陳春文 林曉潑 周苗苗
據(jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)每年因心血管疾病死亡患者大約300 萬(wàn),新發(fā)急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者50 萬(wàn)[1]。肌紅蛋白(myoglobin,Myo)是心肌細(xì)胞損傷后最早進(jìn)入血液的生物標(biāo)志物,組織蛋白酶S(cathepsin s,CatS)是參與細(xì)胞外蛋白降解的重要內(nèi)切酶,被認(rèn)為在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中發(fā)揮重要作用[2],可溶性生長(zhǎng)刺激表達(dá)因子2(soluble growth stimulation express gene 2,sST2)系由受機(jī)械張力作用的心肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分泌[3],可反映心肌細(xì)胞損傷與心肌纖維化具有反映價(jià)值。近年來(lái),有關(guān)人類基因的研究發(fā)現(xiàn),循環(huán)微小核糖核酸(microRNA,miRNA)可能是AMI 的潛在生物標(biāo)志物,小鼠試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)微小RNA-195(microRNA-195,miR-195)對(duì)于心肌細(xì)胞有促凋亡作用[4]。本研究旨在分析AMI 患者血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS的檢測(cè)價(jià)值,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。
1.1 對(duì)象 選擇2019 年4 月至2020 年10 月平陽(yáng)縣人民醫(yī)院收治的AMI 患者105 例作為觀察組,另?yè)裢诒驹航】刁w檢者94 名作為對(duì)照組。觀察組男64 例,女41 例;年齡25~73(58.34±9.41)歲;吸煙史43 例;發(fā)病時(shí)間2~21(10.24±1.32)h;冠狀動(dòng)脈(下稱冠脈)狹窄程度評(píng)分<40 分25 例,40~60分27 例,61~80 分33 例,>80 分20 例;心電圖QRS 積分<3 分36 例,3~4 分49 例,>4 分20 例。對(duì)照組男57 名,女37 名;年齡26~72(59.16±10.22)歲;吸煙史38 名。兩組對(duì)象一般資料比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn):符合AMI 診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];冠脈造影檢查顯示冠脈狹窄>50%;入院時(shí)均伴有胸悶、心悸等癥狀;在平陽(yáng)縣人民醫(yī)院接受經(jīng)皮冠脈介入治療,且成功植入支架;臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):嚴(yán)重肝腎功能不全;合并呼吸系統(tǒng)疾病或呼吸道感染;心力衰竭;心臟瓣膜疾病。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查通過(guò)(批準(zhǔn)文號(hào):LW-2023-63),兩組對(duì)象或家屬均知情同意。
1.2 方法
1.2.1 血清指標(biāo)檢測(cè) 觀察組在入院后12 h 內(nèi)采集靜脈血2 mL,對(duì)照組于體檢當(dāng)天采集空腹靜脈血2 mL。室溫下靜置1 h,以3 000 r/min 離心10 min,保存于-20 ℃冰箱中。采用RT-PCR 法定量檢測(cè)miR-195 水平;采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清sST2、Myo 和CatS 水平。試劑盒均由武漢明德生物科技有限公司提供。
1.2.2 治療方法 觀察組入院后立即給予阿司匹林片(規(guī)格:0.3 g/粒,國(guó)藥準(zhǔn)字:H22024700,長(zhǎng)白山制藥股份有限公司)、硫酸氫氯吡格雷片(規(guī)格:75 mg/片,國(guó)藥準(zhǔn)字:H20213330,浙江京新藥業(yè)股份有限公司)口服治療,術(shù)中給予肝素鈉注射液(規(guī)格:2 mL/1 000 U,國(guó)藥準(zhǔn)字:H51021210,成都市海通藥業(yè)有限公司)10 000 U,建立靜脈通道。經(jīng)冠脈造影術(shù)檢查后,對(duì)梗死血管直接行經(jīng)皮冠脈腔內(nèi)血管成形術(shù)治療,并植入冠脈支架。
1.2.3 隨訪方法 觀察組患者出院后通過(guò)電話、門診等形式隨訪6 個(gè)月,根據(jù)其預(yù)后情況(再發(fā)胸痛癥狀、缺血再入院、死亡),將觀察組患者分為預(yù)后不良組24 例和預(yù)后良好組81 例,對(duì)兩組患者血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平進(jìn)行比較,并分析以上指標(biāo)對(duì)AMI 患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以表示,組間比較采用兩獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn),方差不齊時(shí)采用t'檢驗(yàn)。采用Pearson 秩相關(guān)對(duì)血漿sST2、Myo、CatS 和miR-195 的相關(guān)性進(jìn)行分析。采用ROC 曲線評(píng)估以上指標(biāo)對(duì)于AMI 預(yù)后的預(yù)測(cè)效能。采用單因素以及多因素Cox 回歸分析影響AMI 患者預(yù)后的相關(guān)因素。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 兩組對(duì)象血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平比較 觀察組患者血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見(jiàn)表1。
表1 兩組對(duì)象血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平比較
2.2 血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 的相關(guān)性分析 血漿miR-195 與sST2、Myo、CatS 均呈正相關(guān)(r=0.606、0.522、0.347,均P<0.05),Myo 與sST2、CatS 均呈正相關(guān)(r=0.460、0.401,均P<0.05),CatS與sST2 呈正相關(guān)(r=0.321,P<0.05),見(jiàn)圖1-6。
圖1 血漿miR-195 與sST2 相關(guān)性
圖2 血漿miR-195 與Myo 相關(guān)性
圖3 血漿miR-195 與CatS 相關(guān)性
圖4 血漿Myo 與sST2 相關(guān)性
圖5 血漿Myo 與CatS 相關(guān)性
圖6 血漿CatS 與sST2 相關(guān)性
2.3 預(yù)后不良組、預(yù)后良好組一般資料及血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平比較 預(yù)后不良亞組患者血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平高于預(yù)后良好亞組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),見(jiàn)表2。
表2 不同預(yù)后患者一般資料及血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平比較
2.4 AMI 患者不良預(yù)后發(fā)生的Cox 回歸分析 單因素及多因素Cox 回歸分析顯示,血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 水平異常升高均是導(dǎo)致AMI 患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素(均P<0.05),見(jiàn)表3。
表3 AMI 患者不良預(yù)后發(fā)生的Cox 回歸分析
2.5 血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 對(duì)AMI 患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值分析 血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 4 者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于AMI 患者預(yù)后的AUC 值、靈敏度均高于單一檢測(cè)(均P<0.05),見(jiàn)表4 和圖7。
圖7 血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 預(yù)測(cè)AMI 患者預(yù)后的ROC 曲線
表4 血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 對(duì)AMI 患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值分析
AMI 主要是因冠脈閉塞、血流中斷,引起局部心肌缺血性壞死,是患者致殘和死亡的主要原因之一[6]。AMI 是臨床常見(jiàn)的危害人類健康的疾病之一,雖然臨床對(duì)心血管疾病的預(yù)防和治療方法均進(jìn)行了完善,但死亡率仍居高不下。AMI 的發(fā)生會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)胸痛、心肌損傷或缺血等,其主要病因與暴飲暴食、吸煙、過(guò)度飲酒等有關(guān)。研究證實(shí)隨著近年來(lái)人們生活飲食的變化,AMI 的發(fā)病率日趨上升,且發(fā)病年齡逐漸趨于年輕化[7]。早期診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)對(duì)其治療至關(guān)重要。心電圖對(duì)AMI 治療有較好的指導(dǎo)作用,但臨床發(fā)現(xiàn)約50%的AMI 患者無(wú)心電圖的特異性變化[8]。高敏肌鈣蛋白Ⅰ(hypersensitive-troponin I,hs-TnI)等新型心肌損傷標(biāo)志物水平升高通常存在一定滯后性,故也存在一定局限。肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脫氫酶、肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)等常規(guī)心肌酶參數(shù)一般在AMI 發(fā)生后的4~8 h 后上述參數(shù)才會(huì)升高,且CK、CK-MB 的活性一般在2~4 d 內(nèi)就會(huì)恢復(fù)正常,無(wú)法判斷心肌受損情況[9]。因此常規(guī)心肌酶生化參數(shù)在AMI 的診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)方面仍具有一定的局限性。
miRNA 在細(xì)胞受損時(shí),可快速釋放入血液中,并可在循環(huán)體液中保持一段時(shí)間[10]。張淑華等[11]研究表明miR-195 在AMI 患者胸痛發(fā)生4 h 血漿中即可檢測(cè)到升高,且隨著胸痛時(shí)間的增加而升高。本研究中也表明AMI 患者血漿miR-195 水平顯著升高,與其研究一致??缒ば问絊T2(membrane-bound ST2,ST2L)是一個(gè)力學(xué)激活系統(tǒng),可發(fā)揮抗心肌纖維化、抗心肌細(xì)胞肥大、減少細(xì)胞壞死等心臟保護(hù)作用[12]。在缺氧情況下,心肌細(xì)胞部分凋亡,血清中游離的sST2 可作為誘騙受體與IL-33 結(jié)合,削弱ST2L 的心臟保護(hù)作用。既往研究表明AMI 發(fā)生后早期sST2 顯著升高[13],本研究中也發(fā)現(xiàn)AMI 患者血清sST2 水平顯著高于對(duì)照組,與上述結(jié)果一致。分析其可能,可能是AMI 發(fā)生后部分心功能喪失,導(dǎo)致心室壁機(jī)械張力增加,心肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生大量sST2。Myo 是一種氧結(jié)合血紅素蛋白,存在于橫紋肌胞質(zhì)中,可結(jié)合和釋放氧氣,有利于氧氣在肌肉中的分布。因Myo 在心肌中含量較為豐富,相對(duì)分子量較小,故在心肌損傷的早期即可大量漏至血中,是AMI 發(fā)生后可早期檢出的心肌損傷標(biāo)志之一[14-15]。本研究結(jié)果也顯示觀察組患者血清Myo 水平顯著高于對(duì)照組,與既往研究結(jié)果相一致[16]。CatS是具有保守活性的三維囊,包括動(dòng)脈粥樣硬化、腦卒中等多種疾病都認(rèn)為與CatS 代謝紊亂有關(guān)。有學(xué)者通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小鼠主動(dòng)脈壁重構(gòu)以及動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程可以受到血清CatS 水平高低的影響[17]。本研究中,也發(fā)現(xiàn)觀察組患者血清CatS 水平高于對(duì)照組,提示血清CatS 與AMI 的發(fā)生密切相關(guān)。
本研究結(jié)果顯示血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 之間均呈正相關(guān),且單因素以及多因素Cox 回歸分析均證實(shí)血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 的異常升高是導(dǎo)致AMI 患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素,提示血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 的高表達(dá)可預(yù)測(cè)AMI 患者不良預(yù)后的發(fā)生。李玉坤等[18]研究同樣發(fā)現(xiàn)血清Myo 的高表達(dá)可增加AMI 患者心血管事件風(fēng)險(xiǎn)。分析其原因,AI 的發(fā)生會(huì)導(dǎo)致心肌細(xì)胞缺血缺氧,激活機(jī)體炎癥反應(yīng),而Myo 可作為反映急性期損傷的有效指標(biāo)迅速上升,而當(dāng)心功能不全,梗死周圍心肌進(jìn)行性壞死,梗死擴(kuò)散時(shí),持續(xù)小量的Myo、miR-195 會(huì)釋放入血,故血清Myo 的高表達(dá)可能提示AI 患者預(yù)后差。絕大多數(shù)AMI 的發(fā)生是由動(dòng)脈粥樣硬化引起的,CatS 的分泌和釋放增加,會(huì)觸發(fā)體內(nèi)大量泡沫細(xì)胞的形成,加快斑塊的不穩(wěn)定性,同時(shí)可促進(jìn)單核細(xì)胞向內(nèi)膜下部位遷移,促進(jìn)纖維斑塊的形成,進(jìn)而加重病情,影響預(yù)后[19]。進(jìn)一步通過(guò)ROC 曲線分析得出,血漿miR-195、sST2、Myo和CatS 水平聯(lián)合對(duì)于AMI 患者預(yù)后的AUC 值、靈敏度均高于單一檢測(cè),提示血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 聯(lián)合可提高對(duì)于AMI 預(yù)后的預(yù)測(cè)效能。分析其原因,Myo 在心肌、骨骼肌中均存在,miR-195、sST2 受高敏感性的影響,可能在部分炎癥性疾病中也可檢測(cè)到,因此單一檢測(cè)仍存在一定的局限性,通過(guò)4 者聯(lián)合可較好的彌補(bǔ)上述局限。
綜上所述,AMI 患者均存在血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 高表達(dá),且血漿miR-195、sST2、Myo 和CatS 相互呈正相關(guān),其高表達(dá)與患者預(yù)后不良密切相關(guān),將其聯(lián)合可較好的預(yù)測(cè)AMI 患者預(yù)后情況。但本研究仍存在一定的局限,為單中心小樣本回顧性研究,部分結(jié)果可能存在一定的偏差,仍有待于后續(xù)進(jìn)一步完善。