劉金金，劉艷梅 ，鄧亞利 ，陳向東 ，羅文匯 ，孫冬梅

1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)材料與能源學(xué)院，廣東 廣州 510642；2.廣東一方制藥有限公司，廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗室，廣東 佛山 528244

枳實(shí)始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，2020年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定其為蕓香科植物酸橙Citrus aurantiumL.及其栽培變種或甜橙Citrus sinensisOsbeck的干燥幼果[1]。枳實(shí)藥材資源豐富，分布廣泛，目前在我國長江流域及南方各省柑橘栽培地區(qū)資源最為豐富，主產(chǎn)于江西、四川、湖南等地[2]。枳實(shí)味苦、辛、酸，性微寒，入胃、脾經(jīng)，具有破氣散痞、瀉痰消積功效，主治大便秘結(jié)、瀉痢后重、積滯內(nèi)停、痞滿脹痛、結(jié)胸等癥[3]?，F(xiàn)有針對枳實(shí)的質(zhì)量評價基本集中在不同藥用部位[4]、不同產(chǎn)地[5]、不同炮制方法[6]等定性定量研究，對不同基原的鑒定和質(zhì)量差異性研究鮮有報道。因此，本研究針對2種基原枳實(shí)建立多元質(zhì)量控制體系，結(jié)合聚類分析、主成分分析、偏最小二乘回歸分析法等化學(xué)模式識別技術(shù)及色度學(xué)原理[7]，對31批不同產(chǎn)地、不同基原的枳實(shí)藥材進(jìn)行質(zhì)量差異性研究，為枳實(shí)藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)完善及資源開發(fā)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

Waters H-Class型超高效液相色譜（UPLC）儀；Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（2.1 mm×150 mm，1.8 μm），安捷倫有限公司；KQ-500DE型超純水凈化系統(tǒng)，Millipore公司；TS7700型分光測色儀，深圳漢三恩時科技有限公司；ME204E萬分之一天平、XP26百萬分之一天平，梅特勒-托利多公司；Milli-Q Direct超純水系統(tǒng)，默克股份有限公司。

柚皮苷（批號110722-201714，純度≥93.5%）、新橙皮苷（批號111857-201804，純度≥99.4%）、橙皮苷（批號110721-201818，純度≥96.2%）、橘皮素（批號112054-202102，純度≥98.6%）對照品，中國食品藥品檢定研究院；蕓香柚皮苷（批號wkp19041908）、水合橙皮內(nèi)酯（批號wkp20031904）、川陳皮素（批號wkp20031701）、柚皮素（批號DST200109-100）、異橙皮內(nèi)酯（批號ST83710105）、異橙黃酮（批號ST20600105）、野漆樹苷（批號111919-201804）對照品，純度≥98.0%，四川省維克奇生物科技有限公司。酸橙對照藥材（批號120936-201606），中國食品藥品檢定研究院；甜橙對照藥材（批號430033-202003），廣州朗歐。乙腈、甲酸，德國Merck公司，色譜純；甲醇，西隴科學(xué)股份有限公司，分析純。

2種基原枳實(shí)藥材共31批，經(jīng)廣東一方制藥有限公司魏梅主任中藥師鑒定，分別為蕓香科植物酸橙Citrus aurantiumL.及其栽培變種或甜橙Citrus sinensisOsbeck的干燥幼果。樣品來源信息見表1。

表1 枳實(shí)樣品來源信息

2 方法與結(jié)果

2.1 指紋圖譜及多指標(biāo)含量測定方法建立

2.1.1 色譜條件

采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（2.1 mm×150 mm，1.8 μm）；以乙腈為流動相A，0.2%甲酸水為流動相B，梯度洗脫（0～3 min，10%～15%A；3～6 min，15%～16%A；6～12 min，16%～18%A；12～16 min，18%A；16～18 min，18%～21%A；18～25 min，21%～24%A；25～30 min，24%～40%A；30～45 min，40%～100%A）；流速0.3 mL/min；柱溫35 ℃；檢測波長330 nm；進(jìn)樣量1 μL。

2.1.2 對照品溶液制備

精密稱取柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、異橙皮內(nèi)酯、橘皮素、野漆樹苷、蕓香柚皮苷對照品適量，加甲醇制成含柚皮苷1073.940 μg/mL、新橙皮苷1071.930 μg/mL、橙皮苷400.451 μg/mL、川陳皮素50.078 μg/mL、柚皮素58.310 μg/mL、水合橙皮內(nèi)酯62.731 μg/mL、異橙黃酮81.340 μg/mL、異橙皮內(nèi)酯23.912 μg/mL、橘皮素44.067 μg/mL、野漆樹苷37.016 μg/mL、蕓香柚皮苷25.284 μg/mL的混合對照品溶液。

2.1.3 供試品溶液制備

取枳實(shí)粉末（過4號篩）約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，稱定質(zhì)量，取出，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用0.22 μm 微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.1.4 方法學(xué)考察

2.1.4.1 精密度試驗

取同一份供試品溶液（SC1），按“2.1.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定6次，以7號峰橙皮苷為參照峰，測得各成分色譜峰相對保留時間RSD為0.15%～1.90%，相對峰面積RSD為0.07%～2.14%，表明儀器精密度良好。

2.1.4.2 重復(fù)性試驗

取SC1樣品6份，按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進(jìn)樣，以7號峰橙皮苷為參照峰，測得24個共有峰的相對保留時間RSD為0.25%～1.00%，相對峰面積RSD為0.50%～1.70%，均小于3%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.4.3 穩(wěn)定性考察

取同一份供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件，分別于0、3、6、9、12、15、18、24 h進(jìn)樣，以7號峰橙皮苷為參照峰，各共有峰的相對保留時間RSD為0.18%～0.90%，相對峰面積RSD為0.39%～2.78%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.5 指紋圖譜建立

取21批酸橙樣品及10批甜橙樣品，分別按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進(jìn)行測定，記錄色譜圖，將所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》（2012版），分別以酸橙對照藥材（SC0）、甜橙對照藥材（TC0）為參照物，時間窗寬度設(shè)為0.2 min，采用中位數(shù)法，進(jìn)行多點(diǎn)校正與全譜峰匹配，分別生成酸橙和甜橙指紋圖譜（見圖1、圖2）。最終確定酸橙共有峰24個，指認(rèn)出其中11個；甜橙共有峰11個，指認(rèn)出其中6個。見圖3。以2種基原枳實(shí)對照藥材作為參照圖譜進(jìn)行相應(yīng)相似度計算，結(jié)果見表2。21批酸橙與對照藥材的相似度為0.935～0.999，10批甜橙與對照藥材相似度為0.937～0.998，均大于0.90，表明同一基原的枳實(shí)質(zhì)量相對穩(wěn)定，同一產(chǎn)地樣品間的化學(xué)成分差異較小。

圖1 21批酸橙樣品指紋圖譜疊加圖

圖2 10批甜橙樣品指紋圖譜疊加圖

圖3 酸橙和甜橙對照藥材及有效成UPLC圖

表2 31批枳實(shí)樣品指紋圖譜相似度評價

由酸橙和甜橙對照藥材色譜圖可知，不同基原枳實(shí)樣品的指紋圖譜共有峰信息和相似度存在顯著差異，表明枳實(shí)同屬藥材之間的化學(xué)成分存在差異；酸橙整體色譜峰信息相對較多，響應(yīng)值偏高，與甜橙對照圖譜比較分析，峰1、峰2、峰3、野漆樹苷、新橙皮苷、峰9、峰10、水合橙皮內(nèi)酯、柚皮素、異橙黃酮、峰21、峰22、峰23及峰24為酸橙特有成分，表明建立的指紋圖譜可實(shí)現(xiàn)2種法定基原枳實(shí)的有效區(qū)分。

2.1.6 聚類分析

將21批酸橙和10批甜橙的共有峰峰面積導(dǎo)入SPSS20.0軟件，以組間聯(lián)接聚類法結(jié)合歐式平方距離（d）進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，結(jié)果見圖4。當(dāng)d=25時，31批枳實(shí)可聚為2類，一類為甜橙樣品（TC1～TC10），另一類為酸橙樣品（SC1～SC21），表明不同基原枳實(shí)可通過聚類分析進(jìn)行有效區(qū)分；當(dāng)d=5時，同一基原的枳實(shí)未能通過產(chǎn)地進(jìn)行區(qū)分，表明同種枳實(shí)不同產(chǎn)地之間化學(xué)成分無明顯差異。

圖4 31批枳實(shí)樣品聚類分析樹狀圖

2.1.7 主成分分析

應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件，以31批枳實(shí)指紋圖譜的共有峰為變量、以特征值＞1為篩選條件進(jìn)行主成分分析（PCA），結(jié)果見表3。共得到3個主成分因子，其特征值分別為15.455、3.242、2.203，累計方差貢獻(xiàn)率達(dá)87.080%，表明模型能較好地進(jìn)行預(yù)測，提取的3個主成分因子可以代表指紋圖譜中24個共有峰的信息，代表枳實(shí)不同基原的整體質(zhì)量特征（見圖5）。PCA可將2種基原枳實(shí)明顯區(qū)分為2類，樣本點(diǎn)之間無交叉點(diǎn)，且甜橙樣品較為集中，表明同一產(chǎn)地的甜橙質(zhì)量較為一致，酸橙組內(nèi)離散程度較大，其中SC12、SC13、SC14與其他樣品差異較大，表明酸橙樣品存在產(chǎn)地質(zhì)量差異。

圖5 31批枳實(shí)樣品PCA得分圖

表3 枳實(shí)樣品PCA特征值及方差貢獻(xiàn)率

2.1.8 偏最小二乘判別分析

為更好識別不同基原枳實(shí)的差異性，在PCA基礎(chǔ)上，利用SIMCA14.1軟件進(jìn)行偏最小二乘判別分析（PLS-DA），PLS-DA得分圖見圖6。31批枳實(shí)可按基原分為2類，與PCA、聚類分析結(jié)果一致；且模型數(shù)據(jù)矩陣的解釋率參數(shù)R2X=0.738，區(qū)分參數(shù)R2Y=0.974，預(yù)測參數(shù)Q2=0.967，表明該模型具有良好的預(yù)測能力，穩(wěn)定且可靠。在此基礎(chǔ)上，為進(jìn)一步研究影響2種基原枳實(shí)的差異性物質(zhì)，利用變量重要性投影（VIP）進(jìn)行分析，結(jié)果見圖7。VIP值越大，表明該變量對模型的影響越大。以VIP＞1為標(biāo)準(zhǔn)，共篩選出11個對辨別酸橙和甜橙有較大影響的共有峰（VIP）：峰3（1.192 25）、野漆樹苷（1.18078）、峰13（1.17157）、川陳皮素（1.16916）、水合橙皮內(nèi)酯（1.15732）、新橙皮苷（1.12345）、峰23（1.12089）、峰12（1.07205）、峰24（1.05281）、峰20（1.05546）、柚皮苷（1.00520），可作為酸橙和甜橙基原鑒別的潛在質(zhì)量標(biāo)志物，用于評價枳實(shí)的質(zhì)量差異。

圖6 31批枳實(shí)樣品PLS-DA得分圖

圖7 31批枳實(shí)樣品指紋圖譜共有峰VIP圖

2.1.9 含量測定

2.1.9.1 線性關(guān)系考察

精密吸取“2.1.2”項下混合對照品溶液，分別稀釋成不同濃度的混合對照品溶液。按“2.1.1”項下色譜條件進(jìn)行檢測，以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，結(jié)果見表4。相關(guān)系數(shù)（r）＞0.9990，表明各成分在相應(yīng)定量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表4 11種成分線性關(guān)系考察結(jié)果

2.1.9.2 精密度考察

取“2.1.2”項下混合對照品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果顯示柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、異橙皮內(nèi)酯、橘皮素、野漆樹苷、蕓香柚皮苷11個成分峰面積RSD分別為0.27%、0.40%、0.37%、1.83%、0.13%、0.95%、0.43%、1.87%、0.30%、0.53%、0.78%，表明儀器精密度良好。

2.1.9.3 重復(fù)性試驗

精密稱取6份枳實(shí)藥材粉末（SC1），按“2.1.3”項下方法平行制備6份供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件檢測，結(jié)果柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、異橙皮內(nèi)酯、橘皮素、野漆樹苷、蕓香柚皮苷11個成分峰面積RSD分別為0.90%、0.39%、0.25%、0.48%、0.45%、0.96%、0.77%、1.67%、0.48%、0.91%、0.87%，表明該方法重復(fù)性較好。

2.1.9.4 穩(wěn)定性試驗

取“2.1.3”項下1份供試品溶液，分別于制備后0、3、6、9、12、15、18、24 h，按“2.1.1”項下色譜條件進(jìn)行檢測，結(jié)果柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、異橙皮內(nèi)酯、橘皮素、野漆樹苷、蕓香柚皮苷11個成分峰面積RSD分別為0.65%、0.57%、0.63%、0.66%、0.73%、0.75%、0.89%、0.89%、0.90%、1.23%、0.86%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

2.1.9.5 加樣回收率試驗

精密稱取已知成分含量的枳實(shí)藥材粉末（SC1）9份，每份0.25 g，按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，再分別加入與所取供試品中待測成分量比例為1.5∶1、1∶1、0.5∶1的對照品，按“2.1.1”項下色譜條件進(jìn)行檢測，并計算回收率。柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、異橙皮內(nèi)酯、橘皮素、野漆樹苷、蕓香柚皮苷的回收率分別為98%、97%、95%、101%、102%、99%、98%、90%、98%、101%、95%，表明該方法準(zhǔn)確性良好。

2.1.9.6 樣品測定

按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件檢測，31批枳實(shí)藥材中11個指標(biāo)成分的含量測定結(jié)果見表5。柚皮苷、橙皮苷、川陳皮素、異橙皮內(nèi)酯、橘皮素、蕓香柚皮苷為酸橙和甜橙共有成分，其中21批酸橙上述6種成分平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.039%、1.108%、0.153%、0.051%、0.128%、0.844%，10批甜橙平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.009%、7.577%、0.121%、0.078%、0.055%、1.134%；酸橙中的特有成分新橙皮苷、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、野漆樹苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11.454%、0.156%、0.226%、0.129%、0.081%。通過含量測定結(jié)果箱線圖（見圖8），能直觀區(qū)分酸橙和甜橙中代表性成分，酸橙中柚皮苷、新橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、橘皮素、野漆樹苷含量整體高于甜橙，甜橙中橙皮苷、異橙皮內(nèi)酯、蕓香柚皮苷含量顯著高于酸橙。不同產(chǎn)地酸橙枳實(shí)黃酮類成分離散程度較大，甜橙指標(biāo)成分含量相對集中，無產(chǎn)地差異性。酸橙和甜橙黃酮類成分差異顯著，推測可能與枳實(shí)瓤囊面積占比有關(guān)，酸橙的瓤囊面積占比較小，即中果皮相對較厚。石敬依等[8]對比研究不同產(chǎn)地枳實(shí)肉和瓤指紋圖譜和6個黃酮類成分差異性，枳實(shí)肉標(biāo)定17個共有峰，枳實(shí)瓤中標(biāo)定10個共有峰，推測枳實(shí)中黃酮類成分主要存在于中果皮中。即酸橙枳實(shí)的總黃酮含量高與其果皮比甜橙較厚有一定相關(guān)性。

圖8 酸橙與甜橙樣品中11種成分含量測定箱線圖

表5 31批枳實(shí)樣品中11個成分含量測定結(jié)果（%）

2.2 不同基原枳實(shí)與色度值相關(guān)性分析

中藥色度分析借助色度儀將藥材的顏色轉(zhuǎn)換成具體數(shù)值進(jìn)行藥材顏色和質(zhì)量之間相關(guān)性的研究，通過藥材的色度值評價藥材質(zhì)量[9]。2020年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定枳實(shí)性狀為黃白色或黃褐色，顏色跨度較大。觀察多批次枳實(shí)粉末發(fā)現(xiàn)，酸橙與甜橙顏色差異明顯[10]。其顏色變化可能與主要黃酮類成分具有一定相關(guān)性。為進(jìn)一步驗證上述觀點(diǎn)，本研究基于色度學(xué)原理將枳實(shí)藥材的外在顏色進(jìn)行色度值量化，結(jié)合含量測定和統(tǒng)計學(xué)分析工具評價其質(zhì)量差異性。

2.2.1 色度測量方法建立

2.2.1.1 供試品制備

取31批枳實(shí)藥材，粉碎，過4號篩，即得。

2.2.1.2 分光測色儀參數(shù)

采用國際照明委員會（CIE）認(rèn)可光源，以反射光為測色模式，采用L*、a*、b*色空間，其中L*值代表明度，可用于藥材色澤判斷；a*值代表紅（+）綠（-）方向；b*值代表黃（+）藍(lán)（-）方向，觀察光源為D65（即色溫度6504K的自然日光），視野角度為10°，以4 mm為視角測定口徑。

2.2.1.3 方法學(xué)考察

按上述分光測色儀參數(shù)條件，取枳實(shí)藥材供試品（編號SC1）進(jìn)行連續(xù)6次的色度測定，記錄L*、a*、b*值，并計算相應(yīng)的總色度值（E*ab），RSD分別為0.96%、0.88%、1.02%、1.13%，均小于3%，表明儀器精密度較好。

2.2.1.4 供試品色度測定

將分光測色儀進(jìn)行黑白校正后，分別對31批枳實(shí)供試品進(jìn)行色度測定，每批各測定3次，記錄L*、a*、b*值，計算E*ab，E*ab=（a*2+b*2+L*2）1/2，取平均值，結(jié)果見表6。酸橙E*ab為51.48～68.63，甜橙E*ab為73.33～77.85，酸橙總色度值低于甜橙。

表6 31批枳實(shí)藥材色度測定結(jié)果

2.2.2 樣品色度值與有效成分含量相關(guān)性

將31批枳實(shí)藥材色度值測定及11個成分含量測定結(jié)果導(dǎo)入SPSS20.0統(tǒng)計軟件，進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果見表7。E*ab與橙皮苷和異橙皮內(nèi)酯含量呈顯著正相關(guān)，與柚皮苷、新橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、橘皮素和野漆樹苷含量均呈顯著負(fù)相關(guān)；L*與橙皮苷的含量呈正相關(guān)，與柚皮苷、新橙皮苷、川陳皮素、柚皮素、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、橘皮素、野漆樹苷含量呈負(fù)相關(guān)；a*與柚皮苷、新橙皮苷、異橙黃酮、野漆樹苷含量呈顯著正相關(guān)，隨橙皮苷、異橙皮內(nèi)酯含量的升高而降低；b*與柚皮苷、新橙皮苷、水合橙皮內(nèi)酯、異橙黃酮、橘皮素及野漆樹苷的含量呈正相關(guān)，隨橙皮苷含量增加而降低。綜合考慮，認(rèn)為柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、異橙黃酮和野漆樹苷的含量可能是導(dǎo)致酸橙和甜橙藥材外在顏色差異性的主要成分。

表7 枳實(shí)藥材色度值與有效成分含量相關(guān)性（r）

3 討論

本試驗共收集31批來自道地產(chǎn)區(qū)江西宜春、江西九江、江西吉安及湖南益陽的2種基原枳實(shí)，由于廣東產(chǎn)區(qū)枳實(shí)年產(chǎn)量較少，批次較少，質(zhì)量不及道地產(chǎn)區(qū)江西、湖南兩地，故未納入[11]。采用UPLC對21批酸橙和10批甜橙建立了指紋圖譜，其中酸橙確認(rèn)了24個共有峰，指認(rèn)其中11個成分，甜橙確認(rèn)了11個共有峰，指認(rèn)其中6個成分。21批酸橙樣品的指紋圖譜相似度均在0.935以上，10批甜橙樣品的指紋圖譜相似度均大于0.937，表明21批酸橙和10批甜橙的整體質(zhì)量相對穩(wěn)定。同時運(yùn)用化學(xué)模式識別方法聚類分析、PCA及PLS-DA對31批枳實(shí)的指紋圖譜進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，3種分析方法均可將不同基原枳實(shí)明顯區(qū)分為2類，其中野漆樹苷、川陳皮素、水合橙皮內(nèi)酯、橙皮苷、新橙皮苷、異橙黃酮、柚皮苷及峰3、峰12、峰13、峰9、峰20、峰23、峰24所代表的成分可能是影響不同基原枳實(shí)質(zhì)量差異性的標(biāo)志性成分；結(jié)合聚類分析、PCA及PLS-DA結(jié)果，篩選出11個已指認(rèn)的指標(biāo)成分進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示，酸橙中含量最高的成分為柚皮苷和新橙皮苷，柚皮苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.080%～8.401%，新橙皮苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.901%～15.109%，甜橙中的成分則以蕓香柚皮苷、橙皮苷為主，蕓香柚皮苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.888%～1.629%，橙皮苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.242%～10.237%，表明本研究篩選出的中藥特征性標(biāo)志物方法比較全面、科學(xué)。2020年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定枳實(shí)的定量指標(biāo)為辛弗林，本實(shí)驗室對收集的31批枳實(shí)辛弗林含量進(jìn)行測定，酸橙和甜橙中辛弗林含量無顯著區(qū)別，且不是含量最高的成分，指標(biāo)成分單一，從全面質(zhì)量控制角度考慮，建議將柚皮苷、新橙皮苷引入酸橙質(zhì)量控制指標(biāo)，蕓香柚皮苷和橙皮苷納入甜橙質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

為進(jìn)一步區(qū)分枳實(shí)的不同基原，探究枳實(shí)的質(zhì)量指標(biāo)與其色度值之間的相關(guān)性，本研究對31批枳實(shí)藥材粉末進(jìn)行色度值測定與分析。結(jié)果表明，酸橙E*ab為51.48～68.63，甜橙E*ab為73.33～77.85，酸橙E*ab明顯低于甜橙。由此表明，不同基原的枳實(shí)存在色度值差異，可能是由酸橙與甜橙藥材中柚皮苷、新橙皮苷及橙皮苷等主要黃酮類成分含量差異導(dǎo)致的。

綜上，本研究從定性和定量兩方面分別對2種基原枳實(shí)進(jìn)行研究，所建立的指紋圖譜和含量測定方法簡單快速、方便穩(wěn)定、重復(fù)性好，與化學(xué)模式識別分析相結(jié)合，可用于酸橙和甜橙藥材不同基原和不同產(chǎn)地間的質(zhì)量評價，橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、異橙黃酮、野漆樹苷等11個成分可能是造成二者質(zhì)量差異的主要成分。將色度分析與統(tǒng)計學(xué)分析相結(jié)合，可作為快速鑒別酸橙和甜橙的新方法，為枳實(shí)不同基原間的鑒別和質(zhì)量評價提供參考。