李 楊,紀(jì)榮超,張干生,呂海玲,陳 超,楊偉光

1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇 泰州 225300 2.泰州豐達(dá)農(nóng)牧科技有限公司,江蘇 泰州 225300

0 引言

在飼料中添加適量抗生素具有促進(jìn)生長(zhǎng)、減少疫病發(fā)生以及提高飼料轉(zhuǎn)化率等優(yōu)點(diǎn)[1],但是由于抗生素的不規(guī)范使用導(dǎo)致了細(xì)菌耐藥、環(huán)境污染和食品安全等問(wèn)題[2]。早在2006年歐盟就推行實(shí)施“禁抗”“減抗”行動(dòng)[3],我國(guó)于2020年7月全面推行實(shí)施抗生素使用減量化行動(dòng),在飼料中全面禁止添加任何抗生素[4],尋找抗生素的替代品是當(dāng)前畜禽養(yǎng)殖的必然需求[5]。飼用抗生素替代品主要有植物精油、抗菌肽、微生態(tài)制劑和中草藥類等。微生態(tài)制劑作為飼用抗生素替代品有著很大的發(fā)展?jié)摿?主要是通過(guò)增加腸道內(nèi)益生菌數(shù)量[6]、改善菌群結(jié)構(gòu)[7]、合成抗菌活性物質(zhì)[8]以及競(jìng)爭(zhēng)性占位[9-10]等綜合機(jī)制來(lái)發(fā)揮多重調(diào)節(jié)功能,因此在禁抗和減抗的大潮中應(yīng)用越來(lái)越廣泛。

干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)屬于乳桿菌屬,是革蘭氏陽(yáng)性菌,不產(chǎn)芽孢,無(wú)鞭毛,不運(yùn)動(dòng),兼性異型發(fā)酵乳糖,不液化明膠,主要存在于口腔、腸道內(nèi)含物中。研究表明干酪乳桿菌可通過(guò)影響動(dòng)物腸道結(jié)構(gòu)與功能,提高動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用率和動(dòng)物的生長(zhǎng)性能[11-12];可通過(guò)抑制腸道病原微生物增殖調(diào)節(jié)腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)[13];可調(diào)節(jié)免疫機(jī)能,刺激免疫細(xì)胞激活和增殖等[14]。目前日糧中添加干酪乳桿菌在蛋雞、肉雞、豬和水產(chǎn)等動(dòng)物上的應(yīng)用研究眾多[15-17],但是在水禽上的研究還不多。為了擴(kuò)大干酪乳桿菌在在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用范圍,本研究選用北京鴨為研究對(duì)象,通過(guò)在基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的干酪乳桿菌,觀察其對(duì)北京鴨生長(zhǎng)性能、屠宰性能、免疫功能和腸道菌群的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

北京鴨購(gòu)自江蘇麗佳農(nóng)牧股份有限公司;干酪乳桿菌購(gòu)自山東向日葵生物工程有限公司,產(chǎn)品規(guī)格活性乳酸菌含量 1×1011CFU/g,鋁箔袋包裝,1 kg/袋。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

購(gòu)買1日齡雛鴨240只,完全隨機(jī)分為4組,即對(duì)照組(基礎(chǔ)日糧)、低劑量組(基礎(chǔ)日糧加50 mg/kg干酪乳桿菌)、中劑量組(基礎(chǔ)日糧加100 mg/kg干酪乳桿菌)和高劑量組(基礎(chǔ)日糧加200 mg/kg干酪乳桿菌),每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只。試驗(yàn)周期為42 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)前5天,對(duì)鴨舍徹底消毒滅菌。試驗(yàn)期間北京鴨實(shí)行網(wǎng)上平養(yǎng),做到自由采食和飲水,飼養(yǎng)環(huán)境條件符合規(guī)范,做好日常免疫和定期消毒。

1.4 生長(zhǎng)性能測(cè)定

在試驗(yàn)開(kāi)始時(shí),稱量試驗(yàn)鴨初始體質(zhì)量。整個(gè)生長(zhǎng)周期中,每周都稱量飼料的重量,用于計(jì)算日平均采食量,并于42日齡清晨稱重北京鴨空腹體質(zhì)量,全部提前12 h進(jìn)食,以重復(fù)為單位進(jìn)行體質(zhì)量測(cè)量,計(jì)算平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)、平均日增重(average daily gain,ADG)和料重比(feed/gain,F/G)。

1.5 屠宰性能測(cè)定

42日齡,禁食12 h,以重復(fù)為單位進(jìn)行稱重計(jì)算平均值,選取2只體質(zhì)量與平均體質(zhì)量相近的作屠宰測(cè)定,稱量活重、屠宰重、半凈膛重、全凈膛重,剝離胸肌和腿肌并稱重。參照家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量統(tǒng)計(jì)方法,計(jì)算屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率。

1.6 免疫功能測(cè)定

屠宰前翅靜脈采血,2 500～3 000 r/min離心5～8 min分離血清,血清免疫指標(biāo)主要測(cè)定IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ和TNF-,使用ELISA檢測(cè)試劑盒,按照說(shuō)明書(shū)操作步驟測(cè)定,檢測(cè)試劑盒購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司。屠宰后摘取脾臟、胸腺以及法氏囊,去除水分、血液和脂肪后,用電子天平以克為單位進(jìn)行分別稱重,計(jì)算免疫器官指數(shù),免疫器官指數(shù)(g/kg)=重量(g)/活重(kg)。

1.7 腸道菌群的測(cè)定

各重復(fù)選擇1只接近該組平均體質(zhì)量的北京鴨,放血致死,使用滅菌剪刀剪取2 cm盲腸,置于無(wú)菌離心管中,參考孟翠紅 等[18]的方法,在EMB、MRS、SS培養(yǎng)基分別培養(yǎng)大腸桿菌、乳酸桿菌和沙門氏菌并計(jì)數(shù),以lgCFU/g計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨生長(zhǎng)性能的影響

由表1可知,與基礎(chǔ)日糧對(duì)照組相比,日糧中添加100 mg/kg干酪乳桿菌和200 mg/kg干酪乳桿菌能顯著提高北京鴨的ADG和ADFI(P<0.05),3種劑量的干酪乳桿菌均能顯著降低北京鴨的F/G(P<0.05)。

表1 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨生長(zhǎng)性能的影響

2.2 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨屠宰性能的影響

由表2可知,與對(duì)照組相比,日糧中添加干酪乳桿菌對(duì)北京鴨屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率等指標(biāo)無(wú)顯著性影響(P>0.05)。

表2 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨屠宰性能的影響 單位:%

2.3 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨免疫功能的影響

由表3可知,與對(duì)照組相比,3種劑量的干酪乳桿菌均能顯著提高法氏囊指數(shù)(P<0.05),中劑量和高劑量干酪乳桿菌能顯著提高脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)(P<0.05)。由表4可知,與對(duì)照組相比,3種劑量的干酪乳桿菌均能顯著提高IgG、IgA的抗體水平以及IL-2的水平(P<0.05),IgM的水平有提高的趨勢(shì),但是差異不顯著(P>0.05),IFN-γ和TNF-α的含量顯著下降(P<0.05)。

表3 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨免疫器官指數(shù)的影響 單位:g/kg

表4 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨血清免疫指標(biāo)的影響

2.4 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨腸道菌群的影響

由表5可知,對(duì)于大腸桿菌來(lái)說(shuō),低劑量組、中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比盲腸中的數(shù)量顯著下降(P<0.05),且3個(gè)劑量組之間的數(shù)量也顯著下降(P<0.05);對(duì)于沙門氏菌,低劑量組、中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比盲腸中的數(shù)量顯著下降(P<0.05),但3個(gè)劑量組之間的差異不顯著(P>0.05);對(duì)于乳酸桿菌,低劑量組、中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比盲腸中的數(shù)量顯著上升(P<0.05)。

表5 干酪乳桿菌對(duì)北京鴨腸道菌群的影響 單位:lgCFU/g

3 討論

迄今關(guān)于干酪乳桿菌對(duì)北京鴨生長(zhǎng)性能影響的研究鮮有報(bào)道。本研究結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼料中添加100 mg/kg和200 mg/kg干酪乳桿菌ADG分別提高7.94%和4.65%(P<0.05),F/G最高可下降8.46%(P<0.05)。李陽(yáng) 等[19]研究結(jié)果表明單獨(dú)添加干酪乳桿菌或聯(lián)合添加干酪乳桿菌與殼寡糖分別使AA肉雞ADG提高7.90%和7.05%。林晗[17]研究表明單獨(dú)添加干酪乳桿菌(100、200、400 mg/kg)可以提高白羽肉雞ADG,降低F/G。本研究的結(jié)果與上述研究結(jié)果一致。王四新 等[20]研究報(bào)道干酪乳桿菌可以通過(guò)影響動(dòng)物腸道結(jié)構(gòu)與功能,從而提高動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用率,提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。血清免疫球蛋白和免疫相關(guān)細(xì)胞因子均可以反映機(jī)體免疫能力。與對(duì)照組相比,3種劑量的干酪乳桿菌可顯著提高法氏囊、脾臟和胸腺等免疫器官指數(shù)(P<0.05);低劑量組、中劑量組和高劑量組鴨血清IgG含量分別提高了20.94%、30.36%和28.27%,血清中IgA含量分別提高了20.53%、23.21%和11.61%,IgM的水平也有提高的趨勢(shì)。細(xì)胞因子中IL-2水平升高以及IFN-γ和TNF-α的含量顯著下降(P<0.05),以上結(jié)果提示干酪乳桿菌可提高北京鴨的免疫功能主要與體液免疫相關(guān)。盲腸腸道菌群測(cè)定發(fā)現(xiàn),可顯著降低盲腸中的大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量(P<0.05),顯著提高乳酸桿菌的數(shù)量(P<0.05),這與曾獻(xiàn)春 等[21]人的報(bào)道一致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明:日糧中添加干酪乳桿菌能提高北京鴨的生長(zhǎng)性能和免疫功能,改善腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)。