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        血液分析儀檢驗(yàn)用于白血病診斷的臨床價值分析

        2023-11-07 02:39:06劉秀娜于海濤
        中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2023年19期
        關(guān)鍵詞:涂片白細(xì)胞白血病

        劉秀娜 于海濤

        白血病是一種惡性造血干細(xì)胞克隆性疾病, 臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、貧血、淋巴結(jié)腫大、疲勞、多汗等[1]。由于白血病細(xì)胞生長紊亂, 白細(xì)胞在細(xì)胞發(fā)育的不同階段停滯不前, 進(jìn)而在骨髓等造血組織中大量積累,影響正常造血。白血病臨床可分為急性白血病和慢性白血病。人類白血病的病因尚不完全清楚, 白血病的發(fā)生可能是多步驟的[2]。目前認(rèn)為, 至少有兩種分子事件參與了發(fā)病機(jī)制[3]。首先, 由于各種原因?qū)е略煅?xì)胞中某些基因發(fā)生決定性突變, 激活某些信號通路, 導(dǎo)致克隆性造血細(xì)胞異常形成, 從而使造血細(xì)胞具有增殖和/或生存優(yōu)勢, 許多細(xì)胞被阻止凋亡[4]。其次, 某些遺傳變化可能涉及某些轉(zhuǎn)錄因子, 導(dǎo)致造血細(xì)胞分化遲緩或紊亂[5]。中國白血病發(fā)病率約為3/10 萬~4/10 萬, 與亞洲其他國家相近, 低于歐美國家[6]。在惡性腫瘤的死亡率中, 白血病排在第6 位和第7 位。急性髓系白血病是成人白血病中最常見的類型, 急性淋巴細(xì)胞白血病是兒童白血病中最常見的類型[7]。慢性髓系白血病的發(fā)病率隨著年齡的增長而逐漸增加。白血病的診斷方法[8]:①骨髓細(xì)胞學(xué)涂片檢查;②流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞, 分析患者免疫分型;③細(xì)胞遺傳學(xué)測試;④細(xì)胞分子生物學(xué)檢測。通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)(Morphology、Immunology、Cytogenetics、Molecular biology, MICM) 的分類, 不僅可以診斷白血病, 還可以了解白血病的細(xì)胞類型。鑒別診斷急性髓系白血病和急性淋巴細(xì)胞白血病對患者的預(yù)后有一定的指導(dǎo)意義。本研究旨在解析血液分析儀檢驗(yàn)在白血病臨床診斷中的價值, 報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選擇2021 年1 月~2023 年3 月本院收治的白血病患者100例作為白血病組, 年齡23~59歲,男52 例, 女48 例;其中急性57 例, 慢性43 例。另選同期體檢的健康者100 例作為健康對照組, 年齡25~60 歲, 男44 例, 女56 例。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。見表1。

        表1 兩組一般資料比較[±s, n(%)]

        表1 兩組一般資料比較[±s, n(%)]

        注:兩組比較, P>0.05

        組別 例數(shù) 年齡(歲) 性別男女白血病組 100 38.65±7.82 52(52.00) 48(48.00)健康對照組 100 38.37±7.93 44(40.00) 56(56.00)t/χ2 0.2514 1.2821 P 0.8018 0.2575

        1.2 白血病診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]

        1.2.1 急性白血病診斷標(biāo)準(zhǔn) ①臨床癥狀包括突然高熱、進(jìn)行性貧血或大出血、外周疼痛。②體征:皮膚出血,胸骨壓痛, 淋巴結(jié)腫大, 肝脾腫大。③實(shí)驗(yàn)室:a.血液圖中白細(xì)胞總有明顯增加(或減少), 可能出現(xiàn)原始細(xì)胞或幼年細(xì)胞;b.骨髓顯像:骨髓有核紅細(xì)胞占所有有核細(xì)胞的50%以下, 原始細(xì)胞≥30%, 可診斷為急性白血?。还撬柚杏泻思t細(xì)胞比例≥50%, 非紅系細(xì)胞中原始細(xì)胞比例≥30%, 即可診斷為急性紅系白血病。

        1.2.2 慢性白血病診斷標(biāo)準(zhǔn) ①臨床表現(xiàn):a.可能出現(xiàn)乏力、體力下降、消瘦、低熱、貧血、出血;b.可能有淋巴結(jié)(包括頭頸部、腋窩和腹股溝)、肝臟和脾臟腫大。②實(shí)驗(yàn)室檢查:a.外周血WBC > 10×109/L, 淋巴細(xì)胞比例≥50%, 絕對值≥5×109/L, 以成熟淋巴細(xì)胞為主, 可見幼年或不典型淋巴細(xì)胞;b.骨髓顯像:骨髓增生活躍或明顯活躍, 淋巴細(xì)胞≥40%, 以成熟淋巴細(xì)胞為主。

        1.3 研究方法 兩組均行血涂片和血液分析儀檢驗(yàn)。采集外周血樣本:采血時, 所有產(chǎn)品均經(jīng)過消毒或使用符合標(biāo)準(zhǔn)的一次性用品。采集新鮮血液樣本, 放入含有抗凝劑的血管中, 采集新鮮血液4 ml。取一半血液樣本, 使用細(xì)胞分析儀分析紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的參數(shù)。取另一半血液樣本進(jìn)行血涂片檢測, 涂抹時涂片厚度均勻適中, 頭部和尾部清晰。涂片上的細(xì)胞分布均勻, 血膜長度約為玻璃的2/3。在用復(fù)合染料染色涂片時, 用高倍和低倍顯微鏡觀察涂片的整體外觀, 即觀察涂片的制備和染色是否符合標(biāo)準(zhǔn)。同時, 要觀察各種血細(xì)胞和白細(xì)胞的數(shù)量和比例, 以及外周血細(xì)胞的分布情況, 是否有異常細(xì)胞和巨細(xì)胞, 身體尾部交界處是否有核細(xì)胞, 核心是否包裹在一個與紅細(xì)胞不重疊的區(qū)域, 即代表性的油鏡區(qū)域。利用油鏡區(qū)檢查、觀察、記錄細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)、形態(tài)、細(xì)胞比, 同時注意淋巴細(xì)胞、毒性是否有變化, 白細(xì)胞形態(tài)、血小板數(shù)量、形態(tài)、聚集、紅細(xì)胞分布情況, 主要觀察紅細(xì)胞大小是否異?;虿坏?。

        1.4 觀察指標(biāo) 比較不同檢驗(yàn)方法的診斷結(jié)果及靈敏度和特異度, 比較兩組的血液指標(biāo), 比較不同白血病類型患者的血液指標(biāo)。血液指標(biāo)包括PLT、Hb、RBC、CRP、WBC。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t 檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 不同檢驗(yàn)方法的診斷結(jié)果比較 血液分析儀的診斷準(zhǔn)確率89.50%明顯高于血涂片的80.00%, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

        表2 不同檢驗(yàn)方法的診斷結(jié)果比較(n, %, n=200)

        2.2 不同檢驗(yàn)方法的靈敏度和特異度比較 血液分析儀檢測白血病的靈敏度和特異度均明顯高于血涂片,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

        表3 不同檢驗(yàn)方法的靈敏度和特異度比較(%)

        2.3 兩組的血液指標(biāo)比較 白血病組患者的PLT、Hb、RBC 水平均明顯低于健康對照組, CRP、WBC水平均明顯高于健康對照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

        表4 兩組的血液指標(biāo)比較( ±s)

        表4 兩組的血液指標(biāo)比較( ±s)

        注:與健康對照組比較, aP<0.05

        組別 例數(shù) PLT(×109/L) CRP(mg/L) Hb(g/L) WBC(×109/L) RBC(×1012/L)白血病組 100 191.91±50.39a 17.00±1.92a 90.53±9.46a 10.26±1.84a 2.76±0.24a健康對照組 100 252.41±54.29 3.42±0.78 119.61±9.94 7.35±1.67 4.02±0.31 t 8.1678 65.5282 21.1821 11.7109 32.1391 P 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

        2.4 不同白血病類型患者的血液指標(biāo)比較 急性白血病患者的PLT、Hb、RBC 水平均明顯低于慢性白血病患者, CRP、WBC 水平均明顯高于慢性白血病患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

        表5 不同白血病類型患者的血液指標(biāo)比較( ±s)

        表5 不同白血病類型患者的血液指標(biāo)比較( ±s)

        注:與慢性白血病比較, aP<0.05

        類型 例數(shù) PLT(×109/L) CRP(mg/L) Hb(g/L) WBC(×109/L) RBC(×1012/L)急性白血病 57 182.36±45.92a 20.15±2.15a 80.67±9.06a 11.56±1.61a 2.37±0.35a慢性白血病 43 204.56±40.78 12.83±1.46 103.61±8.94 9.28±1.03 3.28±0.31 t 2.5098 19.2205 12.6067 8.1128 13.5110 P 0.0137 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

        3 討論

        白血病的發(fā)病率約在2/10 萬~4/10 萬, 在所有惡性腫瘤中, 白血病的發(fā)病率排名9~11 位[10]。白血病的發(fā)病機(jī)制與物理因素、化療因素、生物因素、環(huán)境因素、生活習(xí)慣、自身免疫系統(tǒng)功能等密切相關(guān)[11]。白血病的檢驗(yàn)方法包括以下幾種。①血液檢查。a.急性白血?。喊准?xì)胞性白血病的WBC>10×109/L;白細(xì)胞再生障礙性白血病的WBC 正?;驕p少, <1.0×109/L。血涂片分級檢查顯示原始細(xì)胞和幼細(xì)胞數(shù)量不等, 但在非白細(xì)胞增多的情況下, 很難在血涂片上發(fā)現(xiàn)原始細(xì)胞;其他疾病可以通過血液檢查排除, 對疾病作出初步診斷。b.慢性白血?。郝运柘蛋籽〉腤BC>20×109/L, 最高可達(dá)到100×109/L 以上, 血切片中粒細(xì)胞明顯增多, 可見各個階段的粒細(xì)胞以中性、中期、晚期、桿狀核粒細(xì)胞為主;慢性淋巴細(xì)胞白血病的WBC>10×109/L, 淋巴細(xì)胞比例≥50%, 絕對淋巴細(xì)胞值>5×109/L(至少3 個月)[12]。白血病的主要特征是淋巴細(xì)胞持續(xù)增多。白血病細(xì)胞形態(tài)與成熟小淋巴細(xì)胞相似, 胞漿少, 核染色質(zhì)一團(tuán)。少數(shù)患者細(xì)胞形態(tài)異常, 細(xì)胞體較大, 不成熟, 細(xì)胞核有較深的切口。通過血液檢查可以測出WBC 和比例, 這有助于確診疾病。②骨髓檢查。a.急性白血病, 骨髓檢查是診斷急性白血病的主要依據(jù)和必要檢查。大多數(shù)患者骨髓核細(xì)胞明顯增生, 以原始細(xì)胞為主。少數(shù)急性白血病的骨髓增生低, 稱為發(fā)育不良的急性白血病。b.慢性白血病, 慢性髓系白血病:骨髓增生明顯至極活躍, 主要由粒細(xì)胞組成, 粒細(xì)胞與紅細(xì)胞之比明顯增高, 中性粒細(xì)胞、晚期幼細(xì)胞、棒狀粒細(xì)胞明顯增高, 原始細(xì)胞<10%;嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞增多;紅細(xì)胞相對減少;巨核細(xì)胞正?;蛟龆? 晚期減少。慢性淋巴細(xì)胞白血病的有核細(xì)胞增殖明顯活躍或極活躍, 淋巴細(xì)胞≥40%, 以成熟淋巴細(xì)胞為主。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞和巨核細(xì)胞的增殖受到抑制, 并在晚期顯著減少。當(dāng)伴有溶血時, 紅細(xì)胞可發(fā)生代償性增殖[13-15]。③細(xì)胞學(xué)檢查:主要用于協(xié)助各種類型白血病的形態(tài)學(xué)鑒定,常見白血病細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)包括髓過氧化物酶、糖原染色和非特異度酯酶。④免疫學(xué)檢查:確定白血病細(xì)胞表達(dá)的一系列相關(guān)抗原的來源, 有助于確定疾病的分類, 為治療提供線索。⑤染色體檢查:白血病常伴有特定的染色體和基因變化, 染色體檢查可以明確患者的基因和染色體, 有助于疾病的具體診斷。⑥血液生化檢查。a.急性白血病:血清尿酸濃度升高, 彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)患者可出現(xiàn)凝血象異常, 血清乳酸脫氫酶可升高。b.慢性白血病中的慢性髓系白血病, 血、血清、尿中尿酸濃度升高, 血清乳酸脫氫酶升高, 對疾病的診斷和后續(xù)治療很重要。診斷標(biāo)準(zhǔn)[12]:根據(jù)臨床表現(xiàn)和血液常規(guī)檢查, 醫(yī)生可以做出初步診斷。骨髓穿刺后, 獲得骨髓圖像可確診。根據(jù)臨床表現(xiàn)、血液和骨髓特征一般不難診斷白血病。然而, 由于白血病細(xì)胞類型、染色體改變、免疫表型、融合基因的不同,治療方案和預(yù)后也不同[16-19]。因此, 初步診斷的患者應(yīng)努力獲得全面的MICM數(shù)據(jù), 以評估預(yù)后, 指導(dǎo)治療。b.慢性白血?。郝运柘蛋籽? 在不明原因的白細(xì)胞數(shù)量持續(xù)增加的情況下, 可根據(jù)典型的血液和骨髓變化、脾腫大、PH 染色體陽性或費(fèi)城染色體(BCR-ABL)融合基因陽性來診斷;慢性淋巴細(xì)胞白血病, 結(jié)合臨床表現(xiàn), 外周血中單克隆淋巴細(xì)胞持久性>5×109/L,骨髓中成熟小淋巴細(xì)胞≥40%, 可根據(jù)免疫表型特征進(jìn)行診斷。

        本研究結(jié)果中, 血液分析儀的診斷準(zhǔn)確率89.50%明顯高于血涂片的80.00%, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血液分析儀檢測白血病的靈敏度和特異度分別為97.00%、82.00%, 均明顯高于血涂片的90.00%、70.00%, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。白血病組患者的PLT、Hb、RBC 均明顯低于健康對照組, CRP、WBC 均明顯高于健康對照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。急性白血病患者的PLT、Hb、RBC 均明顯低于慢性白血病患者, CRP、WBC 均明顯高于慢性白血病患者, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血液分析儀主要用于檢測各種血細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類、Hb 含量,檢測原理包括電學(xué)原理和光學(xué)原理。①血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理。a.電阻抗法原理:血細(xì)胞是不良導(dǎo)體, 當(dāng)用等滲電解質(zhì)溶液稀釋的血細(xì)胞懸浮液通過兩側(cè)電流穩(wěn)定的小孔時, 由于細(xì)胞的電導(dǎo)率比電解質(zhì)溶液低, 小孔感應(yīng)區(qū)電阻增大, 引起瞬時電壓變化產(chǎn)生脈沖信號, 即通過脈沖, 脈沖信號經(jīng)過放大、鑒別、整形后, 送入計(jì)數(shù)系統(tǒng), 得到細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果, 根據(jù)脈沖大小, 還可以分析細(xì)胞體積, 并提供細(xì)胞體積分布圖。b.流式細(xì)胞儀與光散射血細(xì)胞檢測原理:在流式細(xì)胞儀中, 當(dāng)單個細(xì)胞通過激光照射的檢測區(qū)域時, 光束會發(fā)生折射、衍射和散射。散射光被光電探測器接收并產(chǎn)生脈沖。脈沖大小與被照射細(xì)胞的大小呈正比, 脈沖的數(shù)量代表細(xì)胞的數(shù)量。②白細(xì)胞分類原則。a.白細(xì)胞的三種分類原則:根據(jù)電阻抗法原理, 不同體積的白細(xì)胞通過毛孔時產(chǎn)生的脈沖大小有顯著差異, 該儀器根據(jù)脈搏大小對白細(xì)胞進(jìn)行分類, 在樣品中加入溶血劑溶解紅細(xì)胞,儀器計(jì)數(shù)從白細(xì)胞測量到的>35 fl 的電子脈沖數(shù), 將細(xì)胞計(jì)數(shù)為白細(xì)胞。同時, 根據(jù)脈沖的大小將血液中的白細(xì)胞分為三組:小細(xì)胞組:35~90 fl, 主要是淋巴細(xì)胞;中間細(xì)胞組:91~160 fl, 包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和幼細(xì)胞;大細(xì)胞組:161~450 fl,主要是中性粒細(xì)胞。其特點(diǎn)是檢測速度快, 操作簡單,可大大提高工作效率。該儀器可用于常規(guī)檢查標(biāo)本的白細(xì)胞分類篩選, 對儀器檢測出的陽性標(biāo)本需進(jìn)一步鏡檢。如果有疑似血液病的患者, 即使儀器未提示異常,也應(yīng)進(jìn)行血液涂片和鏡檢。b.五大分類原則:從電阻抗法三位一體發(fā)展到結(jié)合多種技術(shù)(激光、射頻、化學(xué)染色)同時檢測單個細(xì)胞, 綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù), 得出白細(xì)胞的五大分類結(jié)果。該方法細(xì)胞數(shù)量多, 特異度強(qiáng),是目前較為理想的血細(xì)胞自動分類方法。③Hb 測量原理:Hb 是用分光光度法測量的, 使用三組或五組血液分析儀。其原理是含有溶血劑的稀釋劑溶解紅細(xì)胞,釋放Hb, Hb 與溶血劑中的某些成分結(jié)合, 形成穩(wěn)定的Hb 衍生物。比色法在特定的光波范圍內(nèi)(530~550 nm)進(jìn)行, 由于吸光度變化與血液Hb 濃度呈正比, 因此計(jì)算Hb 濃度[20,21]。

        總之, 在白血病臨床診斷中使用血液分析儀檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性、靈敏度和特異度高, 可以鑒別急、慢性白血病, 具有較高臨床診斷價值。

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