郭小江, 黃 璐, 陳元翠, 施云剛, 歐德淵*

(1. 貴州省草地技術試驗推廣站,貴州 貴陽 550025;2. 江安縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,四川 江安 644200;3. 貴州大學動物科學學院,貴州 貴陽 550025)

隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的快速發(fā)展,重金屬污染已成為全世界日益關注的問題。環(huán)境中的重金屬可通過食物鏈進入人體,給人類健康造成嚴重危害[1]。中藥在防治多種疾病中發(fā)揮了重要作用,本研究采用配制的中藥組方對雞氯化汞中毒模型的紅細胞、白細胞、血小板等血液指標進行分析,探討中藥防治雞氯化汞中毒的可能性。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

100只平均體重(85±5)g、20日齡健康脫溫鐵腳麻公雛雞,購于貴陽市花溪區(qū)某禽苗批發(fā)公司。

1.1.2 試驗藥物

(1)中藥組方:黃芪、甘草、茯苓、白茅根、白術、山藥、蒲公英,購自貴陽市花溪區(qū)中醫(yī)院。配制方法:將中藥飲片用粉碎機進行粉碎,過100目篩,按照“階梯稀釋法”1份藥加同等量飼料混勻,然后再以混合物同等量飼料混勻,如此反復,直至完全混勻,以6 g/(只·d)劑量均勻混于飼料中備用。(2)氯化汞(HgCl2):購自銅仁銀湖化工有限公司化學試劑廠(批號:121202)

1.2 試驗設計

從100只脫溫雞苗中選擇健康、體重與個體差異不顯著(P>0.05)雛雞72只,隨機平均分為3組(每組24只):空白組(僅飼喂基礎日糧)、陽性組(飼喂基礎日糧+氯化汞36 g/kg,作為中毒模型)、中藥組(飼喂日基礎日糧+氯化汞36 g/kg+中藥)。各組自由飲水,分籠常規(guī)飼養(yǎng),飼養(yǎng)管理方法相同,試驗期共60 d。

1.3 血樣采集與檢測

分別于試驗第20、40、60 d(前晚禁食12 h)每組隨機選取8只雞稱重,采用頸動脈采血法采集血液1 mL,裝入有抗凝劑的采血管,并做好記錄。采血后6 h內(nèi)用全自動血細胞分析儀(型號:PE-6800VET,深圳市普康電子有限公司)檢測各組雞血樣中紅細胞總數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞平均體積(MCV)、紅細胞壓積(HCT)、血小板總數(shù)(PLT)、白細胞總數(shù)(WBC)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

采用Excel軟件對各試驗數(shù)據(jù)進行初步統(tǒng)計,用SPSS 20.0軟件(IBM SPSS Statistics 20.0)one-wayANOVA的F檢驗進行差異顯著性分析,結果以“平均數(shù)±標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 紅細胞指標

檢測結果見表1。(1)紅細胞總數(shù):陽性組第20 d紅細胞總數(shù)顯著低于空白組(P<0.05),第40、60 d均極顯著低于空白組(P<0.01),且陽性組第60 d 顯著低于第20 d(P<0.05);中藥組第40 d顯著高于陽性組(P<0.05),第60 d極顯著高于陽性組(P<0.01)。(2)血紅蛋白濃度:與空白組比較,陽性組第20 d顯著降低(P<0.05),第40、60 d均極顯著降低(P<0.01),且陽性組第40、60 d均極顯著低于第20 d(P<0.01);中藥組第40 d顯著高于陽性組(P<0.05),第60 d極顯著高于陽性組(P<0.01)。(3)平均紅細胞血紅蛋白含量:陽性組第20 d顯著低于空白組(P<0.05),第40、60 d均極顯著低于空白組(P<0.01);中藥組第40 d顯著高于陽性組(P<0.05),略低于空白組(P>0.05),第60 d極顯著高于陽性組(P<0.01)。(4)紅細胞平均體積:陽性組第20、40 d顯著低于空白組(P<0.05),第60 d極顯著低于空白組(P<0.01),其中陽性組第40、60 d均極顯著低于第20 d(P<0.01);中藥組第40 d顯著高于陽性組(P<0.05),第60 d極顯著高于陽性組(P<0.05),且第40、60 d均極顯著高于第20 d(P<0.01)。 (5)紅細胞壓積:與空白組比較,陽性組第20 d 顯著降低(P<0.05),第40、60 d極顯著降低(P<0.01),且陽性組第60 d顯著低于第20 d(P<0.05);中藥組第40 d顯著高于陽性組(P<0.05),第60 d極顯著高于陽性組(P<0.01),且中藥組第60 d顯著高于第20 d(P<0.05)。(6)血小板總數(shù):陽性組第20 d顯著低于空白組(P<0.05),第40、60 d均極顯著低于空白組(P<0.01);中藥組第40、60 d均略低于空白組(P>0.05),第40 d顯著高于陽性組(P<0.05),第60 d極顯著高于陽性組(P<0.01)。

2.2 白細胞總數(shù)

由表2可見:第20、40、60 d,陽性組白細胞總數(shù)顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于空白組;第40、60 d,陽性組顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于第20 d;第40、60 d,中藥組顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)低于陽性組。

表2 雞血液白細胞總數(shù)檢測結果 ×109/L

3 討論

血液是動物機體循環(huán)系統(tǒng)的主要組成部分,對于維持機體的正常生理功能起著至關重要的作用。血液由血細胞和血漿組成,其中血細胞可分為紅細胞、白細胞、血小板3大類,這些細胞數(shù)量和形態(tài)的變化可以直接反映血液的氣體運輸、免疫、凝血和造血功能[2],是重要的血液學檢測指標。白細胞總數(shù)升高常表明有急性感染和炎癥發(fā)生,而紅細胞總數(shù)和血小板總數(shù)降低則提示貧血[3]。汞及其化合物是重要的環(huán)境有毒污染物,攝入不同形態(tài)的汞均會造成機體的損害,其中以無機汞的中毒更為顯著,汞中毒會引起小細胞低色素性貧血[2,4]。有研究表明,飼喂茯苓、黃芪等組成的復方中藥添加劑可顯著升高動物紅細胞、血小板的數(shù)量及血紅蛋白含量,降低白細胞數(shù)量,進而改善造血功能[3～6];當歸多糖、黃芪多糖聯(lián)合用藥可促進小鼠造血干細胞增殖[7];黃芪能顯著提高雞的各項免疫球蛋白含量、免疫器官指數(shù),促進免疫器官生長發(fā)育,提高機體抵抗力[8]。本試驗結果表明,陽性組紅細胞總數(shù)、血紅蛋白濃度、血紅蛋白含量、平均紅細胞血紅蛋白濃度、紅細胞壓積等均顯著降低,表明氯化汞中毒可導致雞發(fā)生低色素性貧血,經(jīng)過飼喂配制的中藥組方預防后,這些指標均明顯升高,并逐漸恢復至正常水平。氯化汞中毒雞的血小板總數(shù)顯著或極顯著低于正常雞,造成凝血功能降低,經(jīng)飼喂中藥組方后,血小板總數(shù)下降的情況得到顯著緩解,表明該中藥組方提高了氯化汞中毒雞的凝血功能。此外,氯化汞中毒雞的白細胞總數(shù)顯著或極顯著高于正常雞,造成炎癥反應,經(jīng)過飼喂中藥組方后,白細胞總數(shù)逐漸恢復至正常水平,可能是由于本中藥組方中含有緩解炎癥的成分(茯苓、蒲公英、黃芪、甘草)。

4 結論

黃芪、甘草、茯苓、白茅根、白術、山藥、蒲公英配制的中藥組方可緩解氯化汞中毒雞貧血,增強凝血功能,降低炎癥反應,達到防治氯化汞中毒的作用。