摘要：為了解鹽脅迫對山杏葉片細胞生理生化的影響，以黑龍江省林口縣試驗地優(yōu)良單株為試材進行鹽脅迫處理，共設置4個梯度，以清水灌溉為對照（CK），鹽（NaCl）處理濃度分別為200mmol/L（T1）、400mmol/L（T2）、600mmol/L（T3）。研究表明：山杏鹽脅迫下，通過有機滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的積累，提高細胞液濃度以提高滲透勢，減輕失水程度，同時緩解了細胞膜的損傷程度和光合電子傳遞的受抑制程度，從而了減少活性氧的形成；通過提高體內(nèi)抗氧化酶活性進行調(diào)節(jié)，有效清除過量的活性氧，緩解細胞自由基代謝失調(diào)和質(zhì)膜受損程度，避免活性氧對光系統(tǒng)和光合碳同化過程的傷害，從而維持較高的光合能力，提高植株對鹽脅迫的抵御和耐受能力。表明山杏雖具有一定的抗鹽脅迫的能力。

關鍵詞：山杏；鹽脅迫；生理指標

目前，土壤的鹽堿化已經(jīng)成為了全球性的問題，我國土壤的鹽堿化程度也日趨嚴重。我國是鹽堿地大國，鹽堿地面積位居世界第三，主要分布于地區(qū)有東北、東部沿海地區(qū)、西北地區(qū)、華北地區(qū)等。由于自然條件的影響，鹽堿土類型也較為復雜，大多屬于復合鹽堿地[1]。山杏（Armeniaca sibirica），即西伯利亞杏，薔薇科，屬落葉小喬木，主要分布于我國東北、內(nèi)蒙古以及華北地區(qū)。山杏的根系很發(fā)達，具有比較強的固沙作用；耐寒、耐旱、耐瘠薄又耐高溫，是生態(tài)脆弱地區(qū)植被恢復與園林綠化優(yōu)良樹種[2，3]。山杏果仁可加工飲品、榨油，且其果仁有祛痰、止咳的藥用功效，具備很好經(jīng)濟價值及藥用價值，是集生態(tài)效益、社會效益和經(jīng)濟效益于一體的重要木本糧油經(jīng)濟樹種[3]。本文從鹽堿脅迫對山杏抗鹽堿生理指標進行研究，為今后發(fā)展果樹抗鹽堿育種提供了一定的理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

試驗材料選自黑龍江省林口縣大盤道實驗地優(yōu)良單株，先將該試驗地優(yōu)良單株在苗圃地進行無性繁殖，再從其中選出30組長勢均一健壯的幼苗做試材，進行培育。

1.2方法

試驗選取在7月初在黑龍江省林業(yè)科學研究所試驗地進行（具備防雨措施）。

鹽脅迫設置4個梯度，NaCl處理濃度分別為200mmol/L（T1）、400mmol/L（T2）、600mmol/L（T3），以清水灌溉為對照（CK），每處理30株。加鹽前控制盆水幾天，以利于加鹽后在干燥土壤中充分擴散。脅迫14d后取樣進行測定，每處理重復3次。20d后因鹽度過高，600mmol/L處理區(qū)干枯死亡。

1.3測定方法

葉片相對含水量采用飽和含水量法測定。計算公式：相對含水量（%）=（原初鮮質(zhì)量-干質(zhì)量）/（飽和鮮質(zhì)量-干質(zhì)量）×100%

用電導率儀測定各水分處理葉片的相對透電導率。

超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化物酶（POD）活性、丙二醛（MDA）含量、脯氨酸（Pro）含量、可溶性糖含量分別采用試劑盒（江蘇艾迪生生物公司），嚴格按照說明書進行操作測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)表示為平均值，用 Excel 作圖。

2結(jié)果與分析

2.1鹽脅迫對山杏葉片葉片含水量的影響

由1可以看出，隨著NaCl濃度的增加，葉片的相對含水量下降越快，對照的相對含水量在90%以上，S1、S2、S3梯度下的相對含水量分別是82%、74%、63%，與對照的葉片相對含量平均值下降了12%、20%、32%，相對含水量的下降梯度差異較大，鹽脅迫程度越強，葉片的相對含水量就越低，影響指數(shù)也就越高。

2.2鹽脅迫對山杏葉片質(zhì)膜透性的影響

圖2中，山杏葉片相對電導率在鹽脅迫下均升高，S1、S2、S3比CK相對電導率分別高33%、33%、75%。說明隨著鹽脅迫程度的增加，膜的傷害程度也隨之增加。

2.3鹽脅迫對山杏葉片超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響

不同程度鹽脅迫處理下，由圖3可以看出，隨著脅迫程度的增強，SOD活性含量就越高，分別比最初高7%、31%、38%，中度和重度脅SOD活性含量迫明顯升高。

2.4鹽脅迫對山杏葉片過氧化物酶（POD）活性的影響

不同鹽脅迫處理下，由圖4可以看出在3個梯度的山杏葉片SOD活性隨著時間的增加，均呈現(xiàn)明顯升高的趨勢，W1、W2、W3分別比最初上升了69%、68%、87%，說明鹽脅迫會使山杏葉片誘導的 POD 活性升高以抵御鹽脅迫環(huán)境，在重度鹽脅迫下，山杏葉片相比具有較高的 POD 活性，對活性氧自由基的清除能力更強，抗氧化能力更強。

2.5鹽脅迫對山杏葉片丙二醛（MDA）含量的影響

由圖5所示，在鹽脅迫處理下，丙二醛含量升高，增加幅度：重度脅迫＞中度脅迫＞輕度脅迫，分別比最初升高了27%、27%、22%，結(jié)果表明，鹽脅迫會導致楊樹膜脂過氧化程度增加，而在重度鹽脅迫下山杏葉片受活性氧的損傷更輕，具有更強的耐鹽性。

2.6鹽脅迫對山杏葉片脯氨酸（Pro）的影響

由圖6可以看出，各處理中葉片Pro含量均隨著脅迫時間的增加而增加，且脅迫程度的越強的Pro含量越高，Pro 的積累量較大，說明山杏對鹽脅迫具有一定的適應力。

2.7鹽脅迫對山杏葉片可溶性糖含量的影響

不同鹽脅迫處理下，山杏葉片可溶性糖含量如圖13所示，在14d均有所增加，比最初的含量分別增加了39%、30%、32%，說明葉片中可溶性糖含量均有一定的積累，山杏對鹽脅迫具有一定適應力。

3結(jié)論與討論

葉片相對含水率反映了植物體內(nèi)水分缺失狀況[4-6]，相對電導率反映了細胞膜透性變化[4-6]，而膜脂過氧化反應的最終產(chǎn)物是丙二醛（MDA）[4-6]，其含量是反映植物脂質(zhì)過氧化程度和膜系統(tǒng)傷害程度[4-9]。本研究中，隨著NaCl濃度的增加，葉片的相對含水量下降越快，丙二醛與相對電導率均升高，重度脅迫高于CK75%，表明鹽脅迫的加重，細胞穩(wěn)定性逐漸喪失，代謝失衡，受損狀況加劇。

植物體中的可溶性蛋白、可溶性糖、游離脯氨酸在一定程度上都可以反映植物受環(huán)境水分和鹽度脅迫的情況，以及植物對鹽分脅迫的忍耐及抵抗能力[6，10-14]。本研究中，隨著鹽濃度的增加，山杏葉片中的POD就大量產(chǎn)生，可溶性糖也隨之緩慢增加，以調(diào)節(jié)滲透壓，降低植物體細胞滲透勢，從而改善細胞的持水能力以及吸水能力，維持自身在逆境下的生命活動[10-16]。

有研究表明，鹽脅迫會導致植物細胞中Na+過多的累積，并會破壞植物體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生，從而清除系統(tǒng)的動態(tài)平衡，且大量活性氧會的產(chǎn)生會導致細胞喪失完整的膜結(jié)構(gòu)，然后損傷膜脂等[17-23]。在植物體內(nèi)也存在多種活性氧清除機制，一種是有復雜的酶類抗氧化防御系統(tǒng)，SOD、CAT 和POD是細胞保護酶系統(tǒng)主要成員，這3種酶活性的變化趨勢可以在一定程度上反映出植物抗逆能力[9，17-20] 。本研究中，SOD和POD活性含量隨著鹽濃度的增加，升高的越快，表明植物體內(nèi)產(chǎn)生大量的氧化酶，來清除過量的活性氧，降低膜脂過氧化的程度，維持體內(nèi)活性氧的平衡。具有一定的抗逆能力。

實驗表明，山杏在鹽脅迫下，通過有機滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的積累，提高細胞液濃度以提高滲透勢，減輕失水程度，同時緩解了細胞膜的損傷程度和光合電子傳遞的受抑制程度，從而了減少活性氧的形成[17-23]；通過提高山杏體內(nèi)抗氧化酶活性進行調(diào)節(jié)，有效清除過量的活性氧，緩解細胞自由基代謝失調(diào)和質(zhì)膜受損程度，避免活性氧對光系統(tǒng)和光合碳同化過程的傷害，從而維持較高的光合能力，提高植株對鹽脅迫的抵御和耐受能力[17-23]。

其中鹽脅迫處理組內(nèi)，在14天就開始有植株枯死，在第20天就有大量的死亡，表明山杏雖具有一定的抗鹽脅迫的能力，但不建議長期在高強度鹽脅迫環(huán)境中生存。

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