張 謙，王 燕，董 明，馮國(guó)藝，林永增，梁青龍，王樹林，祁 虹

（河北省農(nóng)林科學(xué)院棉花研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部黃淮海半干旱區(qū)棉花生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，石家莊 050051）

棉蚜AphisgossypiiGlover 是棉花上主要的常發(fā)性害蟲，其繁殖速度快、年發(fā)生世代多，以成蚜和若蚜聚集在棉葉背面或幼嫩枝葉上刺吸汁液，常造成葉片皺縮卷曲、甚至枯死，光合作用和正常生理代謝活動(dòng)受到抑制，嚴(yán)重影響棉花產(chǎn)量和品質(zhì)[1]。黃河流域各棉區(qū)以苗蚜和伏蚜為害為主，受氣候條件影響，伏蚜年際間發(fā)生量及成災(zāi)幾率變幅較大，且7、8 月處于防治綠盲蝽等害蟲的用藥高峰期，伏蚜可以兼防兼治；相比之下，苗期害蟲以苗蚜為主，其他類害蟲較少，防治難度和投入理應(yīng)較低，但生產(chǎn)中3～7 d 進(jìn)行1 次噴霧防治的現(xiàn)象很普遍。另外，頻繁的化學(xué)防治，導(dǎo)致棉蚜抗藥性上升和天敵控蚜能力下降，苗蚜“難防治、治不住”問(wèn)題日益嚴(yán)重。

綠僵菌是一類重要的昆蟲病原真菌，作為生物農(nóng)藥在農(nóng)林害蟲防治中廣為應(yīng)用，防治對(duì)象包括半翅目（沫蟬科、蚜科、飛虱科、粉虱科和蟬科）、鞘翅目（金龜科、象甲科、露尾甲科）、直翅目（蝗科、飛蝗科、錐頭蝗科）等12 目33 科[2]。針對(duì)蚜科害蟲，金龜子綠僵菌MetarhiziumanisopliaeCQMa421 與25%噻蟲嗪水分散粒劑、20%噻蟲胺懸浮劑和10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑等3 種化學(xué)農(nóng)藥桶混殺瓜蚜Aphis gossypiiGlover 增效作用顯著，其速效性顯著優(yōu)于金龜子綠僵菌CQMa421，持效性顯著優(yōu)于化學(xué)殺蟲劑[3]；黃綠綠僵菌M.flavoviride處理煙草蚜蟲Myzuspersicae后，對(duì)寄主的解毒代謝酶（AChE 和GSTs）在侵染初期抑制作用不明顯，隨著時(shí)間延長(zhǎng)出現(xiàn)顯著的抑制作用，煙草蚜蟲在處理36 h 后開始逐漸死亡[4]；金龜子綠僵菌破壞素A 與1.8%阿維菌素乳油混配對(duì)蘋果黃蚜Aphiscitricolavan der Goot 有較高防效[5]。目前對(duì)于綠僵菌防治棉蚜效果，特別是對(duì)棉田苗蚜的防效報(bào)道較少，本研究選擇80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑與50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑和50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑3 種棉蚜防治藥劑進(jìn)行桶混施用，并在最高推薦用量基礎(chǔ)上減藥25%、50%和75%，研究金龜子綠僵菌與化學(xué)農(nóng)藥的聯(lián)用及減量效果，為苗蚜防治中綠色生物農(nóng)藥高效使用和化學(xué)農(nóng)藥減施增效提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)田基本情況

試驗(yàn)于2021 年4―6 月在河北省農(nóng)林科學(xué)院棉花研究所威縣試驗(yàn)站（115°46′ E，36°95′ N）進(jìn)行，種植棉花品種冀863，等行距種植，行距76 cm，株距30 cm。試驗(yàn)田土壤為沙壤土，肥力中等，連作棉田，4 月中旬灌溉底墑水，下旬旋耕耙耱待播，4 月30 日覆膜播種；苗期不進(jìn)行任何蟲害防治，其他管理措施同大田管理。

1.2 供試藥劑

50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑購(gòu)自美國(guó)陶氏益農(nóng)公司；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑購(gòu)自日本石原產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑購(gòu)自巴斯夫歐洲公司；80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑購(gòu)自重慶聚立信生物工程有限公司。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)產(chǎn)品使用說(shuō)明，50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑和50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑田間推薦藥劑用量分別為60 g/hm2、600 g/hm2和240 mL/hm2，每個(gè)藥劑分別設(shè)置推薦量、減量25%、減量50%和減量75%共4 個(gè)用量處理，80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑用量為900 mL/hm2，各化學(xué)農(nóng)藥用量與金龜子綠僵菌聯(lián)合使用方法見表1。5 月27 日苗蚜發(fā)生初期進(jìn)行藥劑防治試驗(yàn)，調(diào)查蟲口基數(shù)為22.2～68.8 頭/株，采用背負(fù)式電動(dòng)噴霧器（DB-M20A，臺(tái)州大美機(jī)械有限公司）進(jìn)行人工噴藥處理，藥液量375 L/hm2。分別于藥后1 d、3 d、7 d 和14 d 進(jìn)行棉蚜數(shù)量調(diào)查，每小區(qū)5 點(diǎn)取樣，每點(diǎn)固定5 株，計(jì)數(shù)整株蚜蟲數(shù)量，計(jì)算不同處理對(duì)苗蚜的防治效果。

蟲口減退率（%）＝（藥前蟲口數(shù)―藥后蟲口數(shù)）/藥前蟲口數(shù)×100；防治效果（%）＝（防治區(qū)蟲口減退率―空白對(duì)照區(qū)蟲口減退率）/（1―空白對(duì)照區(qū)蟲口減退率）×100。

藥后14 d 對(duì)有蚜株率和卷葉株率進(jìn)行調(diào)查，每小區(qū)5 行，計(jì)數(shù)每行棉苗株數(shù)、有蚜株和卷葉株，計(jì)算有蚜株率和卷葉株率。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Excel 2010 和DPS 7.05 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析，藥劑間防效及苗蚜為害差異采用Duncan’s 新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 金龜子綠僵菌CQMa421 與化學(xué)農(nóng)藥減量聯(lián)用對(duì)苗蚜的防效比較

80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑推薦劑量（900 mL/hm2）單獨(dú)施用，藥后1 d、3 d、7 d 和14 d 對(duì)苗蚜的田間防效分別為5.36%、6.76%、5.75%和15.46%，藥后14 d 防效最高，但整體防效較低。50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑和50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑在最高推薦用量（60 g/hm2、600 g/hm2和240 mL/hm2）單獨(dú)施用，藥后1 d、3 d、7 d 和14 d 對(duì)苗蚜的防效分別為77.48%、71.39%、74.88%和50.38%；41.79%、87.78%、80.41%和79.53%；86.94%、99.46%、94.43%和93.95%。綜合來(lái)看，80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑單獨(dú)施用防效較低，對(duì)苗蚜防控效果不理想；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑對(duì)苗蚜整體防效較好，表現(xiàn)出較好的速效性和持效性；50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑藥后3 d 后防效較為穩(wěn)定，藥后14 d 持效性略低；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑藥后1 d 防效較低，藥后3 d 后防效較穩(wěn)定，持效性較好。

80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑與3 種化學(xué)農(nóng)藥聯(lián)合施用相較于金龜子綠僵菌或化學(xué)農(nóng)藥單獨(dú)施用有一定的協(xié)同增效作用?；瘜W(xué)農(nóng)藥與金龜子綠僵菌聯(lián)合施用條件下，藥后1 d，50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑推薦用量、減量25%、減量50%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為83.82%、78.79%和73.45%，與氟啶蟲胺腈單獨(dú)施用差異不顯著，且推薦用量和減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用比氟啶蟲胺腈單獨(dú)施用防效提高6.34%和1.31%；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑推薦用量、減量25%和減量50%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為71.20%、76.55%和59.23%，比氟啶蟲酰胺單獨(dú)施用防效增加29.41%、34.76%和17.44%；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑推薦用量、減量25%、減量50%和減量75%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為97.57%、97.63%、91.49%和80.82%，與雙丙環(huán)蟲酯推薦用量單獨(dú)施用防效差異不顯著，其中，推薦用量、減量25%和減量50%分別比雙丙環(huán)蟲酯單用防效提高10.63%、10.69%和4.55%。

藥后3 d，50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑推薦用量與金龜子綠僵菌聯(lián)用防效為73.31%，略高于推薦用量單獨(dú)施用，減量25%和減量50%防效降低，但與推薦用量單獨(dú)施用差異不顯著；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑推薦用量、減量25%和減量50%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為95.39%、94.80%和70.86%，與氟啶蟲酰胺單獨(dú)施用防效差異不顯著，其中，推薦用量、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用比氟啶蟲酰胺單用防效分別增加7.61%、7.02%；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑推薦用量、減量25%、減量50%和減量75%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為100.00%、99.66%、98.75%和95.19%，與雙丙環(huán)蟲酯推薦用量單獨(dú)施用防效差異不顯著。

藥后7 d，50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑推薦用量、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用防效分別為67.74%、64.09%，與推薦用量單獨(dú)施用差異不顯著；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑推薦用量、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為85.48%、83.66%，與氟啶蟲酰胺單獨(dú)施用防效差異不顯著，其中，推薦用量、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用比氟啶蟲酰胺單用防效分別增加5.07%、3.25%；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑推薦用量、減量25%、減量50%和減量75%與金龜子綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為94.79%、97.25%、97.23%和92.25%，與雙丙環(huán)蟲酯推薦用量單獨(dú)施用防效差異均不顯著。

藥后14 d，50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑推薦用量與綠僵菌聯(lián)用防效為51.87%，略高于推薦用量單獨(dú)施用，減量25%和減量50%防效降低，但與推薦用量單獨(dú)施用差異不顯著；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑推薦用量、減量25%和減量50%與綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為85.29%、85.02%和63.49%，與氟啶蟲酰胺單獨(dú)施用防效差異不顯著，其中，推薦用量、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用比氟啶蟲酰胺單用防效分別增加5.76%、5.49%；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑推薦用量、減量25%和減量50%與綠僵菌聯(lián)用對(duì)苗蚜防效分別為90.91%、94.42%和93.07%，與雙丙環(huán)蟲酯推薦用量單獨(dú)施用防效差異不顯著。

2.2 金龜子綠僵菌CQMa421 與化學(xué)農(nóng)藥減量聯(lián)用對(duì)苗蚜為害水平的影響

金龜子綠僵菌與化學(xué)農(nóng)藥減量聯(lián)用對(duì)苗蚜為害造成的有蚜株率和卷葉株率影響見圖1。藥后14 d，棉蚜已全田擴(kuò)散，金龜子綠僵菌單獨(dú)施用與對(duì)照處理有蚜株率均為100.00%；50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑推薦用量單獨(dú)施用或減量與金龜子綠僵菌聯(lián)用的各處理有蚜株率接近或達(dá)到100.00%；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑推薦用量和金龜子綠僵菌聯(lián)用與推薦用量單獨(dú)施用間有蚜株率分別為64.32%和63.22%，兩者無(wú)顯著差異，但顯著低于金龜子綠僵菌與氟啶蟲酰胺減量聯(lián)用；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑減量50%和金龜子綠僵菌聯(lián)用有蚜株率為32.04%，顯著低于各藥劑單施或綠僵菌聯(lián)用處理。

圖1 金龜子綠僵菌CQMa421 與化學(xué)農(nóng)藥減量聯(lián)用對(duì)苗蚜為害水平的影響（A：有蚜株率；B：卷葉株率）Fig.1 Impact of combination of Metarhizium anisopliae and reduced dosages of chemical pesticides on the rate of aphid plants (A) and leaf rolling plants (B)

藥后14 d，綠僵菌單獨(dú)施用與對(duì)照處理卷葉株率均為100.00%；50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑推薦用量與金龜子綠僵菌聯(lián)合施用卷葉株率為61.87%，顯著低于其他氟啶蟲胺腈處理；10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑推薦用量、推薦用量與金龜子綠僵菌聯(lián)用、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用卷葉株率分別為56.58%、52.94%、62.70%，3 個(gè)處理間無(wú)顯著差異；50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑各處理卷葉株率顯著低于其他處理，推薦用量、推薦用量與金龜子綠僵菌聯(lián)用、減量25%與金龜子綠僵菌聯(lián)用、減量50%與金龜子綠僵菌聯(lián)用卷葉株率分別為5.47%、5.51%、4.82%、12.78%，處理間差異不顯著。

3 討論

以微生物農(nóng)藥、生物化學(xué)農(nóng)藥和植物源農(nóng)藥為主的生物農(nóng)藥，盡管在農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)中占比較低，但在減少化學(xué)農(nóng)藥使用、保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和保護(hù)生態(tài)環(huán)境方面發(fā)揮著積極作用[6]。殺蟲真菌農(nóng)藥是最具潛力的一類微生物農(nóng)藥，可通過(guò)體壁直接侵染害蟲，在防治刺吸式口器害蟲和非取食蟲態(tài)（卵、蛹等）上較其他殺蟲微生物有明顯的優(yōu)勢(shì)[7]。綠僵菌是最為常見的殺蟲真菌之一，國(guó)內(nèi)金龜子綠僵菌CQMa421 居微生物農(nóng)藥產(chǎn)量的前五位，已登記防治對(duì)象包括水稻、玉米、茶葉等18 種（類）植物上的19 種（類）害蟲，包括小麥、苦瓜、黃瓜、桃樹、煙草等作物上的蚜科害蟲[8]，而對(duì)于棉花苗蚜大田防治效果的研究較少。

本研究選擇80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑作為金龜子綠僵菌供試藥劑，并與50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑和50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑等3 種化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行減量聯(lián)用，比較了其對(duì)苗蚜的田間防效。結(jié)果表明，80 億孢子/mL 金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑推薦劑量（900 mL/hm2）單獨(dú)施用對(duì)苗蚜田間防效為5.36%～15.46%，田間防效較低?；瘜W(xué)農(nóng)藥推薦用量和金龜子綠僵菌聯(lián)合施用可提高藥劑防蚜效果，減量25%和金龜子綠僵菌聯(lián)合施用與化學(xué)農(nóng)藥推薦用量單獨(dú)施用防效無(wú)顯著差異，其中，10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑和金龜子綠僵菌減量聯(lián)用效果增加明顯。金龜子綠僵菌與化學(xué)農(nóng)藥混配后聯(lián)合施用具有減藥增效作用，兩者結(jié)合能有效縮短真菌制劑侵染時(shí)間，顯著降低化學(xué)農(nóng)藥使用量，提高害蟲防治效果，并減緩害蟲產(chǎn)生抗藥性[9]。金龜子綠僵菌CQMa421 與10%氟啶蟲酰胺等25 種防治水稻、蔬菜和茶葉害蟲的常用殺蟲劑兼容性較好，不會(huì)影響金龜子綠僵菌孢子萌發(fā)率[10]，本文研究結(jié)果中10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑與金龜子綠僵菌減量聯(lián)用對(duì)苗蚜防效較高與上述結(jié)論一致。同時(shí)，本文中其他化學(xué)藥劑與金龜子綠僵菌聯(lián)用存在防效差異，可能與殺蟲劑和綠僵菌的兼容性差異有關(guān)，具體增效原因需要進(jìn)一步明確。

前人研究表明，金龜子綠僵菌CQMa421 可分散油懸浮劑對(duì)農(nóng)業(yè)害蟲有較好田間防效，例如，對(duì)白背飛虱Sogatellafurcifera、稻縱卷葉螟Cnaphalocrocismedinalis和二化螟Chilosuppressalis等水稻害蟲的田間防效達(dá)60%～85%，且對(duì)環(huán)境友好[11-13]；能夠侵染玉米害蟲草地貪夜蛾Spodopterafrugiperda卵、低齡幼蟲和蛹，明顯降低卵孵化率、幼蟲存活率和蛹羽化率，與蘇云金桿菌G033A 聯(lián)用、減量化學(xué)農(nóng)藥聯(lián)用對(duì)草地貪夜蛾防效良好[14-17]；是目前唯一登記的防控茶小綠葉蟬Empoascaonukii的微生物農(nóng)藥，防效達(dá)到60%～80%[18,19]；同時(shí)，可作為化學(xué)農(nóng)藥替代品控制茄子西花薊馬Frankliniellaoccidentalis，生產(chǎn)中制定了無(wú)化藥防控方案[20]。金龜子綠僵菌CQMa421 與噻蟲嗪、噻蟲胺和氟啶蟲酰胺桶混防治瓜蚜，其速效性優(yōu)于金龜子綠僵菌單用、持效性優(yōu)于化學(xué)藥劑[3]，這與本研究金龜子綠僵菌與化學(xué)農(nóng)藥聯(lián)合施用對(duì)棉蚜防效增加的結(jié)果一致。但在本研究中，金龜子綠僵菌單獨(dú)施用對(duì)棉花苗蚜防效較低，與化學(xué)農(nóng)藥聯(lián)合施用后，雖然蟲口數(shù)量下降明顯，但藥后14 d，苗蚜造成的有蚜株率和卷葉株率仍較高，除50 g/L 雙丙環(huán)蟲酯可分散液劑對(duì)棉株保護(hù)效果較好外，其他藥劑處理均達(dá)到防治指標(biāo)，利用金龜子綠僵菌侵染提高藥劑持效性的作用不明顯。而金龜子綠僵菌單施對(duì)瓜蚜防效高于本研究中金龜子綠僵菌單施對(duì)棉蚜防效，可能與應(yīng)用作物（西葫蘆與棉花）、施用場(chǎng)景（日光溫室和大田）等存在差異有關(guān)。

環(huán)境相對(duì)濕度是影響昆蟲病原真菌田間防治害蟲效果的關(guān)鍵因素，在玫煙色蟲草Isariafumosorosea、球孢白僵菌Beauveriabassiana、貴州綠僵菌Metarhiziumguizhouense的萌發(fā)與侵染中，當(dāng)相對(duì)濕度低于75%時(shí)，孢子萌發(fā)率和目標(biāo)害蟲的死亡率較低，而相對(duì)濕度越高，越有利于孢子萌發(fā)與侵染[21-23]。本研究中，單獨(dú)施用金龜子綠僵菌對(duì)苗蚜防效較低，難以實(shí)現(xiàn)對(duì)苗蚜種群的有效控制，可能與苗期棉株矮小、地表裸露造成的葉片表面或棉田干燥微環(huán)境有關(guān)。環(huán)境濕度調(diào)控有利于減輕濕度過(guò)低對(duì)孢子萌發(fā)和侵染的影響，提高昆蟲病原真菌對(duì)害蟲的田間防治效果，如適宜的濕度等天氣狀況下，有利于提高玫煙色棒束孢對(duì)刺吸式口器害蟲的防治效果[24]；田間試驗(yàn)過(guò)程中，通過(guò)水霧噴施（2 d）增加環(huán)境濕度以實(shí)現(xiàn)階段性的田間保濕，可以明顯提升球孢白僵菌和玫煙色蟲草菌株對(duì)棉蚜的田間控制作用[25]。但利用降雨、噴霧補(bǔ)濕等方法在田間生產(chǎn)中較難控制和實(shí)行，如何通過(guò)增加藥液量、灌溉（滴灌）等簡(jiǎn)便措施進(jìn)行濕度調(diào)控，提高昆蟲病原真菌防治棉花苗蚜效果需要進(jìn)一步研究。