陳丹丹，印 蓉

（1.泰州市姜堰區(qū)三水街道畜牧獸醫(yī)站，江蘇 泰州 225500；2.泰州市姜堰區(qū)溱潼鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇 泰州 225500）

近年來(lái)，我國(guó)使用新城疫疫苗的覆蓋率較高，本病的發(fā)生逐漸減少，特別是以高發(fā)病率、高死亡率的典型性新城疫疫情的影響逐漸減弱，但低發(fā)病率、低死亡率、高淘汰率的非典型性新城疫卻不斷發(fā)生。由于非典型性新城疫的臨床特點(diǎn)和病理變化與典型性新城疫有很大不同，容易被誤診為其他疾病，且病雞體內(nèi)的抗體常高于log28，使雞新城疫的防控面臨新的挑戰(zhàn)。

1 病原學(xué)

新城疫病毒是副黏病毒科、副黏病毒屬的成員，是單股RNA 病毒，病毒粒子為蝌蚪樣或大小不規(guī)則的圓形，直徑在100～500 nm，由核衣殼、囊膜組成，囊膜外有放射性的突起。新城疫病毒可編碼6種結(jié)構(gòu)蛋白（分別為NP、P、M、F、HN 和L6），其中NP 蛋白可參與病毒基因組的復(fù)制，結(jié)構(gòu)蛋白M、F以及HN 可參與囊膜的合成，F(xiàn)N 和N 蛋白主要附著于病毒的囊膜外，M 蛋白主要在囊膜內(nèi)，HN 和F蛋白與病毒的致病性有密切關(guān)系。新城疫病毒在雞胚絨毛尿囊膜、尿囊腔中可生長(zhǎng)繁殖，在36～72 h內(nèi)導(dǎo)致雞胚死亡，死亡的胚體有嚴(yán)重出血；新城疫病毒能夠在多種動(dòng)物的培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，且均能導(dǎo)致動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生病變反應(yīng)。新城疫病毒能夠在動(dòng)物尸體、土壤中存活30 d，在0 ℃的組織、尿液中可存活1 年以上，室溫條件或溫度更高時(shí)，病毒的存活時(shí)間較短。日光直射、干燥以及常見的消毒藥品如乙醚、氯仿等均可較快的將新城疫病毒殺滅。

新城疫病毒可按照致病力的不同分為三種類型，分別為緩發(fā)型（僅有輕微致病力）、中發(fā)型（具有中等致病力）以及強(qiáng)毒型（具有高致病力）。目前大部分地區(qū)發(fā)生的新城疫均屬于緩發(fā)型或中發(fā)型病毒引起的。使用緩發(fā)型毒株制作的疫苗產(chǎn)生的免疫保護(hù)力較弱，保護(hù)期短，需要重復(fù)免疫才能達(dá)到良好的效果。而中發(fā)型毒株在制作疫苗時(shí)可以刺激機(jī)體產(chǎn)生更強(qiáng)、更持久的抵抗力，但有可能會(huì)引起部分雞死亡，故部分國(guó)家不采用這種疫苗免疫。

2 流行病學(xué)

2.1 易感動(dòng)物新城疫病毒能夠感染多種禽類，包括雞、鴿子、火雞、鵪鶉、野鴨、烏鴉、孔雀等，其中雞的易感性最強(qiáng)，任何日齡、品種及性別均能感染，且日齡越小的雛雞越易感。

2.2 傳染源及傳播途徑患病動(dòng)物和帶毒動(dòng)物是主要的傳染源，新城疫病毒可通過(guò)消化道、呼吸道、眼結(jié)膜、創(chuàng)傷的皮膚以及交配等多種方式傳播，患病動(dòng)物和帶毒動(dòng)物被感染后24 h 會(huì)通過(guò)口腔、鼻腔分泌物向體外排毒，污染周圍的空氣、水源、飼料、用具等。

2.3 季節(jié)性本病全年均可發(fā)生，無(wú)明顯的季節(jié)性，但由于新城疫病毒在低溫環(huán)境下存活的時(shí)間更長(zhǎng)，因此在氣溫較低或氣候多變的季節(jié)更易發(fā)病。

3 診斷技術(shù)

3.1 初步診斷可根據(jù)病雞的臨床癥狀和剖檢特征，結(jié)合流行病學(xué)特點(diǎn)可初步診斷，但由于雞新城疫的部分臨床癥狀與禽霍亂、雞傳染性喉氣管炎等呼吸系統(tǒng)疾病較為類似，因此應(yīng)當(dāng)注重鑒別診斷。按照病雞的臨床癥狀不同可將雞新城疫分為最急性型、急性型、慢性型以及非典型新城疫。自然感染條件下本病的潛伏期為4～5 d。

3.1.1 最急性型 多發(fā)生在疫情暴發(fā)初期，病雞突然發(fā)病，無(wú)任何癥狀而突然死亡，主要以雛雞發(fā)病為主，死亡率可達(dá)90%，成年雞感染后不易突然死亡。

3.1.2 急性型 病雞的呼吸系統(tǒng)癥狀明顯，流鼻涕，流淚，張口呼吸，咳嗽，呼吸紊亂，因呼吸困難會(huì)有“咯咯”的喘鳴聲，聽診有明顯的濕鑼音，雞冠、肉髯發(fā)紺；體溫升高至44 ℃左右，昏睡，不愿活動(dòng)，兩翅下垂，垂頭縮頸；喙旁有大量的黏液，嗉囊內(nèi)有液體，如果將病雞倒提，口腔和鼻腔內(nèi)會(huì)流出大量液體，有酸臭氣味，也有的病雞可通過(guò)甩頭的方式甩出口腔、鼻腔內(nèi)的分泌物。病雞出現(xiàn)下痢，排出的糞便為黃綠色或黃白色，有時(shí)伴有血液，后期糞便可為蛋清樣。部分病例會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，翅部、腿部麻痹，嚴(yán)重影響其行動(dòng)，出現(xiàn)跛行、站立不穩(wěn)，有的會(huì)出現(xiàn)頭頸后仰、頭頸向側(cè)方扭轉(zhuǎn)，呈共濟(jì)失調(diào)。

3.1.3 慢性型 在患病初期該型病例與急性型類似，但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，癥狀逐漸減輕，呼吸系統(tǒng)癥狀逐漸消失，僅保留神經(jīng)癥狀，翅部、腿部麻痹，運(yùn)動(dòng)失調(diào)，頭頸后仰或頭頸向一側(cè)扭轉(zhuǎn)。有的也會(huì)出現(xiàn)全身癱瘓、一側(cè)癱瘓等，病死率約為15%～45%。

3.1.4 非典型性 相較于前三個(gè)類型，非典型新城疫的癥狀較為緩和，大多數(shù)病例沒有明顯的臨床表現(xiàn)，僅表現(xiàn)出精神不振，翅膀下垂，羽毛凌亂，采食量和飲水量均降低，小日齡的雛雞可能會(huì)表現(xiàn)出部分臨床癥狀，如張口伸頸呼吸，口腔、鼻腔中有大量黏液，排綠色稀糞等。隨著病程的發(fā)展，少數(shù)患病雞有站立不穩(wěn)，歪頭，“觀星狀”等神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。產(chǎn)蛋雞患病時(shí)產(chǎn)蛋率下降40%～70%，一段時(shí)間后會(huì)慢慢回升，但軟殼率、小蛋率明顯提高，種蛋的受精率和孵化率也會(huì)受到影響，此型多發(fā)于免疫雞群。

3.1.5 剖檢特征 全身的漿膜、黏膜出現(xiàn)出血，特別是肌胃、腺胃和賁門處存在多處潰瘍性壞死灶，并伴有出血；心冠脂肪、心外膜有菜花樣病變，可見針尖大小的出血點(diǎn)；呼吸道、消化道充血、腫脹，腸道外側(cè)有大小不一的紫紅色腸淋巴濾泡，小腸粘膜有纖維素性、出血性壞死灶，直腸、泄殖腔粘膜出血。

3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.2.1 病原學(xué)診斷 （1）病料處理 對(duì)病死雞可直接無(wú)菌采集肝臟、脾臟、肺臟等器官作為病料，經(jīng)3 次凍融后加入PBS 溶液研磨，研磨物置于4 ℃低溫離心15 min 后取上清（轉(zhuǎn)速為10000 r/min），將上清移至無(wú)菌離心管內(nèi)，添加10000 IU/mL 的青霉素和10 g/L 的鏈霉素，37 ℃下感作1 h 后將液體用0.22 μm 濾膜過(guò)濾。

（2）病毒分離鑒定 將過(guò)濾好的樣本接種于10 日齡SPF 雞胚尿囊腔內(nèi)，每個(gè)雞胚接種0.2 mL，接種后將蛋置于孵化箱內(nèi)，間隔6 h 照蛋1 次，將24 h 后發(fā)生死亡的雞胚置于4 ℃下保存過(guò)夜，收集雞胚尿囊液，并觀察雞胚的情況。

（3）結(jié)果判定 當(dāng)胚體出現(xiàn)頭、翅、頸、胸等多處出血，尿囊液為清亮狀態(tài)，同時(shí)用病料涂片染色鏡檢，未發(fā)現(xiàn)病原體，幾種常見的培養(yǎng)基上無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，則可判定為新城疫病毒，同時(shí)可使用血清學(xué)診斷驗(yàn)證。

3.2.2 血清學(xué)診斷

（1）病料處理 可用血清或雞蛋作為檢測(cè)的病料，血清樣品是無(wú)菌采集患病雞血液或病死雞心房?jī)?nèi)凝血塊后進(jìn)行血清的分離，合格的血清應(yīng)當(dāng)新鮮、無(wú)雜質(zhì)、無(wú)腐敗、不容血，呈微黃色的清亮液體。由于采血可能會(huì)造成雞只應(yīng)激，因此可使用卵黃抗體檢測(cè)的方法代替血清效價(jià)檢測(cè)。

（2）血凝與血凝抑制試驗(yàn) 血凝試驗(yàn)：在96孔板的第一排和第二排分別加入50 μL 的生理鹽水和50 μL 紅細(xì)胞，將50 μL 待檢樣品加入生理鹽水第2 孔內(nèi)，混勻后吸出50 μL 加入第2 孔，直至稀釋到第12 孔。再在各孔內(nèi)加入1%的雞紅細(xì)胞，震蕩2 min，室溫下靜置10～30 min。

血凝抑制試驗(yàn)：在96 孔板的第一、二、三排的各孔中加入50 μL 生理鹽水，在第一排的第1 孔內(nèi)加入50 μL 待檢血清，混勻后吸出50 μL 加入第2 孔，直至稀釋到第12 孔，稀釋完成后像第一、二排各孔內(nèi)加入4 個(gè)單位血凝素50 μL，震蕩2 min 混勻，室溫下靜置20 min，再在各孔內(nèi)加入1%的雞紅細(xì)胞，震蕩2 min，室溫下靜置10～30 min。

（3）結(jié)果判定 血凝試驗(yàn)中，第二排為紅細(xì)胞對(duì)照組，全部完全沉降，再觀察第一排的凝集情況，以能夠使等量紅細(xì)胞發(fā)生完全凝集的病毒最高稀釋倍數(shù)作為病毒的血凝價(jià)。在血凝抑制試驗(yàn)中，第二排為抗原對(duì)照，紅細(xì)胞全部發(fā)生凝集，第三排為紅細(xì)胞對(duì)照組，紅細(xì)胞全部沉降，再觀察第一排的凝集情況，以待檢血清能夠完全抑制病毒凝集紅細(xì)胞的最高稀釋倍數(shù)作為血清的HAI 效價(jià)。

3.2.3 分子生物學(xué)診斷 主要用于檢驗(yàn)雞新城疫病毒的分子生物學(xué)方法為PCR 法，此外，也可使用RNA 指紋圖譜法、核酸探針?lè)ǖ绕渌椒ㄟM(jìn)行檢測(cè)，但該方法對(duì)檢測(cè)設(shè)備和操作人員的要求較高，基層實(shí)踐中尚未得到推廣。

4 綜合防治

目前尚沒有治療雞新城疫的特效方法，因此應(yīng)當(dāng)堅(jiān)持“預(yù)防為主，防大于治”的原則綜合防控本病。

4.1 做好免疫接種免疫接種是預(yù)防雞新城疫的主要方法之一，當(dāng)雞群的免疫效價(jià)在log24 以上時(shí)，即使用較強(qiáng)毒力的毒株攻擊雞群也能夠不發(fā)病，但不能保證其生產(chǎn)性能不受影響，但當(dāng)免疫效價(jià)大于log28 時(shí)，則能夠保證產(chǎn)蛋雞感染強(qiáng)毒后既不死亡也不影響產(chǎn)蛋性能。

應(yīng)當(dāng)根據(jù)各養(yǎng)殖場(chǎng)的實(shí)際情況制定免疫程序，可參照如下程序：7 日齡雛雞用弱毒疫苗進(jìn)行滴鼻首免，疫苗在使用前用蒸餾水稀釋10～20 倍，每只雛雞接種0.3 mL；24～26 日齡時(shí)使用弱毒疫苗進(jìn)行點(diǎn)眼二免，每只雞接種0.5 mL；2 月齡以上的雞可使用Ⅰ系苗（中等毒力苗，適合已經(jīng)接種2 次弱毒力疫苗的雛雞使用）進(jìn)行3 免，疫苗使用前用蒸餾水稀釋100 倍，在雞只翅膀內(nèi)側(cè)進(jìn)行刺種，接種后3 d 即可形成可靠的抵抗力，免疫保護(hù)期約為2 年。

4.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理新城疫病毒雖然只有1 個(gè)血清型，但有9 個(gè)基因型，各個(gè)國(guó)家和地區(qū)都通過(guò)免疫接種的方式對(duì)本病進(jìn)行預(yù)防，致使新城疫病毒的毒株不斷出現(xiàn)變異，試驗(yàn)證明，新城疫野毒株間的HN 蛋白氨基酸序列的同源度可達(dá)98.15%±1.65%，但與傳統(tǒng)疫苗毒株（如La Sota Clone30）的同源性僅有88.65%±1.25%，差距比較巨大，因此疫苗有可能已經(jīng)不能起到很好的預(yù)防疾病的作用。這就需要各個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)通過(guò)不斷加強(qiáng)飼養(yǎng)管理來(lái)控制新城疫疫情的發(fā)生。

4.2.1 飼料的配制 在飼料的配制方面應(yīng)當(dāng)保證營(yíng)養(yǎng)的充足和全面，特別是維生素和礦物質(zhì)元素的添加，營(yíng)養(yǎng)全面的日糧能夠很好的避免雞群產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，有效提升雞群的抗病力。

4.2.2 注重環(huán)境控制 雞場(chǎng)內(nèi)應(yīng)當(dāng)做好環(huán)境控制，及時(shí)的清理糞便，至少每日清理1 次，保持雞舍的干凈、整潔，在保證舍內(nèi)溫濕度的同時(shí)加強(qiáng)通風(fēng)，避免有毒有害氣體在舍內(nèi)的蓄積。清理出的糞便不得隨意堆放，應(yīng)運(yùn)送至統(tǒng)一處理地點(diǎn)進(jìn)行無(wú)害化處理。

4.2.3 嚴(yán)格執(zhí)行消毒程序 養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)當(dāng)制定消毒程序并嚴(yán)格執(zhí)行，生活區(qū)和生產(chǎn)區(qū)應(yīng)當(dāng)有有效的隔離，養(yǎng)殖場(chǎng)采取封閉式管理，無(wú)特殊情況外來(lái)車輛和人員不得隨意入場(chǎng)，工作人員入場(chǎng)前應(yīng)當(dāng)更換工作服，并進(jìn)行嚴(yán)格消毒，車輛進(jìn)入時(shí)必須經(jīng)過(guò)消毒池，保證消毒效果。雞舍內(nèi)每日使用高錳酸鉀溶液進(jìn)行消毒，養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)遵循“全進(jìn)全出”的原則，轉(zhuǎn)入雞苗前要對(duì)環(huán)境進(jìn)行徹底的清掃和消毒，并空置一段時(shí)間后方可使用。

4.3 疫情處理（1）當(dāng)發(fā)現(xiàn)雞新城疫疑似病例時(shí)，應(yīng)立刻對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行封鎖，并上報(bào)有主管部門，禁止對(duì)場(chǎng)內(nèi)的雞群轉(zhuǎn)場(chǎng)、出售。要對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行全面、徹底的消毒，控制疾病的蔓延和傳播。對(duì)治療無(wú)效死亡的患病雞及其接觸過(guò)的用具、飼料、墊草等均應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理，常用的方法包括深埋和焚燒。

（2）對(duì)未發(fā)病雞應(yīng)立刻使用弱毒活疫苗進(jìn)行緊急接種，對(duì)日齡較大的雞可刺種或肌肉注射Ⅰ系苗，但注射時(shí)應(yīng)當(dāng)仔細(xì)核對(duì)接種雞的日齡，防止雛雞受到Ⅰ系苗的感染而引發(fā)此病。

（3）對(duì)確診的病雞應(yīng)緊急接種新城疫高免血清或卵黃抗體，患病雛雞首次注射2～4 mL，次日再以相同劑量注射一次。同時(shí)要配合使用青霉素、鏈霉素等抗生素預(yù)防繼發(fā)感染，在飲水、飼料內(nèi)添加電解多維和清熱解毒類中草藥以增強(qiáng)雞群的免疫力，促進(jìn)其康復(fù)。

5 小 結(jié)

雞新城疫是高度接觸性傳染病，發(fā)生后無(wú)特效藥物可供治療，因此各個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)當(dāng)通過(guò)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、做好免疫接種的方式切實(shí)提升雞群的抵抗力，做到預(yù)防為主，為養(yǎng)雞業(yè)提供安全保障。