母 雨，黃 鈞，周榮清，2*，張宿義，秦 輝

(1.四川大學輕工科學與工程學院，四川成都 610044；2.國家固態(tài)釀造工程技術(shù)研究中心，四川瀘州 646015；3.瀘州老窖股份有限公司，四川瀘州 646099)

濃香型白酒是我國三大基酒香型之一，因窖香濃郁、純凈和諧、香氣協(xié)調(diào)和回味悠長等特點在白酒行業(yè)中獨占鰲頭，其市場占有率約為70%[1]。酯類物質(zhì)對白酒的風味特征具有重大貢獻，“四大酯”——己酸乙酯、乳酸乙酯、乙酸乙酯和丁酸乙酯是濃香型白酒的特征風味成分，它們的濃度和比例決定了產(chǎn)品的質(zhì)量和等級[2]。酸類物質(zhì)也是影響白酒風味的關鍵因素，“三大酸”——己酸、乙酸和丁酸不僅是相應乙酯的重要前體，還具有獨特的風味和滋味屬性，能起到豐富和平衡酒體的作用[3]。傳統(tǒng)上“四大酯”和“三大酸”被認為是濃香型白酒的風味骨架成分，如何準確、快速的測定這些組分對于產(chǎn)品質(zhì)量的評價和控制意義重大。

現(xiàn)代儀器分析技術(shù)在白酒領域的應用已經(jīng)取得了較大進展[4]。GB/T 10345—2007 將氣相色譜技術(shù)用作白酒中“四大酯”含量測定的標準方法[5]。王群等[6]利用高效液相色譜（HPLC）技術(shù)建立了同時測定芝麻香白酒中“四大酯”的方法，具有效果好、速度快、重現(xiàn)性好等特點；買書魁等[7]結(jié)合近紅外光譜技術(shù)和偏最小二乘法建立了白酒中乙酸乙酯和乳酸乙酯的定量分析模型，具有較高穩(wěn)定性和準確性；對于“三大酸”，王芳等[8]利用HPLC 技術(shù)實現(xiàn)了白酒樣品的準確定量分析；李家民[9]則通過GC-FID 分析了濃香型白酒貯藏期間的含量變化；韓旭等[10]建立了同時檢測白酒中己酸乙酯和己酸的氣相色譜方法。然而，同時檢測白酒中“四大酯”和“三大酸”的方法尚未見報道。本研究通過不斷優(yōu)化實驗條件和儀器參數(shù)，獲得了能在短時間內(nèi)同時測定這7 種骨架成分的氣相色譜分析方法，適用于基酒的快速質(zhì)量檢驗。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

樣品：四川省瀘州市瀘州老窖集團有限公司，濃香型白酒。

試劑及耗材：己酸乙酯（阿拉丁，純度99%，GC級）、乳酸乙酯（阿拉丁，純度99%，GC 級）、乙酸乙酯（Dr.Ehrenstorfer，純度99.7 %，GC 級）、丁酸乙酯（阿拉丁，純度99.5%，GC 級）、己酸（阿拉丁，純度99.5 %，GC 級）、乙酸（麥克林，純度99.8 %，GC級）、丁酸（阿拉丁，純度99.5%，GC 級）、乙酸戊酯（阿拉丁，純度99.5 %，GC 級）、2-乙基丁酸（阿拉丁，純度99.5 %，GC 級）、無水乙醇（諾爾施，純度99.9%，HPLC級）。

儀器設備：Trace 1300 氣相色譜儀，配備FID 檢測器和自動進樣器，美國賽默飛公司；電子天平；渦旋儀。

1.2 試驗方法

1.2.1 標準溶液配制

（1）70 %乙醇溶液：量取350 mL 無水乙醇至500 mL 容量瓶中，加超純水至刻度線，搖勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。

（2）混合標準工作液：稱取0.9007 g 己酸乙酯、0.6004 g 乙酸乙酯、0.4018 g 乳酸乙酯、0.0902 g 丁酸乙酯、0.1004 g 己酸、0.1000 g 乙酸和0.0603 g 丁酸于100 mL 容量瓶中，用70%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，置于4 ℃冰箱密封保存。

（3）混合內(nèi)標標準工作液：稱取0.4043 g 乙酸戊酯和0.0910 g 2-乙基丁酸于10 mL 容量瓶中，用70 %乙醇溶液稀釋至刻度，渦旋混勻，置于4 ℃冰箱中密封保存。

1.2.2 標準曲線配制

分別吸取混合標準工作液0.312 mL、0.625 mL、1.25 mL、2.5 mL、5 mL、10 mL 于10 mL 容量瓶中，用70 %乙醇溶液稀釋至刻度，加入混合內(nèi)標標準工作液100 μL，渦旋混勻后用于標準曲線的繪制。

1.2.3 色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-WAX毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μ m）；升溫程序：初溫40 ℃維持4 min，20 ℃/min升至100 ℃保持1 min，40 ℃/min升至200 ℃保持3 min；進樣口溫度：250 ℃；進樣量：1 μL；分流比：20∶1；檢測器溫度：250 ℃；氮氣流速：1 mL/min；氫氣流速：40 mL/min；空氣流速：450 mL/min；尾吹氣：35 mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 標品與樣品的檢測

從標品色譜圖（圖1）和樣品色譜圖（圖2）中可以看出，在優(yōu)化的色譜條件下，“四大酯”“三大酸”與內(nèi)標乙酸戊酯和2-乙基丁酸能在13 min 內(nèi)實現(xiàn)較好的分離，所有色譜峰響應良好、峰形完整、靈敏度高。

圖2 白酒樣品色譜圖

2.2 標準曲線

圖3 所示為7 種目標組分的標準曲線，以濃度為橫坐標，以目標物與內(nèi)標物的峰面積比值為縱坐標進行線性回歸所得?？紤]到同類物質(zhì)在相同條件下的響應相似，以乙酸戊酯作為“四大酯”的內(nèi)標物，以2-乙基丁酸作為“三大酸”的內(nèi)標物。結(jié)果可知，所有標準曲線的R2均大于0.99，線性關系良好，滿足分析要求。

2.3 精密度實驗

利用上述方法對同一濃香型白酒基酒樣品進行連續(xù)7 次進樣，計算所有目標物的相對標準偏差（RSD），以評估方法的精密度。如表1 所示，所有組分的RSD 在0.59%～1.89%之間，表明該方法精密度高。

表1 各組分精密度實驗結(jié)果(n=6)

2.4 加標回收率實驗

取濃香型白酒基酒樣品4 份，以其中1 份作為空白，另外3 份加入已知量的標準溶液進行3 次平行測定。如表2 所示，在四大酯中，己酸乙酯的加標回收率為98.26 %～101.68 %；乙酸乙酯的為96.45 %～98.87 %；乳酸乙酯的為93.68 %～97.06%；丁酸乙酯的為91.55%～99.42%。在三大酸中，己酸的加標回收率為98.70%～101.84%；乙酸的為91.04 %～100.37 %；丁酸的為95.66 %～97.70 %。同時，各組分的RSD 在0.05 %～2.78 %之間，說明該方法回收率高、穩(wěn)定性好，能滿足分析要求。

表2 各組分加標回收率

3 結(jié)論

本研究利用基于內(nèi)標法的氫火焰離子-氣相色譜法實現(xiàn)了濃香型白酒中“四大酯”和“三大酸”的同時定量，該法的標準曲線、精密度和加標回收率等各項指標均達到檢測要求，具有操作簡單、耗時短、數(shù)據(jù)可靠等特點，可用于濃香型白酒的快速品質(zhì)鑒定。