王 妙,王秀麗,鄶 鵬,王振東
(威海市食品藥品檢驗檢測研究院,山東 威海 264210)
草莓是世界上用量最大的漿果之一,它富含氨基酸、維生素等多種營養(yǎng)物質,其中含有的多酚類物質不僅對人體生長發(fā)育有良好的促進作用[1-2],還能起到消炎和抑制癌細胞生長的作用[3-4]。由于草莓以大棚種植為主,高溫高濕的大棚環(huán)境極易滋生病菌而使其受到害蟲侵害。為保證草莓的品質和成果率,種植戶會在草莓種植過程中使用多種農藥,導致草莓中農藥殘留檢出種類繁多[5-6],因此需要建立一種簡便快速的檢測方法,以便相關部門對草莓進行安全監(jiān)管。
本地市場采購的甜寶草莓;乙腈,色譜純,賽默飛世爾科技(中國)有限公司;硫酸鎂(無水)、氯化鈉,均為分析純,天津市致遠化學試劑有限公司;氟苯脲、氟蟲脲、除蟲脲、滅幼脲,濃度均為100 μg·mL-1,TMstandard。
Qtrap 6500 液相色譜-質譜聯(lián)用儀,美國AB SCIEX;V4DS025 旋渦振蕩器,德國IKA 有限公司;G-16C 高速冷凍離心機、SQP PRACTUMl102-1CN 分析天平(感量0.01 g)、SQP QUINTIX224-1CN分析天平(感量0.000 1 g),均購自德國賽得利斯有限公司;MB550 組織搗碎機,德國WIGGENS 有限公司;GM300 刀式研磨儀,德國萊馳有限公司;MS-NANO-C NANO 凈化管,博納艾杰爾科技。
混合標準儲備溶液:準確量取氟苯脲、氟蟲脲、除蟲脲和滅幼脲標準品各1.00 mL 到10.00 mL 容量瓶內,用乙腈定容至刻度,配制成濃度10 mg·L-1的混合標準儲備液,4 ℃冷藏避光保存,有效期3 個月。
混合標準工作溶液:分別準確吸取0.01 mL、0.02 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.50 mL、1.00 mL和2.00 mL混合標準儲備液,然后用乙腈定容至10.00 mL,分別配制成質量濃度是0.01 μg·mL-1、0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1、1.00 μg·mL-1和2.00 μg·mL-1的標準系列工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用。
1.4.1 制備樣品
稱取樣品500 g,切碎其可食用部分(不可用水洗),并用搗碎機把樣品加工成漿狀。
1.4.2 提取樣品
稱取勻漿試樣10.0 g(準確到0.1 mg),放到50.0 mL離心管內,再加入10.0 mL 乙腈溶液,通過1 min 的渦旋振蕩,然后在高速冷凍離心機上5 000 r·min-1離心5 min,先加入氯化鈉1.0 g,經過1 min 渦旋振蕩,再加入無水硫酸鎂3.0 g,再經過1 min 渦旋振蕩,然后在高速冷凍離心機上6 000 r·min-1離心10 min,留取上清液待測。
1.4.3 凈化樣品
量取上清液1.0 mL,加入到博納艾杰爾MSNANO-C 凈化管中,渦旋振蕩1 min,于高速冷凍離心機中8 000 r·min-1離心5 min,將上清液經過0.22 μm有機相濾膜過濾,以待上機測定。
1.5.1 液相色譜條件
色譜柱:C18柱,Kinetex?(100 mm×2.1 mm,2.6 μm 或1.8 μm);柱溫:30 ℃;流速:0.3 mL·min-1;進樣量:5 μL;流動相:A(1%甲酸水溶液)、B(乙腈),梯度洗脫詳情見表1。
表1 液相色譜的梯度洗脫條件表
1.5.2 質譜條件
離子源:電噴霧源;掃描方式:負離子模式;分辨率:單位分辨率;電噴霧電壓:5 500.0 V;離子源溫度:550 ℃;霧化氣壓力:50.00 psi;輔助氣壓力:50.00 psi;氣簾氣壓力:35.00 psi。其他質譜條件見表2。
表2 4 種苯甲酰脲農藥質譜多反應監(jiān)測情況表
在上述色譜、質譜條件下,對氟苯脲、氟蟲脲、除蟲脲和滅幼脲標準品進行上機測定,色譜圖見圖1。結果發(fā)現(xiàn),4 種苯甲酰脲類農藥的保留時間分別為氟蟲脲(9.27 min)、氟苯脲(8.67 min)、除蟲脲(7.81 min)和滅幼脲(7.98 min)。
圖1 4 種苯甲酰脲類農藥標準品色譜圖
按照1.3 配制的混合標準工作溶液進行線性回歸分析,用所得結果繪制農藥標準曲線,最終通過空白基質加標的方式,確定4 種物質的方法檢出限(以S/N≥3)為0.01~0.02 mg·kg-1。4 種農藥在0.05~2.00 μg·mL-1時,濃度與峰面積呈現(xiàn)出良好的線性關系,相關系數(shù)均在0.999 以上,詳見表3。
表3 線性回歸方程和相關性表
分別向空白樣品中添加濃度為0.01 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1的4 種苯甲酰脲類農藥,進行6 次平行測定,按照1.4 前處理方法提取,1.5 儀器條件測定加標后樣品含量并計算加標回收率,結果見表4。結果發(fā)現(xiàn)平均回收率為85.2%~92.5%,相對標準偏差為2.2%~7.9%。
表4 4 種苯甲酰脲類農藥的加標回收率表
本文以高效液相色譜-串聯(lián)質譜法為基礎,建立了草莓中苯甲酰脲類農藥殘留快速測定的方法,平均回收率為85.2%~92.5%,相對標準偏差為2.2%~7.9%,能夠滿足草莓等果蔬質量安全監(jiān)測量大和高頻的檢測需求,為有效控制草莓質量安全提供了可靠的技術保障。