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        Ki-67、P16蛋白在子宮頸癌組織中的表達(dá)及其意義分析

        2023-12-31 00:00:00吳穎史晶晶涂劍宏
        中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新 2023年26期

        【摘要】 目的:探究子宮頸癌組織中增殖細(xì)胞核抗原-67(Ki-67)、多重腫瘤抑制基因-16(P16)蛋白表達(dá)及意義。方法:回顧性分析2018年7月—2022年8月于南昌市第三醫(yī)院行子宮頸檢查的70例患者的臨床資料,所有患者均經(jīng)病理檢查明確診斷為子宮頸癌及癌前病變。其中子宮頸癌39例入子宮頸癌組,癌前病變31例[低級別子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)13例和高級別CIN 18例]入癌前病變組,均行免疫組化Ki-67、P16蛋白檢測。分析Ki-67、P16蛋白在子宮頸癌組織中的表達(dá)情況,將病理結(jié)果作為診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”,分析子宮頸癌中Ki-67、P16蛋白的診斷價值。結(jié)果:子宮頸癌組Ki-67、P16蛋白陽性表達(dá)率均高于低級別CIN、高級別CIN(Plt;0.05);高級別CIN Ki-67、P16蛋白陽性表達(dá)率均高于低級別CIN(Plt;0.05)。Ki-67、P16蛋白診斷子宮頸癌的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05)。結(jié)論:Ki-67、P16蛋白在子宮頸癌患者中陽性表達(dá)率較高,兩者診斷子宮頸癌的價值相當(dāng)。

        【關(guān)鍵詞】 子宮頸癌 子宮頸癌前病變 增殖細(xì)胞核抗原-67 多重腫瘤抑制基因-16

        Analysis of the Expression and Significance of Ki-67 and P16 Protein in Cervical Cancer/WU Ying, SHI Jingjing, TU Jianhong. //Medical Innovation of China, 2023, 20(26): -163

        [Abstract] Objective: To investigate the expression and significance of proliferating cell nuclear antigen-67 (Ki-67) and multiple tumor suppressor gene-16 (P16) protein in cervical cancer. Method: The clinical data of 70 patients who underwent cervical examination in Nanchang Third Hospital from July 2018 to August 2022 were analyzed retrospectively. All patients were diagnosed by pathological examination of cervical cancer and precancerous lesions. Among them, 39 patients with cervical cancer were enrolled in the cervical cancer group, and 31 patients [low-grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN) with 13 cases and high-grade CIN with 18 cases] with precancerous lesions were enrolled in the precancerous lesions group. Ki-67 and P16 protein were detected by immunohistochemistry. The expression of Ki-67 and P16 protein in cervical cancer and precancerous lesions was analyzed, and the pathological results were used as the \"gold standard\" to analyze the diagnostic value of Ki-67 and P16 protein in cervical cancer. Result: The positive expression rates of Ki-67 and P16 protein in cervical cancer group were higher than those in low-grade CIN and high-grade CIN (Plt;0.05); the positive expression rates of CIN Ki-67 and P16 protein in high-grade were higher than those of low-grade CIN (Plt;0.05). There were no significant differences in sensitivity, specificity, accuracy, positive predictive value and negative predictive value between Ki-67 and P16 protein in the diagnosis of cervical cancer (Pgt;0.05). Conclusion: Ki-67 and P16 protein have high positive expression rate in patients with cervical cancer, and they have similar value in the diagnosis of cervical cancer.

        [Key words] Cervical cancer Cervical precancerous lesions Ki-67 P16

        First-author's address: Nanchang Third Hospital, Nanchang 330000, China

        doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2023.26.038

        近年來,子宮頸癌發(fā)病率逐年上升,且呈年輕化,已對女性身體健康等造成嚴(yán)重影響[1]。早期子宮頸癌無典型癥狀表現(xiàn),對其行形態(tài)學(xué)診斷無法準(zhǔn)確預(yù)測子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)的進(jìn)展情況,隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,生物學(xué)標(biāo)記物的測定在篩查子宮頸病變中成為研究的重點(diǎn)[2-3]。增殖細(xì)胞核抗原-67(Ki-67)可用于識別生長期的腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞,用于反映腫瘤細(xì)胞增殖指數(shù),其水平越高,提示患者的腫瘤惡性程度越高,腫瘤細(xì)胞增殖速度越快。多重腫瘤抑制基因-16(P16)作為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑,能夠直接對細(xì)胞周期進(jìn)行調(diào)控,在子宮頸癌組織中呈現(xiàn)過表達(dá)的現(xiàn)象[4-5]。鑒于此,本研究分析Ki-67、P16蛋白在子宮頸癌中的表達(dá)及意義?,F(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        回顧性分析2018年7月—2022年8月于南昌市第三醫(yī)院行子宮頸檢查的70例患者的臨床資料,納入標(biāo)準(zhǔn):均經(jīng)組織病理學(xué)檢查明確診斷為子宮頸癌及癌前病變;病歷資料齊全。排除標(biāo)準(zhǔn):存在其他免疫缺陷性疾病;其他系統(tǒng)惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移;存在子宮頸手術(shù)史;感染或傳染性疾病。子宮頸癌39例入子宮頸癌組,癌前病變31例[低級別CIN(CIN 1級)13例和高級別CIN(CIN 2、3級)18例]入癌前病變組。本研究獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

        1.2 方法

        對病理標(biāo)本行石蠟切片及免疫組化染色處理。首先使用石蠟切片機(jī)對蠟塊進(jìn)行切片,再用攤烤片機(jī)進(jìn)行裱片、烤片,將得到的白片依次置入二甲苯、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇中脫蠟至水。蒸餾水沖洗后,在室溫下將白片置入阻斷內(nèi)源性過氧化物酶中10 min,后用PBS緩沖液沖洗,再用EDTA修復(fù)液高壓修復(fù)后,用PBS緩沖液沖洗。滴加一抗后,將白片至于4 ℃環(huán)境中12 h,后用PBS緩沖液沖洗,再滴加二抗,置于37 ℃恒溫箱20 min,后用PBS緩沖液沖洗,再滴加DAB顯色劑進(jìn)行染色5 min,用流動水沖洗5 min,再用蘇木素復(fù)染、分化、EDTA反藍(lán),最后流動水沖洗、風(fēng)干、封片。將制好的玻片置于顯微鏡下進(jìn)行觀察。結(jié)果判斷:應(yīng)用雙盲法判斷染色結(jié)果,均由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)生判斷。

        1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)

        (1)分析Ki-67、P16蛋白在子宮頸癌及癌前病變組織中的表達(dá)情況。Ki-67表達(dá)陽性判斷標(biāo)準(zhǔn):陰性為視野內(nèi)無陽性細(xì)胞;低表達(dá)為視野內(nèi)陽性細(xì)胞數(shù)量未達(dá)1/3;中等表達(dá)為視野內(nèi)陽性細(xì)胞數(shù)量為1/3~2/3,高表達(dá)為視野內(nèi)陽性細(xì)胞數(shù)量超過2/3;陽性表達(dá)是將中等表達(dá)及以上的共同列入。P16表達(dá)陽性判斷標(biāo)準(zhǔn):陰性為視野內(nèi)無陽性細(xì)胞;弱陽性為視野內(nèi)陽性細(xì)胞數(shù)量未達(dá)25%,反之,為強(qiáng)陽性。(2)以“金標(biāo)準(zhǔn)”為本次病理檢查結(jié)果,分析Ki-67、P16在子宮頸癌中的診斷價值。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

        數(shù)據(jù)處理應(yīng)用SPSS 22.0軟件,以(x±s)表示計量資料,組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn),用率(%)表示計數(shù)資料,應(yīng)用字2檢驗(yàn),以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組一般資料比較

        子宮頸癌組年齡36~69歲,平均(50.86±2.84)歲;體重指數(shù)19.76~24.38 kg/m2,平均(22.07±1.34)kg/m2;病理類型:17例腺癌,22例鱗癌;TNM分期:18例Ⅰ期,10例Ⅱ期,11例Ⅲ期。癌前病變組年齡35~68歲,平均(51.02±2.13)歲;體重指數(shù)19.96~24.43 kg/m2,平均(22.10±1.41)kg/m2;13例為CIN 1級,14例為CIN 2級,4例為CIN 3級。兩組年齡、體重指數(shù)比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05)。

        2.2 子宮頸癌和癌前病變組織中Ki-67、P16蛋白表達(dá)情況比較

        三組Ki-67、P16蛋白陽性表達(dá)率比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.05);子宮頸癌組Ki-67、P16蛋白陽性表達(dá)率均高于低級別CIN、高級別CIN(Plt;0.05);高級別CIN Ki-67、P16蛋白陽性表達(dá)率均高于低級別CIN(Plt;0.05)。見表1。

        2.3 診斷價值

        Ki-67、P16蛋白診斷子宮頸癌的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05),見表2、3。

        3 討論

        作為婦科常見的惡性腫瘤,子宮頸癌中腺癌及鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生率較高,臨床認(rèn)為子宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展和患者多產(chǎn)、性生活過早、多個性伴侶、人乳頭瘤病毒(HPV)感染等因素存在密切聯(lián)系[6-7]。但子宮頸癌的發(fā)病過程持續(xù)時間較久,子宮頸癌演變過程如下:長期慢性子宮頸炎→CIN→子宮頸原位癌→浸潤癌,因其發(fā)病演變過程較長,故早期準(zhǔn)確篩查子宮頸癌前病變對預(yù)防及控制子宮頸癌的發(fā)生意義重大[8-9]。

        Ki-67作為細(xì)胞增殖的一種核蛋白,在正常情況下可于各階段內(nèi)的細(xì)胞周期表達(dá),但在異常有絲分裂中呈現(xiàn)高表達(dá),其與機(jī)體細(xì)胞的增殖能力間相關(guān)性較高,有助于更好地反映正常狀態(tài)下細(xì)胞的增殖活性。另有絲分裂在腫瘤細(xì)胞的判斷中具有較強(qiáng)的輔助作用,已將其作為判斷子宮頸上皮鱗狀異常增殖及分化的重要性標(biāo)志物[10-11]。此外,Ki-67蛋白還在CIN病變及良性增生中存在一定表達(dá),同時亦在子宮頸鱗狀上皮基底層進(jìn)行有效表達(dá)[12-13]。P16對抑制多種腫瘤的轉(zhuǎn)移意義重大,被臨床稱之為多重腫瘤的抑制基因,能較好地參與細(xì)胞周期蛋白D1產(chǎn)生特異性結(jié)合,從而達(dá)到抑制蛋白活性的目的,共同參與Ki-67的細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)[14-15]。P16在子宮頸癌前病變診斷中若為強(qiáng)陽性,則提示患者的子宮頸存在較高可能性的內(nèi)瘤樣改變,或發(fā)生子宮頸癌的概率較高。此外,P16在子宮頸上皮細(xì)胞中呈高表達(dá),則說明P16在子宮頸病變早期診斷中具有較高的臨床應(yīng)用價值[16-17]。本研究結(jié)果顯示,子宮頸癌組織中Ki-67、P16蛋白陽性率均高于低級別CIN、高級別CIN(Plt;0.05),表明通過觀察Ki-67、P16蛋白陽性表達(dá)情況有助于判斷患者病情嚴(yán)重程度,分析其原因可知Ki-67蛋白表達(dá)是細(xì)胞增殖的活性體現(xiàn),其陽性表達(dá)情況與子宮頸病變呈正相關(guān),有助于判斷細(xì)胞惡性程度及患者預(yù)后,同時對預(yù)測CIN進(jìn)展意義重大。當(dāng)患者發(fā)生HPV感染后,HPV病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行整合時,E1及E2蛋白出現(xiàn)明顯缺失,且二者缺失可導(dǎo)致癌蛋白的水平升高,使得P16蛋白出現(xiàn)過表達(dá)的現(xiàn)象[18-20]。本研究中Ki-67、P16蛋白的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05),表明二者在子宮頸癌診斷中應(yīng)用價值相當(dāng)。

        綜上所述,Ki-67、P16蛋白在子宮頸癌患者中陽性表達(dá)率較高,兩者診斷子宮頸癌的價值相當(dāng),但本研究納入研究樣本量較少,后續(xù)研究中需進(jìn)一步擴(kuò)大研究樣本量,以待進(jìn)一步明確診斷價值。

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