余可佳 黃 璇 湯余歡 許麗蓉 李 闖 鄧 萍 張 旭 劉 洋 范志勇** 蔣桂韜*
(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,長沙 410128;2.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所,長沙 410128)
錳是家禽生長發(fā)育過程中必需的微量元素之一,在體內(nèi)主要以錳酶(氧化還原酶、羧化酶、水解酶和糖酶等)的形式發(fā)揮作用[1],并且在機(jī)體三大營養(yǎng)物質(zhì)代謝、免疫及造血功能調(diào)節(jié)等諸多方面具有重大影響[2]。錳在吸收過程中容易被單寧、植酸等物質(zhì)吸附形成大分子物質(zhì)被快速降解并排出體外[3],而家禽對錳的需要量較高,缺錳易導(dǎo)致骨短粗、骨形成障礙及滑鍵等營養(yǎng)缺乏癥[4],因此生產(chǎn)上通常會過量添加無機(jī)錳。研究表明,家禽對飼糧中無機(jī)錳的吸收率僅有1.0%~2.3%[5];而有機(jī)錳具有穩(wěn)定性好、利用率高和適口性好等特點(diǎn),其應(yīng)用效果明顯優(yōu)于無機(jī)錳[6]。NRC(1994)給出生長期鵝的錳推薦需要量為66 mg/kg,34~43周齡鵝飼糧中錳適宜添加水平為24.27~32.91 mg/kg[7],47~56周齡五龍鵝種鵝錳需要量為30 mg/kg[8]。上述結(jié)果差異較大且有機(jī)錳在生長期肉鵝飼糧中的適宜添加水平尚未見報道。因此,本試驗(yàn)以武岡銅鵝為研究對象,通過在飼糧中梯度添加有機(jī)錳,研究氨基酸錳絡(luò)合物對5~10周齡武岡銅鵝生長性能、屠宰性能、器官指數(shù)、血清生化指標(biāo)和肝臟脂質(zhì)代謝指標(biāo)的影響,為探討有機(jī)錳在肉鵝生產(chǎn)上的實(shí)際應(yīng)用提供參考數(shù)據(jù)。
本試驗(yàn)所用錳源為氨基酸錳絡(luò)合物,總錳(以錳計)含量≥15.0%,購自北京某生物科技有限公司。
本試驗(yàn)所需飼糧依據(jù)廣東灰鵝飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制,飼糧中維生素和礦物質(zhì)含量滿足NRC(1994)所推薦的鵝需要量,其中基礎(chǔ)飼糧中錳含量為9.02 mg/kg,基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。選取28日齡、體重相近的武岡銅鵝300羽,采用隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計,分為6個組,每組5個重復(fù),每個重復(fù)10羽(公母各占1/2)。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,各試驗(yàn)組(Ⅰ組~Ⅴ組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加20、40、60、80和100 mg/kg的氨基酸錳絡(luò)合物(以錳元素計)。試驗(yàn)期42 d。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平 (風(fēng)干基礎(chǔ)) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %
試驗(yàn)于湖南省瀏陽市試驗(yàn)基地進(jìn)行,試驗(yàn)鵝采用高層平網(wǎng)方式飼養(yǎng),層高3 m;欄舍整體為木制材料,底部鋪墊塑料網(wǎng)墊,自然光照和通風(fēng);試驗(yàn)鵝自由采食和飲水,執(zhí)行常規(guī)免疫程序。
1.4.1 生長性能
試驗(yàn)開始和結(jié)束時,以重復(fù)為單位對試驗(yàn)鵝進(jìn)行空腹稱重,分別記錄為始重和末重;試驗(yàn)期間,按重復(fù)記錄飼喂量和剩料重,計算試驗(yàn)鵝平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.4.2 屠宰性能
試驗(yàn)結(jié)束時,每個重復(fù)選取2只鵝(公母各1只),根據(jù)NY/T 823—2020《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量計算方法》方法,測定鵝的屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、腹脂重和皮脂重,并根據(jù)公式計算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率和皮脂率。計算公式如下:
屠宰率(%)=(屠體重/宰前活重)×100;
半凈膛率(%)=(半凈膛重/宰前活重)×100;
全凈膛率(%)=(全凈膛重/宰前活重)×100;
胸肌率(%)=(2側(cè)胸肌重/全凈膛重)×100;
腿肌率(%)=(2側(cè)腿肌重/全凈膛重)×100;
腹脂率(%)=[腹脂重/(腹脂重+
全凈膛重)]×100;
皮脂率(%)=[(皮重+皮下脂肪重+腹脂重)/
(全凈膛重+腹脂重)]×100。
1.4.3 器官指數(shù)
試驗(yàn)結(jié)束時,每個重復(fù)選取2只鵝(公母各1只),采集器官(心臟、肝臟、脾臟、肌胃和腺胃)并去除結(jié)締組織,再用濾紙擦干血液稱重,計算器官指數(shù),計算公式為:
器官指數(shù)(%)=[器官濕重(g)/活體重(g)]×100。
1.4.4 血清生化指標(biāo)
試驗(yàn)結(jié)束時,每個重復(fù)選取2只鵝(公母各1只),翅下靜脈采血5 mL,室溫下靜置30 min后,3 000 r/min離心10 min,取上清液。采用全自動生化儀(URIT-8000,優(yōu)利特,美國)測定血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和尿酸(UA)含量。
1.4.5 肝臟脂質(zhì)代謝指標(biāo)
試驗(yàn)結(jié)束時,每個重復(fù)選取2只鵝(公母各1只),取肝臟樣品測定肝臟中脂肪酸合成酶(FAS)、脂蛋白脂肪酶(LPL)和乙酰輔酶A羧化酶(ACC)活性,其中肝臟FAS和ACC活性采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒測定,肝臟LPL活性采用LPL檢測試劑盒測定。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),差異顯著者采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較,結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”(mean±SD)表示,P<0.05表示差異顯著。采用SAS 9.0軟件的非線性模擬程序中的二次曲線模型擬合武岡銅鵝各敏感指標(biāo)與飼糧氨基酸錳絡(luò)合物水平的二次曲線方程,并求導(dǎo)得出武岡銅鵝飼糧中錳適宜添加水平。
由表2可知,與對照組相比,各試驗(yàn)組武岡銅鵝末重、平均日增重、平均日采食量和料重比均無顯著差異(P>0.05)。
表2 飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝生長性能的影響Table 2 Effects of dietary manganese-amino acid complex on growth performance of Wugang copper geese
由表3可知,與對照組相比,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝屠宰性能指標(biāo)均無顯著影響(P>0.05)。
表3 飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝屠宰性能的影響Table 3 Effects of dietary manganese-amino acid complex on slaughter performance of Wugang copper geese %
由表4可知,與對照組相比,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝器官指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。
表4 飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝器官指數(shù)的影響Table 4 Effects of dietary manganese-amino acid complex on organ indices of Wugang copper geese %
由表5可知,與對照組相比,Ⅱ組和Ⅲ組武岡銅鵝血清HDL含量顯著提高(P<0.05);Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組血清UA含量顯著降低(P<0.05),且Ⅳ組血清UA含量顯著低于Ⅰ組(P<0.05)。
表5 飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary manganese-amino acid complex on serum biochemical indices of Wugang copper geese
由表6可知,與對照組相比,各試驗(yàn)組武岡銅鵝肝臟FAS活性均顯著提高(P<0.05),且各試驗(yàn)組間無顯著差異(P>0.05);Ⅲ組肝臟LPL活性顯著高于對照組、Ⅰ組、Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.05);與對照組相比,Ⅰ組~Ⅳ組肝臟ACC活性顯著提高(P<0.05),且Ⅰ組肝臟ACC活性顯著高于Ⅴ組(P<0.05)。
表6 飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝肝臟脂質(zhì)代謝指標(biāo)的影響Table 6 Effects of dietary manganese-amino acid complex on liver lipid metabolism indices of Wugang copper geese
由表7可知,武岡銅鵝肝臟FAS、LPL和ACC活性隨飼糧中氨基酸錳絡(luò)合物添加水平的提高呈現(xiàn)顯著的先升高后降低的二次曲線變化(P<0.05),因此,以呈現(xiàn)顯著二次曲線指標(biāo)為評價指標(biāo),通過二次曲線模型估測武岡銅鵝飼糧中有機(jī)錳適宜添加水平為50.39~53.67 mg/kg。
表7 武岡銅鵝飼糧中錳適宜添加水平Table 7 Optimal supplemental level of manganese in diets for Wugang copper geese
錳是肉鵝生長發(fā)育所必需的微量元素之一,但其對家禽生長性能的影響說法不一。Meng等[9]報道,與對照組相比,飼糧添加硫酸錳和蛋氨酸羥基類似物螯合錳顯著提高了肉雞的末重和平均日增重,但對料重比無顯著影響。Bao等[10]研究發(fā)現(xiàn),有機(jī)絡(luò)合錳可顯著降低肉雞料重比。另有文獻(xiàn)報道,錳對家禽生長性能無顯著影響,如Berta等[11]研究表明有機(jī)錳對14~49日齡雛雞末重和料重比無顯著影響;Mwangi等[12]報道,錳對肉雞生長性能無顯著影響;Yang等[13]試驗(yàn)結(jié)果表明,錳對1~35日齡北京鴨的末重、平均日采食量和平均日增重均無顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝末重、平均日采食量、平均日增重和料重比皆無顯著影響,與上述多數(shù)結(jié)論一致,表明錳對肉鵝生長性能無顯著影響。
屠宰性能指標(biāo)是評定肉用動物生長性能的重要指標(biāo)之一,可直觀反映營養(yǎng)物質(zhì)在機(jī)體不同組織的沉積情況。喬富強(qiáng)等[14]報道,飼糧添加120 mg/kg錳分別降低了肉雞腹脂重和腹脂率達(dá)16.5%和20.5%。Sands等[15]試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧添加240 mg/kg錳可顯著降低肉雞腹脂率。Lu等[16]研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加120 mg/kg錳可降低肉仔雞腹脂率。陳仲建等[17]研究表明,飼糧添加100和200 mg/kg錳均有提高肉仔雞腿肌率和降低腹脂率的趨勢。宋亞偉等[18]研究發(fā)現(xiàn),無機(jī)錳對肉雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均無顯著影響,但顯著降低了肉雞腹脂率。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物對武岡銅鵝的各屠宰性能指標(biāo)均無顯著影響,與上述結(jié)論存在一定差異,可能與試驗(yàn)動物品種和有機(jī)錳添加水平過低有關(guān)。
器官指數(shù)是衡量器官生長狀況和功能的重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物有提高武岡銅鵝肌胃指數(shù)和腺胃指數(shù)的趨勢,對心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)和脾臟指數(shù)均無顯著影響。潘淑勤[19]研究發(fā)現(xiàn),錳源及錳水平對肉雞脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)均無顯著影響,這與本試驗(yàn)結(jié)論一致。由此可知,錳對家禽器官指數(shù)無顯著影響。
血清脂質(zhì)相關(guān)指標(biāo)的變化與機(jī)體脂質(zhì)代謝密切相關(guān),血清HDL能夠?qū)⑼庵躎C和TG轉(zhuǎn)移到肝臟,而血清LDL則在TC的逆轉(zhuǎn)運(yùn)中起重要作用[20]。Xie等[21]報道,錳對蛋雞血清膽固醇含量沒有顯著影響。侯爽[22]研究發(fā)現(xiàn),錳顯著降低了肉雞血清尿素氮(UN)含量。本研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物能夠顯著提高鵝血清HDL含量,顯著降低血清UA含量,而對血清TG、TC和LDL含量無顯著影響,與上述試驗(yàn)結(jié)論相似。以上結(jié)果表明,有機(jī)錳對鵝血脂指標(biāo)具有一定的影響。
家禽90%的脂肪在肝臟中合成,FAS、LPL和ACC均是調(diào)控脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵酶[23-24]。ACC是催化脂肪合成的限速酶,作用于乙酰輔酶A生成丙二酸單酰輔酶A,隨后在FAS的作用下生成軟脂酸,進(jìn)一步加工生成脂肪酸;小腸中形成的乳糜微粒經(jīng)腸黏膜進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng),被LPL水解后釋放出游離脂肪酸;LPL還能促進(jìn)脂肪細(xì)胞攝取和儲存游離脂肪酸[25]。王美玲等[26]研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加100 mg/kg錳降低了肉雞肝臟FAS活性,對肝臟LPL活性無顯著影響。Lu等[27]報道,不同錳源均可顯著降低肉雞腹部脂肪的LPL活性,且相較而言有機(jī)錳效果更佳。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物能夠提高武岡銅鵝肝臟FAS、LPL和ACC活性,與上述結(jié)論存在差異,可能的原因如下:其一,與試驗(yàn)動物有關(guān),鵝可耐受肝臟脂肪的大量沉積,其體脂的合成代謝與肉雞存在較大差異;其二,與試驗(yàn)飼糧營養(yǎng)水平有關(guān),由于目前尚未發(fā)布武岡銅鵝的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn),借鑒其他品種鵝(本試驗(yàn)借鑒廣東灰鵝)的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)中的代謝能和粗脂肪需要量可能并不完全適用于武岡銅鵝,因此可能對試驗(yàn)鵝的體脂代謝水平具有一定的影響;其三,與飼糧中錳的本底值有關(guān),本試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧中錳本底值為9.02 mg/kg,均低于王美玲等[26](26 mg/kg)和Lu等[27](20 mg/kg)的試驗(yàn),導(dǎo)致相關(guān)酶對飼糧中錳的敏感性提高。錳調(diào)控脂質(zhì)代謝的機(jī)制鮮少報道,有研究認(rèn)為錳可以通過調(diào)控多巴胺等途徑影響脂肪沉積,通過提高sbp-1轉(zhuǎn)錄因子和降低let-363蛋白激酶的表達(dá),進(jìn)而誘導(dǎo)脂肪沉積和TG水平上調(diào)[28]。此外,由于錳可以像胰島素一樣通過增強(qiáng)現(xiàn)有的低水平胰島素來增加葡萄糖進(jìn)入脂肪組織的運(yùn)輸,推測錳的胰島素樣作用也是調(diào)控脂質(zhì)代謝的潛在途徑之一[29]。目前結(jié)論表明,飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物可提高武岡銅鵝肝臟ACC、FAS和LPL活性,對肉鵝的脂質(zhì)代謝具有一定的調(diào)控作用。
飼糧添加氨基酸錳絡(luò)合物能夠降低武岡銅鵝血清UA含量,提高血清HDL含量以及肝臟ACC、FAS和LPL活性,對肉鵝的脂質(zhì)代謝具有正向影響。以肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)為評價指標(biāo),經(jīng)二次曲線模型估測得出5~10周齡武岡銅鵝飼糧中有機(jī)錳適宜添加水平為50.39~53.67 mg/kg。