■ 蔣桂梅 王建明 吳 杰 陳 鳳 鄭程莉 王 歡 司華哲

（1.四川養(yǎng)麝研究所，四川都江堰 611830；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，吉林長(zhǎng)春 130118）

我國(guó)有豐富的樹木資源，其中多數(shù)樹木的葉子、嫩枝及果實(shí)都可用作畜禽的飼料原料，樹葉資源的飼料化利用可在一定程度上緩解飼料與糧食供求之間的矛盾，利用當(dāng)?shù)貎?yōu)勢(shì)樹木種類資源，開發(fā)非常規(guī)飼料資源、提高資源的利用率是保證畜牧業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的重要途徑。樹葉具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，例如新鮮的榆樹葉（Ulmus pumilaL.）中粗蛋白含量為7.5%,無(wú)氮浸出物含量為14%，此外還含有豐富的礦物質(zhì)和胡蘿卜素[1]。樊金玲[2]發(fā)現(xiàn)榆樹葉中含有大量的類胡蘿卜素，其主要組分為葉黃素和β-胡蘿卜素。楊樹葉富含多種必需氨基酸，部分氨基酸含量高于谷類作物[3]。部分地區(qū)的刺槐、紫穗槐和桑葉（Folium mori）的蛋白質(zhì)含量可達(dá)20%以上，可作為畜禽優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)和維生素來源[4]。其中，桑葉營(yíng)養(yǎng)全面、成本低、產(chǎn)量大[5-6]，在牛、羊、兔等草食動(dòng)物中已被證明有較好的應(yīng)用效果。據(jù)文獻(xiàn)記載，桑葉有提高動(dòng)物采食量及生長(zhǎng)性能、改善瘤胃內(nèi)環(huán)境、促進(jìn)瘤胃內(nèi)微生物纖維分解酶產(chǎn)生、增強(qiáng)消化率的作用[7-9]。在飼糧中添加鮮桑葉可提高母兔繁殖性能和血清瘦素水平，降低血脂含量[10]。飼糧配合8%的飼料桑葉可以顯著提高育肥湖羊平均日增重、胴體脂肪含量、瘤胃背囊肌層厚度和背囊的乳頭長(zhǎng)度，有利于瘤胃發(fā)育，顯著提高湖羊血清中谷胱甘肽過氧化物酶活力，提高總抗氧化能力[11]。桑葉調(diào)制成的桑葉青貯飼料，可作為反芻動(dòng)物高質(zhì)量飼料來源或生物活性藥物，可改善瘤胃微生物群落，提高羔羊的抗氧化能力和免疫調(diào)節(jié)能力[12]。林麝（Moschus berezovskii）屬偶蹄目麝科，主要棲于針闊混交林，也適于在針葉林和郁閉度較差的闊葉林生境生活。楊營(yíng)等[13]針對(duì)圍欄養(yǎng)殖林麝采食植物種類的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，其可采食植物的種類多達(dá)64 種，這些植物隸屬于31 科，除野草和種植飼草外，還采食青皮藤[Jasminum elongatum(Bergius)Willd]、桑樹葉、三角楓葉（Acer buergerianum Miq）、榆樹葉、苦楝樹葉（Melia azedaeachL.）等樹葉類飼料。然而，這些樹葉類飼料對(duì)林麝日糧消化率的影響研究鮮見報(bào)道。野生林麝食性較廣，圈養(yǎng)林麝由于受到飼養(yǎng)地域、樹種分布、樹種數(shù)量、樹葉產(chǎn)量、采摘條件等因素影響，所食樹葉種類非常有限，通常以榆樹葉、桑樹葉、青皮藤等為主，輔以其他雜樹葉[14]。試驗(yàn)旨在研究幾種常用樹葉類飼料對(duì)林麝?duì)I養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和氮平衡的影響，為不同種類樹葉飼料在林麝生產(chǎn)中的科學(xué)應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在四川養(yǎng)麝研究所都江堰養(yǎng)麝場(chǎng)選取12 頭體重（8.0±0.5） kg、年齡相同、體況良好的雄性林麝，隨機(jī)分為6 組，每組2 只。試驗(yàn)采用6×6 拉丁方設(shè)計(jì)，根據(jù)樹葉飼料種類分為青皮藤組、桑樹葉組、三角楓葉組、榆樹葉組、苦楝樹葉組及以上樹葉等比混合的混合葉組等六組。整個(gè)試驗(yàn)期84 d，共分為6 期，每期14 d，其中預(yù)試期11 d、正試期3 d。

1.2 試驗(yàn)日糧及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)日糧由基礎(chǔ)飼糧和樹葉組成?；A(chǔ)飼糧由多汁料（南瓜和萵筍，鮮重）與精補(bǔ)料（風(fēng)干基礎(chǔ)）按5∶1 的重量比例配成，日喂量600 g，樹葉日喂量80 g，各樹葉類飼料的營(yíng)養(yǎng)水平見表1?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。試驗(yàn)麝每日08：00 和16：00 飼喂兩次，自由飲水。

表1 試驗(yàn)用樹葉營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ)，%)

樹葉：在5 月下旬至6 月下旬采集各品種鮮嫩樹葉，除去硬枝、雜物，及時(shí)攤曬晾干制成風(fēng)干料，裝入塑料袋密封，放置于陰涼干燥處保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 樣品采集

1.3.1 飼料樣品和糞樣樣品的采集

試驗(yàn)正試期每天采集飼料樣本和全部糞樣，飼料樣品在65 ℃烘干24～48 h至恒重；糞便樣品按收集鮮重的25%加入10%酒石酸溶液進(jìn)行固氮，先在80 ℃下殺菌2 h，然后在65℃烘干24～48 h 至恒重，烘干后的飼料和糞便樣品用于干物質(zhì)測(cè)定。粉碎過40 目篩后進(jìn)行粗蛋白、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維等指標(biāo)的測(cè)定。

1.3.2 尿樣的采集與分析

試驗(yàn)期每天（24 h）收集全部尿樣，取20%的尿樣加入裝有二甲苯的廣口瓶中，試驗(yàn)期結(jié)束后混勻尿樣，冷藏保存?zhèn)錅y(cè)。

1.4 指標(biāo)的測(cè)定及方法

1.4.1 采食量的測(cè)定

正試期每天記錄每只動(dòng)物的飼料投喂量和剩料量，用于計(jì)算干物質(zhì)采食量（DMI）。

1.4.2 消化指標(biāo)測(cè)定

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率采用2N 鹽酸不溶灰分法測(cè)定，計(jì)算公式如下：

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率（%）=100-100×[飼糧中鹽酸不溶灰分含量（%）/糞樣中鹽酸不溶灰分含量（%）]×[糞樣中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量（%）/飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量（%）]

飼料及糞樣的干物質(zhì)（DM）含量采用GB/T 6435—2014 方法測(cè)定，粗蛋白含量參照GB/T 6432—2018采用凱氏定氮法測(cè)定，粗脂肪含量參照GB/T 6433—2006采用索氏抽提法測(cè)定，粗纖維含量參照GB/T 6434—2006采用過濾法測(cè)定，中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維參照GB/T 20806—2006 采用范氏（Van Soest）纖維分析法測(cè)定，總能采用ZDHW-3 全自動(dòng)量熱儀測(cè)定，鈣含量采用GB/T 6436—2018 進(jìn)行測(cè)定，粗灰分的含量采用GB/T 6438—2007 飼料中粗灰分的方法測(cè)定。計(jì)算可利用氮、沉積氮、氮利用率。

可利用氮（g/d）=食入氮-糞氮

沉積氮（g/d）=食入氮-（糞氮+尿氮）

氮利用率（%）=沉積氮/食入氮

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2013 整理后采用SPSS 22.0 中單因素方差分析（one-way ANOVA）進(jìn)行均值的差異分析，采用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同種類樹葉對(duì)林麝采食量的影響

由表3 可見，以不同種類樹葉作為林麝粗飼料來源時(shí)，三角楓葉組基礎(chǔ)飼糧采食量顯著高于青皮藤組（P<0.05），但與其他組無(wú)顯著差異（P>0.05）；混合葉組樹葉采食量顯著高于榆樹葉組和苦楝樹葉組（P<0.05），但與其他組無(wú)顯著差異（P>0.05）；混合葉組飼糧采食總量顯著高于青皮藤組、桑樹葉組、榆樹葉組和苦楝樹葉組（P<0.05），但與三角楓葉組差異不顯著（P>0.05）。表明飼喂混合樹葉更能提高林麝采食量。

表3 林麝以不同樹葉為粗飼料時(shí)的采食量（風(fēng)干基礎(chǔ)，g/d，n=12）

2.2 不同種類樹葉對(duì)林麝日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表4 可見，以不同種類樹葉作為林麝粗飼料來源時(shí)，桑樹葉組日糧CP 表觀消化率顯著高于其他處理組（P<0.05）；三角楓葉組EE 表觀消化率顯著高于混合葉組（P<0.05），但與其他處理組差異不顯著（P>0.05）；各處理組間Ash 的表觀消化率無(wú)顯著差異（P>0.05）；桑樹葉組日糧Ca、OM、CHO、GE、ADF、NDF 表觀消化率顯著高于榆樹葉組和混合葉組（P<0.05），但與其他處理組差異不顯著（P>0.05）；榆樹葉組日糧CF 表觀消化率顯著低于其他處理組（P<0.05）。表明本試驗(yàn)條件下，以桑樹葉為林麝粗飼料時(shí)，日糧CP、Ca、OM、CHO、GE、NDF 表觀消化率更高，更利于林麝消化。

表4 不同樹葉對(duì)林麝日糧表觀消化率的影響（%，n=12）

2.3 不同種類樹葉對(duì)林麝日糧氮平衡的影響

由表5 可見，以不同種類樹葉作為林麝粗飼料來源時(shí)，混合葉組食入氮顯著高于青皮藤組和苦楝樹葉組（P<0.05）；桑葉組組糞氮顯著低于混合葉組（P<0.05），但與其他組差異不顯著（P>0.05）；尿氮各組間差異不顯著（P>0.05）；桑樹葉組、三角楓葉組和混合葉組可利用氮和沉積氮顯著高于青皮藤組和苦楝樹葉組（P<0.05），但與榆樹葉組差異不顯著（P>0.05）；桑樹葉組和三角楓葉組沉積氮顯著高于青皮藤組（P<0.05），但與其他組差異不顯著（P>0.05）；各組間氮利用率差異不顯著（P>0.05），但桑樹葉組較其他組有升高趨勢(shì)。表明本試驗(yàn)條件下，以桑樹葉作為林麝粗飼料來源時(shí)，日糧氮利用率更高，更有利于氮的吸收利用。

表5 不同樹葉對(duì)林麝日糧氮平衡的影響(n=12)

3 討論

苦楝樹葉是楝科落葉喬木苦楝樹的葉子，含有毒成分苦楝素和苦楝萜酮內(nèi)酯，畜禽喜吃，但食量過大會(huì)引起中毒[15]。本研究中，飼喂苦楝樹葉組和榆樹葉組林麝樹葉的采食量顯著低于混合葉組，這可能是苦楝樹葉中的苦味物質(zhì)苦楝素和苦楝萜酮內(nèi)酯影響采食后的生理感受，使得林麝不喜多采食此種樹葉，該結(jié)果有待進(jìn)一步研究。王道坤[16]研究發(fā)現(xiàn)榆樹葉含粗蛋白22.4%，粗脂肪2.5%。王永奇等[17]報(bào)道，興山榆樹葉的粗蛋白為13.4%。本試驗(yàn)使用的榆樹葉粗蛋白為17.66%。粗蛋白含量的不同可能與榆樹葉產(chǎn)地、品種及收獲時(shí)期不同有關(guān)。動(dòng)物對(duì)植物的采食受到植物營(yíng)養(yǎng)價(jià)值特性的影響[18]。有研究發(fā)現(xiàn)，樹葉葉片中CP、NDF 及ADF 含量是影響黇鹿對(duì)葉片采食的重要因素，即黇鹿對(duì)葉片的采食量與NDF 和ADF 含量呈負(fù)相關(guān)，與CP 含量呈正相關(guān)[19]。本試驗(yàn)中所用榆樹葉和青皮藤粗蛋白含量不高，而ADF 和NDF 含量較高（分別為22.9%和24.7%），林麝對(duì)這兩種樹葉的采食量較低，這與黇鹿對(duì)樹葉的采食選擇相似。Liu 等[20-21]研究發(fā)現(xiàn)，使用桑葉替代生長(zhǎng)羔羊氨化稻草日糧中的菜籽粕，可促進(jìn)干物質(zhì)采食量的提高，且桑葉作為粗飼料可改善綿羊瘤胃微生態(tài)環(huán)境，并改善瘤胃營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)平衡。在本研究中，桑樹葉組基礎(chǔ)飼糧和樹葉的干物質(zhì)采食量與其他各組無(wú)顯著差異，總干物質(zhì)采食量顯著低于混合葉組，這可能是由于林麝特殊的采食習(xí)性造成的。野生林麝食性較廣，所食植物種類可達(dá)100 多種，而圈養(yǎng)林麝所食植物種類有限?；旌蠘淙~綜合了幾種樹葉在適口性和營(yíng)養(yǎng)成分方面的特點(diǎn)、較好地平衡了林麝對(duì)適口性和營(yíng)養(yǎng)的需求，故在多種樹葉混合飼喂時(shí)，較好地滿足了林麝的采食習(xí)性和適口性，采食量提高。本試驗(yàn)中林麝混合葉組的總干物質(zhì)采食量最高，較符合林麝采食多樣性的生理特點(diǎn)[22]。此外，動(dòng)物采食量與日糧蛋白質(zhì)水平有關(guān)。王循剛等[23]研究發(fā)現(xiàn)藏系綿羊羯羊平均日采食量隨日糧蛋白質(zhì)水平提高而增加。倪曉君等[24]對(duì)云南半細(xì)毛羊的研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)水平從8.38%提高到10.42%，采食量顯著增加，但10.42%及以上各水平組間差異不顯著。孫光明等[25]發(fā)現(xiàn)飼喂粗蛋白水平為9.91%和13.89%日糧的育肥期牦牛平均日采食量差異不顯著。賈志海等[26]研究發(fā)現(xiàn)，山羊16%蛋白質(zhì)水平日糧的干物質(zhì)采食量顯著高于9%蛋白質(zhì)水平日糧。試驗(yàn)結(jié)果的不同可能是由于使用的動(dòng)物和日糧蛋白質(zhì)水平不同。本研究中，由于樹葉種類不同，各組日糧蛋白質(zhì)水平有一定差異，相差最高約為1.56%，其中日糧蛋白質(zhì)水平居中的混合葉組采食量最高，樹葉種類、營(yíng)養(yǎng)成分、適口性和日糧蛋白質(zhì)水平影響林麝采食量的權(quán)重比還有待進(jìn)一步研究。

新鮮桑葉含粗蛋白4%，其蛋白質(zhì)的氨基酸組成大體與脫脂大豆粉一致[27]，經(jīng)霜后桑葉氨基酸含量高于其他季節(jié)[28]。桑葉干物質(zhì)中含粗蛋白15%～30%，粗脂肪4%～10%，粗纖維8%～12%，無(wú)氮浸出物30%～35%，粗灰分8%～12%，鈣1%～3%，磷0.3%～0.6%[29-30]，桑葉粗蛋白含量高而粗纖維含量低，林麝較喜食。桑葉富含維持機(jī)體免疫系統(tǒng)、抗氧化系統(tǒng)、脂肪和碳水化合物周轉(zhuǎn)代謝系統(tǒng)正?；驊?yīng)激活動(dòng)所需的維生素，且礦物質(zhì)元素含量豐富、易被消化吸收[31]。用桑葉飼喂牛羊可提高牛羊?qū)Υ值鞍椎奈?，Tewatia等[32]用桑樹嫩枝飼喂水牛犢，提高了日糧消化率和日增重，瘤胃氨基酸含量明顯增加。凌浩等[33]用青貯桑葉替代青貯玉米飼喂奶山羊的研究發(fā)現(xiàn)，粗蛋白和酸性洗滌纖維表觀消化率顯著提高。Sun 等[34]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂桑葉綿羊的干物質(zhì)、有機(jī)物、酸性洗滌纖維表觀消化率比飼喂羊草高，且24%桑葉組粗蛋白和粗脂肪表觀消化率高。桑葉中的黃酮類物質(zhì)能提高飼料中干物質(zhì)、中性纖維、酸性纖維及氮的表觀消化率，同時(shí)能顯著降低產(chǎn)甲烷菌的數(shù)量，增加琥珀酸纖維桿菌的數(shù)量，調(diào)節(jié)腸道菌群，減少空氣的污染[35-36]。本研究所用風(fēng)干桑樹葉含粗蛋白17.74%，粗纖維10.10%，林麝采食后日糧粗蛋白表觀消化率顯著高于其他處理組，且日糧Ca、OM、CHO、GE和NDF表觀消化率顯著高于榆樹葉組和混合葉組，且均較其他組有提高趨勢(shì)；日糧ADF 和CF 表觀消化率僅次于三角楓組，較其他組有提高趨勢(shì)。本研究結(jié)果與前述研究結(jié)果一致，說明以桑樹葉作為粗飼料的來源更有利于林麝消化吸收。

嚴(yán)冰等[37]研究了桑葉作為湖羊補(bǔ)充飼料促進(jìn)生長(zhǎng)的效果。蘇海涯等[38]研究表明，桑葉蛋白質(zhì)含量高，適口性好，可使奶牛瘤胃中可降解蛋白增加，提高產(chǎn)奶量。用桑葉飼喂牛羊可提高牛羊?qū)Υ值鞍椎奈眨琓ewatia 等[32]用桑樹嫩枝飼喂水牛犢，瘤胃氨基酸含量明顯增加。Huyen 等[39]研究發(fā)現(xiàn)，雜交肉牛每天攝入200、400、600 g桑葉顆?？删€性提高瘤胃中總揮發(fā)性脂肪酸、乙酸、丁酸含量以及乙酸/丙酸，改善氮平衡，并提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。本研究中桑樹葉組可利用氮和沉積氮顯著高于青皮藤組和苦楝樹葉組，與三角楓組和混合葉組差異不顯著，桑樹葉組氮利用率顯著高于其他處理組，提高了蛋白質(zhì)的吸收率，這與粗蛋白表觀消化率提高結(jié)果一致。桑樹葉粗蛋白含量高，易于被林麝消化吸收，可利用氮含量高，飼喂林麝后日糧營(yíng)養(yǎng)成分的表觀消化率提高，營(yíng)養(yǎng)成分的有效利用改善了氮平衡，提高了氮沉積和氮利用率，是林麝較理想的樹葉類飼料。

4 結(jié)論

林麝以混合樹葉為粗飼料時(shí)日平均總采食量最高，以桑樹葉為主要粗飼料時(shí)日糧CP、Ca、OM、CHO、GE、NDF 表觀消化率和氮利用率較其他5 組高。綜合考慮采食量、日糧表觀消化率和氮平衡指標(biāo)，未來可以考慮改變桑樹葉加工調(diào)制方法或采用以桑樹葉為主的多種樹葉混合飼喂以提高林麝的采食量和消化利用率，從而滿足林麝采食多樣性、適口性和對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求，提高林麝的生長(zhǎng)、生產(chǎn)性能。