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        玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、養(yǎng)分表觀代謝率和腸道食糜黏度的影響

        2023-12-04 10:43:22王秋凡趙國先馮志華劉觀忠張東遠楊博文趙前程常丹萍
        動物營養(yǎng)學報 2023年11期
        關(guān)鍵詞:食糜代謝率聚糖

        王秋凡 趙國先* 李 茜 馮志華 劉觀忠 張東遠 楊博文 趙前程 常丹萍

        (1.河北農(nóng)業(yè)大學動物科技學院,保定 071000;2.河北省畜牧獸醫(yī)研究所,保定 071030;3.中科康源(唐山)生物技術(shù)有限公司,唐山 064400)

        近年來,我國飼料資源短缺問題日益突出,提高現(xiàn)有飼料資源的利用是解決飼料短缺問題的有效途徑。植物性飼料原料(如玉米、小麥和豆粕等)細胞壁中含有纖維素、半纖維素和木質(zhì)素等成分[1-3],這些成分按一定方式排列構(gòu)成復雜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),像一個天然屏障,在蛋雞體內(nèi)阻礙內(nèi)源酶對胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的進一步接觸,降低蛋雞的養(yǎng)分消化率,造成飼料資源浪費[4-6]。目前,關(guān)于降解飼糧中纖維成分的研究多集中于添加纖維素復合酶[7-10]。纖維素復合酶產(chǎn)品繁多,無酶數(shù)量及種類限制,一般由纖維素酶、木聚糖酶、多糖酶(如甘露聚糖酶、葡聚糖酶等)及消化酶(如蛋白酶、淀粉酶等)等酶類組成[11]。其中纖維素酶屬于O-糖基水解酶,主要分為內(nèi)切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等[12],這些酶協(xié)同作用于纖維素鏈內(nèi)部松散的非結(jié)晶區(qū),將纖維素降解成小分子葡萄糖[13]。木聚糖酶主要由β-1,4內(nèi)切木聚糖酶、β-木糖苷酶兩大主鏈水解酶和多種側(cè)鏈水解酶構(gòu)成,可將木聚糖分解為低聚木糖及多種側(cè)鏈寡糖(如阿拉伯糖、半乳糖等)[14]。畜牧生產(chǎn)中,由于纖維素復合酶作用底物組成及結(jié)構(gòu)復雜[15]、作用環(huán)境不穩(wěn)定[16]及產(chǎn)酶微生物發(fā)酵和純化工藝限制[17-18]等因素影響,其添加量參差不齊,作用效果不一。對不同纖維素復合酶在不同飼糧類型中的效果針對性開展飼養(yǎng)試驗,精準評價不同纖維素復合酶的應用效果具有現(xiàn)實意義。本試驗擬通過研究玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加一種主要由纖維素酶和木聚糖酶組成的纖維素復合酶對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、養(yǎng)分表觀代謝率和腸道食糜黏度的影響,探討該纖維素復合酶在蛋雞玉米-小麥-豆粕型飼糧中的應用效果,為該纖維素復合酶的推廣提供科學依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        本試驗所用纖維素復合酶是由里氏木霉和黑曲霉雙菌種協(xié)同作用經(jīng)可溶性誘導碳源開發(fā)等特殊工藝發(fā)酵的產(chǎn)物。該纖維素復合酶為粉劑,其濾紙酶和羧甲基纖維素酶活性按照QB/T 2589—2003測定,木聚糖酶活性按照QB/T 4483—2013測定,β-葡聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶活性分別按照QB/T 4481—2013、GB/T 24401—2009、GB/T 28715—2012測定,具體數(shù)值見表1。

        表1 纖維素復合酶中各種酶的活性Table 1 Each enzyme activity in cellulose complex enzyme U/g

        1.2 試驗設計

        采用單因素試驗設計,共選取288只健康狀況相近、產(chǎn)蛋率無顯著差異(P>0.05)的53周齡海蘭褐蛋雞,隨機分為4個組,每個組6個重復,每個重復12只雞。對照組為玉米-小麥-豆粕型飼糧,試驗組分別在對照組飼糧的基礎(chǔ)上分別添加200、400、600 mg/kg的纖維素復合酶。預試期為7 d,正試期為84 d?;A(chǔ)飼糧參照《雞飼養(yǎng)標準》(NY/T 33—2004)配制,其中小麥用量為20%,基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

        表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

        1.3 飼養(yǎng)管理

        試驗雞采用上、中、下3層階梯式籠養(yǎng),每籠3只,各組均勻分布。每日08:00、16:00喂料。以粉料形式飼喂,小麥粉碎粒度為2.5 mm,乳頭式飲水器飲水。每日光照時長16 h,每日17:00清糞并打掃衛(wèi)生。每周對雞舍帶雞噴霧消毒1次。

        1.4 檢測指標

        1.4.1 生產(chǎn)性能

        每日以重復為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋重,每周結(jié)料,統(tǒng)計耗料量。每周計算各重復產(chǎn)蛋率、日均產(chǎn)蛋量、平均日采食量和料蛋比。計算公式如下:

        產(chǎn)蛋率(%)=[每重復產(chǎn)蛋總數(shù)/(每重復雞只數(shù)×試驗天數(shù))]×100;

        平均蛋重(g)=每重復總蛋重/每重復產(chǎn)蛋總數(shù);

        日均產(chǎn)蛋量(g/d)=每重復總蛋重/(每重復雞只數(shù)×試驗天數(shù));

        平均日采食量[g/(只·d)]=每重復耗料量/(每重復雞只數(shù)×試驗天數(shù));

        料蛋比=耗料量/總產(chǎn)蛋重。

        1.4.2 蛋品質(zhì)

        試驗結(jié)束當天,每重復隨機收集3顆雞蛋并標號,用全自動蛋品分析儀進行蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位等指標的檢測。此外,采用以色列OKRA公司的蛋殼強度測定儀測定蛋殼強度;使用螺旋測微儀分別測量除去內(nèi)外殼膜的蛋殼鈍端、中部、銳端3個部位的厚度,取平均值,精確到0.01 mm,即為蛋殼厚度。

        1.4.3 養(yǎng)分表觀代謝率

        在飼養(yǎng)試驗的最后3 d,以重復為單位,每24 h收集1次排泄物(糞樣中無雜物),將3 d糞樣混勻,取出100 g加入10 mL 10%鹽酸(HCl),混勻,用于測定粗蛋白質(zhì)含量;剩余糞樣不加HCl,用于檢測其他指標。糞樣全部于-20 ℃冰箱保存,測定時將糞樣取出,經(jīng)65 ℃烘48 h,于室溫回潮并制成風干樣品。飼料和糞便樣品均粉碎過40目篩。飼料和糞便樣品中總能按照ISO 9831:1998采用氧彈式能量儀(IKA-C 200)測定;粗蛋白質(zhì)含量參照GB/T 6432—2018中的凱氏定氮法測定;酸不溶灰分(AIA)含量參考GB/T 23742—2009測定。此外,飼糧中水分、鈣、總磷和氨基酸含量分別按照GB/T 6435—2014、GB/T 6436—2018、GB/T 6437—2018和GB/T 18246—2019中方法進行測定。能量和粗蛋白質(zhì)表觀代謝率計算公式如下:

        能量表觀代謝率(%)=[1-(糞中總能×飼糧中
        AIA含量)/(飼糧中總能×糞中AIA含量)]×100;
        粗蛋白質(zhì)表觀代謝率(%)=[1-(糞中粗蛋白質(zhì)
        含量×飼糧中AIA含量)/(飼糧中粗蛋白質(zhì)
        含量×糞中AIA含量)]×100。

        1.4.4 腸道食糜黏度

        試驗結(jié)束時,每個重復選取1只雞進行屠宰,取出十二指腸、空腸、回腸食糜于10 mL EP管中,-20 ℃保存。檢測時取出樣品自然融化后,取4~5 g樣品,用蒸餾水2倍稀釋后,振蕩混勻,在4 000 r/min離心10 min,取食糜上清液,用奧氏黏度計(Φ=0.55 mm)測定黏度(單位:mPa·s)。測定時將黏度計垂直架在(40±1) ℃的恒溫水浴鍋中預熱5 min,先取2 mL上清液潤洗奧氏黏度計,再將5 mL上清液吸入黏度計,以秒表記錄液體流出的時間,同樣的方法測定同體積蒸餾水流出時間,重復3次,取平均值。計算公式如下:

        食糜黏度=樣品液通過毛細管所用時間/
        等量蒸餾水通過毛細管所需時間。

        1.4.5 經(jīng)濟效益

        以每組72只雞為單位,根據(jù)整個試驗期的飼料成本和總耗料量結(jié)合總蛋重、雞蛋價格等計算試驗期內(nèi)蛋雞產(chǎn)生的經(jīng)濟效益,即利潤,飼料原料價格和雞蛋價格按照試驗進行時的單價計算。計算公式如下:

        利潤=(雞蛋產(chǎn)量×雞蛋單價)-(飼料用量×飼料單價)。

        1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

        試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA),通過Duncan氏法進行多重比較檢驗;采用曲線估值對差異顯著指標和纖維素復合酶添加量進行曲線擬合,獲得最佳添加量。試驗結(jié)果均以平均值和均值標準誤(SEM)表示,P<0.05為差異顯著。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

        由表2可知,200、400、600 mg/kg組蛋雞的產(chǎn)蛋率顯著高于對照組(P<0.05),分別提高2.72%、3.28%、5.39%;400和600 mg/kg組平均日采食量和料蛋比顯著低于對照組(P<0.05),平均日采食量分別降低4.63%、2.99%,料蛋比分別顯著降低7.73%、6.87%。200 mg/kg組蛋雞的平均蛋重、日均產(chǎn)蛋量、平均日采食量和料蛋比與對照組相比差異不顯著(P>0.05)。各試驗組之間,400、600 mg/kg組平均日采食量顯著低于200 mg/kg組(P<0.05),產(chǎn)蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比差異不顯著(P>0.05)。料蛋比(y)與纖維素復合酶添加量(x)之間存在線性和二次曲線關(guān)系,可建立回歸方程:y=11.072×10-7x2-0.001x+2.331,由回歸方程計算得出纖維素復合酶添加量為451.59 mg/kg時可獲得最小料蛋比。

        表2 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of adding cellulose complex enzyme to corn-wheat-soybean meal type diet on performance of laying hens

        2.2 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

        由表3可知,與對照組相比,400、600 mg/kg組蛋雞蛋黃顏色顯著提高(P<0.05),200 mg/kg組差異不顯著(P>0.05);各試驗組之間,400、600 mg/kg組蛋雞蛋黃顏色顯著高于200 mg/kg組(P<0.05);蛋雞蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋白高度及哈氏單位各組之間差異不顯著(P>0.05)。

        表3 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of adding cellulose complex enzyme to corn-wheat-soybean meal type diet on egg quality of laying hens

        2.3 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞養(yǎng)分表觀代謝率的影響

        由表4可知,600 mg/kg組蛋雞能量表觀代謝率與對照組相比顯著提高6.18%(P<0.05),200和400 mg/kg組與對照組相比差異不顯著(P>0.05);400、600 mg/kg組蛋雞粗蛋白質(zhì)表觀代謝率與對照組相比顯著提高(P<0.05),分別提高12.78%、19.11%,200 mg/kg組與對照組相比差異不顯著(P>0.05);各試驗組之間,600 mg/kg組蛋雞能量表觀代謝率顯著高于200和400 mg/kg組(P<0.05),粗蛋白質(zhì)表觀代謝率差異不顯著(P>0.05)。

        2.4 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞腸道食糜黏度的影響

        由表5可知,400、600 mg/kg組蛋雞十二指腸食糜黏度與對照組相比分別顯著降低7.97%(P<0.05)、6.13%(P<0.05),200 mg/kg組與對照組相比差異不顯著(P>0.05);各試驗組與對照組相比蛋雞回腸食糜黏度均顯著降低(P<0.05),其中400 mg/kg組比對照組降低15.79%;各試驗組蛋雞空腸食糜黏度較對照組有一定程度降低,但差異不顯著(P>0.05),各試驗組之間差異也不顯著(P>0.05)。

        表5 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞腸道食糜黏度的影響Table 5 Effects of adding cellulose complex enzyme to corn-wheat-soybean meal type diet on intestinal chyme viscosity of laying hens

        2.5 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞經(jīng)濟效益的影響

        由表6可知,與對照組相比,200、400、600 mg/kg組蛋雞利潤分別提高11.01%、19.74%、16.64%,其中400 mg/kg組蛋雞的利潤最高,產(chǎn)生的經(jīng)濟效益最好。

        表6 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞經(jīng)濟效益的影響Table 6 Effects of adding cellulose complex enzyme to corn-wheat-soybean meal type diet on economic benefit of laying hens

        3 討 論

        3.1 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

        本試驗所用纖維素復合酶是由纖維素酶、木聚糖酶等構(gòu)成。這些酶可降解植物細胞壁,將動物機體自身不能消化的纖維素、木聚糖等多糖分子分解,生成小分子多糖(如葡萄糖、低聚木糖、半乳糖等)[19-20],也可將植物細胞壁包裹的營養(yǎng)物質(zhì)釋放,提高蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的消化率,促進內(nèi)源酶對胞內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的降解[21],改善蛋雞對營養(yǎng)物質(zhì)的利用率[22],降低食糜黏度,從而提高蛋雞的生產(chǎn)性能及蛋品質(zhì),進而提高蛋雞生產(chǎn)的經(jīng)濟效益[23-24]。段磊等[25]研究結(jié)果顯示,在育成蛋雞小麥型飼糧中添加纖維素復合酶,蛋雞的平均日采食量顯著提高4.89%。王繼強等[26]在小麥-豆粕型飼糧中添加0.1%的纖維素復合酶,蛋雞產(chǎn)蛋率顯著提高4.4%,料蛋比顯著降低5.31%,以上試驗結(jié)果均與本試驗結(jié)果一致。本試驗中,在蛋雞玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶,各試驗組蛋雞產(chǎn)蛋率均較對照組顯著提高,且400、600 mg/kg組平均日采食量及料蛋比顯著降低。此外,也有研究報道纖維素復合酶對蛋雞生產(chǎn)性能無明顯改善作用。例如,李勇等[27]研究結(jié)果顯示不同劑量纖維素復合酶添加到小麥-豆粕型飼糧中對青年蛋雞的采食量、料重比、日增重均無顯著影響;杜金娥等[28]報道,在玉米-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞產(chǎn)蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比均無顯著影響。可能是由于添加的纖維素復合酶成分及種類、添加量、飼糧類型和飼養(yǎng)環(huán)境存在差異,導致不同試驗研究結(jié)果不盡相同。

        3.2 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

        小麥中類胡蘿卜素含量低,部分替代玉米會使飼糧中類胡蘿卜素含量降低,影響蛋雞蛋黃顏色[29]。在小麥型飼糧中添加酶制劑可彌補蛋黃顏色的不足[30-31]。Papadopoulos等[32]研究結(jié)果表明,在小麥飼糧中添加90 000 U/g的木聚糖酶可改善蛋雞蛋黃顏色,并且降低蛋黃中不飽和脂肪酸含量。Cufadar等[33]發(fā)現(xiàn),在含有小麥的飼糧中添加木聚糖酶雖然未對蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)產(chǎn)生顯著影響,并顯著提高了蛋黃顏色。漆雯雯等[34]研究顯示,在玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加葡聚糖酶和木聚糖酶組蛋雞蛋黃顏色最高,為9.47。Nguyen等[30]在含有小麥的飼糧中添加木聚糖酶后顯著提高了蛋雞蛋黃顏色。本試驗中,在玉米-小麥-豆粕型飼糧添加400或600 mg/kg纖維素復合酶均可顯著改善蛋雞蛋黃顏色,說明纖維素復合酶促進蛋雞對玉米中未被利用的類胡蘿卜素等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,從而改善蛋黃顏色。

        3.3 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞養(yǎng)分表觀代謝率的影響

        纖維素復合酶降解植物細胞壁中的纖維素、木聚糖等纖維成分,使其分解成葡萄糖參與能量代謝,進而釋放被包裹的營養(yǎng)物質(zhì),促進蛋白酶等內(nèi)源酶的分解作用,提高能量及蛋白質(zhì)的利用率。Anwar等[35]在小麥型飼糧中添加以木聚糖為主的纖維素復合酶后顯著提高了肉雞的粗蛋白質(zhì)表觀代謝率,而不添加纖維素復合酶的小麥飼糧組蛋雞粗蛋白質(zhì)表觀代謝率顯著降低。Madrid等[36]在小麥-豆粕型飼糧中添加0.05%的纖維素復合為酶(由黑曲霉、綠木霉和米曲酶生產(chǎn),包括纖維素酶、木聚糖酶和α-半乳糖酶等)后,肉仔雞的平均日采食量顯著提高,同時其粗蛋白質(zhì)表觀代謝率顯著提高。周傳鳳等[37]在小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶(主要成分為纖維素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等)研究其對肉雞養(yǎng)分表觀代謝率的影響,結(jié)果顯示,肉雞總能和粗蛋白質(zhì)的表觀代謝率顯著提高。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果一致。本試驗中,3個試驗組蛋雞的能量表觀代謝率均高于對照組,其中600 mg/kg組蛋雞的能量表觀代謝率較對照組顯著提高6.18%;400、600 mg/kg組蛋雞的粗蛋白質(zhì)表觀代謝率較對照組分別顯著提高12.78%、19.11%,這呼應了上述400、600 mg/kg組蛋雞產(chǎn)蛋率顯著提高。上述結(jié)果說明纖維素復合酶通過增加能量和粗蛋白質(zhì)的表觀代謝率,提高蛋雞的生產(chǎn)性能。

        3.4 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞腸道食糜黏度的影響

        木聚糖主鏈上的側(cè)基(如4-O-甲基葡糖醛酸、阿拉伯糖、半乳糖和乙?;?分子內(nèi)的醇羥基、酯鍵或醚鍵與水分子形成氫鍵,或是通過分子間相互纏繞形成膠體結(jié)構(gòu),具有黏性[38],木聚糖酶系可分解木聚糖中的膠體結(jié)構(gòu),改變食糜黏性[39]。段磊[40]研究發(fā)現(xiàn),纖維素復合酶降低飼喂小麥型飼糧蛋雞十二指腸和回腸食糜黏度,對空腸食糜黏度的降低效果不顯著。Mirzaie等[41]發(fā)現(xiàn),各年齡段蛋雞回腸黏度隨飼糧中小麥含量的升高而升高,隨添加木聚糖酶添加量的升高而降低,并發(fā)現(xiàn)飼喂小麥含量為23%的玉米-小麥-豆粕型飼糧蛋雞回腸食糜黏度極顯著降低。Liu等[42]研究顯示,在小麥型飼糧中添加木聚糖酶可顯著降低肉仔雞回腸食糜黏度。胡官波[43]報道,纖維素復合酶可顯著降低飼喂小麥-豆粕型飼糧肉雞回腸食糜黏度,而對飼喂玉米-豆粕型飼糧肉雞回腸食糜黏度的降低作用不顯著。黃志毅等[44]研究發(fā)現(xiàn),在含有小麥的飼糧中添加木聚糖酶可顯著降低肉雞胃、回腸食糜黏度。以上研究結(jié)果說明纖維素復合酶有降低腸道食糜黏度的作用,與本試驗得出相似的結(jié)果。本試驗中,玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加400或600 mg/kg纖維素復合酶顯著降低了蛋雞十二指腸食糜黏度;400 mg/kg組蛋雞回腸食糜黏度顯著高于對照組,600 mg/kg組蛋雞則與對照組無顯著差異。由于食糜黏度受食糜中半纖維素溶解性與溶質(zhì)濃度的影響,600 mg/kg的纖維素復合酶可在更大程度分解半纖維素的同時釋放出更多養(yǎng)分,食糜中養(yǎng)分溶質(zhì)濃度增加,從而使得該組蛋雞食糜黏度與對照組差異不顯著。

        3.5 玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加纖維素復合酶對蛋雞經(jīng)濟效益的影響

        本試驗中,玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加200、400、600 mg/kg纖維素復合酶均提高了蛋雞利潤,表明在蛋雞玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加該纖維素復合酶可通過降低蛋雞腸道食糜黏度,提高能量和粗蛋白質(zhì)表觀代謝率來提高生產(chǎn)性能,并能改善蛋黃顏色,進而提高蛋雞生產(chǎn)的經(jīng)濟效益,其中400 mg/kg組的經(jīng)濟效益最好,其利潤與對照組相比提高了19.74%。

        4 結(jié) 論

        ① 通過建立料蛋比與纖維素復合酶添加量之間的回歸方程,預測蛋雞料蛋比最低時的纖維素復合酶添加量為451.59 mg/kg。

        ② 在玉米-小麥-豆粕型飼糧中添加400或600 mg/kg的纖維素復合酶可在顯著提高蛋雞能量及粗蛋白質(zhì)表觀代謝率的同時降低料蛋比及腸道食糜黏度,改善蛋黃顏色,提高蛋雞的產(chǎn)蛋率和經(jīng)濟效益。

        ③ 結(jié)合生產(chǎn)性能和經(jīng)濟效益,在本試驗條件下,蛋雞玉米-小麥-豆粕型飼糧中纖維素復合酶的適宜添加量為400 mg/kg。

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