周俏苑，陳洪，劉海全*，黃桂瓊，秦佳佳

1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)惠州醫(yī)院（惠州市中醫(yī)醫(yī)院），廣東 惠州 516000

2.暨南大學(xué)，廣東 廣州 510000

骨質(zhì)疏松癥是一種骨骼系統(tǒng)疾病，其特征是骨量低和骨微結(jié)構(gòu)改變，致骨折風(fēng)險(xiǎn)增加。經(jīng)典理論認(rèn)為，骨質(zhì)疏松癥本質(zhì)上是由雌激素缺乏/衰老（原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥）或繼發(fā)于疾病/藥物（繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥）引起的骨重塑障礙[1]。骨質(zhì)疏松癥已被定義為21 世紀(jì)的無聲疾病，由于其嚴(yán)重性、慢性和進(jìn)展性而成為一種公共衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)，主要影響絕經(jīng)后婦女和老年人[2]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，我國(guó)65 歲以上人群中，骨質(zhì)疏松癥患病率為32.0%，其中女性為51.6%，男性為10.7%[3]。骨質(zhì)疏松癥在臨床上主要表現(xiàn)為腰背部疼痛或全身骨痛，甚至脊柱變形及骨折。骨質(zhì)疏松癥在中醫(yī)學(xué)上總屬于“骨痿”或“骨痹”或“腰痛”等范疇，其病機(jī)根本為肝脾腎三臟虛損，因虛致瘀，進(jìn)而導(dǎo)致骨骼失養(yǎng)[4]。臨床上治療總以補(bǔ)腎活血為主[5]。

護(hù)骨膠囊是在“腎主骨生髓”和“補(bǔ)腎生髓”的理論基礎(chǔ)上，由淫羊藿、制何首烏、熟地黃、龜甲、巴戟天、杜仲、續(xù)斷、骨碎補(bǔ)、當(dāng)歸和山藥組合而成，主要具有補(bǔ)腎益精、養(yǎng)血活血的功效[6]。臨床研究表明，護(hù)骨膠囊可有效緩解癥狀、改善骨代謝、提高骨密度等，且安全性良好[7-9]。護(hù)骨膠囊適用于骨質(zhì)疏松癥患者，但護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的活性物質(zhì)及作用機(jī)制尚不明確。因此，本研究結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)探究護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的物質(zhì)基礎(chǔ)和分子機(jī)制，旨在為進(jìn)一步研究護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的實(shí)驗(yàn)研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 護(hù)骨膠囊化學(xué)成分收集

本研究在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)TCMSP 數(shù)據(jù)庫檢索護(hù)骨膠囊處方中的各個(gè)單味藥的活性成分，篩選標(biāo)準(zhǔn)：生物利用度（OB）≥30%，類藥性指數(shù)（DL）≥0.18，相對(duì)分子質(zhì)量（MW）＜500，氫鍵供體數(shù)目（Hdon）≤5，氫鍵受體數(shù)目（Hacc）≤10 和脂水分配系數(shù)（lgP）≤5。由于存在某些中藥有效成分不滿足篩選條件在本數(shù)據(jù)庫容易被剔除和其他非特征性且無效成分被納入候選的客觀因素，故結(jié)合《中國(guó)藥典》2020 版進(jìn)行篩選候選活性成分，最后通過文獻(xiàn)檢索和綜合考慮對(duì)篩選出的單味藥活性成分進(jìn)行補(bǔ)充和剔除。

1.2 護(hù)骨膠囊化學(xué)成分潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

根據(jù)篩選出來的化合物在PubChem 數(shù)據(jù)庫中查找其Canonical SMILES 結(jié)構(gòu)，將其上傳至Swis Target Prediction、Pharmmapper 等數(shù)據(jù)庫獲取靶點(diǎn)信息，并通過UniProt 數(shù)據(jù)庫為靶基因注釋及確認(rèn)，合并去重后得到護(hù)骨膠囊化學(xué)成分靶點(diǎn)。

1.3 骨質(zhì)疏松癥相關(guān)靶點(diǎn)篩選

以“osteoporosis”為關(guān)鍵詞，在Drugbank、TTD、Genecards、DisGeNET 等數(shù)據(jù)庫收集骨質(zhì)疏松癥相關(guān)靶點(diǎn)，取其交集作為骨質(zhì)疏松癥疾病靶點(diǎn)。

1.4 護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥相關(guān)靶點(diǎn)及關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將收集的護(hù)骨膠囊化學(xué)成分潛在靶點(diǎn)和骨質(zhì)疏松癥疾病靶點(diǎn)上傳至在線做圖軟件Venny 2.1.0獲取其交集靶點(diǎn)作為護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的潛在靶點(diǎn)。將護(hù)骨膠囊化學(xué)成分和護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.9.0 軟件，構(gòu)建成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。并進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，篩選主要化學(xué)成分。在網(wǎng)絡(luò)中，以節(jié)點(diǎn)度（degree）和介值中心度（between nesscentrality）來反映節(jié)點(diǎn)的重要程度，節(jié)點(diǎn)代表化合物信息，邊代表活性成分-靶點(diǎn)的相互作用。

1.5 蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

將潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入String 數(shù)據(jù)庫獲取蛋白互作信息，將信息導(dǎo)入Cytoscape 3.9.0 軟件繪制PPI 網(wǎng)絡(luò)圖；運(yùn)用其插件“NetworkAnalyzer”對(duì)PPI 網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行分析，并將節(jié)點(diǎn)（node）大小和顏色設(shè)置用于反映degree 值的大小。

1.6 基因本體論（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）富集分析

將潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行GO 和KEGG 富集分析，以P＜0.05 為篩選條件，分析潛在靶點(diǎn)聚類于護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥相關(guān)的生物學(xué)過程或信號(hào)通路，將富集結(jié)果可視化處理。

1.7 分子對(duì)接

從PubChem數(shù)據(jù)庫獲取活性成分的SDF格式，再導(dǎo)入Chemdraw 3D 軟件進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，得到活性成分分子結(jié)構(gòu)mol2 格式。從PDB 數(shù)據(jù)庫下載目標(biāo)靶點(diǎn)基因 PDB 格式的 3D 分子結(jié)構(gòu)。利用AutoDockTools 1.5.6 軟件進(jìn)行分子對(duì)接，最后將分子對(duì)接結(jié)果導(dǎo)入Pymol 軟件進(jìn)行可視化分析。

2 結(jié)果

2.1 護(hù)骨膠囊化學(xué)成分

通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)檢索篩選護(hù)骨膠囊有效成分，共收集了59 個(gè)化學(xué)成分，其中淫羊藿12 個(gè)、制何首烏5 個(gè)、熟地黃5 個(gè)、龜甲5 個(gè)、巴戟天6 個(gè)、杜仲6 個(gè)、續(xù)斷5 個(gè)、骨碎補(bǔ)5 個(gè)、當(dāng)歸5 個(gè)、山藥5 個(gè)，見表1。

表1 護(hù)骨膠囊活性成分信息Table 1 Information of active ingredients of Hugu Capsules

2.2 護(hù)骨膠囊活性成分潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

將篩選出的活性成分的SMILE 格式文件導(dǎo)入到Swiss Target Prediction 等數(shù)據(jù)庫進(jìn)行潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，共得到529 個(gè)潛在靶點(diǎn)。

2.3 骨質(zhì)疏松癥相關(guān)靶標(biāo)

通過檢索GeneCard、DrugBank、OMIM 等數(shù)據(jù)庫共獲得與骨質(zhì)疏松癥相關(guān)的疾病靶點(diǎn)共1 609個(gè)，與2.2 項(xiàng)下預(yù)測(cè)的潛在靶點(diǎn)構(gòu)建韋恩圖，最終獲得護(hù)骨膠囊可能治療骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)靶點(diǎn)共78 個(gè)，見圖1。

圖1 護(hù)骨膠囊潛在靶點(diǎn)與骨質(zhì)疏松癥靶標(biāo)韋恩圖Fig.1 Venn diagram of Hugu Capsules potential targets and osteoporosis targets

2.4 護(hù)骨膠囊活性成分網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和分析

將交集靶點(diǎn)及其對(duì)應(yīng)的成分信息導(dǎo)入Cytoscape 3.9.0 軟件，構(gòu)建“中藥-成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖（圖2），同時(shí)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，篩選主要化學(xué)成分，選擇degree 排名前12 位的活性成分作為核心化學(xué)成分，見表2。

圖2 中藥-成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖Fig.2 Traditional Chinese medicine-component-target network diagram

表2 護(hù)骨膠囊主要活性成分Table 2 Main active ingredients in Hugu Capsules

2.5 基于String 和Cytoscape 軟件的PPI 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和分析

將78 個(gè)交集靶點(diǎn)上傳至String 數(shù)據(jù)庫，運(yùn)行得到PPI 數(shù)據(jù)。將結(jié)果導(dǎo)入到Cytoscape 3.9.0 軟件繪制靶點(diǎn)互作網(wǎng)絡(luò)，通過Cytoscape 3.9.0 軟件中的Network Analyzer 功能進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析，繪制核心靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)圖，見圖3。顏色深淺和大小表示該節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的重要程度。選取排名前5 位靶點(diǎn)作為核心靶點(diǎn)，即腫瘤壞死因子（TNF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A（VEGFA）、非受體酪氨酸激酶（SRC）、酪氨酸蛋白激酶3（MAPK3）、雌激素受體α（ESR1），其中TNF 可能是治療骨質(zhì)疏松癥關(guān)鍵靶點(diǎn)，見表3。

圖3 PPI 網(wǎng)絡(luò)圖Fig.3 PPI network diagram

表3 主要核心靶點(diǎn)蛋白Table 3 Main core target proteins

2.6 GO 功能富集與KEGG 通路富集分析

2.6.1 GO 功能富集分析 采用DAVID 數(shù)據(jù)庫對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO 富集分析。研究結(jié)果顯示，置信度P＜0.05 的生物學(xué)過程（BP）有917 條，分子功能（MF）有98 條，細(xì)胞組成（CC）相關(guān)路徑33條。護(hù)骨膠囊可能通過參與眾多過程治療骨質(zhì)疏松癥，主要包含對(duì)有機(jī)物的響應(yīng)、對(duì)含氧化合物的響應(yīng)和對(duì)化學(xué)的響應(yīng)等；MF 涉及核受體活性和過渡金屬離子結(jié)合、類固醇結(jié)合等多個(gè)過程；CC 包括細(xì)胞外空間、質(zhì)膜和宿主細(xì)胞核等。分別選取前10 條富集結(jié)果進(jìn)行可視化分析（圖4）。

圖4 交集靶點(diǎn)GO 富集分析Fig.4 GO enrichment analysis of intersection targets

2.6.2 KEGG 通路分析 KEGG 通路富集到P＜0.05 相關(guān)通路共159 條，選擇排名前20 條信號(hào)通路進(jìn)行可視化分析。主要富集通路有糖尿病并發(fā)癥中的晚期糖基化終末化產(chǎn)物（AGE）-晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）信號(hào)通路、松弛素信號(hào)通路、雌激素信號(hào)通路、Rap1 信號(hào)通路、低氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路、癌癥途徑、流體剪切力與動(dòng)脈粥樣硬化等，表明護(hù)骨膠囊可能通過多個(gè)通路治療骨質(zhì)疏松癥。以上結(jié)果選取前20條信號(hào)通路，繪制氣泡圖，見圖5。

圖5 KEGG 通路富集分析Fig.5 Enrichment analysis of KEGG pathway

2.7 分子對(duì)接驗(yàn)證

將排名前5 位的核心靶點(diǎn)TNF、VEGFA、SRC、MAPK3、ESR1 與排名前5 位的活性成分地黃苦苷元、大黃素甲醚、甲基異茜草素、阿魏酸、大豆苷元進(jìn)行分子對(duì)接，并記錄兩者親和力數(shù)值，親和力數(shù)值小于-5 kcal/mol（1 cal＝4.4 J），認(rèn)為小分子與蛋白的結(jié)合能力較強(qiáng)，結(jié)果見熱圖（圖6）。其中大黃素甲醚與MAPK3 結(jié)合能最低，為-7.16 kcal/mol，兩者之間存在氫鍵作用力及疏水作用力。以Physcion 和MAPK3 對(duì)接為例，借助Pymol 軟件進(jìn)行可視化分析（圖7）。

圖7 大黃素甲醚-MAPK3 對(duì)接圖Fig.7 Physcion-MAPK3 interconnection diagram

3 討論

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究策略[10]，對(duì)護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的潛在活性成分、靶點(diǎn)和作用機(jī)制進(jìn)行探究，最后借助分子對(duì)接對(duì)小分子和蛋白質(zhì)之間的相互作用進(jìn)行驗(yàn)證。本研究通過TCMSP數(shù)據(jù)庫結(jié)合《中國(guó)藥典》2020 版及文獻(xiàn)檢索收集的護(hù)骨膠囊化學(xué)成分，進(jìn)一步構(gòu)建“成分-交集靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)，網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治霭l(fā)現(xiàn)地黃苦苷元、大黃素甲醚、甲基異茜草素、阿魏酸、大豆苷元、松果菊苷等核心化合物可能是護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的核心成分。Liu 等[11]研究證實(shí)了地黃苦苷元具有抗炎作用。Hou 等[12]研究發(fā)現(xiàn)阿魏酸可通過激活糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥新生鼠體內(nèi)的沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）和核因子-κB（NF-κB）來預(yù)防骨質(zhì)疏松癥。在動(dòng)物模型和培養(yǎng)細(xì)胞中，已觀察到大豆苷元具有促進(jìn)骨形成和防止骨吸收的雌激素樣作用[13]。大黃素甲醚屬于屬蒽醌類化合物，具有抗炎、抗氧化、抗癌和抗誘變等作用[14-15]。Jiang 等[16]研究發(fā)現(xiàn)松果菊苷在體外通過阻止活化T-細(xì)胞核因子1（NFATc1）易位、下調(diào)其表達(dá)和影響磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/原癌基因c-Fos 通路來抑制破骨細(xì)胞分化、F-肌動(dòng)蛋白帶形成、骨吸收功能和破骨細(xì)胞特異性基因表達(dá)，松果菊苷還通過抑制破骨細(xì)胞活性減輕體內(nèi)假體周圍感染（PJI）誘導(dǎo)的骨溶解并維持骨量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，甲基異茜草素可抑制破骨細(xì)胞的形成與分化并降低破骨細(xì)胞的吸收[17]。胡倩影等[18]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)了杜仲中的松脂素可通過促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖與分化，以達(dá)抗骨質(zhì)疏松的作用。雌二醇（E2）是通過促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖和分化來治療骨質(zhì)疏松癥的一線藥物，而松脂素對(duì)成骨細(xì)胞的增殖和分化具有與E2類似作用[19]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，藁本內(nèi)酯具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化等作用，對(duì)骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、心腦血管等疾病也有治療作用[20]。實(shí)驗(yàn)證明，藁本內(nèi)酯可通過抑制破骨細(xì)胞的形成與分化，從而達(dá)到骨保護(hù)作用[21]；藁本內(nèi)酯顯著抑制一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的產(chǎn)生，并通過阻斷MAPKs/IκB 激酶（IKK）和下游轉(zhuǎn)錄因子AP-1 和NF-κB 的激活從而表現(xiàn)出抗炎活性[22]。樓棪[23]通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，海風(fēng)藤酮可直接抑制Rank1 所誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞的形成。尿囊素可促進(jìn)MAPK 磷酸化、增加葡萄糖的攝取等過程，達(dá)到預(yù)防骨骼肌功能障礙的作用[24]。綜上所述，護(hù)骨膠囊通過抗炎、抑制破骨細(xì)胞的形成與分化與促進(jìn)成骨細(xì)胞的增值與分化，達(dá)到治療骨質(zhì)疏松癥的潛在治療作用。

PPI 網(wǎng)絡(luò)分析表明，TNF、VEGFA、SRC、MAPK3、ESR1 可能是護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的關(guān)鍵靶點(diǎn)。TNF-α 調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的分化功能是通過腫瘤壞死因子表面受體1（TNFR1）和表面受體2（TNFR2）實(shí)現(xiàn)的。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，TNF-α 信號(hào)會(huì)促進(jìn)正常小鼠和TNFR1 缺失小鼠細(xì)胞的骨形成，而TNFR2 只有在骨損傷時(shí)調(diào)節(jié)TNFα 在骨折愈合中的再生效應(yīng)[25]。研究報(bào)道，來自早期成骨細(xì)胞（Osx+）的VEGFA 在骨損傷時(shí)對(duì)于骨膜快速血管生成和骨折修復(fù)過程中的編織骨形成至關(guān)重要[26]。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，SRC SH2 選擇性結(jié)合化合物可降低破骨細(xì)胞吸收活性[27]。MAPK3 可通過影響PI3K/Akt 通路治療骨質(zhì)疏松[28]。ESR1 與絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松關(guān)系密切[29-30]；同時(shí)，B 細(xì)胞中一種新的ESR1 和MAPK3 網(wǎng)絡(luò)被認(rèn)為是絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的病因[31]。ESR1 和MAPK3 均參與雌激素受體信號(hào)和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）/MAPK信號(hào)通路。

GO 和KEGG 富集分析表明，護(hù)骨膠囊主要通過細(xì)胞外空間、質(zhì)膜、宿主細(xì)胞核等CC 參與細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、分裂等眾多BP，繼而與蛋白質(zhì)特異性結(jié)合，發(fā)揮調(diào)節(jié)核受體活性、過渡金屬離子結(jié)合、類固醇結(jié)合等MF，涉及糖尿病并發(fā)癥中的糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE 信號(hào)通路、松弛素信號(hào)通路、雌激素信號(hào)通路、Rap1 信號(hào)通路、HIF-1 信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路等，表明護(hù)骨膠囊可能通過多個(gè)通路作用于多個(gè)靶點(diǎn)發(fā)揮治療骨質(zhì)疏松癥的作用。Cheng 等[32]研究發(fā)現(xiàn)，胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）受體激動(dòng)劑促進(jìn)肥胖2 型糖尿病大鼠成骨細(xì)胞生成并抑制骨吸收，作用機(jī)制可能部分是由AGEs/RAGE/活性氧（ROS）通路通過與GLP-1 受體相互作用介導(dǎo)的。松弛素是一種肽激素，通過激活膠原酶來改變軟骨和肌腱的特性，還參與骨骼重塑和受傷韌帶和骨骼肌的愈合[33]。雌激素是女性和男性骨代謝的主要激素調(diào)節(jié)劑，對(duì)骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的直接作用分別導(dǎo)致骨重塑抑制、骨吸收減少和骨形成維持，還調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的成骨細(xì)胞/骨細(xì)胞和T 細(xì)胞調(diào)節(jié)[34]。微小RNA（miRNA）廣泛調(diào)節(jié)骨的正常生物學(xué)功能以及骨折愈合和骨質(zhì)疏松的進(jìn)展[35]。其中，miRNA-182 在調(diào)節(jié)細(xì)胞的凋亡、生長(zhǎng)和分化中發(fā)揮重要作用，Pan 等[36]研究表明，下調(diào)的miR-182-5p 通過上調(diào)腺苷酸環(huán)化酶異構(gòu)體6 的Rap1/MAPK 信號(hào)通路激活，促進(jìn)骨質(zhì)疏松癥大鼠成骨細(xì)胞的增殖與分化，這可能是治療骨質(zhì)疏松癥的新靶標(biāo)。缺氧刺激可調(diào)節(jié)骨的形成、維持和修復(fù)[37]，缺氧也是調(diào)節(jié)血管生成-成骨耦合過程的主要驅(qū)動(dòng)力，HIF-1α 為HIF-1 的活性亞基，研究結(jié)果表明，缺氧可以通過 HIF-1α 途徑上調(diào)VEGF，從而改善血管生成以及成骨細(xì)胞的分化和活性；HIF-1α 的過度表達(dá)顯著增加了成骨細(xì)胞中的2 種促血管生成因子白細(xì)胞介素（IL）-6 和IL-8 的水平，可促進(jìn)人成骨細(xì)胞的增殖[38]。

分子對(duì)接結(jié)果表明，地黃苦苷元、大黃素甲醚、甲基異茜草素、阿魏酸、大豆苷元核心成分與TNF、VEGFA、SRC、MAPK3、ESR1 核心靶點(diǎn)均具有良好的結(jié)合能力，結(jié)合能表明它們是護(hù)骨膠囊治療骨質(zhì)疏松癥的關(guān)鍵活性成分。

綜上所述，護(hù)骨膠囊中的地黃苦苷元、大黃素甲醚、甲基異茜草素、阿魏酸、大豆苷元、松果菊苷可能是治療骨質(zhì)疏松癥的物質(zhì)基礎(chǔ)，能夠作用于TNF、VEGFA、SRC、MAPK3 等多個(gè)靶點(diǎn)，通過調(diào)節(jié)糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE 信號(hào)通路、松弛素信號(hào)通路、雌激素信號(hào)通路、Rap1 信號(hào)通路、HIF-1 信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路等參與骨骼重塑、抑制破骨細(xì)胞的形成與分化、促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖與分化和抗炎功能，發(fā)揮治療骨質(zhì)疏松癥的作用。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突