許江飛，周海燕，王寬紅

新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院（新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第四臨床學(xué)院）神經(jīng)內(nèi)科，新鄉(xiāng) 453000

腦缺血為臨床常見(jiàn)腦血管疾病之一，70%患者會(huì)發(fā)生腦缺血再灌注（cerebral ischemia-reperfusion，CIR）損傷，CIR損傷的死亡率達(dá)10%，致殘率高于50%，再灌注不僅可造成腦組織缺血損傷，還會(huì)誘發(fā)遠(yuǎn)隔重要臟器（例如肺臟）損傷，這是造成患者死亡的重要原因之一［1］。核因子E2相關(guān)因子2/血紅素加氧酶1（nuclear factor E2-related factor 2/heme oxygenase-1，Nrf2/HO-1）屬于內(nèi)源性抗氧化通路，既往研究顯示激活Nrf2/HO-1通路對(duì)腦出血、腦梗死等多種腦損傷均具有重要的保護(hù)作用［2-3］，也有基礎(chǔ)研究證實(shí)激活Nrf2/HO-1通路可減輕內(nèi)毒素誘發(fā)的急性肺損傷［4］。降低再灌注繼發(fā)性臟器損傷為治療CIR的重要環(huán)節(jié)，但目前尚缺乏明確療效的靶向藥物。七葉皂苷鈉（sodium aescinate）是從七葉樹科植物天師栗中提取的多酯鍵三萜皂苷鈉鹽，臨床研究顯示其能夠緩解腦出血患者的腦水腫，降低出血量［5］，然而對(duì)CIR引發(fā)的肺損傷是否有保護(hù)作用目前尚不清楚。本研究采用七葉皂苷鈉對(duì)CIR大鼠進(jìn)行干預(yù)，探究其對(duì)CIR引發(fā)肺損傷的改善作用，初步探討作用機(jī)制，以期為藥物應(yīng)用提供一定依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雄性SD大鼠74只，8～10周齡，體重200～220g，由北京科宇動(dòng)物養(yǎng)殖中心提供，許可證號(hào)：SYXK（京）2018-0036。所有大鼠均在23℃、50%濕度環(huán)境中統(tǒng)一飼養(yǎng)，大鼠自由飲食飲水。本研究符合《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，且經(jīng)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理批號(hào)：20201028）。

1.2 藥品、試劑與儀器

1.2.1 藥品與試劑

注射用七葉皂苷鈉（武漢普生制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20057826，規(guī)格5mg，批號(hào)：180215）；Nrf2特異性抑制劑（ML385）（美國(guó)Selleck Chemicals公司，規(guī)格5mg，貨號(hào)：846557-71-9）；水合氯醛、多聚甲醛購(gòu)自德國(guó)Sigma-Aldrich公司，貨號(hào)分別為C8383、P6148；生理鹽水（江西江藍(lán)純生物試劑有限公司，貨號(hào)：JLC-E1400）；HE染色試劑盒、RIPA裂解液均購(gòu)自碧云天生物技術(shù)研究所，貨號(hào)分別為C0105、P0013E；白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自北京百奧萊博科技有限公司，貨號(hào)分別為ZN2877-MBG、KFS230-AVD；活性氧（reactive oxygen species，ROS）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）檢測(cè)試劑盒、免疫組化試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，貨號(hào)分別為E004-1-1、A003-1-2、A001-3-2、I001-1；Tris、甘氨酸、十二烷基硫酸鈉（sodium dodecyl sulfate，SDS）、甲醇購(gòu)自北京索萊寶生物科技有限公司，貨號(hào)分別為T1160、T8190、S8010、M9330；過(guò)氧化氫溶液（北京萬(wàn)佳首化生物科技有限公司，貨號(hào)：SH-00546）；檸檬酸鈉（德國(guó)默克公司，貨號(hào)：PHR1416）；兔抗鼠Nrf2、HO-1、抗氧化響應(yīng)元件（antioxidant response element，ARE）抗體、核內(nèi)參LaminB購(gòu)自英國(guó)Abcam公司，貨號(hào)分別為ab62352、ab137749、ab99975、ab16048；山羊抗兔HRP標(biāo)記二抗、山羊抗鼠HRP標(biāo)記二抗購(gòu)自美國(guó)CST公司，貨號(hào)分別為14708、96714；鼠抗鼠β-actin抗體（美國(guó)RcD公司，貨號(hào)：MAB8929）。

1.2.2 儀器

Vi-Cell XR細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（美國(guó)貝克曼公司）；FA3004電子天平（上海良平儀器儀表有限公司）；DHG-9023A烤箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；Centrifuge 5702 RH離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司）；JJ-2B勻漿器（上海達(dá)洛科學(xué)儀器有限公司）；XDS-200C倒置顯微鏡（蔡康光學(xué)儀器有限公司）；Mini-PROTEANTetra1658033垂直電泳儀、Mini-Trans Blot1703930轉(zhuǎn)膜儀購(gòu)于美國(guó)Bio-Rad公司；CUT4062石蠟切片機(jī)（德國(guó)SLEE公司）；Gel-Doc IT TS2凝膠成像儀（美國(guó)UVP公司）。

1.3 CIR大鼠模型建立

參照改良Zea-Longa線栓法構(gòu)建CIR模型［6］。隨機(jī)選取62只大鼠，經(jīng)腹腔注射10%水合氯醛麻醉后，在頸部正中部位做一切口，將左頸總動(dòng)脈、左頸外動(dòng)脈及左頸內(nèi)動(dòng)脈依次分離，于左頸外動(dòng)脈遠(yuǎn)端用棉線環(huán)向纏繞1cm結(jié)扎。將栓線插入左頸總動(dòng)脈，沿著左頸總動(dòng)脈及左頸內(nèi)動(dòng)脈推送入大腦中動(dòng)脈起始處，推入深度距離分叉部位2cm，阻斷大腦中動(dòng)脈血流，2h后將栓線從左頸總動(dòng)脈緩慢抽出，使中動(dòng)脈血流恢復(fù)（即缺血再灌注），24h后縫合頸部切口。大鼠清醒2h后，依據(jù)Zea Longa標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分［7］，評(píng)分為1～3分者即認(rèn)為造模成功，納入研究。本研究的模型制備過(guò)程中共14只大鼠死亡，造模成功率為77.42%。

1.4 大鼠分組方法與給藥處理

選取造模成功的48只大鼠，依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為CIR模型（Model）組、七葉皂苷鈉（SA）組、Nrf2抑制劑（ML385）組、七葉皂苷鈉聯(lián)合Nrf2抑制劑（SA+ML385）組，每組12只。另選取12只大鼠作為假手術(shù)（Sham）組，即不植入栓線，其他操作與Model組相同。

造模結(jié)束后，SA組給予注射用七葉皂苷鈉，尾靜脈注射，劑量為10mg/kg［8］；ML385組給予Nrf2特異性抑制劑（ML385），尾靜脈注射，劑量為30mg/kg［9］；SA+ML385組尾靜脈注射10mg/kg SA，15min后注射30mg/kg ML385；Sham、Model組尾靜脈注射等體積生理鹽水。各組均連續(xù)給藥4周。

1.5 觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法

1.5.1 樣本收集

末次給藥處理后，將大鼠麻醉處死，左肺用1.8 mm氣管插管行支氣管肺泡灌洗，灌洗液用量為2.5ml/次，回收率80%，共灌洗5次，得到支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）；取右肺上葉組織，清洗后部分組織用4%多聚甲醛固定，部分組織用于制備肺組織勻漿液；右肺中葉組織用于評(píng)估肺的濕/干重比（wet/dry，W/D）；右肺下葉組織置于-80℃保存。

1.5.2 CIR大鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)變化及肺組織病理?yè)p傷程度

取出4%多聚甲醛固定的肺組織，經(jīng)脫水、透明、石蠟包埋后用切片機(jī)制備5μm肺組織石蠟切片，烘烤、脫蠟脫水后參照HE染色試劑盒說(shuō)明書對(duì)肺組織切片進(jìn)行染色，封片后置于倒置顯微鏡下觀察并保存病理形態(tài)學(xué)圖片。采用半定量法［10］評(píng)估肺組織病理?yè)p傷程度，評(píng)價(jià)項(xiàng)目包括肺泡充血、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)水腫、肺泡水腫及肺泡壁厚度，每個(gè)項(xiàng)目0～4分，共20分，評(píng)分越高代表?yè)p傷越嚴(yán)重。

1.5.3 CIR大鼠肺組織的干重、濕重

采用電子天平稱取右肺中葉組織的重量，記錄濕重（wet，W）；將右肺中葉組織置于80℃烤箱中，當(dāng)兩次測(cè)量重量差不超過(guò)0.2mg時(shí)即為恒重，記錄干重（dry，D）；計(jì)算肺組織的W/D值。

1.5.4 CIR大鼠BALF中的炎癥因子水平與炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)

將BALF在4℃、3000r/min的條件下離心10min后，保留上清液，采用ELISA法檢測(cè)BALF上清液中TNF-α、IL-1β水平（參照相關(guān)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作）；采用全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定BALF原液中總細(xì)胞數(shù)、多形核白細(xì)胞數(shù)量。

1.5.5 CIR大 鼠 肺 組 織 中 的SOD、MDA、ROS水平

稱取1mg肺組織，添加9ml生理鹽水，研磨后置于勻漿器中制備勻漿液。采用硫代巴比妥酸法檢測(cè)MDA水平；采用氮藍(lán)四唑光還原法檢測(cè)組織SOD水平；采用二氫乙錠（dihydroethidium，DHE）法［11］檢測(cè)肺組織中ROS相對(duì)水平。

1.5.6 免疫 印 跡（Western blotting，WB）法測(cè)定CIR大鼠肺組織Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)水平

實(shí)驗(yàn)開始前先進(jìn)行配液：①電泳緩沖液（5×）配制：Tris 15.1g，甘氨酸72.0g，SDS 5.0g，蒸餾水定容至1L，pH調(diào)至8.3，制得電泳緩沖液（5×），置于4℃保存。使用時(shí)將電泳緩沖液（5×）稀釋為電泳緩沖液（1×），即：取200ml電泳緩沖液（5×），蒸餾水定容至1L，即得。②轉(zhuǎn)膜緩沖液配制：甘氨酸2.9g，Tris 5.8g，SDS 0.37g，600ml蒸餾水充分溶解，加200ml甲醇后混勻，定容至1L，現(xiàn)配現(xiàn)用。

配液完成后，取-80℃保存的右肺下葉組織，加入RIPA裂解液裂解，冰浴勻漿后，4℃12000r/min離心20min，上清液即為蛋白樣本。測(cè)定蛋白含量后，取20μg蛋白行10% 十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）電泳，將凝膠轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜，用山羊血清封閉膜，清洗后用Nrf2、ARE、LaminB、HO-1、β-actin一抗（1∶300）孵育，4℃過(guò)夜。洗滌后于37℃下用山羊抗兔HRP標(biāo)記二抗或山羊抗鼠HRP標(biāo)記二抗（1∶3000）孵育2h。經(jīng)增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（enhanced chemiluminescence，ECL）顯色后，在凝膠成像儀中觀察成像情況，以鼠抗鼠β-actin抗體為內(nèi)參蛋白，采用ImageJ 1.8.0軟件對(duì)蛋白相對(duì)表達(dá)情況進(jìn)行分析。

1.5.7 免疫組化法檢測(cè)CIR大鼠肺組織Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)情況

肺組織石蠟切片經(jīng)脫蠟水化后加入過(guò)氧化氫溶液，浸泡10min以消除內(nèi)源性過(guò)氧化酶，清洗后加入檸檬酸鈉進(jìn)行抗原熱修復(fù)，滴加山羊血清后室溫下封閉20min，用兔抗鼠Nrf2、ARE、HO-1一抗及鼠抗鼠β-actin一抗（1∶300）于4℃孵育，過(guò)夜，用山羊抗兔HRP標(biāo)記二抗或山羊抗鼠HRP標(biāo)記二抗（1∶3000）室溫下孵育45min，二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色后行蘇木精復(fù)染、氨水反藍(lán)，經(jīng)脫水、透明、封片后進(jìn)行鏡檢，利用ImageJ 1.8.0軟件分析Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)率，蛋白陽(yáng)性表達(dá)率=視野下陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以±s表示，多組間比較行單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 CIR大鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)變化及肺組織病理?yè)p傷程度

Model組、ML385組肺組織中肺血管及肺泡隔膜毛細(xì)血管擴(kuò)張，肺泡壁變厚，肺泡腔變窄，肺泡隔變寬，伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肺間質(zhì)出現(xiàn)水腫、充血；與Model組比較，SA組、SA+ML385組均明顯改善。各組大鼠肺組織HE染色結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 各組大鼠肺組織HE染色結(jié)果（100×）

與Sham組比較，Model組肺損傷評(píng)分升高（P＜0.05），證明CIR模型構(gòu)建成功。ML385組肺損傷評(píng)分高于Model組（P＜0.05）。SA組、SA+ML385組肺損傷評(píng)分低于Model組，且SA+ML385組肺損傷評(píng)分高于SA組、低于ML385組（P＜0.05）。各組大鼠肺損傷評(píng)分趨勢(shì)見(jiàn)圖2。

2.2 CIR大鼠肺組織的W/D

與Sham組比較，Model組肺組織的W/D值升高（P＜0.05）。ML385組肺組織的W/D值高于Model組（P＜0.05）。SA組、SA+ML385組肺組織的W/D值低于Model組，且SA+ML385組肺組織的W/D值高于SA組、低于ML385組（P＜0.05）。各組大鼠肺組織的W/D趨勢(shì)見(jiàn)圖3。

圖3 各組肺組織的W/D值比較（n=12）

2.3 CIR大鼠BALF中的炎癥因子水平與炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)

與Sham組比較，Model組BALF中IL-1β、TNF-α、總細(xì)胞數(shù)量、多形核白細(xì)胞數(shù)量均升高（P＜0.05）。ML385組BALF中各指標(biāo)均高于Model組（P＜0.05）。SA組、SA+ML385組BALF中各指標(biāo)均低于Model組，且除TNF-α外，SA+ML385組BALF中各指標(biāo)高于SA組、低于ML385組（P＜0.05）。各組BALF中的IL-1β、TNF-α、總細(xì)胞數(shù)量、多形核白細(xì)胞數(shù)量趨勢(shì)見(jiàn)圖4。

圖4 各組IL-1β、TNF-α、總細(xì)胞數(shù)量、多形核白細(xì)胞數(shù)量比較（n=12）

2.4 CIR大鼠肺組織中的SOD、MDA、ROS水平

與Sham組比較，Model組ROS、MDA水平均升高，SOD水平降低（P＜0.05）。ML385組ROS、MDA水平高于Model組，SOD水平低于Model組（P＜0.05）。SA組和SA+ML385組ROS、MDA水平低于Model組，SOD水平高于Model組；SA+ML385組ROS、MDA水平高于SA組，SOD水平低于SA組、高于ML385組（P＜0.05）。各組ROS、MDA、SOD水平趨勢(shì)見(jiàn)圖5。

圖5 各組ROS、MDA、SOD水平比較（n=12）

2.5 CIR大鼠肺組織Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)

與Sham組比較，Model組肺組織Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)降低（P＜0.05）。ML385組Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)低于Model組（P＜0.05）。SA組 和SA+ML385組Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)高于Model組；SA+ML385組Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)低于SA組、高于ML385組（P＜0.05），各組Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)量趨勢(shì)見(jiàn)圖6。

圖6 各組肺組織Nrf2、ARE、HO-1蛋白表達(dá)水平變化（n=12）

2.6 CIR大鼠肺組織Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)情況

與Sham組比較，Model組肺組織Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)降低（P＜0.05）。ML385組Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)低于Model組（P＜0.05）。SA組 和SA+ML385組Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)高于Model組；SA+ML385組Nrf2、ARE、HO-1陽(yáng)性表達(dá)低于SA組、高于ML385組（P＜0.05）。各 組Nrf2、ARE、HO-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)見(jiàn)圖7。

圖7 各組Nrf2、ARE、HO-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)比較（n=12）

3 討論

本研究采用改良Zea-Longa線栓法［6］構(gòu)建CIR致肺損傷大鼠模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Model組肺組織出現(xiàn)肺泡壁變厚，肺泡腔變窄，肺泡隔變寬，伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且伴有肺間質(zhì)水腫、充血，大鼠肺組織的W/D值升高，以上結(jié)果說(shuō)明Model組大鼠肺組織發(fā)生嚴(yán)重炎癥性損傷及病理改變，符合肺損傷大鼠模型特征，提示造模成功。

七葉皂苷鈉是從中藥天師栗果實(shí)中提取的重要活性成份，藥理學(xué)研究結(jié)果提示其具有修復(fù)毛細(xì)血管通透性、消腫、抗炎等功效［12］，有臨床研究表明七葉皂苷鈉在治療腦出血、腦水腫方面療效較佳［13］。七葉皂苷鈉可通過(guò)調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子-1α發(fā)揮對(duì)心肺復(fù)蘇后大鼠腦組織的保護(hù)作用［14］，但其對(duì)CIR致腦損傷的治療作用尚不明確。本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)七葉皂苷鈉干預(yù)后，大鼠肺組織病理學(xué)得到明顯改善，肺組織評(píng)分降低，肺組織的W/D值降低，提示七葉皂苷鈉可以緩解CIR所致大鼠肺組織水腫，緩解肺組織的炎癥反應(yīng)。

肺組織中的肺泡巨噬細(xì)胞能夠釋放大量的IL-1β、TNF-α等促炎性細(xì)胞因子，進(jìn)一步擴(kuò)大炎癥反應(yīng)。此外IL-1β、TNF-α水平升高能夠加速中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)至肺組織損傷區(qū)，擴(kuò)大組織炎癥反應(yīng)，造成惡性循環(huán)［15］?；A(chǔ)研究顯示，抑制IL-1β分泌可緩解大鼠肺損傷［16］。本研究發(fā)現(xiàn)，Model組肺組織BALF中IL-1β、TNF-α、總細(xì)胞數(shù)量、多形核白細(xì)胞數(shù)量均升高，經(jīng)七葉皂苷鈉干預(yù)后各指標(biāo)均降低，提示七葉皂苷鈉可能通過(guò)抑制肺組織炎癥因子釋放而降低炎癥反應(yīng)，緩解肺組織損傷。

Nrf2為細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，一般與Keap1結(jié)合并存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)受到氧化應(yīng)激刺激后，Nrf2與Keap1解離，移位到細(xì)胞核中與ARE蛋白結(jié)合調(diào)控下游HO-1等抗氧化酶，發(fā)揮抗氧化作用［17］。Nrf2/HO-1與腦組織氧化損傷有關(guān)，過(guò)往研究顯示激活Nrf2/HO-1通路有利于降低腦組織的氧化應(yīng)激反應(yīng)，發(fā)揮腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用［18］。Li等［19］發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷Ⅱ可通過(guò)激活Nrf2/HO-1通路而減輕腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織氧化應(yīng)激水平；Cattani等［20］發(fā)現(xiàn)激活Nrf2/HO-1可減弱小鼠肺組織氧化應(yīng)激、減弱NF-κB/TNF-α途徑而降低炎癥反應(yīng)。然而Nrf2/HO-1與CIR繼發(fā)肺損傷的關(guān)系目前尚不明確。本研究中，Model組大鼠肺組織中Nrf2、ARE、HO-1表達(dá)水平降低，提示CIR繼發(fā)肺損傷發(fā)生可能與Nrf2/HO-1信號(hào)通路的抑制有關(guān)。經(jīng)七葉皂苷鈉干預(yù)后，大鼠肺組織中Nrf2、ARE、HO-1表達(dá)水平升高，推測(cè)七葉皂苷鈉緩解CIR大鼠肺部炎癥反應(yīng)的作用可能與Nrf2/HO-1信號(hào)通路的激活有關(guān)。腦損傷或腦出血后，腦組織中會(huì)釋放大量ROS，造成氧自由基增多，并進(jìn)一步導(dǎo)致SOD減少，MDA 等氧化物質(zhì)增多，加重氧化應(yīng)激損傷［21］。本研究中，Model組MDA、ROS水平均升高，SOD水平降低；經(jīng)七葉皂苷鈉干預(yù)后，MDA、ROS水平均降低，SOD水平升高，提示七葉皂苷鈉可能通過(guò)激活Nrf2/HO-1信號(hào)通路降低CIR引發(fā)的氧自由基堆積，發(fā)揮抗氧化作用。為證實(shí)這一推測(cè)，本研究采用Nrf2特異性抑制劑處理CIR大鼠發(fā)現(xiàn)，經(jīng)Nrf2特異性抑制劑干預(yù)后，CIR大鼠肺組織損傷更為嚴(yán)重，BALF中炎癥因子表達(dá)水平及炎癥細(xì)胞數(shù)量均高于Model組，肺組織中Nrf2、ARE、HO-1表達(dá)水平均低于Model組，提示抑制Nrf2表達(dá)后能夠加重CIR后肺組織炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激水平，加重肺損傷；Nrf2特異性抑制劑聯(lián)合七葉皂苷鈉干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，大鼠肺部炎癥反應(yīng)、肺損傷得到一定緩解，進(jìn)一步說(shuō)明七葉皂苷鈉能夠通過(guò)激活Nrf2/HO-1信號(hào)通路，降低CIR后肺組織炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激水平，改善肺組織損傷。

綜上所述，七葉皂苷鈉可在一定程度上改善CIR繼發(fā)肺損傷，其機(jī)制可能與激活Nrf2/HO-1信號(hào)通路、降低CIR后肺組織炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激水平有關(guān)。本研究也存在一定的缺陷，例如CIR繼發(fā)肺損傷發(fā)生機(jī)制較為復(fù)雜，七葉皂苷鈉是否還可能通過(guò)參與其他信號(hào)通路對(duì)CIR繼發(fā)肺損傷的保護(hù)作用還有待后續(xù)深入探究。