劉曉寧，王衛(wèi)國(guó)，石云霄，班高亞，姜濤，王國(guó)良，張海龍

［1.開(kāi)封市中醫(yī)院 心病科，河南 開(kāi)封 475000；2.開(kāi)封市中醫(yī)院 CCU病房，河南 開(kāi)封 475000；3.河南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（免疫學(xué)教研室），河南 開(kāi)封 475000］

糖尿病為一種常見(jiàn)內(nèi)分泌疾病，其發(fā)生及發(fā)展與患者自身飲食、生活習(xí)慣密切相關(guān)［1］。心肌病為糖尿病病情進(jìn)展至一定階段的常見(jiàn)并發(fā)癥，可給患者生活質(zhì)量及預(yù)后造成嚴(yán)重影響［2］?？蓪?dǎo)致糖尿病患者并發(fā)心肌病的危險(xiǎn)因素較多，目前公認(rèn)的致病因素主要包括高齡、高血糖、高血脂及胰島素抵抗［3］。研究指出［4］，胞漿內(nèi)模式識(shí)別受體與多種蛋白質(zhì)復(fù)合而成的炎性小體在糖尿病的發(fā)生、發(fā)展中也有重要作用，NLRP3 為炎性小體的主要成員，其水平升高與心肌缺血再灌注損傷、急性心肌梗死均有密切聯(lián)系。目前認(rèn)為，機(jī)體長(zhǎng)期處于高糖刺激下可導(dǎo)致大量活性氧（ROS）產(chǎn)生，高表達(dá)ROS 可釋放大量腺苷三磷酸酶（ATP）并導(dǎo)致線粒體功能損傷［5］。除此之外，LCB3 及p63 表達(dá)上升可促使細(xì)胞發(fā)生自噬反應(yīng)，也是導(dǎo)致糖尿病并發(fā)心肌病的重要原因［6］。本研究主要探討糖尿病并發(fā)心肌病的危險(xiǎn)因素及與NLRP3 炎性小體表達(dá)水平的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文為前瞻性研究，以2021 年1 月至2022年10 月開(kāi)封市中醫(yī)院收治的120 例糖尿病患者為研究對(duì)象，根據(jù)是否合并心肌病將入組患者分為合并組（50 例，合并心肌?。?、未合并組（70 例，未合并心肌?。?，兩組患者一般資料比較見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般資料比較

納入標(biāo)準(zhǔn)：①入組患者均符合糖尿病診斷要點(diǎn)［7］；②合并組患者均符合心肌病診斷要點(diǎn)［8］；③均知悉此次研究試驗(yàn)?zāi)康募皟?nèi)容，同意獲取并公開(kāi)既往臨床資料。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴其他內(nèi)分泌代謝性疾病者；②伴其他心肺、肝腎功能障礙者；③臨床資料缺失者。

1.2 方法

收集并對(duì)比兩組患者的一般資料、臨床資料，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)單因素分析、Logistic 多因素回歸分析歸納可導(dǎo)致糖尿病并發(fā)心肌病的危險(xiǎn)因素；比較兩組患者的心功能指標(biāo)以及NLRP3 炎性小體表達(dá)水平，經(jīng)Spearman 相關(guān)性系數(shù)檢驗(yàn)二者相關(guān)性。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)學(xué)單因素分析：①一般資料包括性別、年齡（≥50 歲、＜50 歲）、糖尿病分型（1 型糖尿病、2 型糖尿病）、糖尿病病程（≥10 年、＜10 年）、體重指數(shù)（≥24.00 kg/m2、＜24.00 kg/m2）等；②臨床資料包括血糖水平、血脂水平、胰島素功能、線粒體功能、細(xì)胞自噬情況，其中血糖水平檢測(cè)指標(biāo)包括空腹血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1c），血脂水平檢測(cè)指標(biāo)包括甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、極低密度脂蛋白（VLDL），胰島素功能檢測(cè)指標(biāo)包括空腹胰島素（RI）、空腹C 肽（C-P），線粒體功能檢測(cè)指標(biāo)包括ROS 表達(dá)率、ATP，細(xì)胞自噬情況檢測(cè)指標(biāo)包括自噬標(biāo)志因子LC3B 高表達(dá)、p63 等。比較兩組患者上述指標(biāo)間的差異，當(dāng)P＜0.05 時(shí)認(rèn)為該因素可能會(huì)導(dǎo)致心肌病發(fā)生。

Logistic 多因素回歸分析［9］：由于自變量、因變量間存在非線性關(guān)系，本研究將是否并發(fā)心肌病設(shè)為自變量，其余單因素設(shè)為因變量，將存在一定差異的單因素納入Logistic 多因素回歸分析，當(dāng)P＜0.05 時(shí)認(rèn)為該因素為導(dǎo)致糖尿病并發(fā)心肌病的危險(xiǎn)因素。

相關(guān)性分析［10］：比較兩組患者心功能及NLRP3 表達(dá)水平間的差異，心功能指標(biāo)包括左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室舒張末期內(nèi)徑（LVDD）；使用Spearman 相關(guān)性系數(shù)對(duì)NLRP3 表達(dá)及心功能進(jìn)行相關(guān)性分析，當(dāng)P＜0.05 時(shí)認(rèn)為二者顯著相關(guān)，r＞0 表示正相關(guān)，r＜0 表示負(fù)相關(guān)，r=0 表示零相關(guān)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0 處理。計(jì)數(shù)資料以百分率（%）表示，用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 糖尿病并發(fā)心肌病的統(tǒng)計(jì)學(xué)單因素分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)單因素分析結(jié)果顯示，兩組患者的年齡、體重指數(shù)、糖尿病病程、血糖水平、血脂水平、胰島素功能、線粒體功能、細(xì)胞自噬情況均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 糖尿病并發(fā)心肌病的統(tǒng)計(jì)學(xué)單因素分析 ［n(%)］

2.2 糖尿病并發(fā)心肌病的Logistic 多因素回歸分析

結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)單因素分析結(jié)果，對(duì)各單因素分別進(jìn)行賦值：將年齡≥50 歲、糖尿病病程≥10 年、體重指數(shù)≥24 kg/m2、FBG≥10 mmol/L、HbA1c≥10%、TG≥1.70 mmol/L、TC≥6.45 mmol/L、VLDL≥1.0 mmol/L、RI≥25 pmol/L、C-P≥1.3 nmol/L、ROS 表達(dá)率≥90%、ATP≥20.33 U、LC3B 高表達(dá)、p63 高表達(dá)賦值為1，反之賦值為0。Logistic 多因素回歸分析結(jié)果顯示，糖尿病病程≥10 年、FBG≥10 mmol/L、HbA1c≥10%、VLDL≥1.0 mmol/L、RI≥25 pmol/L、C-P≥1.3 nmol/L、ROS 表達(dá)率≥90%、ATP≥20.33 U、LC3B 高表達(dá)、p63 高表達(dá)均是導(dǎo)致糖尿病并發(fā)心肌病的危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表3。

表3 糖尿病并發(fā)心肌病的Logistic 多因素回歸分析

2.3 兩組患者的心功能及NLRP3 表達(dá)水平比較

經(jīng)檢測(cè)，合并組的LVEF 低于未合并組，LVDD、NLRP3 表達(dá)均高于未合并組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 兩組患者的心功能及NLRP3 表達(dá)水平比較（）

表4 兩組患者的心功能及NLRP3 表達(dá)水平比較（）

2.4 NLRP3 表達(dá)與心功能相關(guān)性分析

經(jīng)Spearman 相關(guān)性系數(shù)檢驗(yàn)，NLRP3 表達(dá)水平與LVEF 負(fù)相關(guān)，與LVDD 正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表5。

表5 NLRP3 表達(dá)與心功能相關(guān)性分析

3 討論

糖尿病為一種常見(jiàn)的代謝性疾病，其發(fā)病與患者個(gè)人不良飲食、作息習(xí)慣密切相關(guān)，近年隨人們生活方式不斷變化，此病患病率正逐步上升［11］。心肌病為糖尿病患者病情進(jìn)展至一定階段的常見(jiàn)并發(fā)癥，可嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，心肌病引起的心肌組織、心功能損傷也是導(dǎo)致患者死亡的重要因素，血糖、血脂水平異常高于正常控制標(biāo)準(zhǔn)及胰島素抵抗均為糖尿病并發(fā)心肌病的重要原因［12］。近年有研究指出［13］，機(jī)體固有免疫系統(tǒng)介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在糖尿病的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，NOD 受體能通過(guò)識(shí)別機(jī)體刺激信號(hào)并活化為NLRP3 炎癥小體而介導(dǎo)白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等強(qiáng)力炎性介質(zhì)釋放，進(jìn)而導(dǎo)致胰島β 細(xì)胞損失或胰島素抵抗，與患者并發(fā)心肌病或有一定關(guān)聯(lián)。

本研究結(jié)果顯示，兩組患者的年齡、體重指數(shù)、糖尿病病程、血糖水平、血脂水平、胰島素功能、線粒體功能、細(xì)胞自噬情況均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示除公認(rèn)的年齡、體重指數(shù)、糖尿病病程、血糖血脂水平異常標(biāo)高及胰島素抵抗等因素外，線粒體損傷以及細(xì)胞自噬在心肌病的發(fā)生、發(fā)展中也有一定影響。本研究通過(guò)Logistic多因素回歸分析后結(jié)果顯示，糖尿病病程≥10 年、FBG≥10 mmol/L、HbA1c≥10%、VLDL≥1.0 mmol/L、RI≥25 pmol/L、C-P≥1.3 nmol/L、ROS 表達(dá)率≥90%、ATP≥20.33 U、LC3B 高表達(dá)、p63 高表達(dá)均是導(dǎo)致糖尿病并發(fā)心肌病的危險(xiǎn)因素。HbA1c 為糖基化末期（AGEs）主要產(chǎn)物，高水平AGEs 能促使細(xì)胞外基質(zhì)改變并導(dǎo)致血管發(fā)生纖維化病變，可對(duì)患者心功能造成一定影響［14］。隨心肌纖維化程度加劇，大量脂質(zhì)積聚于血管即可發(fā)生脂毒性，VLDL 為反映脂毒性的重要標(biāo)志物［15］。若機(jī)體長(zhǎng)期處于高血糖刺激可導(dǎo)致體內(nèi)ROS 含量增加，高表達(dá)ROS 為損傷線粒體功能的主要機(jī)制，過(guò)量ROS 可增強(qiáng)線粒體氧化磷酸化反應(yīng)，進(jìn)而上調(diào)ATP 表達(dá)［16］。受損線粒體的組配結(jié)構(gòu)紊亂后可導(dǎo)致其密度降低甚至膜破裂現(xiàn)象發(fā)生，以上均是引起心肌損傷或加劇心肌功能異常的重要原因［17］。研究指出［18］，低水平自噬是維持細(xì)胞功能、質(zhì)量穩(wěn)定的重要基礎(chǔ)，若機(jī)體存在胰島素抵抗可增強(qiáng)細(xì)胞自噬功能并導(dǎo)致心肌損傷，LCB3、p63 均為反映細(xì)胞自噬功能的重要標(biāo)志物。已有的研究指出［19］，NLRP3 炎癥小體表達(dá)水平與糖尿病患者的胰島素抵抗呈顯著正相關(guān)，其機(jī)制考慮與高表達(dá)NLRP3 釋放大量IL-1β 后損傷胰島β 細(xì)胞功能相關(guān)。胰島素抵抗與糖尿病并發(fā)心肌病有密切關(guān)聯(lián)，通過(guò)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)患者的NLRP3 表達(dá)或可實(shí)現(xiàn)對(duì)心肌病的有效防治［20］。本研究中，合并組患者的LVEF 低于未合并組，LVDD、NLRP3 均高于未合并組，經(jīng)Spearman 相關(guān)性系數(shù)檢驗(yàn)后得知，NLRP3 表達(dá)水平與LVEF 負(fù)相關(guān)，與LVDD 正相關(guān)。

綜上所述，糖尿病患者并發(fā)心肌病與個(gè)人糖尿病病程、胰島素抵抗、線粒體損傷、細(xì)胞自噬密切相關(guān)，隨LVEF 下降、LVDD 升高，患者的NIRP3 炎癥小體表達(dá)會(huì)顯著上升，與糖尿病并發(fā)心肌病有一定關(guān)聯(lián)。