劉志強(qiáng)

香河縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北廊坊 065400

0 引言

奶牛乳房炎是化學(xué)、物理或病原微生物等刺激乳腺組織而引起的炎癥反應(yīng)，多由細(xì)菌、真菌、病毒等非特定性病原微生物感染乳腺引起，是影響奶牛養(yǎng)殖效益的疾病之一，對(duì)奶牛機(jī)體健康危害較大，可以改變?nèi)橹砘匦?，降低奶牛生產(chǎn)性能和乳品質(zhì)量，給奶牛養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失[1，2]。針對(duì)該病的治療，通常采用抗生素、化學(xué)合成類藥對(duì)感染乳腺的組織進(jìn)行局部治療或全身性炎癥治療。雖然治療效果明顯，但是臨床上存在濫用抗生素等現(xiàn)象，易引起耐藥菌株不斷擴(kuò)大、耐藥性增強(qiáng)和藥物殘留超標(biāo)等問(wèn)題。因此，需要開發(fā)研究抗生素替代品藥物，以用于奶牛乳房炎防治。

植物提取物含有多種生物活性成分，不僅具有安全、綠色、無(wú)耐藥性和低殘留等諸多特點(diǎn)，而且具有抗炎、抑菌、不容易產(chǎn)生耐藥、抗氧化、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生理功效[3～5]。近年來(lái)，有關(guān)植物提取物應(yīng)用于奶牛繁殖障礙疾病的研究較多，但多是對(duì)單一植物提取物或者體外抑菌研究，對(duì)復(fù)合植物提取物應(yīng)用于奶牛乳房炎影響的研究較少。在畜禽養(yǎng)殖領(lǐng)域，復(fù)合植物提取物是按照中獸醫(yī)學(xué)理論和植物藥效成分，將多種提取物有效成分按比例混合在一起研制而成。由于植物提取物種類眾多，成分復(fù)雜多樣，配伍不同，產(chǎn)生的治療效果也存在差別。基于此，本研究針對(duì)奶牛乳房炎的發(fā)病機(jī)理和病因，以清熱解毒、抗菌消炎、消腫止痛、活血化瘀為組方原則，選取益母草、金銀花、蒲公英、連翹等4 種植物進(jìn)行加工提起研制成復(fù)合植物提取物，應(yīng)用于患病奶牛，觀察其對(duì)奶牛泌乳量和乳汁pH值、導(dǎo)電率、體細(xì)胞數(shù)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、乳酸脫氫酶（LDH）和白蛋白（ALB）等指標(biāo)的影響，以評(píng)價(jià)4 種復(fù)合植物提取物治療奶牛乳房炎的治療成效。

1 材料與方法

1.1 復(fù)合植物提取物

益母草、金銀花、蒲公英、連翹的提取物委托河北省綠川生物科技有限公司制備，采用乙醇提取法，每種植物原料按照1∶1∶1∶1重量比混合均勻，工藝流程主要包括：原料→乙醇提取→濃縮→浸膏→噴霧干燥→粉碎、混合、包裝。4 種植物提取物活性有效成分見(jiàn)表1。

表1 4 種植物提取物生物活性成分含量 單位：%

1.2 主要儀器

SP60牛奶電導(dǎo)率檢測(cè)儀、牛奶全自動(dòng)生化分析儀，均購(gòu)自北京海誼科技有限公司；筆式牛奶pH計(jì)牛奶酸度計(jì)，購(gòu)自于上海暉望工貿(mào)有限公司；Milk CELL 100牛奶體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，購(gòu)自于天津博耘科技有限公司；AXTGL16M臺(tái)式冷凍高速離心機(jī)，購(gòu)自于鹽城市安信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取確診為乳房炎的奶牛24 頭，隨機(jī)分為2 組（Ⅰ組、Ⅱ組），每組12 頭。試驗(yàn)Ⅰ組采用5 倍稀釋后的復(fù)合植物提取物治療乳房炎，自由飲用，連續(xù)用藥7 天。試驗(yàn)Ⅱ組作為陽(yáng)性對(duì)照，采用常規(guī)抗生素治療，連續(xù)用藥7 d。另選取無(wú)乳房炎的健康奶牛12 頭為試驗(yàn)Ⅲ組，作為陰性對(duì)照，采用10 倍稀釋后的復(fù)合植物提取物，自由飲用，連續(xù)用藥7 d。于試驗(yàn)用藥前1 天和用藥第7 天，收集每頭奶牛早、中、晚的乳樣共10 mL，混勻，裝入離心管。同時(shí)記錄每頭奶牛的產(chǎn)奶量。

1.3.1 乳汁pH值、電導(dǎo)率和體細(xì)胞數(shù)的測(cè)定

按照儀器說(shuō)明書，分別使用筆式牛奶PH計(jì)牛奶酸度計(jì)、SP60牛奶電導(dǎo)率檢測(cè)儀和Milk CELL 100牛奶體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定乳汁的pH值、電導(dǎo)率、體細(xì)胞數(shù)含量。

1.3.2 乳清LDH、ALB和ALT含量的測(cè)定

將收集的乳樣取5 mL，經(jīng)3 000 r/min離心3～5 min，棄取乳脂，再經(jīng)12 000 r/min高速離心5 min，收集乳清，并按照試劑盒說(shuō)明書采用牛奶全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定乳清中的LDH、ALB和ALT含量。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel整理后，采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)合植物提取物對(duì)奶牛乳房炎乳汁中電導(dǎo)率和體細(xì)胞數(shù)的影響

由表2可知，用藥前1 天，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組的電導(dǎo)率、體細(xì)胞數(shù)均極顯著高于試驗(yàn)Ⅲ組（P＜0.01）。在連續(xù)用藥治療的第7 天時(shí)，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組的電導(dǎo)率、體細(xì)胞數(shù)均極顯著低于試驗(yàn)Ⅱ組（P＜0.01），但試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅲ組差異不顯著（P＞0.05）。

表2 復(fù)合植物提取物對(duì)奶牛乳房炎乳汁中電導(dǎo)率和體細(xì)胞數(shù)的影響

2.2 復(fù)合植物提取物對(duì)奶牛乳房炎乳汁產(chǎn)奶量和pH 值的影響

由表3可知，用藥前1 天，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組的產(chǎn)奶量極顯著低于試驗(yàn)Ⅲ組（P＜0.01），pH值極顯著高于試驗(yàn)Ⅲ組（P＜0.01）。連續(xù)用藥治療第7 天時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組產(chǎn)奶量極顯著低于試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅲ組（P＜0.01），而試驗(yàn)Ⅱ組pH值顯著大于試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組（P＜0.05）。

表3 復(fù)合植物提取物對(duì)奶牛乳房炎乳汁產(chǎn)奶量和pH 值的影響

2.3 復(fù)合植物提取物對(duì)奶牛乳房炎乳清中LDH、ALB 和ALT 含量的影響

由表4可知，用藥前1 天，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組的LDH、ALB、ALT含量均極顯著高于試驗(yàn)Ⅲ組（P＜0.01）。連續(xù)用藥治療第7 天時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組的LDH、ALB、ALT含量極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅲ組（P＜0.01），而試驗(yàn)Ⅰ組的LDH、ALB、ALT含量與試驗(yàn)Ⅲ組差異不顯著（P＞0.05）。

表4 復(fù)合植物提取物對(duì)奶牛乳房炎乳清中 LDH、ALB 和ALT 含量的影響

3 討論

奶牛乳房炎是由于機(jī)體生理狀態(tài)和代謝改變、乳房損傷、環(huán)境性或接觸傳染性病原微生物等引起的乳腺炎癥反應(yīng)，不僅影響奶牛機(jī)體健康，而且改變血液指標(biāo)、乳汁成分和理化特性?；既榉垦椎哪膛Ｔ谘仔砸蜃幼饔孟?，血管通透性增強(qiáng)，腺泡腔分布大量脫落的上皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及白細(xì)胞，引起體細(xì)胞數(shù)量增多[6]。此外，患乳房炎奶牛的一系列病理反應(yīng)還將導(dǎo)致電導(dǎo)率、pH值和酶類物質(zhì)發(fā)生變化[7]。

奶牛乳房炎會(huì)導(dǎo)致奶牛產(chǎn)奶量出現(xiàn)不同程度的下降，影響奶業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。乳中體細(xì)胞主要包括淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和上皮細(xì)胞，是反映奶牛乳腺健康狀況的常用指標(biāo)，可通過(guò)檢測(cè)體細(xì)胞數(shù)量多少判定乳房炎發(fā)病程度。健康泌乳牛乳腺中體細(xì)胞數(shù)較少，參照我國(guó)《奶牛隱性乳房炎快速診斷技術(shù)（NY/T2692-2015）》規(guī)定，健康奶牛乳汁中體細(xì)胞數(shù)應(yīng)低于50 萬(wàn)個(gè)/mL。而在奶牛乳腺組織發(fā)生炎癥時(shí)，大量淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞隨血液循環(huán)遷移至乳腺中，導(dǎo)致乳汁中體細(xì)胞數(shù)量異常增加。乳腺炎癥破壞機(jī)體鹽類物質(zhì)代謝平衡環(huán)境，引起牛乳的pH值、鈉離子、氯離子濃度和電導(dǎo)率增加[8]。

本研究中采用益母草、金銀花、蒲公英、連翹復(fù)合提取物對(duì)乳房炎奶牛連續(xù)治療7 天后，試驗(yàn)Ⅰ組與治療前1 天比較，產(chǎn)奶量提高了10.29%，而試驗(yàn)Ⅱ組、試驗(yàn)Ⅲ組較治療前1 天分別提高2.40%和4.46%，且試驗(yàn)Ⅱ組于第7 天產(chǎn)奶量顯著低于其他兩組。在經(jīng)過(guò)7 天治療后，試驗(yàn)Ⅰ組的電導(dǎo)率、pH值和體細(xì)胞數(shù)量與試驗(yàn)Ⅲ組差異不顯著，試驗(yàn)Ⅱ組與試驗(yàn)Ⅲ組差異顯著或極其顯著，這表明表明利用復(fù)合植物提取物治療奶牛乳房炎的效果優(yōu)于抗生素，且各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)與健康奶牛相當(dāng)，可減輕乳腺炎癥，有助于提高泌乳性能，對(duì)健康奶牛也起到了乳房炎預(yù)防效果。

轉(zhuǎn)氨酶是細(xì)胞和組織進(jìn)行物質(zhì)代謝的催化劑，尤其對(duì)蛋白質(zhì)代謝具有催化氨基酸脫氨基作用，其活性越高，表明氨基酸氧化分解能力越強(qiáng)，動(dòng)物機(jī)體利用蛋白質(zhì)能力下降。ALT是反映肝臟功能的重要指標(biāo)之一，主要分布于肝臟細(xì)胞，并參與蛋白質(zhì)代謝的轉(zhuǎn)氨酶，當(dāng)濃度升高表明肝臟細(xì)胞受到損傷[9]。ALB可以反映動(dòng)物肝臟功能和免疫機(jī)能強(qiáng)弱。LDH主要來(lái)自被損害的上皮細(xì)胞和大量的乳汁白細(xì)胞，乳汁中LDH活性的增加充分反映了白細(xì)胞大量聚集的炎癥過(guò)程和乳腺組織的損害程度，LDH是反映乳腺感染的重要指標(biāo)之一[10]。夏志等[11]報(bào)道，ALB與奶牛是否患乳房炎呈極顯著相關(guān)，ALT與奶牛乳房炎呈顯著相關(guān)。兩種酶活性變化可作為奶牛乳房炎患病與否以及患病程度的一種新的血液學(xué)指示指標(biāo)。本研究中，經(jīng)過(guò)7 天治療，試驗(yàn)Ⅰ組ALB、ALT和LDH濃度與試驗(yàn)Ⅲ組差異不顯著，而試驗(yàn)Ⅱ組極顯著高于試驗(yàn)Ⅲ組，表明復(fù)合植物提取物能降低患病奶牛血液中ALT和LDH的濃度，從而改善肝臟功能和提高免疫機(jī)能。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，植物提取物可以減輕乳腺組織炎癥反應(yīng)，改善奶牛生產(chǎn)性能和乳汁理化特性，且治療效果優(yōu)于抗生素。