王宗升，馬冬，邵三敏，呂寧寧，牛營(yíng)，許榮強(qiáng)，賈鑫玉

（青島易邦生物工程有限公司 山東青島 266113）

豬圓環(huán)病毒（porcine circovirus，PCV）是圓環(huán)病毒科的無(wú)囊膜單股環(huán)狀DNA 病毒，其病毒粒子直徑在17nm 左右，是目前發(fā)現(xiàn)的最小的脊椎動(dòng)物病毒之一。根據(jù)其抗原和基因型不同，可分為基本不致病的PCV1 型和致病的PCV2 型和PCV3 型（2015 年發(fā)現(xiàn)），以及2019 年在我國(guó)湖南首次發(fā)現(xiàn)的以呼吸道和消化道癥狀為特征的PCV4 型病毒[1]，其中PCV2 型在自然界中廣泛存在，可感染不同日齡的豬，引發(fā)以斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭、皮炎腎病、壞死性淋巴結(jié)炎等為主要特征的眾多臨床癥狀，嚴(yán)重影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能和生命健康，給我國(guó)乃至全球養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展帶來(lái)巨大威脅。2020 年的一項(xiàng)研究在歐洲8 個(gè)國(guó)家的豬場(chǎng)中均檢測(cè)出PCV2 病毒，檢出率為47%[2]。隨著圓環(huán)病毒的病原學(xué)和致病性研究的不斷深入，2022 年新修訂的《一、二、三類動(dòng)物疫病病種名錄》將其調(diào)整為3 類動(dòng)物疫病，但圓環(huán)病毒的防控工作仍然是影響豬場(chǎng)健康、可持續(xù)發(fā)展的重要前提，應(yīng)持續(xù)保持高度關(guān)注和重視。

1 病毒分布情況

2000 年，該病在我國(guó)首次暴發(fā)和流行，浪洪武等[3]在北京、河北等地豬場(chǎng)分離鑒定出PCV2 型病毒，此后豬圓環(huán)病毒2 型在我國(guó)的污染面不斷擴(kuò)大。2007 年，曹正等[4]在江蘇省15 個(gè)豬場(chǎng)中均檢測(cè)出PCV2 病毒。2009 年，劉健等[5]對(duì)上海周邊的豬場(chǎng)進(jìn)行采樣PCR 檢測(cè)，發(fā)病群體陽(yáng)性檢出率為39.06%，健康群體隱性感染率為13.51%，且PCV-2b 亞型為其主要流行毒株。2020 年，徐麗華等[6]對(duì)浙江部分規(guī)模豬場(chǎng)的329 份臨床病料進(jìn)行PCR 檢測(cè)，PCV2 陽(yáng)性檢出率為27.4%，育肥豬陽(yáng)性檢出率最高為68.8%，優(yōu)勢(shì)毒株是PCV2d，且從遺傳進(jìn)化信息上分析，存在向PCV2e 毒株轉(zhuǎn)變的趨勢(shì)。2021 年，黃曉慧等[7]的研究發(fā)現(xiàn)，在安徽地區(qū)，PCV2d 基因亞型已經(jīng)逐漸過(guò)渡成為主要流行毒株，且Cap 蛋白氨基酸序列在免疫反應(yīng)區(qū)域內(nèi)的變異可能與PCV2 的免疫原性有關(guān)。2017 年，梁?jiǎn)痰萚8]對(duì)遼寧地區(qū)2016—2017 年間屠宰場(chǎng)的3 430 份樣品進(jìn)行了PCR 檢測(cè)，病原學(xué)陽(yáng)性率高達(dá)83.54%和85.62%，且呈逐年上升趨勢(shì)，PCV2d 為其主要流行毒株。2020 年，張海等[9]對(duì)貴陽(yáng)市55 個(gè)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行病料監(jiān)測(cè)，其中PCV2 陽(yáng)性率為21.95%，且陽(yáng)性率與養(yǎng)殖集約化程度成反比。2018 年，趙晶等[10]建立起區(qū)分鑒定PCV1 型、2 型、3 型的三重PCR 方法，并對(duì)廣西地區(qū)2018 年來(lái)的病原情況進(jìn)行了檢測(cè)，PCV2 陽(yáng)性檢出率為56.56%。李海泉等[11]對(duì)四川地區(qū)的14 個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行了抗原檢測(cè)，檢出率為49.2%，且存在明顯的季節(jié)性（春夏易感）。魏春華等[12]在福建、江西、廣東等東南地區(qū)的發(fā)病生豬中，PCV2 陽(yáng)性檢出率為41.9%，且不同亞型之間重組現(xiàn)象普遍。

2 病毒變異程度

與其他單鏈DNA 病毒一樣，豬圓環(huán)病毒存在高突變率和重組率，其中以PCV2 變異程度最高。PCV2 基因組全長(zhǎng)為1 767 bp 或1 768 bp，由11 個(gè)開放閱讀框（ORFs）組成，主要的ORF1 編碼與病毒復(fù)制相關(guān)的復(fù)制酶蛋白（Rep 蛋白），ORF2 編碼與病毒抗原性相關(guān)的衣殼蛋白（Cap 蛋白），也是疫苗研制的靶向蛋白。之前有研究者根據(jù)毒株之間的系統(tǒng)發(fā)育分析將其分為a-f 6 個(gè)亞型，最近根據(jù)全球不同毒株在核酸同源性、地理、宿主和時(shí)間分布上的差異，提出了更系統(tǒng)、全面的a-h 亞型分類辦法[13]。研究發(fā)現(xiàn)，從1996 年到21 世紀(jì)初，PCV-2a 是臨床感染中最常見的基因型，之后十年P(guān)CV-2b 在全球占主導(dǎo)地位，這與全球貿(mào)易頻繁有關(guān)。2010 年P(guān)CV-2d 在中國(guó)首次報(bào)道以來(lái)，隨著PCV-2 疫苗的使用，已成為全球主要的流行毒株，其次是PCV2b 和PCV2a[2]，非洲等欠發(fā)達(dá)地區(qū)流行毒株仍以PCV2a 為主，其余基因型零星存在且為少數(shù)。臨床中常見多種亞型混合感染的情況，在動(dòng)物體內(nèi)持續(xù)產(chǎn)生重組，表現(xiàn)出不同的分子生物學(xué)和流行病學(xué)，且有研究表明，疫苗的使用加大了病毒的進(jìn)化壓力，給診斷、檢測(cè)、防控策略的選擇帶來(lái)難度。

3 免疫抑制明顯

目前認(rèn)為，豬圓環(huán)病毒是產(chǎn)生斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的必要而非唯一要素，之所以對(duì)生豬產(chǎn)業(yè)帶來(lái)巨大威脅，根本在于其引發(fā)的嚴(yán)重免疫抑制，對(duì)機(jī)體獲得性免疫能力的建立影響重大。主要包括在全身性淋巴細(xì)胞衰竭和組織細(xì)胞浸潤(rùn)增殖兩個(gè)方面。一方面，可以在感染初期在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等抗原呈遞細(xì)胞中存在而不復(fù)制，對(duì)PCV2 的免疫抑制和免疫逃避具有一定作用，隨后在多種淋巴細(xì)胞中復(fù)制組裝，通過(guò)抑制淋巴細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞的嚴(yán)重缺失，對(duì)T 淋巴細(xì)胞（主要是CD4+）、B 淋巴細(xì)胞、NK 細(xì)胞等具有明顯的損傷作用[14]，這種變化在外周血和器官組織中都存在，造成胸腺、淋巴結(jié)等淋器組織的損傷和萎縮，臨床表現(xiàn)為全身淋巴結(jié)的顯著腫大和炎癥反應(yīng)（組織細(xì)胞浸潤(rùn)）；另一方面，通過(guò)影響機(jī)體多種細(xì)胞免疫因子來(lái)調(diào)控免疫，無(wú)論是在體內(nèi)還是體外模型中，PCV2 能明顯誘導(dǎo)外周血中免疫抑制因子IL-10（能夠抑制巨噬細(xì)胞，Th1-和NK 細(xì)胞的活性））的合成[15]，且對(duì)產(chǎn)生抗病毒因子IFN-α 的漿樣DC 及產(chǎn)生IL-8 和IFN-γ 的Th1 細(xì)胞具有明顯的損傷作用。

4 混合感染嚴(yán)重

實(shí)際生產(chǎn)中，PCV2 與其他病毒混合感染的情況在實(shí)際生產(chǎn)中普遍存在，常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬細(xì)小病毒、豬肺炎支原體等混合感染，給豬場(chǎng)疫病防控和凈化帶來(lái)了難度。劉杏[16]檢測(cè)了對(duì)吉林、山東等6 省的192 份樣品發(fā)現(xiàn)PCV2 和PRRSV 混合感染率為14.58%；劉東旭等[17]檢測(cè)出10 家規(guī)模場(chǎng)生豬PCV2 和細(xì)環(huán)病感染率44.6%；孫艷永[18]檢測(cè)出吉林部分豬場(chǎng)PRRSV 和PCV2 混合感染率為46.27%。目前，已建立起多種病原的多重PCR 檢測(cè)方法，可供養(yǎng)殖業(yè)主選擇（表1）。

5 討論

目前豬圓環(huán)病毒2 型的有效防控手段主要包括生物防護(hù)和特異性疫苗接種兩種。大量研究已表明，科學(xué)實(shí)施免疫是預(yù)防PCV2的重要手段，中和抗體可有效清除循環(huán)中的病毒，數(shù)量不足與PCV2 復(fù)制增加、嚴(yán)重淋巴樣病變和PCV2-sd 發(fā)展有關(guān)。初乳中母源性中和抗體的存在，可幫助仔豬免受PCV2 感染，對(duì)交配期母豬進(jìn)行免疫很有必要[19]。另一方面，母源抗體在哺乳期和保育期下降且在一定程度上干擾仔豬疫苗接種后的獲得性免疫效果，使動(dòng)物容易再次感染PCV2，Martelli P 等[20]的研究發(fā)現(xiàn)，在高滴度母源抗體保護(hù)下，6 周齡是仔豬接受PCV2 免疫的最佳時(shí)期，但這與母源抗體水平、管理?xiàng)l件、疫苗種類等都有關(guān)系，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況而定。而且，疫苗的聯(lián)合使用是影響免疫效果的另一個(gè)重要因素，所以對(duì)于PCV2 免疫接種來(lái)說(shuō)，疫苗種類和時(shí)間的選擇十分重要。

還需要特別提醒的是，當(dāng)前我國(guó)動(dòng)物疫病防控已從被動(dòng)防御向主動(dòng)凈化轉(zhuǎn)變。2021 年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)《關(guān)于推進(jìn)動(dòng)物疫病凈化工作的意見》，PCV2 作為存在面廣、根除困難、影響重大的疫病種類，已有關(guān)于豬偽狂和PCV2 的聯(lián)合凈化[21]的嘗試，廣大業(yè)主應(yīng)重視借鑒?！?/p>