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        改進(jìn)的QuEChERS/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蜂蜜中的丙烯酰胺

        2023-10-25 06:38:22張琳昀吉文亮王鑫楠
        分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2023年10期
        關(guān)鍵詞:丙烯酰胺蜂蜜乙腈

        張琳昀,吉文亮,沈 菲,王鑫楠,鐘 誠(chéng),朱 峰*

        (1.江蘇省疾病預(yù)防控制中心,江蘇 南京 210009;2.沃特世科技(上海)有限公司,上海 200120)

        丙烯酰胺(分子式為CH2CHCONH2)是一種白色晶體,親電性強(qiáng),易溶于水、三氯甲烷、乙醇及醚等溶劑中,室溫下穩(wěn)定,對(duì)生物體具有生殖毒性、神經(jīng)毒性、免疫毒性、遺傳毒性及潛在致癌性,于1994 年被國(guó)際癌癥組織(IRAC)列為2A 類致癌物。近期有研究者發(fā)現(xiàn)丙烯酰胺會(huì)影響大腦脂質(zhì)代謝引發(fā)炎癥,導(dǎo)致焦慮和抑郁[1]。2002 年瑞典科學(xué)家首次在高溫加熱的淀粉類食品中發(fā)現(xiàn)了丙烯酰胺,氨基酸、還原糖和蛋白質(zhì)在高溫烹飪過(guò)程中會(huì)發(fā)生“美拉德反應(yīng)”,產(chǎn)生副產(chǎn)物丙烯酰胺。大量研究表明,經(jīng)高溫加工的食物可能含有丙烯酰胺。我國(guó)原衛(wèi)生部2005 年發(fā)布了《關(guān)于減少丙烯酰胺可能導(dǎo)致的健康危害公告》[2],該公告建議盡可能避免連續(xù)長(zhǎng)時(shí)間或高溫烹飪淀粉類食品。2017年,歐盟發(fā)布了《減少食品中丙烯酰胺含量的緩解措施和基準(zhǔn)水平》指令(EU 2017/2158),該指令規(guī)定了不同食品中丙烯酰胺的基準(zhǔn)水平(40 ~ 4 000 μg/kg)[3]。2021 年韓國(guó)發(fā)布了《食品中丙烯酰胺建議規(guī)格運(yùn)營(yíng)計(jì)劃》,規(guī)定了各類食品中丙烯酰胺的建議限量(0.3 ~ 1 mg/kg)[4]。

        蜂蜜是蜜蜂釀制的天然營(yíng)養(yǎng)品,深受大眾喜愛。蜂巢或蜂箱內(nèi)的蜂蜜通常含有沙塵顆粒、結(jié)晶顆粒、蜜蜂殘留肢體、蜂蠟、花粉等微粒,可通過(guò)控制加熱提高蜂蜜的流動(dòng)性,采用過(guò)濾等手段去除大部分雜質(zhì)。蜂蜜由不同的糖組成,主要是果糖和葡萄糖,以及微量元素、氨基酸、維生素、黃酮類、有機(jī)酸類等物質(zhì)。因此,蜂蜜在熱加工過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生“美拉德反應(yīng)”產(chǎn)生丙烯酰胺。目前,有關(guān)食品中丙烯酰胺的測(cè)定研究,樣品基質(zhì)主要包括咖啡、薯片、面包、餅干、食糖、茶葉、嬰幼兒輔食等[5-8],鮮有測(cè)定蜂蜜中丙烯酰胺的報(bào)道,因此建立蜂蜜中丙烯酰胺的測(cè)定方法具有重要意義。

        食品中丙烯酰胺傳統(tǒng)的測(cè)定方法有高效液相色譜法[9]、氣相色譜-質(zhì)譜法[10]、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[11],新型的測(cè)定方法有阻抑還原光度法[12]、生物傳感法[13]、數(shù)字圖像比色法[14]、毛細(xì)管電泳法[15]。新型的檢測(cè)技術(shù)多以薯片基質(zhì)作為檢測(cè)對(duì)象,雖快速但面臨諸多挑戰(zhàn),如其他基質(zhì)的適用性、定性定量的準(zhǔn)確性、方法推廣性等。傳統(tǒng)分析方法中,高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法適用于絕大多數(shù)食品基質(zhì)中丙烯酰胺的測(cè)定,靈敏度高、準(zhǔn)確性好,然而該方法多采用固相萃取柱凈化,如《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中丙烯酰胺的測(cè)定》(GB 5009.204-2014)[16],不僅過(guò)程繁瑣且成本較高。近年來(lái),QuEChERS法因操作簡(jiǎn)單、快速、安全、成本低,在食品檢測(cè)中被廣泛使用。

        由于蜂蜜的含水量低、粘稠性大,且含有大量的糖類和有機(jī)色素,其提取凈化過(guò)程十分復(fù)雜。本研究基于改進(jìn)的QuEChERS 凈化方法,建立了蜂蜜中丙烯酰胺的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。該方法簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定,可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜的蜂蜜基質(zhì)中丙烯酰胺的高效準(zhǔn)確定量,從而為蜂蜜中丙烯酰胺的安全評(píng)價(jià)提供依據(jù)。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 儀器與試劑

        Acquity Premier 超高效液相色譜儀、Xevo TQ Absolute 三重四極桿質(zhì)譜儀(美國(guó)Waters 公司),ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18色譜柱(3.0 mm×150 mm,1.8 μm,美國(guó)Agilent 公司),2-16 KL 冷凍離心機(jī)(德國(guó)Sigma 公司),Multi Reax 渦旋振蕩器(德國(guó)Heidolph 公司),HSC-24B 氮吹儀(天津市恒奧科技發(fā)展有限公司)。

        丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)品(純度均≥98%,德國(guó)Dr.Ehrenstorfer 公司);甲酸(質(zhì)譜純,美國(guó)Fisher 公司);氯化鈉、硫酸鈉、無(wú)水硫酸鎂、正己烷(分析純,國(guó)藥集團(tuán));乙腈、甲醇(色譜純,德國(guó)Merck公司);石墨化炭黑(GCB)、十八烷基吸附劑(C18)、乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、強(qiáng)陽(yáng)離子交換材料(SCX)(安普科技有限公司);0.22 μm水相微孔濾膜(天津市津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

        1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

        準(zhǔn)確稱取丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg,用甲醇溶解并定容至100 mL,配成質(zhì)量濃度為100 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。移取丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mL,加甲醇稀釋至10 mL,使丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺的質(zhì)量濃度為10 μg/mL。臨用時(shí)用超純水將丙烯酰胺稀釋成2.0~500 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,其中13C3-丙烯酰胺的質(zhì)量濃度為50 ng/mL。

        1.3 樣品前處理

        1.3.1 提 取準(zhǔn)確稱取2.0 g(精確至1 mg)混合均勻的蜂蜜樣品于15 mL 離心管中,加入10 μg/mL的13C3-丙烯酰胺10 μL,靜置15 min;先加入10 mL超純水,渦旋振蕩提取10 min;再加入10 mL乙腈,渦旋振蕩提取10 min;隨后在離心管中加入5 g 鹽析劑(1 g 氯化鈉和4 g 硫酸鈉),渦旋振蕩2 min 后置于冷凍離心機(jī),在0 ℃下以10 000 r/min離心5 min。取上清液待凈化。

        1.3.2 凈 化取2 mL 上清液于基質(zhì)分散固相萃取凈化管中(含200 mg SCX、20 mg GCB、150 mg C18、150 mg PSA、150 mg無(wú)水硫酸鎂),渦旋振蕩5 min 后置于冷凍離心機(jī),在0 ℃下以10 000 r/min 離心5 min。取1 mL 上清液氮吹至近干,用0.2 mL 超純水溶解提取物,過(guò)0.22 μm 水相微孔濾膜,待上機(jī)測(cè)定。

        1.4 儀器條件

        色譜柱:ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18(3.0 mm×150 mm,1.8 μm);柱溫:30 ℃;流動(dòng)相:A 相為0.1%甲酸水溶液,B 相為甲醇;進(jìn)樣量:10 μL;流速:0.2 mL/min;梯度洗脫程序:0~2 min,2%B;2~4 min,2%~10% B;4~6 min,10% B;6~7 min,10%~95% B;7~8.5 min,95% B;8.5~8.6 min,95%~2% B;8.6~10 min,2% B。

        檢測(cè)方式:多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)(MRM);電離方式:電噴霧電離源正離子模式(ESI+);脫溶劑氣溫度:600 ℃;毛細(xì)管電壓:2.5 kV;去溶劑流速:1 000 L/h;錐孔流速:150 L/h;霧化氣壓力:700 kPa;碰撞氣流速:0.15 mL/min。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

        配制200 ng/mL的丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺,以5 μL/min的流速通過(guò)蠕動(dòng)泵將丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)溶液直接注入質(zhì)譜儀。在以往的研究中[17],丙烯酰胺在正離子模式下具有更好的響應(yīng),因此,本研究采用正離子掃描模式對(duì)丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)進(jìn)行調(diào)諧優(yōu)化。通過(guò)優(yōu)化毛細(xì)管電壓、脫溶劑氣溫度、去溶劑流速、錐孔電壓、碰撞能等參數(shù),確定了丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)的定性、定量離子,具體參數(shù)如表1所示。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),丙烯酰胺m/z為27的碎片離子比m/z為44的碎片離子響應(yīng)強(qiáng),這與文獻(xiàn)報(bào)道不一致[5,11,17],且多數(shù)文獻(xiàn)未提供實(shí)際樣本中丙烯酰胺定性離子對(duì)(m/z72>44)的提取離子色譜圖。因此,本實(shí)驗(yàn)同時(shí)監(jiān)測(cè)了丙烯酰胺的3對(duì)離子,以確定定量離子和定性離子。如圖1所示,標(biāo)準(zhǔn)溶液和蜂蜜樣品中丙烯酰胺離子對(duì)m/z72>55的響應(yīng)均最強(qiáng),這與文獻(xiàn)結(jié)果一致[8],但m/z72>44的基線噪音明顯高于m/z72>27,且在低含量本底的蜂蜜樣本中m/z72>44 離子對(duì)無(wú)法提取到色譜峰。綜上,本研究選用m/z72>55和m/z72>27分別作為丙烯酰胺的定量離子對(duì)和定性離子對(duì)。

        圖1 標(biāo)準(zhǔn)溶液(A)和蜂蜜樣品(B)中丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺的提取離子色譜圖Fig.1 Extracted ion chromatograms of acrylamide and 13C3-acrylamide in standard solution(A) and honey sample(B)

        表1 丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜參數(shù)Table 1 Mass spectrometric parameters of acrylamide and 13C3-acrylamide

        2.2 色譜條件的優(yōu)化

        通常酸能增強(qiáng)ESI+模式下目標(biāo)物的響應(yīng)強(qiáng)度,因此本實(shí)驗(yàn)采用0.1%甲酸水溶液-甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。丙烯酰胺辛醇/水分配系數(shù)的對(duì)數(shù)值(logKow)為-0.67,表現(xiàn)為強(qiáng)極性。因此,丙烯酰胺在常規(guī)C18填料色譜柱上的保留較弱,其保留時(shí)間大多小于3 min[8,11]。由于丙烯酰胺屬于小分子極性化合物,受質(zhì)譜低質(zhì)量端噪音的干擾大,且蜂蜜樣品基質(zhì)復(fù)雜,一些小分子化合物不能完全被去除。實(shí)驗(yàn)表明,丙烯酰胺的提取離子色譜圖上存在干擾峰,影響定性和定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此考察了Atlantis dC18(2.1 mm×150 mm,5 μm)、ACQUITY HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)、ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18(3.0 mm×150 mm,1.8 μm)3 種色譜柱對(duì)丙烯酰胺的保留效果,發(fā)現(xiàn)前兩種色譜柱對(duì)丙烯酰胺的保留效果較差(均小于3 min),干擾峰與目標(biāo)峰不能完全基線分離;而丙烯酰胺在ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18上的保留時(shí)間在6 min左右,因此選擇該色譜柱進(jìn)行分離。

        柱溫會(huì)影響目標(biāo)物在色譜柱上的吸附/解吸附過(guò)程,進(jìn)而影響分離度,因此比較了不同柱溫(20、25、30、40 ℃)下丙烯酰胺的色譜保留情況。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)溫度對(duì)丙烯酰胺的色譜峰峰形無(wú)顯著影響,上述溫度下丙烯酰胺的保留時(shí)間分別為6.43、6.24、6.03、5.67 min。柱溫為40 ℃時(shí),丙烯酰胺目標(biāo)峰與干擾峰未完全分離,當(dāng)溫度≤30 ℃時(shí),干擾峰與目標(biāo)峰完全基線分離,因此選擇柱溫為30 ℃。

        2.3 提取方法的選擇

        丙烯酰胺的極性強(qiáng),易溶于水和乙腈。采用體積比為1∶1 的水和乙腈溶液稀釋丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)品,加入鹽析劑,結(jié)果表明97%的丙烯酰胺進(jìn)入了乙腈層,表明丙烯酰胺可以采用QuEChERS 法提取,即采用鹽析法將目標(biāo)分析物從水相層轉(zhuǎn)入乙腈層,提取液供進(jìn)一步凈化處理。由于蜂蜜含水量較低、黏性大,無(wú)法直接采用有機(jī)溶劑提取,本研究首先加入水將蜂蜜溶解分散,再加入乙腈沉淀蛋白,并與水形成混合提取溶劑提取丙烯酰胺;加入鹽析劑使水和乙腈分層,采用冷凍離心的方式,使蛋白沉淀不易進(jìn)入乙腈層,部分水溶性雜質(zhì)可留在水層,丙烯酰胺則進(jìn)入乙腈層,起到初步分離凈化的目的,上層乙腈提取液供QuEChERS凈化處理。

        2.4 凈化方法的優(yōu)化

        QuEChERS 法常用的凈化填料為GCB、C18、PSA,并加入少量無(wú)水硫酸鎂除水。其中,GCB 可去除色素等非極性干擾物;C18可去除脂、固醇等非極性干擾物;PSA 可去除糖類、有機(jī)酸、色素等極性干擾物。本研究對(duì)QuEChERS法作了改進(jìn),增加一種強(qiáng)陽(yáng)離子交換材料,以去除堿性化合物。比較了4種凈化填料(SCX、GCB、C18、PSA)用量對(duì)蜂蜜樣品中丙烯酰胺的凈化效果。

        2.4.1 SCX 用量的優(yōu)化保持凈化填料GCB(20 mg)、C18(150 mg)、PSA(150 mg)、無(wú)水MgSO4(150 mg)用量不變,考察了SCX不同用量(50、100、150、200 mg)對(duì)基質(zhì)干擾去除的影響。如圖2所示,當(dāng)SCX 用量為50 mg 時(shí),基質(zhì)干擾嚴(yán)重,丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)的色譜峰無(wú)法被觀察到。隨著SCX 的用量增加,丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)的色譜峰能夠被觀察到。SCX 的用量為100 mg 和150 mg 時(shí),13C3-丙烯酰胺提取離子色譜圖中的雜質(zhì)峰較多且強(qiáng)度高,丙烯酰胺的兩對(duì)提取離子色譜峰(m/z72>55和72>27)受雜質(zhì)峰干擾嚴(yán)重,峰形較差。SCX 的用量為200 mg 時(shí),丙烯酰胺同位素提取離子色譜圖中的雜質(zhì)峰降低明顯,峰形以及相對(duì)峰高得到了明顯提高,丙烯酰胺的兩對(duì)提取離子峰的峰形明顯改善。綜上所述,加入SCX填料能有效去除蜂蜜樣品中雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)峰的干擾,其最佳用量為200 mg。

        圖2 SCX用量對(duì)丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺提取離子色譜圖的影響Fig.2 Influences of different SCX amounts on the extracted ion chromatograms of acrylamide and 13C3-acrylamide SCX amount(A~D):50,100,150,200 mg

        2.4.2 GCB 用量的優(yōu)化保持凈化填料SCX(200 mg)、C18(150 mg)、PSA(150 mg)、無(wú)水MgSO4(150 mg)用量不變,考察了GCB 用量(10、20、50、100 mg)對(duì)基質(zhì)干擾去除的影響。結(jié)果表明,GCB 的用量增加不影響丙烯酰胺及其同位素內(nèi)標(biāo)的峰形,考慮到不同蜂蜜樣本的色素含量有差異,本研究選擇GCB用量為20 mg。

        2.4.3 C18與PSA 用量的優(yōu)化保持凈化填料SCX(200 mg)、GCB(20 mg)、無(wú)水MgSO4(150 mg)用量不變,考察了C18和PSA 用量(C18和PSA 各50、100、150、200 mg)對(duì)基質(zhì)干擾去除的影響。結(jié)果顯示,C18和PSA用量均為50 mg或100 mg時(shí),雖然雜質(zhì)對(duì)13C3-丙烯酰胺的干擾影響最小,當(dāng)用量為150 mg時(shí),丙烯酰胺的兩對(duì)提取離子(m/z72>55和72>27)色譜峰形及干擾峰得到明顯改善,當(dāng)PSA 和C18用量均增至200 mg 時(shí),丙烯酰胺的兩對(duì)提取離子色譜峰的峰形變差。綜合考慮,選擇PSA 和C18的用量均為150 mg,各提取離子的色譜峰峰形最佳、雜質(zhì)干擾影響小。

        綜上所述,最終選用SCX(200 mg)、GCB(20 mg)、C18(150 mg)、PSA(150 mg)、無(wú)水MgSO4(150 mg)作為凈化填料。

        2.5 基質(zhì)效應(yīng)

        基質(zhì)效應(yīng)是由于待分析樣品溶液中的雜質(zhì)在離子電離時(shí)與目標(biāo)分析物產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)或改變噴霧液滴的表面張力和粘度,從而影響目標(biāo)化合物的電離程度,通常表現(xiàn)為基質(zhì)抑制或基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。由于丙烯酰胺在蜂蜜樣品中普遍存在,因此本實(shí)驗(yàn)采用13C3-丙烯酰胺考察基質(zhì)效應(yīng)。按照“1.3”對(duì)樣品進(jìn)行前處理(不加入同位素內(nèi)標(biāo)),獲得蜂蜜基質(zhì)溶液,分別用該基質(zhì)溶液和純水將13C3-丙烯酰胺逐級(jí)稀釋成2.0 ~ 100 ng/mL 的同位素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,分別將基質(zhì)溶液和純水配制的兩組13C3-丙烯酰胺同位素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按照濃度從低到高依次進(jìn)樣,獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線。基質(zhì)效應(yīng)(ME)計(jì)算公式如下:ME(%)=k1/k2×100,其中k1和k2分別為13C3-丙烯酰胺的基質(zhì)曲線和純?nèi)軇┣€的斜率。當(dāng)ME 為100%時(shí),表明無(wú)基質(zhì)效應(yīng);當(dāng)ME為<100%或>100%時(shí),分別表現(xiàn)為基質(zhì)抑制效應(yīng)或基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)的ME為77.4%,表明存在基質(zhì)抑制效應(yīng)。由于前處理過(guò)程中丙烯酰胺存在絕對(duì)損失,實(shí)驗(yàn)采用13C3-丙烯酰胺消除前處理過(guò)程中目標(biāo)分析物的絕對(duì)損失以及基質(zhì)抑制效應(yīng)的影響。

        2.6 方法學(xué)數(shù)據(jù)的考察

        用超純水將丙烯酰胺稀釋成2.0 ~ 500 ng/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,其中13C3-丙烯酰胺的質(zhì)量濃度為50 ng/mL,采用本方法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示,丙烯酰胺在2.0 ~ 500 ng/mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)(r2)為0.999 7。將低本底蜂蜜樣品按本方法進(jìn)行樣品前處理和測(cè)定,獲得丙烯酰胺的本底值以及信噪比(S/N)值,按照S/N分別為3 和10 計(jì)算并獲得丙烯酰胺的檢出限(LOD)和定量下限(LOQ)分別為0.42 μg/kg和1.38 μg/kg。

        對(duì)低本底蜂蜜樣品(2.5 μg/kg),按照低、中、高(2、10、100 μg/kg)3個(gè)水平進(jìn)行加標(biāo)實(shí)驗(yàn),每個(gè)濃度水平平行測(cè)定6 次。由表2 可知,丙烯酰胺在3 個(gè)加標(biāo)水平下的平均回收率為89.2% ~ 96.3%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.2% ~ 4.2%。

        表2 丙烯酰胺的回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)Table 2 Recoveries and relative standard deviations of acrylamide(n=6)

        2.7 實(shí)際樣品檢測(cè)

        在江蘇省13 個(gè)地市的超市、零售店以及網(wǎng)店購(gòu)買30 份蜂蜜,從產(chǎn)地上看,其中29 份樣品產(chǎn)自我國(guó)浙江、江蘇、廣西、上海、河北、遼寧、福建、安徽,1份樣品產(chǎn)自新西蘭;根據(jù)蜜源植物可分為:洋槐蜂蜜、棗花蜂蜜、紫云英蜂蜜、白玉枇杷蜂蜜和油菜花蜂蜜。采用本方法對(duì)30 份蜂蜜進(jìn)行測(cè)定,丙烯酰胺的檢出率為100%,含量為2.5~40.4 μg/kg,實(shí)際樣品的色譜圖見圖1B。由于原料蜜除雜過(guò)程一般需加熱,導(dǎo)致30 份蜂蜜樣品均檢出丙烯酰胺,但該熱加工工藝的溫度一般較低(40~65 ℃),所以蜂蜜中丙烯酰胺的含量整體較低,最高僅40.4 μg/kg。歐盟EU 2017/2158 指令規(guī)定嬰幼兒食品中丙烯酰胺的基準(zhǔn)值為40 μg/kg[3],本研究的測(cè)定結(jié)果顯示,蜂蜜樣品中丙烯酰胺含量處于較低水平,但仍需給予關(guān)注。

        3 結(jié) 論

        本研究在傳統(tǒng)QuEChERS 法基礎(chǔ)上增加一種強(qiáng)陽(yáng)離子交換材料作為凈化材料,基于改進(jìn)的QuEChERS 法,并結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜建立了蜂蜜樣品中丙烯酰胺的測(cè)定方法。該方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、準(zhǔn)確性好。經(jīng)過(guò)優(yōu)化后的凈化材料能顯著降低蜂蜜中雜質(zhì)的干擾,同時(shí)選用分離效果更為高效的色譜柱,進(jìn)一步減少了雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)峰的干擾,確保定量結(jié)果準(zhǔn)確可靠。該方法的建立可彌補(bǔ)蜂蜜中丙烯酰胺相關(guān)檢測(cè)方法的缺失,可為蜂蜜中丙烯酰胺的暴露評(píng)估提供技術(shù)支撐,從而保障廣大消費(fèi)者“舌尖上的安全”。

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