張雪莎 ，周 杰 ，李彩琳 ，吳定宇 ，彭 芳

（1）大理大學(xué)藥學(xué)院，云南 大理 671000;2）云南省昆蟲生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 大理 671000）

肝癌是一種常見的惡性腫瘤，在全球范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率均較高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國肝癌死亡率居于亞洲國家首位[1]。目前，臨床上治療肝癌的手段通常有手術(shù)治療、肝癌消融治療、外放射治療和藥物治療等[2]，其中使用化療藥物治療是一種較常規(guī)的治療方式，但目前臨床上使用的多數(shù)化療藥物易誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥，甚至使腫瘤細(xì)胞具有多藥耐藥性（multi-drug resistance，MDR）[3]。因此探索藥物對耐藥腫瘤細(xì)胞的作用及機(jī)制成為治療癌癥的研究熱點(diǎn)。

細(xì)胞自噬是一種依賴溶酶體的自我降解過程，有研究認(rèn)為腫瘤細(xì)胞的自噬可促進(jìn)癌癥的生長和生存[4]。對于耐藥腫瘤細(xì)胞，還可通過侵襲轉(zhuǎn)移途徑促進(jìn)癌細(xì)胞的生存和擴(kuò)散，這也是癌癥難以治愈的一個(gè)原因。中藥具有多靶點(diǎn)、多層次、低毒等優(yōu)點(diǎn)，對腫瘤細(xì)胞及耐藥腫瘤細(xì)胞療效較佳。美洲大蠊作為一種動(dòng)物中藥，具有修復(fù)肝損傷、抗腫瘤等作用，尤其對肝癌具有較好的療效，可逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥。但美洲大蠊提取物對肝臟腫瘤細(xì)胞的自噬和侵襲轉(zhuǎn)移的研究尚未見報(bào)道。故本文以裸鼠為實(shí)驗(yàn)對象，給予CII-3 和脫脂膏進(jìn)行干預(yù)，并以索拉菲尼為陽性對照，探討美洲大蠊提取物CII-3 與脫脂膏對肝癌細(xì)胞及肝癌耐藥細(xì)胞自噬和侵襲轉(zhuǎn)移力的影響。

開始采用適應(yīng)性牽引，初始重量為頭顱、雙側(cè)股骨髁上各2 kg，若患者無不適，牽引重量可逐日增加，一般為頭顱、雙側(cè)股骨髁上每日各增加2 kg，最大重量可達(dá)體重的1/3～1/2，牽引過程中密切觀察神經(jīng)功能［6，7］。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雌雄各半的標(biāo)準(zhǔn)體重的SPF 級Balb/c-nude裸鼠[動(dòng)物合格證號：430727200101104518，許可證號：SCXK（湘）2019-0004]，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。本實(shí)驗(yàn)已經(jīng)大理大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 主要試劑和設(shè)備

美洲大蠊提取物脫脂膏，系褐色粘稠糕狀，得率約為75.18%，批號為P14805-20171023，由美洲大蠊干燥蟲體的醇提物制備的浸膏制得。美洲大蠊脫脂膏進(jìn)一步純化的粗提物CII-3 為黃褐色凍干粉末，得率約為0.2%，批號為17102125，以上2 種均由大理大學(xué)昆蟲生物醫(yī)藥研究院張成桂博士提供；5-氟尿嘧啶（5-Pentafluorouracil，5-FU）（批號WXBC0190V），購自美國 Sigma 公司；索拉非尼（批號819C021），購自北京索萊寶科技有限公司；谷草轉(zhuǎn)氨酶測試盒（AST）（批號20201112），谷丙轉(zhuǎn)氨酶測試盒（ALT）（批號20201113），肌酐測試盒（CRE）（批號20201109），尿素氮測試盒（BUN）（批號20201120），均購自南京建成生物科技有限公司；全波長酶標(biāo)儀由Bio-Teck 公司生產(chǎn)；激光共聚焦顯微鏡由徠卡公司生產(chǎn)；人肝細(xì)胞癌敏感細(xì)胞株BEL-7402，耐5-FU人肝細(xì)胞癌細(xì)胞株BEL-7402/5-FU，生產(chǎn)批號均為MXC050，均由上海美軒生物科技有限公司提供。

近日，法國圣愛美隆產(chǎn)區(qū)釀酒開拓者——杰樂貝干（J.LEGEGUE）酒莊新品晚宴在陽光上東MAISON CELINE隆重舉行，ADVINI集團(tuán)中國大區(qū)總監(jiān)Bertrand Jimenez亮相晚宴現(xiàn)場，品牌方攜5款新品驚艷亮相。

1.3 移植瘤模型的建立[5]

取密度為8×107的BEL-7402 或BEL-7402/5-FU 細(xì)胞懸液，用100 μL 的 PBS 和 Matrigel 基質(zhì)膠包裹好后，接種于裸鼠左前肢腋下。敏感組接種BEL-7402 為肝癌敏感細(xì)胞模型，其他組均接種BEL-7402/5-FU 為耐藥肝癌細(xì)胞模型，接種第5 天開始，每2 d 1 次分別測量并記錄裸鼠腋下腫瘤長短徑。

采用SPSS 17.0 軟件處理數(shù)據(jù)，正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，2 組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，單因素方差分析有意義后各組兩兩比較采用q檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.4 動(dòng)物分組、給藥與取材[6]

隨著人們對環(huán)保意識的增強(qiáng)以及國家政策的要求、移動(dòng)破碎篩分設(shè)備在城市建筑垃圾、礦山等方面應(yīng)用越來越廣泛。

1.5 裸鼠生化指標(biāo)檢測[7]

按照試劑盒要求測定各組血清中AST、ALT、CR、BUN 等生化指標(biāo)。

1.6 裸鼠的臟器指數(shù)和抑瘤率的檢測[8]

將肝臟和腫瘤組織常規(guī)處理，分別進(jìn)行石蠟包埋、切片、染色、封片，并于光學(xué)顯微鏡下觀察病理組織變化。

作者是科學(xué)研究的主體，通過對發(fā)文作者及其合作網(wǎng)絡(luò)的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行分析，可以反映該領(lǐng)域研究的核心作者群及合作關(guān)系。本文將獲取的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入CiteSpace V中，選擇網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)(node types)為Author，以關(guān)鍵路徑(pathfinder)算法，數(shù)據(jù)抽取對象為Top50，設(shè)置時(shí)間區(qū)間(time slicing)的值為1，生成了作者共引聚類知識圖譜(如圖3)。

1.7 肝臟和腫瘤組織病理學(xué)檢測[10]

臟器指數(shù)=臟器重量（mg）/動(dòng)物體重（g）。

1.8 腫瘤組織中自噬和侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)mRNA 的檢測[11]

CII-3 組心臟指數(shù)高于空白組、敏感組和耐藥組（P<0.05）。與空白組、敏感組、耐藥組相比，索拉菲尼組提升肝臟指數(shù)，CII-3 組和脫脂膏組則降低肝臟指數(shù)。各藥物處理組均升高脾臟指數(shù)，尤其是CII-3 組。脫脂膏組心臟指數(shù)較索拉菲尼組高（P<0.05），其他組變化不明顯。各組對肺臟指數(shù)影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表3。

表1 自噬相關(guān)因子引物序列表Tab.1 Primers sequence of autophagy related factors

表2 侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子引物序列表Tab.2 Primer sequence of invasion and metastasis related factors

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

梯度氣象觀測站是一個(gè)低層大氣綜合探測系統(tǒng)，集多層、多參量觀測系統(tǒng)于一體，實(shí)現(xiàn)一定高度內(nèi)的風(fēng)溫梯度信號參量的綜合自動(dòng)觀測。氣象數(shù)據(jù)為研究大氣污染、大氣邊界層物理提供高質(zhì)量的觀測資料，同時(shí)提升公共氣象服務(wù)能力、提高氣象預(yù)報(bào)預(yù)測準(zhǔn)確率也起著重要作用。

取未接種腫瘤細(xì)胞的裸鼠作為空白組；接種BEL-7402 并造模成功的裸鼠為敏感組；接種BEL-7402/5-FU 并造模成功的裸鼠隨機(jī)分為30 mg/kg 索拉菲尼組、200 mg/kgCII-3 組和200 mg/kg 脫脂膏組，每組12 只。在接種后的第8 天分別按上述劑量給藥（0.1 mL/10 g），連續(xù)給藥14 d。末次給藥24 h 后，各組眼眶靜脈叢取血用于生化指標(biāo)監(jiān)測；剝?nèi)×鰤K以及心、肝、腎、脾等重要臟器，用于臟器指數(shù)、腫瘤體積和抑瘤率的計(jì)算、肝臟和腫瘤組織病理學(xué)檢測以及腫瘤組織相關(guān)指標(biāo)的檢測。

2 結(jié)果

2.1 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠體重及腫瘤抑制的影響

前期各組裸鼠體重變化不大，CⅡ-3 組和脫脂膏組在后期有降低裸鼠體重的趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。敏感組瘤體積增長速度較快，耐藥組趨于穩(wěn)定。索拉菲尼組、CII-3 組和脫脂膏組在給藥9 d 后瘤體積明顯減小。敏感組瘤重顯著高于其余4 組，耐藥組明顯高于索拉菲尼組、CII-3 組和脫脂膏組（P<0.01），索拉菲尼組、CII-3 組、脫脂膏組之間瘤重，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見圖1。

圖1 CII-3 和脫脂膏對皮下移植瘤裸鼠體重、腫瘤體積及瘤重的影響Fig.1 Effects of CII-3 and defatted ointment on body weight，tumor volume and tumor weight of nude mice with subcutaneously transplanted tumor

2.2 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠臟器指數(shù)的影響

取腫瘤組織進(jìn)行常規(guī)處理后，再按照相應(yīng)試劑盒操作流程進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄（RT-PCR）反應(yīng)，確定自噬和侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子引物，見表1，表2，觀察RT-PCR 反應(yīng)并計(jì)算各基因的相對表達(dá)量。計(jì)算公式：

表3 CII-3 和脫脂膏對皮下移植瘤裸鼠臟器指數(shù)的影響（，n=12）Tab.3 Effects of CII-3 and defatted ointment on organ index in nude mice with subcutaneously transplanted tumor（，n=12）

表3 CII-3 和脫脂膏對皮下移植瘤裸鼠臟器指數(shù)的影響（，n=12）Tab.3 Effects of CII-3 and defatted ointment on organ index in nude mice with subcutaneously transplanted tumor（，n=12）

與空白組比較，▲P <0.05，▲▲P <0.01；與敏感組比較，*P <0.05，**P <0.01；與耐藥組比較，#P <0.05，##P <0.01；與索拉非尼組比較，△P <0.05，△△P <0.01。

2.3 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠血清生化指標(biāo)的影響

與空白組相比，敏感組裸鼠的AST 升高，索拉菲尼和脫脂膏組能降低AST，CII-3 組則升高AST。對ALT 的影響，也存在索拉菲尼和脫脂膏組降低其含量，CII-3 組則升高其含量。各給藥處理組均提升CR 的含量，而各給藥組對BUN 含量影響則不明顯，見表4。

腫瘤體積=1/2（長徑×短徑×短徑），腫瘤的相對體積=每次測量計(jì)算后的腫瘤體積/接種后第4 天的體積[9]。

表4 CII-3 和脫脂膏對皮下移植瘤裸鼠生化指標(biāo)的影響（，n=12）Tab.4 Effects of CII-3 and defatted ointment on biochemical indexes of nude mice with subcutaneously transplanted tumor（，n=12）

表4 CII-3 和脫脂膏對皮下移植瘤裸鼠生化指標(biāo)的影響（，n=12）Tab.4 Effects of CII-3 and defatted ointment on biochemical indexes of nude mice with subcutaneously transplanted tumor（，n=12）

與空白組比較，▲P <0.05，▲▲P <0.01；與敏感組比較，*P <0.05，**P <0.01；與耐藥組比較，#P<0.05，##P <0.01；與索拉非尼組比較，△P <0.05，△△P <0.01。

2.4 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠肝臟組織病理學(xué)的影響

空白組肝組織細(xì)胞排列整齊、形狀規(guī)則，而敏感組和耐藥組肝組織的細(xì)胞核排列不整齊且出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象，索拉菲尼組、CⅡ-3 組和脫脂膏組對肝損傷的改善雖有一定作用，但效果不凸顯，肝細(xì)胞排列部分仍存在不規(guī)則且多核現(xiàn)象，見圖2。

2.5 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠腫瘤組織病理學(xué)的影響

敏感組和耐藥組腫瘤組織呈現(xiàn)鵝卵石或不規(guī)則形態(tài)，索拉菲尼組腫瘤組織細(xì)胞為片狀壞死，細(xì)胞形態(tài)難以看清；CⅡ-3 組大部分細(xì)胞呈不規(guī)則形態(tài)，成片狀壞死，細(xì)胞核出現(xiàn)縮小甚至碎裂；脫脂膏組腫瘤細(xì)胞壞死不明顯，見圖3。

近年來，浙江省金華市人大常委會探索開展財(cái)政專項(xiàng)支出第三方績效評價(jià)工作，先后完成了保障性住房建設(shè)、科技創(chuàng)新支出等6個(gè)項(xiàng)目的第三方績效評價(jià)，今年又開展了農(nóng)村生活污水治理、居家養(yǎng)老服務(wù)機(jī)構(gòu)補(bǔ)助等4個(gè)項(xiàng)目的第三方績效評價(jià)，取得了良好效果。今年8月，該項(xiàng)工作獲評“浙江人大工作與時(shí)俱進(jìn)獎(jiǎng)”提名獎(jiǎng)。

圖3 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠腫瘤組織病理學(xué)的影響（HE 染色）Fig.3 Effects of CII-3 and defatted ointment on tumor histopathology in nude mice with transplanted tumor（HE staining）

2.6 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠自噬相關(guān)因子mRNA 的影響

與敏感組相比，耐藥組6 個(gè)自噬相關(guān)因子（ATG5、ATG7、BECLIN、LC3B、PIK3C3、P62）均呈現(xiàn)高表達(dá)。與耐藥組相比，索拉菲尼組、CⅡ-3 組和脫脂膏組均能抑制上述6 個(gè)自噬相關(guān)因子的表達(dá)，見表5。

表5 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠自噬相關(guān)因子mRNA 的影響（，n=12）Tab.5 Effects of CII-3 and defatted ointment on autophagy related factor mRNA in nude mice with transplanted tumor（，n=12）

與敏感組比較，*P <0.05，**P <0.01；與耐藥組比較，#P <0.05，##P <0.01；與索拉非尼組比較，△P <0.05，△△P <0.01。

2.7 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子mRNA 的影響

與敏感組相比，耐藥組5 個(gè)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子（MMP2、MMP9、mTOR、AKT、4EBP1）均呈現(xiàn)高表達(dá)。與耐藥組相比，索拉菲尼組除提升4EBP1 較為明顯外，其余均降低；而CⅡ-3 組和脫脂膏組均能抑制5 個(gè)侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子的表達(dá)，見表6。

2) 污染土中Pb賦存形態(tài)的改變是改性磷礦渣和普通硅酸鹽水泥穩(wěn)定土Pb變化的主要原因，普通硅酸鹽水泥可促進(jìn)Pb從弱酸提取態(tài)向可還原態(tài)轉(zhuǎn)化，而改性磷礦渣可促進(jìn)Pb從弱酸提取態(tài)向可氧化態(tài)轉(zhuǎn)化.

表6 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子mRNA 的影響（，n=12）Tab.6 Effects of CII-3 and defatted ointment on the mRNA of invasion and metastasis related factors in nude mice with transplanted tumor（，n=12）

表6 CII-3 和脫脂膏對移植瘤裸鼠侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子mRNA 的影響（，n=12）Tab.6 Effects of CII-3 and defatted ointment on the mRNA of invasion and metastasis related factors in nude mice with transplanted tumor（，n=12）

與敏感組比較，*P <0.05，**P <0.01；與耐藥組比較，#P <0.05，##P <0.01；與索拉非尼組比較，△P <0.05，△△P <0.01。

3 討論

肝癌作為一種惡性腫瘤疾病，嚴(yán)重威脅著人民的身體健康和生命安全?；熕幱捎诙拘詮?qiáng)，易產(chǎn)生MDR，療效不顯著等缺點(diǎn)限制了其在臨床上的使用。多種中藥因作用靶點(diǎn)多、不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)被臨床用于腫瘤的治療[12]。美洲大蠊作為一種動(dòng)物藥，自開發(fā)為藥物以來備受關(guān)注，已有大量研究表明美洲大蠊提取物可通過抑制腫瘤細(xì)胞生長、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥等機(jī)制對多種癌癥組織產(chǎn)生抑制作用[13]。細(xì)胞自噬和侵襲轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞的重要生命活動(dòng)，許多中藥發(fā)揮抗腫瘤作用就是通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的自噬、侵襲轉(zhuǎn)移途徑[14]。細(xì)胞自噬的調(diào)控對肝癌的作用至今仍是國內(nèi)外的研究熱點(diǎn)[15-16]，例如有研究報(bào)道了RNA 結(jié)合蛋白PNO1 和類固醇原件結(jié)合蛋白2SREP2 等就是通過調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞的自噬和侵襲轉(zhuǎn)移從而抑制細(xì)胞凋亡成為肝細(xì)胞癌的治療靶點(diǎn)[17-18]。此外，已有研究發(fā)現(xiàn)美洲大蠊提取物脫脂膏和CⅡ-3 有一定的對抗腫瘤MDR 的作用[19]，但對于CⅡ-3 和脫脂膏是否影響腫瘤的自噬和侵襲轉(zhuǎn)移則沒有深入研究。本研究通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測美洲大蠊提取物對裸鼠瘤體積、臟器指數(shù)、生化指標(biāo)，腫瘤細(xì)胞病理學(xué)及自噬和侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子的表達(dá)來探討脫脂膏和CⅡ-3 對肝癌耐5-氟尿嘧啶細(xì)胞（BEL-7 402/5-FU）自噬和侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。

3.1 CⅡ-3 和脫脂膏的抑癌作用

本研究觀察到CII-3 和脫脂膏有降低耐藥肝癌裸鼠體重趨勢，且可減少裸鼠皮下移植瘤體積和重量，表明美洲大蠊提取物CII-3 和脫脂膏可抑制耐藥性肝癌細(xì)胞的生長。此外，本研究還在鏡下觀察到敏感組和耐藥組腫瘤細(xì)胞呈鵝卵石或不規(guī)則形態(tài)，而索拉菲尼組和CII-3 組腫瘤細(xì)胞呈片狀壞死，表明CII-3 與抗肝癌藥物索拉菲尼均對腫瘤細(xì)胞有殺傷作用，這進(jìn)一步證明了CII-3 具有抗腫瘤及抗腫瘤耐藥效果。而脫脂膏組腫瘤細(xì)胞片狀壞死情況不夠明顯，說明了美洲大蠊提取物CII-3 的抗腫瘤及抗腫瘤耐藥的效果比脫脂膏更佳。先前的研究也證明了脫脂膏和CⅡ-3可逆轉(zhuǎn)人肝癌細(xì)胞HepG2/ADM 細(xì)胞的多藥耐藥性，且CⅡ-3 的效果優(yōu)于脫脂膏[20]。

3.2 CⅡ-3 和脫脂膏引起肝腎損傷

雖然先前大多研究認(rèn)為美洲大蠊提取物可改善肝功能，減輕肝纖維化[21-22]，但本研究發(fā)現(xiàn)裸鼠接種肝癌敏感細(xì)胞和耐藥細(xì)胞后會對肝臟組織產(chǎn)生一定影響，誘發(fā)肝損傷，且索拉菲尼、美洲大蠊提取物CII-3 均不能有效改善這種損傷。提示我們還應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對CII-3 在抗腫瘤方面的作用機(jī)制和安全性研究。此外該研究也發(fā)現(xiàn)了CII-3 和脫脂膏能提高脾臟指數(shù)，可升高血清CR 值，一定程度也說明了CII-3 和脫脂膏有一定的肝腎損傷，有必要進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化。

3.3 CII-3 和脫脂膏影響肝癌細(xì)胞的自噬和侵襲轉(zhuǎn)移

近年來研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬和侵襲轉(zhuǎn)移與肝細(xì)胞癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移及耐藥等方面有密切的關(guān)系[23-24]。細(xì)胞自噬和侵襲轉(zhuǎn)移過程是由許多基因共同參與完成，其中參與細(xì)胞自噬的基因主要包括ATG5、ATG7、P62。其中ATG5 主要參與自噬體形成，促進(jìn)自噬前體膜延伸，ATG7 參與調(diào)控自噬體的形成，P62 主要依賴自噬進(jìn)行降解。參與侵襲轉(zhuǎn)移的主要有MMP 家族（MMP2 和MMP9表現(xiàn)最明顯）、AKT、PI3K 等[25-26]。在研究各組自噬和侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子的表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn)，耐藥腫瘤組織中P62、ATG5、ATG7、MMP2、MMP9、AKT 等均呈高表達(dá)，說明耐藥肝癌細(xì)胞具有更強(qiáng)的自噬和侵襲轉(zhuǎn)移能力，但P62 作為自噬負(fù)相關(guān)因子卻呈現(xiàn)出高表達(dá)，可能是由于P62 作為自噬過程的最后階段，受自噬影響較小。脫脂膏組和CII-3 組中除P62 外，其余自噬和侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子的mRNA 均明顯降低。表明CII-3 和脫脂膏可降低這種自噬和侵襲轉(zhuǎn)移能力，且CII-3 的作用效果優(yōu)于脫脂膏，但二者對不同的自噬和侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子可產(chǎn)生不同程度的影響，其中對自噬相關(guān)因子ATG5 影響最為明顯，而對ATG7 和P62 影響較小。證明美洲大蠊提取物可能只能作用于自噬的某些階段。

綜上所述，本研究從動(dòng)物水平入手，在前期的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了美洲大蠊提取物CII-3 和脫脂膏對肝癌耐5-氟尿嘧啶細(xì)胞（BEL-7402/5-FU）自噬和侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響，為該藥的物質(zhì)基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。但由于動(dòng)物樣本有限等問題，未能進(jìn)一步監(jiān)測腫瘤組織中相關(guān)蛋白的表達(dá)，還需要進(jìn)一步的研究。