楊 碩 門 翔
肺癌為臨床患病率極高的腫瘤疾病,非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)為其多見類型,大約占據(jù)肺癌的80%左右[1-2]。由于NSCLC早期大部分無(wú)顯著表現(xiàn),繼而造成多數(shù)患者經(jīng)臨床診斷時(shí)已位于中晚期,從而錯(cuò)過(guò)最為優(yōu)良的手術(shù)治療時(shí)機(jī),造成病情控制難度上漲,嚴(yán)重威脅生命安全[3-4]。臨床需深入研究NSCLC發(fā)生與發(fā)展過(guò)程及其有關(guān)的基因功能轉(zhuǎn)變情況,探尋早期診斷與預(yù)后的評(píng)判指標(biāo),以指導(dǎo)臨床制定更有效的治療方案。臨床有研究表明,細(xì)胞系內(nèi)基因長(zhǎng)鏈非編碼RNA(LincRNA)在調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)與新城代謝內(nèi)具有重要效能,參與轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控與轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控,且腫瘤細(xì)胞凋亡、侵襲等與LincRNA有關(guān)[5]。但臨床關(guān)于細(xì)胞系內(nèi)基因長(zhǎng)鏈非編碼RNA00673(Linc00673)基因在NSCLC中的表達(dá)與其臨床意義相關(guān)研究報(bào)道較為缺乏?;诖?本研究以2018年5月至2019年5月本院收治的62例NSCLC患者為研究對(duì)象,分析Linc00673基因在NSCLC患者癌組織中的表達(dá)與其臨床意義。
選取2018年5月至2019年5月該院診治的62例NSCLC患者,研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):患者經(jīng)病理檢查證實(shí)為NSCLC;預(yù)計(jì)生存期>6個(gè)月;患者病歷有關(guān)資料齊全;未行其他相關(guān)抗腫瘤治療的初治者;患者納入遵照自愿原則,簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):存在神經(jīng)疾患者;伴有凝血功能異常者;存有其他惡性腫瘤者;存有意識(shí)或精神障礙,難以進(jìn)行正常交流者;合并心肝腎等重要臟器功能不全者;存有嚴(yán)重的腦器質(zhì)性疾病者;合并免疫系統(tǒng)病癥者;存在酒精、藥物依賴史者。所有患者中男性35例,女性27例;年齡42~78歲,平均年齡(60.52±7.69)歲;腫瘤直徑2~6 cm,平均直徑(4.23±0.78)cm;體重指數(shù)(BMI)18.6~27.1 kg/m2,平均BMI(23.26±1.57)kg/m2;TNM分期:Ⅰ期15例,Ⅱ期23例,Ⅲ期17例,Ⅳ期7例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:30例有,32例無(wú);吸煙:36例有,26例無(wú);分化程度:低分化30例,中分化20例,高分化12例。
標(biāo)本采集:所有患者均于行手術(shù)治療時(shí),于術(shù)中取其癌組織與癌旁正常組織,留存待檢。檢測(cè)方法:采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)兩組Linc00673基因的表達(dá),采用Trizol法提取癌組織與癌旁正常組織的總RNA,按cDNA合成試劑盒說(shuō)明書分別將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cRNA;之后以Pubmed查詢Linc00673基因序列,設(shè)計(jì)Linc00673基因引物為,上游引物序列5'-CCGTGTAAAGAGGCCAGTGT-3',下游引物序列5'-ACACGAGCCTTCACCATCAG-3',以標(biāo)準(zhǔn)曲線法分析數(shù)據(jù),150bpβ-actin片段作為內(nèi)對(duì)照;標(biāo)準(zhǔn)曲線模板稀釋范圍為10-3-10-8,溶解曲線用以保障擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性,全部反應(yīng)均設(shè)3個(gè)復(fù)孔。依照Linc00673基因表達(dá)水平,將所有患者分為L(zhǎng)inc00673基因高表達(dá)組(n=31)與Linc00673基因低表達(dá)組(n=31)。
①兩組Linc00673基因表達(dá)對(duì)比。②Linc00673基因表達(dá)與NSCLC患者臨床病理特征之間的關(guān)系:收集所有患者性別、年齡、BMI、腫瘤直徑、臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、吸煙等一般資料,探究Linc00673基因表達(dá)與患者上述特征的關(guān)系。③Linc00673基因表達(dá)與NSCLC患者預(yù)后的關(guān)系。
癌組織中Linc00673基因表達(dá)高于癌旁正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖1。
圖1 兩組Linc00673基因表達(dá)對(duì)比
Linc00673基因表達(dá)與NSCLC患者性別、年齡、體重指數(shù)(BMI)、腫瘤直徑無(wú)關(guān)(P>0.05);Linc00673基因表達(dá)與臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、吸煙有關(guān)(P<0.05),見表1。
表1 Linc00673基因表達(dá)與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系(例,%)
Kaplan-Meier結(jié)果顯示:Linc00673基因高表達(dá)NSCLC患者3年生存率[48.39%(15/31)]低于Linc00673基因低表達(dá)患者[74.19%(23/31)],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.351,P=0.037)。見圖2。
NSCLC為肺癌的常見類型,且發(fā)病率呈逐年升高趨勢(shì),對(duì)廣大居民群眾健康及生命安全構(gòu)成較大威脅[6-7]。近些年隨著分子靶向治療、免疫治療的不斷發(fā)展,NSCLC的治療取得較大的進(jìn)展,但NSCLC發(fā)病早期無(wú)特異性臨床表現(xiàn),絕大多數(shù)的患者確診時(shí)已處于中晚期,使得死亡率居高不下[8-9]。臨床探尋一快速有效的檢測(cè)方式,提高NSCLC早期檢出精準(zhǔn)率,指導(dǎo)臨床采取科學(xué)規(guī)范的治療措施,對(duì)于延長(zhǎng)患者生存周期尤為重要[10-11]。
既往臨床常通過(guò)病理學(xué)檢查進(jìn)行NSCLC的早期診斷,但所需時(shí)間較長(zhǎng),且具有一定創(chuàng)傷性,患者接受度較低,難以作為常規(guī)檢查,在臨床的應(yīng)用較為受限[12]。隨著臨床對(duì)生物學(xué)標(biāo)志物的不斷深入研究發(fā)現(xiàn),多種生物因子與NSCLC的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。LincRNA指的是長(zhǎng)度超過(guò)200個(gè)核苷酸,是無(wú)編碼蛋白質(zhì)功能的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物[13-14]。伴隨對(duì)LincRNA的深入分析,LincRNA所存在的巨大功效亦逐步呈現(xiàn)于人們面前。目前,臨床多項(xiàng)研究表明,Linc00673基因在不同的腫瘤組織中的表達(dá)存在顯著性差異,在癌癥的發(fā)生與發(fā)展中扮演重要角色[15]。本研究結(jié)果顯示,癌組織中Linc00673基因表達(dá)高于癌旁正常組織,提示NSCLC患者癌組織內(nèi)的Linc00673基因呈高表達(dá)。本研究結(jié)果顯示,Linc00673基因表達(dá)與NSCLC患者的性別、年齡、BMI、腫瘤直徑無(wú)關(guān);Linc00673基因表達(dá)與患者的臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、吸煙有關(guān),表明Linc00673基因參與NSCLC的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程。本研究Kaplan-Meier結(jié)果顯示:Linc00673基因高表達(dá)的NSCLC患3年生存率[48.39%(15/31)]低于Linc00673基因低表達(dá)患者[74.19%(23/31)],提示Linc00673基因表達(dá)越高,則NSCLC患者的生存率越低,預(yù)后越差。但目前關(guān)于Linc00673基因與NSCLC相關(guān)性的研究仍非常少,對(duì)于Linc00673基因促進(jìn)NSCLC發(fā)生與發(fā)展的作用機(jī)制尚未完全密切,之后臨床還需開展大樣本量的研究,進(jìn)行更深層次的分析,深入了解Linc00673基因與NSCLC患者的關(guān)系,從而為臨床制定更為規(guī)范、有效的治療手段提供參考,以盡可能提升患者生存率。
綜上所述,NSCLC患者癌組織中Linc00673基因呈高表達(dá),其表達(dá)水平與臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、吸煙密切相關(guān),且Linc00673基因表達(dá)越高,NSCLC患者生存率越低。