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        肝癌病人血清中長(zhǎng)鏈非編碼RNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p表達(dá)水平及其臨床診斷價(jià)值分析

        2023-10-27 09:28:10羅興紅楊柳董琪田愛霞龍丹
        臨床外科雜志 2023年9期
        關(guān)鍵詞:二者靈敏度標(biāo)志物

        羅興紅 楊柳 董琪 田愛霞 龍丹

        有研究表明,長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)在細(xì)胞增殖、侵襲和遷移等各種生物過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,與癌癥的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[1]。E2F1激活的lncRNA BSN-AS2通過靶向miR-654-3p/SYTL2軸促進(jìn)脊柱骨肉瘤的進(jìn)展[2]。miR-4782-3p通過去泛素化酶泛素特異性肽酶抑制非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)[3]。本研究檢測(cè)肝癌病人血清中l(wèi)ncRNA BSN-AS2與hsa-miR-4782-3p的表達(dá)情況,并分析其與臨床病理特征的關(guān)系。

        對(duì)象與方法

        一、對(duì)象

        二、方法

        1.資料收集:收集病人年齡、性別、腫瘤直徑、TNM分期、是否肝硬化、浸潤(rùn)深度、分化程度等資料。

        2.qRT-PCR檢測(cè)血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p表達(dá)水平:按照Trizol試劑操作步驟分離提取血清總RNA,并測(cè)定其濃度和純度,按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒操作步驟逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,采用ABI 7500型PCR儀檢測(cè)血清中l(wèi)ncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p相對(duì)表達(dá)水平,內(nèi)參分別為GAPDH和U6,引物設(shè)計(jì)后由上海生工生物工程有限公司合成,引物序列見表1。為減小實(shí)驗(yàn)誤差,各樣品重復(fù)3次,使用2-△△Ct方法(Ct為循環(huán)閾值)計(jì)算目的基因lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p的相對(duì)表達(dá)量。

        表1 qRT-PCR引物序列

        三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        結(jié)果

        1.兩組血清中l(wèi)ncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p表達(dá)的比較見表2。結(jié)果顯示,研究組血清lncRNA BSN-AS2的表達(dá)水平高于對(duì)照組,血清hsa-miR-4782-3p的表達(dá)水平低于對(duì)照組,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表2 兩組血清中l(wèi)ncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p表達(dá)的比較

        3.病人血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p水平的相關(guān)性分析見表4。經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示,肝癌病人血清lncRNA BSN-AS2與hsa-miR-4782-3p表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.536,P<0.05)。

        4.血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p水平對(duì)肝癌病人診斷價(jià)值:血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3單獨(dú)及聯(lián)合診斷肝癌的AUC分別是0.890、0.856和0.937,靈敏度分別為87.00%、93.00%和86.00%,特異度分別為78.89%、70.00%和92.22%;血清AFP單獨(dú)檢測(cè)肝癌的AUC分別是0.901,靈敏度分別為83.00%,特異度分別為86.67%;二者聯(lián)合優(yōu)于lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p各自單獨(dú)預(yù)測(cè)(Z二者聯(lián)合-lncRNA BSN-AS=2.481、P=0.013,Z二者聯(lián)合-hsa-miR-4782-3P=3.503,P=0.001),二者聯(lián)合預(yù)測(cè)特異度大于AFP單獨(dú)預(yù)測(cè)肝癌,AUC值略大于AFP。見表5,圖1。

        圖1 血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p水平診斷肝癌的ROC曲線

        表5 血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p水平對(duì)肝癌病人診斷價(jià)值

        討論

        研究發(fā)現(xiàn),lncRNA雖然不編碼蛋白,但是卻具有復(fù)雜的生物學(xué)功能。有研究表明,lncRNA-SNHG14可以通過PTEN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)H3K27乙酰化激活PABPC1促進(jìn)肝細(xì)胞癌進(jìn)展[5]。lncRNA DLX6-AS1可以通過miR-513c/Cul4A/ANXA10軸促進(jìn)肝細(xì)胞癌的進(jìn)展[6]。本研究中肝癌病人血清lncRNA BSN-AS2的表達(dá)水平高于對(duì)照組,lncRNA BSN-AS2的表達(dá)與肝癌病人的年齡、性別、腫瘤直徑、肝硬化、ALT、AFP無(wú)關(guān),與TNM分期和分化程度有關(guān)。

        miRNA是真核生物中長(zhǎng)度約18~25個(gè)核苷酸的內(nèi)源性小非編碼RNA,可降解靶基因或抑制靶基因翻譯過程,參與細(xì)胞增殖、凋亡和組織分化[7]。miR-203是近年來(lái)新興的參與腫瘤病理生理過程的生物標(biāo)志物[8],可以參與調(diào)節(jié)炎癥通路與角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖與分化過程,也可以作為抑癌因子或者致癌因子作用于目標(biāo)基因,通過與不同靶點(diǎn)和信號(hào)通路相互作用來(lái)參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞的生物活動(dòng)過程[9]。有研究發(fā)現(xiàn),miR-203a-5p在肝癌病人外周血中的水平低于對(duì)照組,影響SOCSI、SOCS3的甲基化狀態(tài)參與調(diào)控肝癌的發(fā)生發(fā)展[10]。本研究中肝癌病人血清hsa-miR-4782-3p的表達(dá)水平低于對(duì)照組,提示在肝癌的發(fā)展過程中,hsa-miR-4782-3p可能發(fā)揮抑癌基因作用。將miR-203a-5p表達(dá)與肝癌病人臨床病理特征進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),TNM分期和分化程度增加,血清hsa-miR-4782-3p的表達(dá)進(jìn)一步降低,提示hsa-miR-4782-3p參與肝癌的發(fā)生發(fā)展。另外,本研究中肝癌病人血清lncRNA BSN-AS2與hsa-miR-4782-3p負(fù)相關(guān),提示lncRNA BSN-AS2可能通過調(diào)控hsa-miR-4782-3p影響肝癌的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示,血清AFP單獨(dú)檢測(cè)肝癌的AUC分別是0.901,靈敏度分別為83.00%,特異度分別為86.67%,而血清lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3單獨(dú)及聯(lián)合診斷肝癌的AUC分別是0.890、0.856和0.937,靈敏度分別為87.00%、93.00%和86.00%,特異度分別為78.89%、70.00%和92.22%;二者聯(lián)合優(yōu)于lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p各自單獨(dú)預(yù)測(cè),且二者聯(lián)合靈敏度和特異度均優(yōu)于AFP單獨(dú)檢測(cè),提示二者有作為肝癌診斷標(biāo)志物的潛能。本研究?jī)H初步探究了lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p作為診斷肝癌生物標(biāo)志物的潛在效果,兩者作為臨床診斷指標(biāo)還需驗(yàn)證,后續(xù)本研究將進(jìn)一步擴(kuò)大試驗(yàn)樣本量,根據(jù)病人腫瘤直徑或疾病進(jìn)展探究lncRNA BSN-AS2、hsa-miR-4782-3p與臨床常用診斷指標(biāo)的關(guān)系以及與疾病進(jìn)展的關(guān)系并評(píng)估不同預(yù)后病人血清水平。

        綜上所述,肝癌病人血清lncRNA BSN-AS2表達(dá)水平顯著升高,hsa-miR-4782-3水平顯著降低,可作為診斷肝癌的潛在生物標(biāo)志物。

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