摘要：為探明碧護(hù)（0.136%赤·吲乙·蕓苔可濕性粉劑）對草坪草種子和幼苗低溫脅迫的緩解作用，以高羊茅（Festuca arundinacea Schreb.）和多年生黑麥草（Lolium perenne L.）為供試材料，研究兩種草坪草種子在碧護(hù)2 500～15 000稀釋倍液浸種24 h后，置于常溫（25℃/25℃）和低溫（15℃/10℃）下的種子萌發(fā)情況，觀察兩種草坪草幼苗期葉面噴施碧護(hù)2 500～15 000稀釋倍液后，置于常溫（25℃）和連續(xù)10 d戶外低溫（11℃/-5℃）下的生長情況。結(jié)果表明：兩種草坪草種子在碧護(hù)7 500～10 000倍液浸種后均能顯著提高其在常溫和低溫脅迫下的發(fā)芽勢、發(fā)芽率、芽長及根長。低溫脅迫前葉面噴施碧護(hù)5 000～7 500倍液后，兩種草坪草的根長、根重及葉綠素含量、脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性顯著提高，丙二醛含量和相對電導(dǎo)率顯著降低。綜上所述，碧護(hù)7 500～10 000倍液浸種后可提高常溫和低溫條件下草坪草種子萌發(fā)能力，葉面噴施碧護(hù)5 000～7 500倍可緩解低溫脅迫對幼苗的傷害，提高其抗寒能力。

關(guān)鍵詞：碧護(hù)；低溫脅迫；高羊茅；多年生黑麥草；種子萌發(fā)；生理指標(biāo)

中圖分類號：S945.34文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1007-0435（2023）03-0804-09

Effects of VitaCat on Alleviating Low Temperature Stress to Turfgrass

Species at Germination and Seedling Growth Stage

LI Zhen1， DAI Ling-ling1， DENG Hai-ling1， GUO Hai-bin2， QIANG Sheng1， SONG Xiao-ling1*

（1.Weed Research Laboratory， college of Life Sciences， Nanjing Agricultural University， Nanjing， Jiangsu Province 210095， China;

2. Nanjing Shengjia Tian Biotechnology Co.， Ltd， Nanjing， Jiangsu Province 210095， China）

Abstract：In order to study the alleviating effect of VitaCat （GA·IAA·BR 0.136%WP） on seed germination and seedling growth of turfgrass under low temperature stress，two turfgrass species，F(xiàn)estuca arundinacea and Lolium perenne were used as the experiment material. The seeds were soaked into 2 500～15 000 times VitaCat for 24 hours at room temperature （25℃/25℃），then their germination were observed under room temperature （25℃/25℃） and low temperature （15℃/10℃）. The seedling were foliar-applied with 2 500～15 000 times VitaCat，then their growth performance was observed under room temperature （25℃） and 10-day outdoor low temperature stress. The results showed that seed germination potential，seed germination rate and sprout length and root length of two turfgrass species under both low and room temperatures were significantly improved after the soaking-up in 7 500～10 000 times dilution of VitaCat. The root length，root weight，as well as chlorophyll content，proline content and superoxide dismutase activity of those turfgrasses were significantly increased，and malondialdehyde content and relative electrical conductivity were significantly decreased under low temperature stress by spraying 5 000～7 500 times VitaCat. From the above results，it can be concluded the seed soaking-up with 7 500～10 000 times dilution of VitaCat improved the seed germination and growth of two turfgrasses. The foliar spraying of 5 000～7 500 times dilution of VitaCat alleviated the injury of seedlings by low temperature stress and enhanced the cold resistance of seedlings.

Key words：VitaCat；Low temperature stress；Festuca arundinacea ; Lolium perenne；Seed germination；Physiological indicators

收稿日期：2022-08-22；修回日期：2022-10-24

基金項(xiàng)目：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)雜草研究室與南京盛甲田生物科技有限公司合作項(xiàng)目（RD01-2023）資助

作者簡介：李震（1997-），男，漢族，湖北孝感人，碩士研究生，主要從事除草劑助劑和植調(diào)劑應(yīng)用研究，E-mail：13669028941@163.com；*通信作者Author for correspondence，E-mail：sxl@njau.edu.cn草坪綠地是衡量現(xiàn)代化城市的標(biāo)準(zhǔn)之一，是人類生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分［1］。草坪能起到美化環(huán)境、凈化空氣、防止水土流失、調(diào)節(jié)大氣溫度與濕度的作用［2］。草坪建植分為種子繁殖和營養(yǎng)體繁殖兩種方式，種子繁殖成本較低，形成的草坪整齊均一，美觀度高［3］。草坪草種子萌發(fā)和生長受多種因素影響，溫度是其中重要的因素之一，其不但影響種子發(fā)芽率及發(fā)芽勢［4-5］，還影響草坪草的蒸騰、水勢、養(yǎng)分吸收和新陳代謝及酶促反應(yīng)［6-8］。低溫脅迫下植物會受到冷害或凍害，嚴(yán)重時導(dǎo)致植物受害死亡。冷害是指0℃以上低溫對植物的傷害，植物膜脂流動性降低、透性增加，質(zhì)膜結(jié)合酶的活力紊亂，植物主動吸收和運(yùn)輸能力下降，導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)向胞外滲漏，引起植物代謝失調(diào)［9-10］。凍害是指0℃以下的低溫傷害，植物細(xì)胞間隙產(chǎn)生冰晶，引起機(jī)械損傷，細(xì)胞膜的膜脂雙分子層結(jié)構(gòu)受到破壞，從而引起植物窒息和生理性干旱［11-12］。

0.136%赤·吲乙·蕓苔可濕性粉劑（GA·IAA·BR WP，商品名碧護(hù)）是含有8種天然植物內(nèi)源激素和近20種氨基酸類及抗逆誘導(dǎo)劑的天然生物產(chǎn)品［13］。具有活化植物細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞分裂與新陳代謝，打破種子休眠的作用。并且能夠解除除草劑對作物產(chǎn)生的藥害，誘導(dǎo)作物提高抗逆性、增加作物產(chǎn)量、改善果實(shí)品質(zhì)［14］。作物施用碧護(hù)后，會提高植物呼吸速率，激活作物體內(nèi)的甲殼素酶和蛋白酶，極大地提高氨基酸和甲殼素的含量，增加細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸的含量，維持其在低溫脅迫下的正常生長。沙紅桃（Amygdalus persica‘Shahongtao’）樹萌芽后在晚霜來臨前，葉面噴霧碧護(hù)20 000倍稀釋液，可有效預(yù)防桃樹的晚霜凍害；遭受低溫凍害后，在葉面噴施碧護(hù)8 000倍稀釋液可快速恢復(fù)桃樹新梢生長［15-16］。大櫻桃（Prunus avium （L.） Moench）在受到持續(xù)低溫凍害后，噴施碧護(hù)10 000倍液后能使其花器官在一定程度上得到恢復(fù)，提高大櫻桃花器的抗寒力［17］。目前，在國內(nèi)外碧護(hù)廣泛應(yīng)用于大田、經(jīng)濟(jì)作物、果樹、蔬菜、海藻、高爾夫球場、園林花卉等，在草坪上應(yīng)用甚少。本文以高羊茅（Festuca arundinacea Schreb.）和多年生黑麥草（Lolium perenne L.）為研究對象，測定不同稀釋倍液碧護(hù)緩解種子萌發(fā)和幼苗生長的低溫脅迫作用，旨在為碧護(hù)運(yùn)用于草坪草抗低溫脅迫提供試驗(yàn)依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試雜草：高羊茅（Festuca arundinacea Schreb.）、多年生黑麥草（Lolium perenne L.），由南京盛甲田生物科技有限公司提供。

供試藥劑：0.136%赤·吲乙·蕓苔可濕性粉劑（碧護(hù)），由北京成禾佳信農(nóng)資貿(mào)易有限公司提供。

供試儀器：便捷式電導(dǎo)率儀（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）、光照培養(yǎng)箱（E-36HO，PERCIVAL公司，美國）、SB-2000水浴鍋（上海愛明儀器有限公司）、研磨儀（GT300，北京格瑞德曼儀器設(shè)備有限公司）、Precisa Ls 220A電子天平（精度0.0001 g）（普利賽斯國際貿(mào)易（上海）有限公司）、離心機(jī)（5425R，EPPENDORF公司，德國）、酶標(biāo)儀（SpectraMax ID5，美谷分子儀器（上海）有限公司）、分光光度計（SHIMADZU UV-1800，島津?qū)嶒?yàn)器材有限公司，日本）。

試驗(yàn)地點(diǎn)及時間：碧護(hù)緩解種子萌發(fā)低溫脅迫試驗(yàn)于2021年12月1日在南京農(nóng)業(yè)大學(xué)雜草研究室進(jìn)行。碧護(hù)緩解苗期低溫脅迫試驗(yàn)于2021年12月27日在南京農(nóng)業(yè)大學(xué)牌樓基地進(jìn)行，常溫（25℃）對照試驗(yàn)在南京農(nóng)業(yè)大學(xué)雜草研究室溫室內(nèi)進(jìn)行。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1碧護(hù)緩解種子萌發(fā)低溫脅迫試驗(yàn)選取飽滿的高羊茅和多年生黑麥草種子，1%次氯酸鈉溶液消毒30 min后，用去離子水洗凈，吸干水分備用。碧護(hù)設(shè)置6個濃度梯度分別為2 500倍、5 000倍、7 500倍、10 000倍、12 500倍、15 000倍，每個濃度重復(fù)4次，將種子分裝于不同濃度的碧護(hù)溶液錐形瓶中浸種，以等量去離子水浸種為對照，25℃下浸種24 h。取各濃度梯度下浸種種子100粒放于裝有4 mL去離子水的直徑9 cm鋪有3層濾紙的培養(yǎng)皿中，種子之間保持一定間距，置于常溫（晝夜25℃/25℃）和低溫（晝夜15℃/10℃）的光照培養(yǎng)箱中（光周期為12 h，濕度為80%），每個培養(yǎng)皿每隔4天加入4 mL去離子水保持水勢。

參照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T2930.4-2001，高羊茅于第7 d統(tǒng)計發(fā)芽勢，第21 d統(tǒng)計發(fā)芽率；多年生黑麥草于第5 d統(tǒng)計發(fā)芽勢，第14 d統(tǒng)計發(fā)芽率。以胚芽突破種皮1 mm時為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)。高羊茅第21 d、多年生黑麥草第14 d從每個重復(fù)中隨機(jī)選取20株幼苗測其芽長、根長、苗質(zhì)量和根質(zhì)量。

高羊茅發(fā)芽勢（%）=（7 d內(nèi)供試種子的發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)）×100

高羊茅發(fā)芽率（%）=（21 d內(nèi)供試種子的發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)）×100

多年生黑麥草發(fā)芽勢（%）=（5 d內(nèi)供試種子的發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)）×100

多年生黑麥草發(fā)芽率（%）=（14 d內(nèi)供試種子的發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)）×100

1.2.2碧護(hù)緩解幼苗低溫脅迫試驗(yàn)用塑料盆缽（直徑9 cm）按照營養(yǎng)土∶蛭石=1∶1裝土，將稱量好的0.1 g高羊茅和多年生黑麥草種子分別播種于盆缽表面。共設(shè)置6個濃度梯度和1個清水對照，劑量設(shè)置同種子萌發(fā)試驗(yàn)，每個處理設(shè)4次重復(fù)，于3～5葉期低溫脅迫前，每日早上9：00進(jìn)行葉面噴霧，連續(xù)噴施2天，對照組噴施等量蒸餾水，兌水量為450 L·hm-2。將供試草坪草隨機(jī)均勻擺放在2 m2的空地上，采用0.8 L手持式噴霧器（市下牌，中國市下控股有限公司）均勻噴霧，噴霧壓力約為0.2 Mpa，使用獨(dú)立的噴霧器，以防止相互干擾。在葉面噴施后進(jìn)行為期10天戶外低溫脅迫，2020.12.27和2020.12.28為施藥時期，2020.12.29～2021.01.07為10天低溫處理時期，最低溫度為-5℃，最高溫度為11℃；25℃的常溫對照組處理時間同低溫處理，自然光照。低溫結(jié)束后，測定其地下生物量和生理指標(biāo)。

草坪草根據(jù)受凍形態(tài)特征劃分為以下4個級別，見表1。

地下生物量測定：每個處理從每個重復(fù)隨機(jī)選取20株草坪草測定其根長、根鮮重和根干重。根長選取最長根測定，根干重在80℃烘箱烘干48 h下測定。

生理指標(biāo)測定：每個處理從每個重復(fù)中隨機(jī)選擇10株混合后測定生理指標(biāo)。葉綠素含量的測定使用丙酮浸提法［18］；電解質(zhì)滲透率的測定采用相對電導(dǎo)率法［19］；丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量測定采用硫代巴比妥酸法（南京建成生物工程研究所丙二醛（MDA）測試盒，規(guī)格：50管/48樣）；超氧化物岐化酶（Superoxide dismutase，SOD）活性測定采用氮藍(lán)四唑還原法（南京建成超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）試劑盒，規(guī)格：100管/96樣）；脯氨酸（Proline，PRO）含量測定采用酸性茚三酮法（南京建成脯氨酸PRO測試盒，規(guī)格：50管/48樣）。

2結(jié)果與分析

2.1碧護(hù)浸種緩解低溫脅迫草坪草種子萌發(fā)的作用

2.1.1對草坪草種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率的影響CK低溫處理下高羊茅和多年生黑麥草的發(fā)芽率、發(fā)芽勢均顯著低于常溫，說明低溫能顯著降低兩種供試草坪草種子的萌發(fā)能力（表2）。

常溫和低溫下碧護(hù)2 500～12 500倍液浸種后的高羊茅發(fā)芽勢與CK相比分別顯著提高14.50%～22.25%和17.50%～24.50%；常溫下10 000倍液發(fā)芽率顯著提高5.25%，低溫下2 500～12 500倍液發(fā)芽率顯著提高4.25%～8.25%。兩種溫度下相比，12 500～15 000倍液浸種后低溫下的發(fā)芽勢與常溫下相當(dāng)，2 500～12 500倍液浸種后低溫下的發(fā)芽率與常溫下相當(dāng)。這說明碧護(hù)在常溫和低溫下均能明顯提高高羊茅種子的發(fā)芽能力，且低溫下的效果更明顯。

常溫下碧護(hù)不同倍液浸種后，多年生黑麥草在2 500～5 000倍液浸種后的發(fā)芽率顯著提高2.75%～3.25%；低溫下，7 500～12 500倍液發(fā)芽勢和發(fā)芽率分別顯著提高9.00%～19.75%和6.50%～9.00%。兩種溫度下相比，碧護(hù)各倍液浸泡后的多年生黑麥草發(fā)芽勢在低溫下均顯著低于常溫下，7 500～15 000倍液浸種后低溫下的發(fā)芽率與常溫下相當(dāng)，說明碧護(hù)在常溫下和低溫下均能明顯提高年多生黑麥草種子的發(fā)芽率，且在低溫下效果更為明顯。

2.1.2對草坪草種子胚芽生長的影響常溫下，高羊茅2 500～15 000倍液芽長、苗鮮重和苗干重與CK相比分別顯著提高9.70%～12.97%，27.73%～41.41%和30.87%～53.04%。低溫下，2 500～15 000倍液芽長顯著提高11.97%～20.17%，2 500～12 500倍液苗鮮重和苗干重分別顯著提高39.66%～45.57%和19.43%～33.76%。2 500～12 500倍液浸種后，苗鮮重在低溫下與常溫下相當(dāng)，各倍液低溫下的苗干重均顯著高于或相當(dāng)于常溫下（表3）。

常溫下，多年生黑麥草5 000倍液芽長顯著提高1.84%，2 500～12 500倍液苗鮮重顯著提高14.18%～23.20%，5 000～7 500倍液苗干重顯著提高18.38%～22.79%。低溫下，2 500～12 500倍液芽長顯著提高14.72%～38.45%，7 500～10 000倍液苗鮮重和苗干重分別顯著提高37.82%～51.30%和38.25%～43.82%。碧護(hù)2 500，7 500，12 500，15 000倍液浸種后，苗干重常溫下與低溫下相當(dāng)（表4）。

以上結(jié)果說明在常溫和低溫下，與CK相比，碧護(hù)不同倍液浸種均能提高兩種供試草坪草苗質(zhì)量。在低溫下，碧護(hù)浸種后的高羊茅和多年生黑麥草通過提高苗干重，累積干物質(zhì)量抵御低溫脅迫。

2.1.3對草坪草種子胚根生長的影響與CK相比，在常溫和低溫下，碧護(hù)浸種均能顯著提高兩種草坪草根長、根鮮重和根干重。對高羊茅，常溫下碧護(hù)浸種后根長、根鮮重和根干重與CK相比分別顯著提高31.27%～44.63%，39.61%～79.87%和41.35%～55.77%；低溫下碧護(hù)浸種后根長、根鮮重和根干重分別顯著提高46.50%～95.88%，47.27%～73.64%和26.51%～68.07%（表5）。對多年生黑麥草，常溫下根長和根鮮重分別顯著提高25.57%～49.17%和20.79%～54.95%；低溫下，7500～12500倍液浸種后根長顯著提高32.81%～49.89%，7500～10000倍下根鮮重和根干重顯著提高60.00%～70.83%和51.43%～53.57%（表6）。

多數(shù)情況下低溫下的高羊茅根長和根鮮重顯著低于常溫下，但在2 500～15 000倍液下，根干重在常溫下極顯著低于低溫下30.00%～44.53%。多數(shù)倍液浸種后多年生黑麥草低溫下的根長和根鮮重極顯著低于常溫下，但根干重在低溫下與常溫下相當(dāng)或顯著高于常溫下。說明碧護(hù)浸種后能促進(jìn)高羊茅和多年生黑麥草種子根伸長，降低根的水分含量，提高干物質(zhì)含量，來抵御低溫脅迫。

2.2碧護(hù)緩解苗期低溫脅迫的作用

2.2.1草坪草的低溫脅迫癥狀在室外10 d低溫脅迫后，CK組高羊茅和多年生黑麥草均出現(xiàn)嚴(yán)重傷害，前者枯萎死亡，等級為4級，后者植株生長停滯，部分葉片黃化，等級為3級。對高羊茅，葉面噴施碧護(hù)不同倍液均能緩解傷害，其中2 500倍和15 000倍液下傷害等級為3級；12 500倍液傷害等級為2級；5 000～10 000倍液葉片出現(xiàn)輕微傷害，等級為1級。對多年生黑麥草，15 000倍液下傷害等級為2級；2 500～12 500倍液下出現(xiàn)輕微傷，等級為1級。

綜合以上結(jié)果，葉面噴施2 500～15 000倍碧護(hù)稀釋液均能在一定程度長緩解草坪草高羊茅和多年生黑麥草受低溫脅迫的影響。

2.2.2低溫對草坪草地下部生物量的影響與CK相比，常溫下，高羊茅葉面噴施碧護(hù)5 000～10 000倍液后根長和根鮮重分別顯著提高18.52%～28.40%和26.82%～50.39%，2 500～10 000倍液下根干重顯著提高26.67%～38.67%；低溫下，2 500～15 000倍液下根長、根鮮重和根干重分別顯著提高71.73%～150.15%，262.35%～588.24%和108.70%～176.09%。低溫與常溫相比，2 500～12 500倍液下根長相當(dāng)，2 500～7 500倍液下根鮮重相當(dāng)，2 500～15 000倍液下根干重相當(dāng)（表7）。

與CK相比，常溫和低溫下，多年生黑麥草葉面噴施2 500～15 000倍液下根長均顯著提高12.68%～29.50%和36.97%～65.90%。常溫下，5 000～15 000倍液下根鮮重顯著提高20.41%～35.71%，12500倍液下根干重顯著提高18.52%，2 500倍液下根干重顯著降低13.58%；低溫下，2 500～12 500倍液下根鮮重和根干重分別顯著提高131.56%～262.13%和52.05%～113.70%。低溫下與常溫下相比，2 500～15 000倍液下根長相當(dāng)，2 500～10 000倍液下根鮮重相當(dāng)，2 500倍和15 000倍液下根干重相當(dāng)（表8）。

這說明碧護(hù)在常溫下和低溫下均能明顯提高高羊茅和多年生黑麥草根系生長，但低溫下的效果更明顯。

與CK相比，常溫下，多年生黑麥草葉綠素含量均有提高，2 500～10 000倍液下顯著提高13.43%～22.39%，相對電導(dǎo)率均有降低，但差異不顯著；低溫下，葉綠素含量均顯著提高13.56%～33.05%，相對電導(dǎo)率均顯著降低47.09%～69.93%。

說明碧護(hù)在常溫和低溫下均能提高高羊茅和多年生黑麥草的葉綠素含量，增強(qiáng)光合作用，降低其相對電導(dǎo)率，減少細(xì)胞電解質(zhì)外滲，但在低溫脅迫下，碧護(hù)效果更明顯（表9）。

2.2.4低溫對草坪草過氧化物和抗氧化酶的影響室外低溫脅迫下，高羊茅和多年生黑麥草體內(nèi)的丙二醛含量和脯氨酸含量顯著增加，超氧化物歧化酶活性顯著降低。在不同溫度下葉面噴施碧護(hù)各倍液均可有效降低丙二醛含量，進(jìn)一步增加植株超氧化物歧化酶活性和脯氨酸含量，增強(qiáng)高羊茅和多年生黑麥草的抗低溫脅迫能力。低溫下，噴施2 500～15 000倍液后高羊茅和多年生黑麥草的丙二醛含量分別顯著降低15.94%～56.52%和18.26%～42.19%（表10），在5 000～7 500和5 000～15 000倍液下二者超氧化物歧化酶活性分別顯著提高15.52%～28.69%和17.50%～39.33%，5 000～10 000和2 500～12 500倍液下二者液脯氨酸含量分別顯著提高28.94%～87.42%和20.91%～125.21%（表11）。

3討論

高羊茅和多年生黑麥草是禾本科草本植物，由于生長迅速，適應(yīng)性強(qiáng)，是草坪建植的優(yōu)良草種［20-22］。

種子繁殖是草坪建植的方式之一，其成本低，整齊度高，但低溫脅迫對種子的萌發(fā)及幼苗生長影響較大［23］。

研究表明植物在萌發(fā)過程中遭受低溫脅迫會影響種子活力，降低發(fā)芽勢及發(fā)芽率［24］。本試驗(yàn)中使用碧護(hù)浸種24 h后，兩種草坪草種子的發(fā)芽勢及發(fā)芽率在常溫和低溫下均有提高；低溫下雖然兩種草坪草的發(fā)芽勢顯著低于相同稀釋倍數(shù)碧護(hù)處理下常溫的發(fā)芽勢，但多數(shù)稀釋倍數(shù)浸種后低溫下的發(fā)芽率與常溫下無顯著差異，這說明碧護(hù)浸種的確能緩解低溫對兩種草坪草種子發(fā)芽的脅迫。唐志偉等［25］研究發(fā)現(xiàn)使用碧護(hù)浸種對水稻中早39（Oryza sativa‘Zhongzao 39’）種子具有促進(jìn)萌發(fā)及根系生長且有壯苗抗寒的效果。本研究結(jié)果也顯示碧護(hù)浸種可以緩解低溫對兩種草坪草生長的脅迫，可在實(shí)際生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

當(dāng)草坪草受到低溫脅迫時，根、莖、葉的生長發(fā)育和相對電導(dǎo)率、丙二醛、可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶等生理生化指標(biāo)均會受影響［26］，葉片作為重要的營養(yǎng)器官，遭遇低溫后會出現(xiàn)枯黃、萎蔫等癥狀［27］。本研究結(jié)果顯示，葉面噴施碧護(hù)常溫下促進(jìn)草坪草生長，并能緩解低溫對兩種草坪草的傷害。這與常溫下葉面噴施碧護(hù)能促進(jìn)水稻生長的報道一致［28］，與緩解沙紅桃、大櫻桃的低溫傷害的報道一致［15-17］。黎可華等［29］研究發(fā)現(xiàn)低溫脅迫會率先抑制草坪植物的光合作用，表現(xiàn)為葉綠素含量迅速下降，同時低溫脅迫會導(dǎo)致草坪草細(xì)胞膜受損，電解質(zhì)外滲，相對電導(dǎo)率升高。本研究結(jié)果也顯示低溫下兩種草坪草的葉綠素含量顯著降低，相對電導(dǎo)率顯著提高；兩種草坪草葉面噴施碧護(hù)顯著提高其葉綠素含量，降低電導(dǎo)率，說明葉面噴施碧護(hù)可以有效緩解低溫對草坪草光合作用的抑制及對細(xì)胞膜的損傷。

丙二醛是膜脂過氧化作用的最終產(chǎn)物，其含量是判斷逆境脅迫對生物膜危害程度的重要指標(biāo)［30-31］，趙春旭等［32］研究早熟禾（Poa annua L.）對低溫脅迫的響應(yīng)機(jī)制中發(fā)現(xiàn)早熟禾在低溫脅迫下丙二醛含量顯著增加。脯氨酸能在低溫脅迫環(huán)境下維護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，調(diào)節(jié)滲透壓，降低植物受傷害的程度，趙娜等［5］研究發(fā)現(xiàn)在不同程度低溫下多種草坪草的丙二醛和脯氨酸含量顯著上升。本研究結(jié)果顯示低溫下兩種草坪草的丙二醛與脯氨酸含量與常溫下相比顯著增加，這與前人研究結(jié)果一致，這說明本試驗(yàn)中的低溫處理有效；葉面噴施碧護(hù)后均顯著提高低溫下兩種草坪草的脯氨酸含量，降低丙二醛含量，這說明葉面噴施碧護(hù)有利于提高草坪草脯氨酸含量以維持細(xì)胞正常的滲透壓，保證正常的物質(zhì)運(yùn)輸，維持細(xì)胞膜的完整性，從而緩解低溫傷害。

超氧化物歧化酶活性增加能清除膜脂過氧化產(chǎn)物并保護(hù)細(xì)胞膜免受傷害，是清除植物體內(nèi)活性氧的關(guān)鍵抗氧化酶［33］。低溫環(huán)境下兩種草坪草的超氧化物歧化酶活性顯著降低，葉面噴施碧護(hù)顯著提高超氧化物歧化酶活性，這與杜思夢等［34］研究的在低溫條件下外源水楊酸處理的小麥超氧化物歧化酶活性提高的結(jié)果一致。說明碧護(hù)具有緩解低溫對草坪草脅迫作用，但碧護(hù)緩解低溫脅迫的效果是否優(yōu)于其他植物激素以及對其他草坪草種的作用還有待于進(jìn)一步的研究。

總體上來看，碧護(hù)7 500～10 000倍液浸種后可提高常溫和低溫條件下草坪草種子萌發(fā)能力，葉面噴施碧護(hù)5 000～7 000倍液可緩解低溫脅迫對幼苗的傷害，提高其抗寒能力。但對兩種草坪草不同指標(biāo)的影響不完全相同，如碧護(hù)浸種對低溫下高羊茅干物質(zhì)積累比多年生黑麥草的促進(jìn)效果更加顯著。碧護(hù)對兩種草坪草低溫脅迫的緩解作用不完全相同可能與草坪草本身的生物學(xué)特性有關(guān)，因此建議碧護(hù)應(yīng)用于緩解低溫脅迫其他草坪草時進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)，獲得更確切的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

4結(jié)論

使用碧護(hù)不同稀釋倍液浸種24 h對常溫和低溫下兩種草坪草種子的發(fā)芽勢、發(fā)芽率以及芽和根生長具有促進(jìn)效果，尤其是對提高低溫下的發(fā)芽率、苗干重及根干重的效果顯著。兩種草坪草苗期葉面噴施碧護(hù)可有效緩解低溫對地下生物量的脅迫，提高植物體內(nèi)葉綠素含量、脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性，降低相對電導(dǎo)率和丙二醛含量，有助于提高草坪草在低溫條件下的光合作用，調(diào)節(jié)滲透壓，維護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，清除過氧化產(chǎn)物，從而緩解低溫對植物體內(nèi)細(xì)胞的損傷程度，提高草坪草的抗寒力。

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（責(zé)任編輯劉婷婷）