張國華, 金振華, 張 備, 王麗坤, 黃新育, 薛沾枚, 沈思思,楊昊天, 劉雪松, 海 龍, 王 巖, 郭立宏, 郝彩虹, 李紅宇, 王洪寶
(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院,黑龍江 齊齊哈爾 161005)
寄生蟲類疾病是嚴(yán)重危害羊健康成長的一類消耗性疾病,會降低羊的生產(chǎn)效率,嚴(yán)重者會造成死亡,給羊養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的損失,特別是羊胃腸道線蟲類疾病給羊養(yǎng)殖業(yè)帶來的困擾尤為嚴(yán)重(Lambertz,2018)。 為解決以上問題,養(yǎng)殖人員長期大量的使用抗寄生蟲類藥物來對胃腸道線蟲病進行防治, 以降低對養(yǎng)羊業(yè)的損失 (羅曉平,2022)。在抗寄生蟲類藥中大多數(shù)為如伊維菌素這類的抗生素類藥物, 但是長期大量的使用抗生素會導(dǎo)致藥物在體內(nèi)的殘留,影響羊的肉質(zhì)和奶質(zhì),如果人食用了該類產(chǎn)品對身體健康也會產(chǎn)生影響(郭少平,2021)。
中草藥與抗生素類藥物相比對動物機體會產(chǎn)生相對較少的副作用以及耐藥性, 并且可以通過對機體內(nèi)環(huán)境的調(diào)整來改善動物的生理狀態(tài)(Liu,2021)。 目前研究表明可以利用中草藥對人和動物的寄生蟲類疾病進行有效地防控和治療(王占銘,2020)。 王雙等(2021)研究表明,使用青蒿素具有較好的抗組織滴蟲的效果, 可以有效地降低雞組織滴蟲的發(fā)病率。 陸寶燕等(2020)研究顯示,苦楝提取物可以有效地抑制羊捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵的發(fā)育。 楊繼生等(2008)研究表明,使用中草藥使君子的提取物對鼠體內(nèi)的蛔蟲具有很好地驅(qū)蟲效果。從中獸醫(yī)的角度來考慮家畜寄生蟲病, 可以觀察到發(fā)病的動物會有脾胃氣虛,谷草不消,生長緩慢等特征(陳曉蘭,2017)。目前通過在日糧中添加中草藥添加劑來解決驅(qū)除小尾寒羊胃腸道線蟲的研究較少。 本研究通過在日糧中添加中草藥添加劑以達到驅(qū)蟲散積、健脾益氣的目的。 以苦楝、草豆蔻、使君子為驅(qū)蟲劑,黨參、黃芪等為健脾益氣的補虛藥,研究其對小尾寒羊生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)、 免疫指標(biāo)以及胃腸道線蟲驅(qū)蟲效果的影響,以確定最佳添加劑量。
1.1 試驗動物及設(shè)計 本試驗于黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院小尾寒羊養(yǎng)殖基地開展。試驗選取3 月齡左右、體重(21.61±1.09)kg、飽和鹽水漂浮法測定糞便中含有胃腸道線蟲蟲卵的母小尾寒羊48 只,隨機分為4 組,每組12 只。 對照組飼喂基礎(chǔ)日糧, Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ組飼喂日糧中分別添加0.5%、1.0%、2.0%的中草藥添加劑,試驗為期14 d。按照試驗分組進行分欄飼養(yǎng)并記錄好耳號,試驗開展前一周將試驗動物轉(zhuǎn)至新環(huán)境進行適應(yīng),減少應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生,試驗期間自由采食以及飲水,參與試驗的小尾寒羊全部采取相同的飼養(yǎng)模式進行管理。
1.2 試驗試劑及飼料 苦楝、草豆蔻、使君子、黨參、黃芪等中草藥材購自齊齊哈爾市同仁堂藥店。血清生化檢測的試劑盒包括:總蛋白(TP,批號:20220410)、白蛋白(ALB,批號:20220610)、尿素氮(UREA,批號20220413)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT,批號 20220612)、 谷草轉(zhuǎn)氨酶 (AST, 批號20220527)、尿酸(UA,批號20220625),購自深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司。檢測免疫指標(biāo)包括:免疫球蛋白A(IgA,批號20220410)、免疫球蛋白G(IgG,批號20220511)、免疫球蛋白M(IgM,批號20220629), 試劑盒購自南京建成生物工程研究所,基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平
1.3 指標(biāo)測定
1.3.1 生長性能測定 試驗第0、14 天清晨,在試驗動物未進食的情況下稱重, 計算平均日增重(ADG)、平均采食量(ADFI)、料重比(FCR)。 終末體重以TBW 表示,初始體重以IBW 表示,計算公式如下:
ADG=(TBW-IBW)/14 d;
FCR=ADFI/ADG。
1.3.2 血清生化指標(biāo)檢測 在試驗第0、7、14 天清晨空腹使用肝素鈉采血管采集靜脈血10 mL,4000 r/min 離心分離得到血漿后12000 r/min 離心分離血清。 應(yīng)用全自動生化分析儀(BS220)進行血清生化檢測,檢測項目包括TP、ALB、UREA、ALT、AST、UA。
1.3.3 免疫指標(biāo)檢測 在試驗第0、7、14 天清晨空腹使用肝素鈉采血管采集靜脈血10 mL,4000 r/min 離心分離得到血漿后12000 r/min 離心分離血清。 應(yīng)用科華酶標(biāo)儀(ST360)進行免疫指標(biāo)檢測,檢測項目包括IgA、IgG、IgM。
1.3.4 糞便樣本采集以及檢測 試驗第0、7、14天采集新鮮糞便10 g,做好標(biāo)記,立即進行實驗室檢測。新鮮糞便應(yīng)用飽和鹽水漂浮法制片,置于顯微鏡下進行鑒定和計數(shù), 運用麥克馬斯特氏法測定EPG,以蟲卵減少情況來評價療效。 將試驗后EPG 為n,試驗前EPG 為x,計算公式如下:
1.4 數(shù)據(jù)處理 原始數(shù)據(jù)于Excel 2007 進行記錄, 應(yīng)用SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件單因素方差One-way ANOVA 進行分析,數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,設(shè)置P<0.05 為差異顯著,P<0.01 為差異極顯著。
2.1 中草藥添加劑對小尾寒羊生產(chǎn)性能的影響如表2 中所示,與對照組進行比較可見,Ⅰ組、Ⅱ組、 Ⅲ組ADG 增加了4.17%、12.50%、12.50%,差異不顯著(P>0.05);各個組之間的ADFI 無顯著差異(P>0.05);試驗組FCR 與對照組相比降低了3.13%、4.98%、2.76%,差異不顯著(P>0.05)。
表2 中草藥添加劑對小尾寒羊生產(chǎn)性能的影響
2.2 中草藥添加劑對小尾寒羊血清生化指標(biāo)的影響 如表3 所示, 小尾寒羊在試驗第0、7 天血清TP、ALB、ALT、AST、UA、UREA 指標(biāo)各組之間無顯著差異(P>0.05)。試驗第14 天時,與對照組進行比較可見,Ⅱ組、Ⅲ組TP 分別增加了5.47%、5.38%,差異顯著(P<0.05);Ⅱ組、Ⅲ組ALB 分別增加了8.72%、6.18%,差異顯著(P<0.05),UREA、ALT、AST、UA 這4 項血清生化指標(biāo)在各組之間未發(fā)現(xiàn)顯著差異(P>0.05)。
表3 中草藥添加劑對小尾寒羊血清生化指標(biāo)的影響
2.3 中草藥添加劑對小尾寒羊免疫指標(biāo)的影響如表4 所示,在試驗第7 天時,與對照組進行比較可見,試驗組的IgA 和IgG 含量有升高的趨勢,但無顯著差異(P>0.05),IgM 含量未見顯著差異和升高趨勢(P>0.05)。在試驗第14 天時,與對照組進行比較可見, Ⅱ組、 Ⅲ組IgA 含量提高了20.00%、19.05%,差異顯著(P<0.05),IgG 的含量分別提高了11.04%、9.82%,差異顯著(P<0.05)。IgM 含量無顯著差異(P>0.05)。
表4 中草藥添加劑對小尾寒羊免疫指標(biāo)的影響g/L
2.4 中草藥添加劑對小尾寒羊胃腸道線蟲驅(qū)蟲效果的影響 如表5 所示,在試驗第7 天時,Ⅰ組EPG 與對照組相比顯著差異(P<0.05),Ⅱ組、Ⅲ組差異及顯著(P<0.01),Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組的療效分別為33.11%、54.61%、54.67%。 在試驗第14 天時,Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組差異極顯著(P<0.01),Ⅱ組與Ⅰ組差異極顯著(P<0.01),Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組的療效分別為39.13%、55.92%、52.67%。
表5 中草藥添加劑對小尾寒羊消化道線蟲驅(qū)蟲效果的影響
3.1 中草藥添加劑對小尾寒羊生產(chǎn)性能的影響中草藥添加劑中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì), 可以起到幫助動物消化吸收,改善機體的內(nèi)環(huán)境,抑制病原體的繁殖和生長等作用(段凱文,2020)。吳萍萍等(2022)報道,中草藥渣應(yīng)用于湖羊可以顯著的提高ADFI 和降低FCR。趙娟娟等(2022)報道,復(fù)方中草藥對熱應(yīng)激小尾寒羊ADFI 可增加1.05% ~7.21%,平均日增重最高可增加12.12%。甘輝群等(2020)報道,中草藥止痢散應(yīng)用于家禽后可以明顯的增加ADG,降低FCR。 本研究中雖然試驗組與對照組相比,ADG、ADFI、FCR 各組之間的差異不顯著,但是在飼料中添加1%和2%的中草藥添加劑可以使小尾寒羊的ADG 有上升的趨勢,F(xiàn)CR有下降的趨勢。
3.2 中草藥添加劑對小尾寒羊血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)可以在一定的程度上反映受檢驗動物的健康狀況、營養(yǎng)狀況,在臨床上具有十分重要的參考意義。 TP、ALB、UREA、ALT、AST、UA 這幾項指標(biāo)可以很好地反映動物肝腎功能是否有損傷以及代謝的情況。吳道義等(2022)報道,在飼料中添加中草藥微生態(tài)制劑可以有效地改善黑山羊的血液生化指標(biāo)。 本研究結(jié)果顯示試驗組UREA、ALT、AST、UA 指標(biāo)與對照組組間無顯著差異, 說明本中草藥添加劑對試驗動物肝腎功能無明顯的損傷,可安全應(yīng)用。 TP 和ALB 這2 項指標(biāo)可以反映出動物的營養(yǎng)狀況。在本研究中,飼料中添加1%和2%的中草藥組TP 和ALB 含量顯著提高, 說明中草藥飼料添加劑可以起到幫助動物蛋白質(zhì)吸收的作用。
3.3 中草藥添加劑對小尾寒羊免疫指標(biāo)的影響免疫球蛋白是指一類具有抗體活性的動物蛋白,可以直接參與動物機體的免疫反應(yīng), 其中IgG、IgA、IgM 可以起到非常關(guān)鍵的作用 (魏倩倩,2022)。 楊濛等(2021)研究顯示,富鍺發(fā)酵中草藥制劑可以極顯著提高育肥豬血清中IgG、IgM 的含量。武彩紅等(2021)研究結(jié)果顯示,日糧中添加復(fù)方中草藥可以顯著提高IgG 的含量, 同時還具有降低仔豬腹瀉的發(fā)病率的作用。 向凌云等(2019)研究顯示, 幼兔在飼喂復(fù)方中草藥制劑后血清IgG、IgA、IgM 的含量分別提高了44.71%、22.03%、17.7%。 沈?qū)W懷等(2021)研究顯示,母豬采食復(fù)方發(fā)酵飼料后血清IgG、IgA 的含量逐漸升高, 且在飼喂30 d 的時候與對照組相比差異極顯著。本研究的結(jié)果與其相近,IgG、IgA 的含量隨著中草藥添加劑飼喂時間的加長, 含量逐漸上升, 在試驗14 d 的時候與對照組差異顯著,說明飼料添加劑可以有效的增加小尾寒羊的免疫力。
3.4 中草藥添加劑對小尾寒羊胃腸道線蟲驅(qū)蟲效果的影響 中草藥作為控制和預(yù)防人和動物寄生蟲類疾病的作用已經(jīng)在很多研究中有所表現(xiàn)。陸寶燕等(2020)的研究表明,中草藥苦楝的提取物可以麻痹羊體內(nèi)的捻轉(zhuǎn)血矛線, 從而起到驅(qū)蟲的作用。 趙超等(2013)應(yīng)用中草藥方劑對羊的胃腸道線蟲的驅(qū)蟲試驗顯示,應(yīng)用鶴虱、使君子、檳榔等中草藥進行驅(qū)蟲效果十分的理想。 本研究中選用苦楝、草豆蔻、使君子、黨參、黃芪等中草藥對小尾寒羊胃腸道線蟲進行驅(qū)蟲試驗, 驅(qū)蟲效果雖然不及化藥, 但可以有降低使用化藥而出現(xiàn)的耐藥性的風(fēng)險。 苦楝、草豆蔻、使君子等中草藥中的有效成分可以起到感染寄生蟲能量代謝, 麻痹寄生蟲,從而排除體外的作用。 黨參、黃芪具有健脾益氣,提高免疫力,增強動物機體抵抗寄生蟲的能力的作用。 在飼料中添加1%和2%的中草藥添加劑在一定程度上起到了驅(qū)蟲的作用。
本研究中,中草藥添加劑對小尾寒羊的生長性能無顯著影響,但有提高平均日增重,降低料重比的趨勢。 日糧中添加1%、2%的中草藥添加劑可以顯著提高血清生化指標(biāo)TP 和ALB 以及免疫指標(biāo)IgA 和IgG 的含量,并在臨床應(yīng)用中具有一定的驅(qū)蟲作用。 本試驗條件下,適宜添加的劑量為1%。