù)支持力度，從源頭控制動物疫病。

4 結(jié)論

病原學(xué)檢測結(jié)果表明，習(xí)水縣黔北麻羊存在嗜血支原體和寄生蟲感染，可能出現(xiàn)病毒與寄生蟲混合感染情況，為合理防控羊主要疫病提供了依據(jù)，并為貴州省養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展奠定基礎(chǔ)。