林 苗 肖亞紅 張諺鵬 溫劉發(fā)
(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,廣州 510642)
酸化劑可調(diào)節(jié)畜禽免疫功能[1]、改善腸道微生態(tài)[2-3]、提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率和生長性能[4],作為一種無毒無害的新型綠色飼料添加劑和替抗產(chǎn)品,在畜牧生產(chǎn)中已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用。腐殖酸鈉復(fù)雜的結(jié)構(gòu)使其具有較強(qiáng)的絡(luò)合作用、離子交換及吸附作用,應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)中能提高動(dòng)物生產(chǎn)性能,增強(qiáng)抗病能力,還具有抗菌抑菌、吸附脫毒等作用[5]。三丁酸甘油酯能為腸道上皮細(xì)胞供能[6-7],還能通過改善腸道形態(tài)、減少炎癥反應(yīng)[8-9]、抑制病原菌生長、促進(jìn)益生菌的增殖來調(diào)節(jié)腸道菌群平衡[10]。苯甲酸具有抗菌、提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率、維持腸道微生態(tài)平衡、減少免疫防御應(yīng)激反應(yīng)等作用[11-13]。單寧酸在動(dòng)物生產(chǎn)中具有良好的抗腹瀉、抑菌殺菌、抗氧化、抗炎癥和改善腸道健康的作用[14-15],適量的單寧酸能夠改善動(dòng)物的營養(yǎng)和健康狀況。目前,國內(nèi)外對肉雞飼糧中單獨(dú)添加腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸的效果已有一定研究,但將其復(fù)合添加于肉雞飼糧的研究報(bào)道較少。為此,本試驗(yàn)通過探究不同配比的腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸組成的復(fù)合酸對肉雞生長性能、屠宰性能、血清免疫指標(biāo)以及盲腸菌群結(jié)構(gòu)的影響,以確定復(fù)合酸中腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸的最佳配比,為科學(xué)合理地設(shè)計(jì)酸化劑的組合配伍及適宜添加量提供參考。
腐殖酸鈉,由北京某生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供,有效含量≥50%;三丁酸甘油酯,為瑞典某公司產(chǎn)品,有效含量≥51.4%;苯甲酸,由荷蘭某公司生產(chǎn),有效含量≥99.5%;單寧酸,由上海某生物化工有限公司提供,有效含量≥37.5%。
選用1 800只56日齡文昌雞(母),完全隨機(jī)分為10組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)36只雞。試驗(yàn)雞采用籠養(yǎng),試驗(yàn)期35 d(56~91日齡)。本試驗(yàn)采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,以腐殖酸鈉(250、500和750 g/t)、三丁酸甘油酯(350、700、1 050 g/t)、苯甲酸(500、1 000、1 500 g/t)和單寧酸(200、400、600 g/t)為4個(gè)試驗(yàn)因子,每個(gè)因子各有3個(gè)水平,選用L9(34)正交試驗(yàn)表設(shè)計(jì)得到9個(gè)正交試驗(yàn)組,具體見表1。
表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 1 Experiment design
參照《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)設(shè)計(jì)肉雞基礎(chǔ)飼糧,基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。飼糧粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、總磷、賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和食鹽含量參照相應(yīng)國標(biāo)方法測定。飼養(yǎng)試驗(yàn)于惠州京基致農(nóng)畜牧有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)前將雞舍沖洗干凈,嚴(yán)格消毒,自由采食和飲水,每天24 h光照,免疫程序按雞場規(guī)程進(jìn)行。每日08:00加料,記錄投料量。
表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %
1.4.1 生長性能測定
在飼養(yǎng)試驗(yàn)開始和結(jié)束前,空腹12 h后對各組雞進(jìn)行稱重并記錄雞重,試驗(yàn)結(jié)束后,計(jì)算各重復(fù)雞平均日增重、平均日采食量和耗料增重比。計(jì)算公式如下:
平均日增重[g/(只·d)]=[末重(g/只)-
初重(g/只)]/飼養(yǎng)天數(shù)(d);
平均日采食量[g/(只·d)]=
總耗料量(g/只)/飼養(yǎng)天數(shù)(d);
耗料增重比=平均日采食量/平均日增重。
1.4.2 屠宰性能測定
飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,根據(jù)生長性能結(jié)果,選擇Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組進(jìn)行屠宰和采樣。分別從Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的每個(gè)重復(fù)中選擇2只生長狀態(tài)良好、體重接近該重復(fù)均重的雞進(jìn)行屠宰,參照NY/T 823—2020測定其活重、屠體重、全凈膛重、腿肌重、胸肌重和腹脂重,計(jì)算屠宰性能指標(biāo),計(jì)算公式如下:
屠宰率(%)=(屠體重/活重)×100;
全凈膛率(%)=(全凈膛重/活重)×100;
胸肌率(%)=(胸肌重/全凈膛重)×100;
腿肌率(%)=(腿肌重/全凈膛重)×100;
腹脂率(%)=[腹脂重/(全凈膛重+腹脂重)]×100。
1.4.3 血清免疫指標(biāo)測定
雞群空腹24 h后,將待采樣的雞進(jìn)行活體稱重后頸動(dòng)脈放血,每只雞用15 mL的離心管取2管血液,每管10 mL,傾斜靜置30~60 min,3 000 r/min下離心10 min,取上清于2.5 mL離心管中-80 ℃保存。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒(江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司)測定血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白A(IgA)含量,具體操作方法詳見相應(yīng)指標(biāo)試劑盒說明書。
1.4.4 盲腸微生物16S rRNA測序分析
在回盲韌帶處用滅菌棉線打結(jié),之后將打結(jié)好的2根盲腸切下來,裝于2 mL無菌凍存管中,編號,-80 ℃保存,該盲腸內(nèi)容物用于16S擴(kuò)增子測序分析,利用高保真PCR對16S V3~V4區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增,使用高通量測序技術(shù)對目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行正反向測序,通過檢測目標(biāo)區(qū)域的序列變異和豐度,對盲腸內(nèi)容物中的微生物進(jìn)行基于操作分類單元(OTUs)上的物種組成及相對豐度分析、alpha多樣性分析和beta多樣性分析等。以上指標(biāo)由深圳微科盟科技集團(tuán)有限公司檢測和分析。
使用Excel 2013記錄和計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù),用SPSS 23.0軟件的單因素方差分析(one-way ANOVA)程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,并采用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示。
由表3可知,與Ⅰ組相比,Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ和Ⅸ組的平均日采食量均顯著提高(P<0.05),而各添加復(fù)合酸組(Ⅱ~Ⅹ組)的平均日增重和耗料增重比均無顯著變化(P>0.05)。
表3 復(fù)合酸對肉雞生長性能的影響Table 3 Effects of compound acid on growth performance of broilers
極差分析是基于腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸的正交試驗(yàn)生長性能結(jié)果上進(jìn)行的分析,極差的大小代表影響因素的主次。從表4中的結(jié)果可以看出,以平均日增重為指標(biāo)時(shí),各因素對平均日增重的影響由大到小依次為三丁酸甘油酯、單寧酸、腐殖酸鈉、苯甲酸;以平均日采食量為指標(biāo)時(shí),各因素對平均日采食量的影響同平均日增重一樣,由大到小依次為三丁酸甘油酯、單寧酸、腐殖酸鈉、苯甲酸;以耗料增重比為指標(biāo)時(shí),各因素對耗料增重比的影響由大到小依次為三丁酸甘油酯、腐殖酸鈉、單寧酸、苯甲酸。由此可知,在正交試驗(yàn)中三丁酸甘油酯的添加量對生長性能的影響最大,其次是單寧酸,再次是腐殖酸鈉,而苯甲酸對生長性能的影響最小,因此,在實(shí)際生產(chǎn)中苯甲酸的添加量可根據(jù)節(jié)約成本考慮選擇。
表4 正交試驗(yàn)結(jié)果Table 4 Results of orthogonal experiment
由表5可知,與Ⅰ組相比,Ⅲ組的腿肌率顯著升高(P<0.05),Ⅱ和Ⅲ組的屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腹脂率均無顯著變化(P>0.05)。
表5 復(fù)合酸對肉雞屠宰性能的影響Table 5 Effects of compound acid on slaughtering performance of broilers %
由表6可知,與Ⅰ組相比,Ⅱ組和Ⅲ組血清中IgA和IgM含量極顯著升高(P<0.01),同時(shí)II組血清中IgG含量也極顯著提高(P<0.01)。這表明由腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸組成的復(fù)合酸能提高肉雞的免疫功能。
表6 復(fù)合酸對肉雞血清免疫指標(biāo)的影響Table 6 Effects of compound acid on serum immune indexes of broilers
2.4.1 盲腸微生物共有物種分析
OTUs是基于有效序列進(jìn)行聚類/去噪和物種分類分析的一種分類單元,由圖1可知,Ⅰ組包含了1 640個(gè)OTUs,Ⅱ組包含1 728個(gè)OTUs,Ⅲ組包含1 740個(gè)OTUs。與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ組肉雞盲腸微生物的OTUs個(gè)數(shù)明顯增加,這表明由腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸組成的復(fù)合酸可影響肉雞盲腸微生物物種組成。
Venn圖顯示的是不同組間共有以及組內(nèi)特有的OTUs數(shù)量,每個(gè)橢圓代表一個(gè)組。A表示Ⅰ組,B表示Ⅱ組,C表示Ⅲ組,圖2同。The Venn diagram shows the number of common OTUs between different groups and the number of unique OTUs in each group, and each ellipse represents a group. A represents group Ⅰ, B represents group Ⅱ, and C represents group Ⅲ, the same as Fig.2.圖1 基于OTUs的Venn圖Fig.1 Venn diagram based on OTUs
2.4.2 復(fù)合酸對肉雞盲腸微生物alpha多樣性的影響
Chao1指數(shù)、Faith-pd指數(shù)、Observed_OTUs指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)是衡量alpha多樣性的主要指標(biāo)。由表7可知,與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ組的Chao1指數(shù)、Faith-pd指數(shù)、Observed_OTUs指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)均無顯著差異(P>0.05)。
表7 復(fù)合酸對肉雞盲腸微生物alpha多樣性的影響Table 7 Effects of compound acid on alpha diversity of cecal microorganisms of broilers
2.4.3 復(fù)合酸對肉雞盲腸微生物beta多樣性的影響
主坐標(biāo)分析(PCoA)是衡量微生物beta多樣性的重要方法。圖2中,根據(jù)PCoA結(jié)果可知,Ⅲ組與Ⅰ組有區(qū)系分離的趨勢;相比于Ⅰ組,Ⅱ、Ⅲ組的節(jié)點(diǎn)之間的距離較長,這表明Ⅱ、Ⅲ組盲腸菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變。
圖2 主坐標(biāo)分析圖Fig.2 PCoA diagram
2.4.4 復(fù)合酸對肉雞盲腸微生物物種組成和相對豐度的影響
圖3-A為盲腸微生物門水平上物種分布柱形圖,擬桿菌門(Bacteroidetes)、厚壁菌門(Firmicutes)和變形菌門(Proteobacteria)是肉雞盲腸中的三大優(yōu)勢菌群,其中擬桿菌門在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組中的相對豐度分別為53.61%、51.12%、53.91%;厚壁菌門在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組中的相對豐度分別為33.40%、39.85%、37.76%;變形菌門在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組中的相對豐度分別為4.37%、3.88%、2.95%。與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ組擬桿菌門和厚壁菌門的相對豐度以及它們的比值無顯著差異(P>0.05),但Ⅲ組變形菌門的相對豐度顯著降低(P<0.05,圖3-B)。
數(shù)據(jù)柱標(biāo)注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),相同小寫字母表示差異不顯著(P>0.05)。圖4同。Data columns with different small letters mean significant difference (P<0.05), while with the same small letters mean no significant difference (P>0.05). The same as below.圖3 復(fù)合酸對肉雞盲腸微生物門水平物種相對豐度的影響Fig.3 Effects of compound acid on species relative abundances of cecal microorganisms at phylum level of broilers
圖4-A為盲腸微生物屬水平上Top前20的優(yōu)勢菌群分布柱形圖,圖中擬桿菌屬(Bacteroides)、瘤胃球菌屬(Ruminococcus)、紫單胞菌屬(Barnesiella)和光岡菌屬(Papillibacter)在菌群結(jié)構(gòu)中占比較大,是肉雞盲腸中的優(yōu)勢菌屬。與Ⅰ組相比,Ⅱ、Ⅲ組在擬桿菌屬、瘤胃球菌屬、紫單胞菌屬和光岡菌屬的相對豐度均有所提升,但無顯著差異(P>0.05);在剩下的16個(gè)菌屬中發(fā)現(xiàn),Ⅲ組其他菌屬的相對豐度與Ⅰ組無顯著差異(P>0.05),但乳桿菌屬(Lactobacillus)的相對豐度顯著提高(P<0.05,圖4-B)。
圖4 復(fù)合菌對肉雞盲腸微生物屬水平物種相對豐度的影響Fig.4 Effects of compound acid on species relative abundances of cecal microorganisms at genus level of broilers
肉雞養(yǎng)殖中能直接反映肉雞營養(yǎng)狀態(tài)的指標(biāo)是生長性能,而平均日增重、平均日采食量和耗料增重比是反映肉雞生長性能的最直接指標(biāo)。腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸均屬于有機(jī)酸化劑,能通過降低肉雞胃部pH、刺激多種消化酶的分泌并提高消化酶的活性、促進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收、抑制腸道有害菌的生長、促進(jìn)益生菌的增殖來調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,從而改善肉雞的生長性能[16]。張世忠等[17]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加200 g/t單寧酸能顯著提高白羽肉雞的平均日采食量和降低耗料增重比。Kocabagli等[18]研究表明,飼糧中添加2.5 kg/t腐殖酸鈉能顯著改善肉仔雞的增重和耗料增重比。有研究表明,多種酸化劑聯(lián)合使用時(shí),多種酸化劑之間可能存在協(xié)同增效作用,并發(fā)揮出比單一酸化劑更好的作用[19]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,由不同添加量的腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸配伍組成的復(fù)合酸對肉雞生長性能均有積極影響,其中以由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸的效果最好,能顯著提高肉雞的平均日采食量,對平均日增重和耗料增重比也有改善趨勢,其改善了生長性能,促進(jìn)了肉雞生長。這可能與多種酸化劑之間協(xié)同增效作用有關(guān)[20-21]。
屠宰性能是評價(jià)肉雞胴體品質(zhì)的重要參數(shù),是衡量生產(chǎn)性能以及經(jīng)濟(jì)效益的綜合性指標(biāo)。張世忠等[17]研究表明,飼糧中添加150 g/t單寧酸能顯著提高白羽肉雞的腿肌率。袁小陵等[22]亦發(fā)現(xiàn),苯甲酸能明顯改善肉雞的屠宰性能,提高全凈膛率和半凈膛率。本研究中,在文昌雞飼糧中添加復(fù)合酸對肉雞的屠宰率、全凈膛率、腿肌率和胸肌率均有改善趨勢,其中由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸能顯著提高肉雞腿肌率,這與張世忠等[17]的研究結(jié)論一致,推測這可能與酸化劑能提高肉雞胃腸道中的蛋白質(zhì)消化吸收有關(guān)[23],該復(fù)合酸通過加強(qiáng)對蛋白質(zhì)的利用來促進(jìn)肌肉沉積,從而提高了屠宰性能[15,24]。
酸化劑具有提高動(dòng)物機(jī)體免疫功能的作用[25]。IgA、IgM和IgG是動(dòng)物血清中主要的免疫球蛋白,是機(jī)體體液免疫的重要組成部分,能調(diào)節(jié)免疫水平,保護(hù)機(jī)體不受各種病原微生物的侵害[26-27]。血清中免疫球蛋白含量的高低能反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱,其含量越高,則說明機(jī)體免疫水平越高[28]。有研究表明,飼糧中添加復(fù)合酸化劑能顯著提高肉雞血清中IgA和IgG含量[29]。童玉鑫等[30]研究結(jié)果顯示,飼糧中添加五倍子單寧酸能顯著提高1~21日齡黃羽肉雞血清中IgM含量,且隨著五倍子單寧酸添加劑量的提高,血清中IgM含量呈線性升高。黃靈杰等[31]也發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加高劑量的苯甲酸能顯著提高肉雞血清中IgM含量。本研究中,在飼糧中添加由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸能極顯著提高肉雞血清中IgA和IgM含量;另外,添加由250 g/t腐殖酸鈉、350 g/t三丁酸甘油酯、500 g/t苯甲酸和200 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸在極顯著提高血清中IgA和IgM含量的基礎(chǔ)上,還極顯著提高了血清中IgG含量。此結(jié)果與童玉鑫等[30]和黃靈杰等[31]的研究結(jié)果一致。這表明由腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸組成的復(fù)合酸能促進(jìn)肉雞機(jī)體B細(xì)胞分泌免疫球蛋白,提高機(jī)體免疫水平,而不同配比復(fù)合酸之間的差異可能與4種酸化劑之間互作調(diào)節(jié)以及劑量配比有關(guān)。
腸道菌群結(jié)構(gòu)對肉雞的生長性能和腸道健康起著關(guān)鍵作用,腸道菌群平衡有助于提高動(dòng)物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力[32],并有利于機(jī)體抵御病原微生物的入侵[33]。有益的微生物在維持正常生理動(dòng)態(tài)平衡、調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)、促進(jìn)器官發(fā)育和調(diào)節(jié)宿主機(jī)體代謝方面具有重要作用[34]。一些研究表明,飼糧中添加有機(jī)酸能選擇性的刺激益生菌生長,從而改善肉雞盲腸菌群平衡[2,35]。本研究發(fā)現(xiàn),在肉雞盲腸微生物中以擬桿菌門、厚壁菌門和變形菌門為三大優(yōu)勢菌群。而擬桿菌門和厚壁菌門細(xì)菌可產(chǎn)生分解多糖的酶,能幫助機(jī)體分解多糖類物質(zhì),從而促進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[36-37]。有研究發(fā)現(xiàn),厚壁菌門與擬桿菌門的比值與脂肪沉積有關(guān),該比值越高,越有益于脂肪沉積[38]。而變形菌門主要由許多已知的病原菌組成,如大腸桿菌、志賀氏菌、沙門氏菌、螺桿菌、布魯氏菌和立克次體等[39],當(dāng)動(dòng)物腸道中變形菌門的相對豐度上升時(shí),往往會(huì)引起代謝紊亂和腸道炎癥的發(fā)生[40-41]。本試驗(yàn)中,在微生物門水平上,飼糧中添加由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸在一定程度上提高了盲腸微生物中擬桿菌門和厚壁菌門的相對豐度以及二者比值,并顯著降低了變形菌門的相對豐度。這表明肉雞飼糧中添加由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸能提高機(jī)體糖代謝,促進(jìn)肉雞育肥,并能抑制病原微生物的增殖,預(yù)防疾病發(fā)生,從而促進(jìn)生長。
在微生物屬水平上,飼糧中添加由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸還顯著提高了肉雞盲腸微生物中乳桿菌屬的相對豐度,并在一定程度上提高了主要優(yōu)勢菌屬如擬桿菌屬和瘤胃球菌屬的相對豐度。乳桿菌屬的細(xì)菌對宿主的健康具有重要作用,它們不僅能夠產(chǎn)生抗菌物質(zhì),也能與致病菌株競爭腸道的黏附位點(diǎn)來達(dá)到抑菌目的,還能阻止細(xì)胞凋亡來提升腸道的防御機(jī)制,為宿主提供更好的健康狀態(tài)。Wang等[42]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加苯甲酸和苯甲酸+淀粉酶復(fù)合物均能提高肉雞盲腸內(nèi)容物中乳桿菌屬的相對豐度,并降低大腸桿菌的相對豐度。這與本研究結(jié)論相符,這些結(jié)果表明,腸道中的有益菌大量增殖是抑制病原菌生長的重要因素,肉雞飼糧中補(bǔ)充由腐殖酸鈉、三丁酸甘油酯、苯甲酸和單寧酸組成的復(fù)合菌可能會(huì)通過提高有益菌數(shù)量來改善腸道菌群組成,促進(jìn)肉雞生長。
在本試驗(yàn)條件下,飼糧中添加由250 g/t腐殖酸鈉、700 g/t三丁酸甘油酯、1 000 g/t苯甲酸和400 g/t單寧酸組成的復(fù)合酸能改善56~91日齡文昌雞的生長性能和屠宰性能,提高機(jī)體特異性免疫水平,并能改善盲腸菌群結(jié)構(gòu)。