祖涵瑜，陳夢莎，韓慧婷，閆鵬，陳亮，黃婭楠，張濬韜，姜興岳*

0 前言

磁共振對比劑作為順磁性或超順磁性的物質(zhì)，其與氫質(zhì)子存在磁性相互作用，影響氫質(zhì)子的弛豫率，使得不同組織和結(jié)構(gòu)間的對比度增強(qiáng)[1]。磁共振對比劑主要分為兩大類[2]：T1 對比劑縮短T1 弛豫時間，使信號強(qiáng)度增加，亮度變亮，為陽性對比劑，最常見的為釓類對比劑[3]；T2 對比劑縮短T2 弛豫時間，信號強(qiáng)度變低，亮度變暗，故被稱為陰性對比劑，最常見的為鐵類對比劑[4]。釓類對比劑因其腎毒性限制了其在臨床中的應(yīng)用[5]，此外，人腦中尤其是蒼白球和齒狀核的Gd3+沉積是釓劑的另一個顯著不利影響[6]；而鐵是人體的必需元素，也是血紅蛋白不可或缺的一部分，F(xiàn)e3O4可被溶酶體降解，降解后可以被機(jī)體清除或進(jìn)入體內(nèi)正常代謝途徑，基于氧化鐵納米顆粒的對比劑被認(rèn)為更具生物安全性[7]。Fe3O4納米顆粒作為一種陰性對比劑，由于具有強(qiáng)磁性和高磁化率、優(yōu)異的表面化學(xué)性質(zhì)及多樣性的功能被越來越多的學(xué)者關(guān)注[8]，已在磁共振分子成像、磁性引導(dǎo)藥物輸送、磁熱治療中顯示出巨大的應(yīng)用前景[9-10]。Fe3O4納米顆粒通過偶聯(lián)多種藥物[11-12]或配合多種序列[13]廣泛應(yīng)用于多個系統(tǒng)[14-16]疾病的診斷、鑒別診斷和治療[17-19]研究當(dāng)中，尤其在分子影像領(lǐng)域中發(fā)揮著重要的作用，有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景[7]。目前Fe3O4納米顆粒合成的主要化學(xué)方法有：共沉淀法、溶劑熱法、微乳液法、熱分解法和溶膠-凝膠法[20-22]。其中溶劑熱法因制造成本低、反應(yīng)條件安全簡單、最終產(chǎn)物純度高且具有良好的水分散性被越來越多的學(xué)者應(yīng)用。未經(jīng)表面修飾的Fe3O4納米顆粒生物相容性較差，會對活體動物的正常組織或器官產(chǎn)生潛在的毒性[23]。目前主流用于修飾Fe3O4的修飾物為葡聚糖或聚乙二醇等聚合物[24-25]，亦有學(xué)者將Fe3O4與其他無機(jī)物偶聯(lián)[26-27]或與放射性元素偶聯(lián)[28]，還有學(xué)者將巨噬細(xì)胞作為鐵載體[29]或者將細(xì)胞膜作為包覆物[30]，較少有學(xué)者使用半胱氨酸（cysteine, Cys）進(jìn)行Fe3O4的表面修飾[31]。Cys 屬于人體內(nèi)的氨基酸，本身具有良好的生物相容性和化學(xué)穩(wěn)定性。另外，Cys 由于其巰基具有獨特的親核性、較低的氧化還原電勢以及較低的自然豐度等特點，適合作為納米顆粒的表面修飾材料，經(jīng)Cys 修飾可以降低Fe3O4納米顆粒的表面能，減小顆粒間的引力，從而制備出穩(wěn)定性好、分散均勻的Fe3O4納米顆粒[32]。目前，尚未發(fā)現(xiàn)有學(xué)者將Fe3O4@Cys作為T2對比劑用于磁共振活體成像。

本研究制備的Fe3O4@Cys 納米顆粒，增加其生物相容性的同時，表現(xiàn)出優(yōu)異的磁學(xué)性能，在活體內(nèi)進(jìn)行磁共振成像時有明顯的對比增強(qiáng)效果，有望作為T2 對比劑應(yīng)用于缺血性疾病例如小腸缺血的定性及定位的診斷研究。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

FeCl3·6H2O（分析純）、檸檬酸三鈉（分析純）、乙酸鈉（分析純）、乙二醇（分析純）、Cys（分析純）均購自于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

恒溫加熱箱（精宏DHG-9146A）、真空干燥箱（喬躍DZF-6020）、X 射線粉末衍射儀（理學(xué)SmartLab 3KW）、掃描電子顯微鏡（日立S-4800）、ZETA電位納米粒度分析儀（馬爾文ZetasizerNano S90）、震動樣品磁強(qiáng)計（量子LakeShore7404）、3.0 T 磁共振成像系統(tǒng)（西門子MAGNETOM SKyra）、8 通道小動物線圈（蘇州眾志醫(yī)療科技有限公司，3A81108C RB80）。

1.2 實驗動物

健康的雌性新西蘭大白兔5只（濟(jì)南西嶺角養(yǎng)殖繁育中心，普通級，NO.370822211100090357），4～6月齡，體質(zhì)量（2.00±0.16）kg，由濱州醫(yī)學(xué)院動物房提供，許可證號：syxk（魯）20180022。清潔環(huán)境下分籠飼養(yǎng)。實驗獲得濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院動物實驗委員會批準(zhǔn)，批準(zhǔn)文號：20190812。

1.3 制備及表征

1.3.1 制備、洗滌及取樣

制備：稱量不同質(zhì)量的FeCl·36H2O，一次稱量0.2 g 檸檬酸三鈉、1.2 g乙酸鈉。分別量取20 mL乙二醇，置于3個燒杯中，將FeCl·36H2O加入到乙二醇溶液中，攪拌5 min，將檸檬酸三鈉加入到乙二醇溶液中，磁力攪拌15 min，將乙酸鈉加入到乙二醇溶液中，攪拌30 min，完成后將樣品轉(zhuǎn)移至高壓反應(yīng)釜中，并將高壓反應(yīng)釜放入恒溫加熱箱。調(diào)節(jié)恒溫加熱箱溫度至200℃，分別加熱4、6、8 h。

洗滌：取出高壓反應(yīng)釜，將樣品分別轉(zhuǎn)移至200 mL燒杯中，高壓反應(yīng)釜中殘留樣品用酒精沖洗并轉(zhuǎn)移至燒杯中。向各個燒杯中加入酒精至120 mL，燒杯下方放置磁鐵，燒杯口覆蓋保鮮膜，靜置沉淀，沉淀完成后將燒杯中余液倒出。向3 個燒杯中加入去離子水至120 mL，燒杯下放置磁鐵，燒杯口覆蓋保鮮膜，靜置沉淀，沉淀完成后將燒杯中去離子水倒出，重復(fù)5次。

取樣：向燒杯中加入少量的去離子水，放入超聲波清洗機(jī)中分散均勻；用移液器將分散后的樣品移至離心管中，將離心管放入高速離心機(jī)中離心；離心完成后，用移液器將離心管上層清液移出，保留下層沉淀。將離心管放入干燥箱中干燥6 h，得到干燥樣品。

1.3.2 改變反應(yīng)時間

在一次反應(yīng)中，F(xiàn)eCl3·6H2O 的用量為0.325 g，加熱時間分別為4、6、8 h。制得的樣品采用X射線粉末衍射儀進(jìn)行表征，分析反應(yīng)時間對樣品結(jié)晶性的影響。

1.3.3 改變底物濃度

選擇結(jié)晶性最高的反應(yīng)時間，調(diào)整FeCl3·6H2O 的用量分別為0.65、0.325、0.1625 g。制得的樣品采用掃描電子顯微鏡（scanning electron microscope,SEM）進(jìn)行表征，隨機(jī)選取150個納米顆粒納入統(tǒng)計，分析底物濃度對樣品形貌、粒徑的影響。

1.3.4 表面修飾

選擇結(jié)晶性較高，粒徑分布較均勻的樣品進(jìn)行表面修飾。將干燥后的樣品加入到10 mL去離子水中并放入超聲波清洗機(jī)分散，分散后加入10 mL 濃度為0.121%的Cys溶液并加熱攪拌10 h，制得Fe3O4@Cys。將部分修飾后的樣品充分稀釋，室溫下經(jīng)ZETA 電位分析儀測量修飾前后樣品的ZETA電位。將部分修飾后的樣品干燥，室溫下經(jīng)震動樣品磁強(qiáng)計測量磁滯回線。

1.4 細(xì)胞增殖抑制實驗

將4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞接種于96孔板中，標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下培養(yǎng)24 h，更換新鮮培養(yǎng)液并加入相應(yīng)濃度梯度的Fe3O4和Fe3O4@Cys，最終96 孔板的濃度梯度為0.025、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/mL，37 ℃、5% CO2孵育24 h，在倒置顯微鏡下觀察，吸除培養(yǎng)液，PBS 洗滌，加入新鮮無血清DMEM 培養(yǎng)基，每孔加入20 μL MTT溶液（5 g/mL），繼續(xù)培養(yǎng)4 h。吸去培養(yǎng)液終止培養(yǎng)，每孔加入150 μL 二甲基亞砜（Dimethyl sulfoxide, DMSO），置搖床上低速振蕩10 min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD 490 nm 處測量各孔的吸光值。

1.5 磁共振成像性能測試

將新西蘭兔麻醉后，仰臥位放置于8通道兔專用線圈（蘇州眾志醫(yī)療科技有限公司3A81108C RB80），冠狀位行T2 加權(quán)成像掃描。將對比劑（注射劑量為5.0 mg Fe/kg，即每千克新西蘭兔體重注射納米探針5.0 mg，以納米顆粒中Fe質(zhì)量計算）經(jīng)新西蘭兔耳緣靜脈注射，掃描間隔為20 min，共掃描240 min。3 次測量腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)及小腸腸壁信號值并記錄，取平均值。T2 加權(quán)成像掃描序列參數(shù)如下：TR 2000.0 ms，TE 83.0 ms，F(xiàn)OV 140 mm×123 mm，翻轉(zhuǎn)角100°，體素尺寸0.7 mm×0.7 mm×3.0 mm，矩陣136×192，層厚3.0 mm。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用R 語言進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析。不同濃度Fe3O4與Fe3O4@Cys 細(xì)胞存活率的比較采用獨立樣本t檢驗。比較注射對比劑前后不同時間點腎臟及小腸信號值的差異，判斷正態(tài)性及方差齊性，若都符合，采用t檢驗，若其中之一不符合，則采用Kruskal-Wallis 秩和檢驗。P＜0.05 被認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 反應(yīng)時間對產(chǎn)物結(jié)晶性的影響

X 射線衍射儀（X-ray powder diffractometer,XRD）顯示（圖1）：圖譜出現(xiàn)了明顯的衍射峰，且衍射峰為Fe3O4的特征峰，表明反應(yīng)時間為4、6、8 h 時制備得到的物質(zhì)均為Fe3O4，證實改變上述的反應(yīng)時間對產(chǎn)物性質(zhì)無明顯改變，樣品結(jié)晶性隨反應(yīng)時間的延長而增加。表明，反應(yīng)時間不影響產(chǎn)物性質(zhì)，并與結(jié)晶性正相關(guān)。

圖1 不同反應(yīng)時間的產(chǎn)物性質(zhì)及結(jié)晶性。圖1A～1C 分別為反應(yīng)時間4、6、8 h 時產(chǎn)物的X 射線衍射圖譜。（1 mSv=10-3 J/kg）。Fig.1 Product properties and crystallization properties at different reaction times.1A-1C show the X-ray diffraction (X-ray powder diffractometer,XRD) map of the products at 4 h, 6 h and 8 h, respectively.(1 mSv=10-3 J/kg).

2.2 底物濃度對粒徑的影響

掃描電鏡（scanning electron microscope, SEM）顯示（圖2）：當(dāng)FeCl3·6H2O的用量為0.650 g時制備的平均粒徑約為116.0 nm，相鄰Fe3O4納米顆粒通過磁性作用相互吸引使得樣品出現(xiàn)團(tuán)聚；當(dāng)FeCl3·6H2O的用量為0.325、0.1625 g 時制備得到的Fe3O4納米顆粒表面較光滑、分散較均勻且呈球形，平均粒徑分別為57.2、57.0 nm?？梢钥闯鰳悠返钠骄诫S著FeCl3·6H2O 的濃度降低而減小。樣品經(jīng)Cys 修飾后，粒徑大小、形貌均未發(fā)生明顯改變。

圖2 FeCl3·6H2O 用量0.650 g（2A）、0.325 g（2B）、0.1625 g（2C）時產(chǎn)物的掃描電鏡圖像及反應(yīng)時間8 h、FeCl3·6H2O 用量0.325 g 時產(chǎn)物經(jīng)半胱氨酸修飾后樣品的掃描電鏡圖像（2D）。Fig.2 The scanning electron microscope (SEM) images of the product at FeCl3·6H2O dosage 0.650 g (2A), 0.325 g (2B) and 0.1625 g (2C), respectively, and the SEM images of the product after cysteine modification at the reaction time 8 h and FeCl3·6H2O dosage 0.325 g (2D).

2.3 Fe3O4@Cys具有超順磁性

震動樣品磁強(qiáng)計顯示（圖3）：磁滯回線呈對稱的“S”形，不存在滯后現(xiàn)象。制備的納米顆粒飽和磁化強(qiáng)度約為73 emu/g（1 emu/g=1 Am2/kg）。剩余磁化強(qiáng)度和矯頑力均趨近于零。表明樣品非鐵磁性、具有良好的超順磁性。

圖3 當(dāng)反應(yīng)時間為8 h、FeCl3·6H2O 用量為0.325 g 時樣品的磁滯回線。（1 Oe≈79.6 A/m；1 emu/g=1 Am2/kg）。圖4 Fe3O4納米顆粒（4A）與Fe3O4@Cys（4B）的表面電位。Fig.3 The hysteresis loop of the samples when the reaction time is 8 h and the FeCl3·6H2O dosage is 0.325 g.(1 Oe≈79.6 A/m; 1 emu/g=1 Am2/kg).Fig.4 The surface potential of the Fe3O4 nanoparticles (4A) and Fe3O4@Cys (4B).

2.4 Cys修飾使納米顆粒穩(wěn)定性增加

ZETA 電位納米粒度分析儀顯示（圖4）：Fe3O4、Fe3O4@Cys 表面均帶有負(fù)電荷，在水相中的電位分別約為-20、-22 mV。

2.5 Cys修飾降低納米顆粒的細(xì)胞毒性

不同濃度的納米顆粒與4T1 細(xì)胞共培養(yǎng)24 h后，經(jīng)MTT實驗測得細(xì)胞存活率（圖5）：Fe3O4@Cys組的細(xì)胞存活率始終高于Fe3O4組，當(dāng)濃度達(dá)到0.4 mg/mL時細(xì)胞存活率仍保持在80%以上。

圖5 不同濃度Fe3O4與Fe3O4@Cys 的細(xì)胞存活率。*：P＜0.05；**：P＜0.01。圖6 新西蘭兔耳緣靜脈注射Fe3O4@Cys 后，T2 加權(quán)成像信號值-時間變化曲線。Fig.5 Cell viability of different concentrations of Fe3O4 versus Fe3O4@Cys.*: P＜0.05; **: P＜0.01.Fig.6 T2-weighted imaging signal value-time change curve after intravenous Fe3O4@Cys in New Zealand rabbits.

2.6 Fe3O4@Cys 在新西蘭兔活體成像中的信號值-時間變化曲線

磁共振T2 加權(quán)成像信號值-時間變化曲線顯示（圖6）：注射Fe3O4@Cys后，腎臟皮質(zhì)、髓質(zhì)及小腸腸壁信號值先降低后逐漸升高，其中腎皮質(zhì)與腎髓質(zhì)在注射對比劑后80 min時信號值最低，小腸在注射對比劑后120 min 信號值最低。通過Kruskal-Wallis 秩和檢驗比較注射前與注射后不同時間節(jié)點的信號值，其中腎皮質(zhì)、髓質(zhì)信號值均于注射后20～160 min內(nèi)顯著低于注射前水平（P＜0.05,P=1.29×10-8），小腸腸壁信號值于注射后40～200 min 內(nèi)顯著低于注射前水平（P＜0.05,P=1.29×10-8）（圖7）。

圖7 不同時間點腎臟及小腸T2 加權(quán)像?；【€為腎皮質(zhì)區(qū)，扇形為腎髓質(zhì)區(qū)，直線為小腸壁。Fig.7 T2-weighted images of the kidney and the small intestine at different time points.Arc is renal cortical area, fan shape of renal medullary area, straight line is small bowel wall.

3 討論

本研究采用溶劑熱法，通過改變反應(yīng)時間、底物濃度，制備了不同結(jié)晶性、不同粒徑的Fe3O4納米顆粒。本研究首次將Fe3O4@Cys 納米顆粒應(yīng)用于磁共振成像，研究證實修飾后產(chǎn)物的穩(wěn)定性及生物相容性增加。

3.1 反應(yīng)時間對Fe3O4納米顆粒結(jié)晶性的影響

本研究表明，反應(yīng)時間延長，F(xiàn)e3O4納米顆粒結(jié)晶性隨之增加，這與以往研究[33]報道的規(guī)律相一致。這是由于當(dāng)反應(yīng)體系中底物濃度和反應(yīng)溫度一定時，當(dāng)反應(yīng)時間更加充足，產(chǎn)物反應(yīng)亦更加充分，導(dǎo)致Fe3O4納米顆粒結(jié)晶性增加[34]。晶體的生長在高壓釜內(nèi)進(jìn)行，高壓釜上部為結(jié)晶區(qū)，懸掛籽晶；下部為溶解區(qū)，放置培養(yǎng)晶體的原料，釜內(nèi)填裝溶劑介質(zhì)。反應(yīng)過程中由于結(jié)晶區(qū)與溶解區(qū)之間存在溫度差而產(chǎn)生對流，將高溫的飽和溶液帶至低溫的結(jié)晶區(qū)形成過飽和析出溶質(zhì)使籽晶生長。溫度降低并已析出了部分溶質(zhì)的溶液又流向下部，溶解培養(yǎng)料，如此循環(huán)往復(fù)，使籽晶持續(xù)生長結(jié)晶。相關(guān)研究[35]表明，延長反應(yīng)時間，由于奧氏熟化，小粒子溶解消失，顆粒逐漸長大；相反，反應(yīng)時間不足會導(dǎo)致產(chǎn)物不純或反應(yīng)不完全，結(jié)晶性降低。

3.2 底物濃度及Cys 修飾對Fe3O4 納米顆粒粒徑的影響

本研究結(jié)果表明，當(dāng)FeCl3·6H2O 的濃度降低，產(chǎn)物平均粒徑隨之減??；當(dāng)FeCl3·6H2O 濃度過高，會導(dǎo)致Fe3O4納米顆粒團(tuán)聚而粒徑增大；當(dāng)FeCl3·6H2O 濃度過低，粒徑分布帶將增寬。這是由于液相環(huán)境中鐵離子濃度太高時，大部分Fe3+和Fe2+未能被表面活性劑形成的水膜包覆，而是以離子的形式自由存在，因此形成的Fe3O4納米顆粒粒徑較大[36]。當(dāng)鐵離子濃度較低時，由于羧基與Fe3+具有很強(qiáng)的配位作用，F(xiàn)e3O4納米顆粒表面的負(fù)電荷增多，靜電斥力和表面張力的共同作用抑制Fe3O4晶體進(jìn)一步長大，使Fe3O4納米顆粒粒徑減小。當(dāng)FeCl·36H2O 的用量為0.1625 g時，粒徑大小分布不均勻。這是由于反應(yīng)體系中底物濃度太低時，過量的表面活性劑會造成部分納米顆粒相互黏結(jié)，從而引起粒徑分布較廣，粒徑均勻性難以控制。本研究發(fā)現(xiàn)，電鏡下Fe3O4經(jīng)Cys修飾后，粒徑大小、形貌均未發(fā)生明顯改變，這與以往的研究[37]的發(fā)現(xiàn)相一致，這是因為Cys在電鏡下不可見。

3.3 Fe3O4@Cys納米顆粒的磁學(xué)性能

本研究證明Fe3O4@Cys具有超順磁性。有研究[38]表明當(dāng)磁性材料的飽和磁化強(qiáng)度大于16.3 emu/g時（1 emu/g=1 Am2/kg），在外加磁場作用下便可從溶液中分離，而本研究制備的Fe3O4@Cys 飽和磁化強(qiáng)度約為73 emu/g，提示其具有磁性引導(dǎo)藥物輸送的潛能[21]。

3.4 Cys修飾對穩(wěn)定性的影響

本研究發(fā)現(xiàn)，修飾前后Fe3O4納米顆粒表面均帶有負(fù)電荷，均能夠穩(wěn)定分散于水相，研究[37]證明ZETA電位的數(shù)值與膠態(tài)分散的穩(wěn)定性有關(guān)。ZETA 電位是對顆粒間相互排斥或吸引力的強(qiáng)度的度量。ZETA 電位絕對值越高，體系越穩(wěn)定，即溶解或分散可以抵抗聚集；相反，絕對值越低，體系越傾向于凝結(jié)或凝聚。相關(guān)基礎(chǔ)研究表[37]明經(jīng)Cys修飾后的Fe3O4膠體粒子分散于去離子水中時，通過電離作用使得表面產(chǎn)生更多負(fù)電荷，表面帶有負(fù)電荷的Fe3O4膠體粒子之間便產(chǎn)生靜電排斥力，使其可以穩(wěn)定分散于水相中。

3.5 Cys修飾對生物相容性的影響

本研究發(fā)現(xiàn)Fe3O4@Cys 組的細(xì)胞存活率始終高于Fe3O4組，當(dāng)濃度達(dá)到0.4 mg/mL 時細(xì)胞存活率仍保持在80%以上，表示其細(xì)胞毒性較小，證明Cys 修飾可以降低Fe3O4納米顆粒的細(xì)胞毒性，增加生物相容性。相關(guān)基礎(chǔ)研究[37]表明Cys 自然存在于人體內(nèi)，是細(xì)胞代謝所需要的物質(zhì)，其本身具備良好的生物相容性和化學(xué)穩(wěn)定性；故經(jīng)Cys 表面修飾，將Fe3O4納米顆粒包覆，亦可降低納米顆粒的細(xì)胞毒性及增加其生物相容性。

3.6 磁共振T2 對比劑Fe3O4@Cys 在新西蘭兔活體成像中的應(yīng)用

本研究發(fā)現(xiàn)靜脈注射Fe3O4@Cys 后的腎臟皮質(zhì)、髓質(zhì)及小腸腸壁信號值隨時間變化先降低后逐漸升高。這是由于Fe3O4@Cys 進(jìn)入血液后與血漿蛋白結(jié)合，并在調(diào)理素的作用下被內(nèi)皮網(wǎng)狀系統(tǒng)識別并攝取，F(xiàn)e3O4@Cys 被巨噬細(xì)胞吞噬后，相應(yīng)區(qū)域的磁共振信號強(qiáng)度降低，當(dāng)Fe3O4@Cys被溶酶體降解并代謝，該區(qū)域的磁共振信號強(qiáng)度逐漸恢復(fù)[39]，腎臟皮質(zhì)與髓質(zhì)信號值隨時間變化下降及上升規(guī)律大致相近，但與小腸的信號值變化規(guī)律相差較大，我們認(rèn)為主要是由于腎臟與小腸的巨噬細(xì)胞分布的數(shù)量差別導(dǎo)致信號值下降、恢復(fù)時間及變化幅度的差異[40]。本研究發(fā)現(xiàn)腎皮質(zhì)、髓質(zhì)信號值均于注射后20～160 min 內(nèi)顯著低于注射前水平，小腸腸壁信號值于注射后40～200 min內(nèi)顯著低于注射前水平，這在以往文獻(xiàn)中未曾報道，提示腎臟掃描的時間窗為注射對比劑后20～160 min，小腸掃描的時間窗為注射對比劑后40～200 min內(nèi)。

3.7 本研究的局限性

本研究尚有不足：（1）由于新西蘭兔小腸管壁較薄，且受呼吸及腸蠕動等影響，對ROI 勾畫會產(chǎn)生一定的影響；（2）本研究中新西蘭兔活體成像時各時間點的樣本量較少，結(jié)果存在一定的誤差，有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)行研究。

4 結(jié)論

綜上所述，本研究制備的磁共振T2 對比劑Fe3O4@Cys 具有良好的穩(wěn)定性和生物相容性，且磁學(xué)性能優(yōu)異，在活體成像中表現(xiàn)出明顯的陰性對比增強(qiáng)效果。當(dāng)組織缺血時細(xì)胞缺氧水腫，在T2 加權(quán)像中缺血部位表現(xiàn)為高信號，而正常血供的組織因?qū)Ρ葎┑拇嬖诒憩F(xiàn)為低信號，從而增加缺血組織與正常組織之間的對比度，有望作為T2 對比劑應(yīng)用于缺血性疾病例如小腸缺血的定性及定位的診斷研究。

作者利益沖突聲明：全體作者均聲明無利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：姜興岳參與選題和設(shè)計，對稿件重要內(nèi)容進(jìn)行了修改，并獲得山東省自然科學(xué)基金項目的資助；祖涵瑜負(fù)責(zé)主要的對比劑合成及表征工作，起草和撰寫稿件；陳夢莎在磁共振掃描序列參數(shù)的調(diào)整、完善方面做出重要貢獻(xiàn)，對稿件重要內(nèi)容進(jìn)行修改；韓慧婷負(fù)責(zé)實驗動物的飼養(yǎng)及動物麻醉，對稿件重要內(nèi)容進(jìn)行了修改；閆鵬分析對比劑的表征工作，對稿件重要內(nèi)容進(jìn)行了修改，獲得國家自然科學(xué)基金項目資助；陳亮參與磁共振圖像內(nèi)容的分析與解釋，對稿件重要內(nèi)容進(jìn)行修改；黃婭楠負(fù)責(zé)磁共振掃描工作，對稿件重要內(nèi)容進(jìn)行了修改；張濬韜在磁共振數(shù)據(jù)分析方面進(jìn)行了關(guān)鍵的指導(dǎo)及修改。全體作者都同意發(fā)表最后的修改稿，同意對本研究的所有方面負(fù)責(zé)，確保本研究的準(zhǔn)確性和誠信。