陸珠，王月，任梓銘，紀淑娟，王歡，楊陽，于延申※

（1.吉林省蔬菜花卉科學研究院，吉林 長春 130033；2.長春中醫(yī)藥大學，吉林 長春 130117；3.中國熱帶農業(yè)科學院環(huán)境與植物保護研究所，海南 海口 571101）

猴頭菇（Hericium erinaceus）是一種著名的食藥用菌，隸屬于菌物界，擔子菌門，傘菌綱，多孔菌目，齒菌科，猴頭菌屬[1]。因其子實體圓整厚實，近球形，表面布滿菌刺，外形酷似猴子的頭部，而被稱之為猴頭菇。在我國自古就有“山珍猴頭、海味燕窩”的美譽[2]。猴頭菇富含多種生物活性物質，如凝集素、多糖、酚類化合物、多酚類化合物、菇類化合物、醇類化合物和揮發(fā)性有機化合物等，因而，常被用作保健食品和膳食補充劑。猴頭菇在自然界中分布很廣，主要分布在北溫帶的闊葉林或針葉、闊葉混交林中，西歐、北美、日本、俄羅斯等地分布廣泛。在中國，主要分布在林區(qū)，包括黑龍江、吉林、內蒙古、河北、浙江和福建等20 多個省級自治區(qū)[3]。猴頭菇進入人們的飲食生活由來已久，相傳早在三千年前的商代就已經有人采摘食用。但是，猴頭菇的栽培歷史不長，猴頭菇的人工馴化栽培在中國最早始于1959 年[4]。在1979 年，我國的猴頭菇產量就己經位居世界之首，產品暢銷全國，并遠銷美國、日本和新加坡等地[5]。猴頭菇具有安神舒緩心情、增強抵抗力、延緩衰老、抗抑郁、益智和防止神經衰退的功效[6-8]，還能夠用來預防和治療消化道和其他惡性腫瘤[9]；具有消食、健脾開胃、預防和治療胃潰瘍、慢性胃炎和其他與消化道有關疾病等功效[10,11]；能降低血液的粘稠度，具有降血糖、降血脂的功效，常被用來治療心血管類的疾病[12]。

對吉林省食用菌研究院保藏的猴頭菇（菌株號：JLSHYLHT13）的生物學特性[13-15]及栽培模式進行研究，探討此株野生猴頭菇特性是否適宜人工栽培。

1 材料與方法

1.1 菌種來源

試驗于2022 年1 月初至2022 年9 月末在吉林省蔬菜花卉科學研究院食用菌研究所完成。野生猴頭菇子實體在吉林省延邊朝鮮族自治州敦化市石鄉(xiāng)臨江西村樹林采集獲得，經組織分離獲得菌種，保藏在吉林省蔬菜花卉科學研究院食用菌研究所，編號JLSHYLHT13。

1.2 試驗方法

1.2.1 單因素試驗

1.2.1.1 碳源試驗 以PDA（馬鈴薯葡萄糖瓊脂）為基礎培養(yǎng)基，碳源分別為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖和可溶性淀粉，其他成分不變，配制1 L 培養(yǎng)基，高溫高壓滅菌后倒入無菌培養(yǎng)皿中，冷卻到常溫，在培養(yǎng)基中間位置接入直徑為6mm的菌塊，于23℃恒溫培養(yǎng)[16]。每隔24 h 觀察1 次并用平板劃線法測量和標記菌絲生長長度。連續(xù)測量直至某一平板長滿菌絲，同時觀察并記錄菌絲長勢，每個處理設3 個重復。

1.2.1.2 氮源試驗 PDA，氮源分別為酵母粉、蛋白胨、尿素、硫酸銨和麥麩汁，其他同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.1.3 溫度試驗 PDA，接種后分別置于15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃和35 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其他同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.1.4 微量元素篩選試驗 PDA，0.15% KH2PO4（補充微量元素K）、0.1% MgSO4（補充微量元素Mg）、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4（補充微量元素K和Mg）、0.1% CaCO3（補充微量元素Ca）、0.05%的維生素B1作為供試條件。其他同“1.2.1.1”節(jié)。

1.2.2 菌絲生長速率 木屑培養(yǎng)基：木屑76%，麥麩20%，石膏2%，葡萄糖1%，過磷酸鈣1%，含水量60%，pH 自然。

將培養(yǎng)好的平板母種接種至10 cm 培養(yǎng)皿平板中使用直徑6 mm 的打孔器，將直徑為6 mm 的菌種塊，接種至木屑平板培養(yǎng)基中心，接10 個重復，放入23 ℃[17]培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每天分2 次測量菌絲生長速度，觀察菌絲長勢、顏色及菌落形態(tài)特征等。當JLSHYLHT13菌絲長滿平板計算菌絲生長速率。

1.2.3 原種制作 原種培養(yǎng)基：78%小麥粒、10%木屑、8%麥麩、石膏2%、葡萄糖1%和過磷酸鈣1%，含水量60%。選用12 cm×24 cm 的聚乙烯塑料袋，菌種接種后放入23 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)[17]。每天在栽培袋上劃線，記錄菌絲定殖及長滿袋的時間，并計算菌絲生長速率。

1.2.4 栽培種制作 栽培種培養(yǎng)基：木屑78%，麥麩20%，石膏1%，過磷酸鈣1%，含水量62%。栽培菌袋選擇18 cm×30 cm 聚乙烯塑料袋，每袋裝料在1.0 kg左右。制作300 袋，經過高溫高壓滅菌，冷卻后接種，放入23 ℃培養(yǎng)室培養(yǎng)[17]。

1.2.5 出菇試驗 將長滿菌絲的菌包轉移至出菇溫室和草莓溫室進行出菇試驗，分別在棚內立體床架擺放式栽培、棚內立體旋轉架栽培和猴頭菇－草莓立體栽培模式下進行出菇，每種栽培模式下放置100 袋。3 種栽培模式下均在菌袋中部劃一字口，口長3 cm。培養(yǎng)溫度16～25 ℃，空氣相對濕度85%～90%，每日通風，保持空氣流通。記錄出菇的農藝性狀：猴頭菇頭潮菇的大小、顏色、抗雜能力及形態(tài)等指標；計算產量及生物轉化率；測量子實體鮮重，并計算平均值。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用GraphPad Prism5 和SPSS 軟件進行制圖和統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 單因素試驗結果

2.1.1 碳源對猴頭菇菌絲生長的影響 由圖1 和表1 可知，JLSHYLHT13 在5 種碳源上均能生長，在以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上，菌絲生長最快，菌絲濃密與其余4 種碳源相比差異極顯著。綜合猴頭菇菌絲長勢及菌絲生長速度可知，葡萄糖是該野生猴頭菇菌絲可利用的較好碳源。

圖1 不同碳源對菌絲生長速率的影響Fig.1 Effects of different carbon sources on the mycelial growth

表1 碳、氮、微量元素和溫度對菌絲生長的影響Table 1 Effect of carbon,nitrogen sources,microelement and temperature on the mycelial growth

表2 菌絲生長情況Table 2 Condition of mycelial growth

2.1.2 氮源對猴頭菇菌絲生長的影響 由圖2 和表1 可見，JLSHYLHT13 菌絲在供試的5 種氮源上均能生長，在以酵母浸粉為氮源的培養(yǎng)基上生長速度最快，菌絲濃密；在以硫酸銨和麥麩汁為氮源的培養(yǎng)基上的菌絲生長速度次之，但菌絲均濃密，與酵母粉相比無顯著性差異；在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長速度較快，菌絲較濃密，與酵母浸粉相比差異顯著；在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上的菌絲生長速度緩慢，菌絲稀疏與酵母浸粉相比差異極顯著。綜上，酵母浸粉是菌絲生長的最適氮源，硫酸銨和麥麩汁也是菌絲生長的較好氮源。

圖2 不同氮源對菌絲生長速率的影響Fig.2 Effects of different nitrogen sources on the mycelial growth

2.1.3 溫度對猴頭菇菌絲生長的影響 由圖3 和表1 可知，菌絲在15～35 ℃范圍內均能生長，在15～25 ℃間，菌絲生長塊，菌絲濃密，與生長速度最快菌絲最濃密的20 ℃相比無顯著性差異。30 ℃時，菌絲生長速度較快、長勢較弱，與20 ℃相比差異顯著。菌絲在35 ℃下的生長速度緩慢，菌絲稀疏與20 ℃相比差異極顯著。因此，得出菌絲在15～25 ℃溫度范圍內生長較快，最適溫度為20 ℃。

圖3 不同氮源對菌絲生長速率的影響Fig.3 Effects of different temperature on the mycelial growth

2.1.4 微量元素對猴頭菇菌絲生長的影響 由圖4 和表1 可知，菌絲在5 種供試微量元素的培養(yǎng)基上均能生長，且菌絲生長速度和菌絲長勢均無顯著性差異，可見5種供試微量元素均是菌絲可利用的較好微量元素。

圖4 不同微量元素對菌生長速率的影響Fig.4 Effects of different microelement on the mycelial growth

2.2 菌絲生長特征測定

JLSHYLHT13 在供試培養(yǎng)基上接種第3 天開始萌發(fā)，接種第10 天長滿平板，菌絲生長速度為0.3898cm/d，菌絲長勢快，菌絲顏色潔白并呈放射狀，無氣生菌絲。培養(yǎng)后期在平板培養(yǎng)基內可以形成原基。

2.3 原種培養(yǎng)記錄

JLSHYLHT13 菌絲發(fā)菌速度快，接種后第3 天菌絲開始吃料，20d后長滿袋，菌絲顏色潔白，菌絲濃密且粗壯，菌絲污染率為1.5%，菌絲平均生長速度為1.12cm/d。

2.4 栽培袋生長情況

由表3 可知，JLSHYLHT13 菌絲發(fā)菌速度快，接種后第3 天菌絲開始吃料，33 d 后長滿袋，菌絲顏色潔白，菌絲濃密，污染率為0.67%，菌絲平均生長速度為1.65 cm/d。

表3 菌絲在栽培袋中的生長情況Table 3 Growth of mycelialin cultivation bags

2.5 農藝性狀

由表4 可知，通過農藝性狀分析得出最優(yōu)栽培模式為棚內立體床架擺放式栽培，子實體縱長6～12 cm，子實體橫長8～13 cm，子實體緊實成白色，圓形或猴頭形，菌刺長，菌絲抗雜能力強，單朵鮮重達到210～275g，平均鮮重250 g。其次是立體旋轉架栽培，子實體縱長5～11 cm，子實體橫長8～12 cm，子實體緊實成白色，圓形、猴頭形或不規(guī)則形，菌刺長，菌絲抗雜能力強，單朵鮮重達到210～240g，平均鮮重235g。最后是猴頭菇 草莓立體栽培，子實體縱長5～10cm，子實體橫長7～11cm，子實體相對松散成白色，圓形、猴頭形或不規(guī)則形，有畸形菇出現(xiàn)，菌刺長，菌絲抗雜能力較強，單朵鮮重達到180～220 g，平均鮮重202 g。

表4 猴頭菇的主要農藝性狀Table 4 Main agronomic traits of

表4 猴頭菇的主要農藝性狀Table 4 Main agronomic traits of

3 討論與結論

JLSHYLHT13 菌絲的最適碳源為葡萄糖，最適氮源為酵母浸粉，最適生長溫度為20 ℃，最適微量元素為0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4（補充微量元素K和Mg）。而最優(yōu)栽培模式為棚內立體床架擺放式栽培，分析原因，棚內立體床架擺放式栽培養(yǎng)分供應充足，生長環(huán)境適宜猴頭菇生長，但空間利用率不足；立體旋轉架栽培空間利用率高，但由于栽培密度大，空氣流通不充分，猴頭菇長勢與產量均不如棚內立體床架擺放式栽培；猴頭菇－草莓立體栽培，棚內溫度過高，通風差，出菇環(huán)境不適宜，導致猴頭菇長勢與產量均不如棚內立體床架擺放式栽培和立體旋轉架栽培。猴頭菇性狀和大小受環(huán)境影響較大，只有在適宜環(huán)境下才能生長出優(yōu)質子實體。JLSHYLHT13 子實體縱長6～12 cm，子實體橫長8～13 cm，子實體緊實成白色，圓形或猴頭形，菌刺長，菌絲抗雜能力強，單朵鮮重210～275 g，平均鮮重250 g。JLSHYLHT13 可作為優(yōu)良猴頭菇菌株進行人工栽培。