何本進(jìn) 莫舒涵 黎 華 陳譽(yù)文 楊云飛 何麗艷 秦嬌琴 呂 淵 胡才友 楊 澤

隨著全球人口老齡化日益加劇,癡呆已成為老年人常見(jiàn)疾病,其中阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)占60%～80%[1],是導(dǎo)致老年人失能和死亡的主要原因。阿爾茨海默病是一種起病隱匿的慢性神經(jīng)系統(tǒng)退行性變性疾病,臨床上以進(jìn)行性記憶缺失、智能減退等認(rèn)知功能障礙、精神行為問(wèn)題和社會(huì)及生活功能喪失為主要特征,其發(fā)病與年齡、性別、家族史、攜帶載脂蛋白E(APOE)ε4等位基因、氧化應(yīng)激、血管相關(guān)危險(xiǎn)因素、生活行為方式及社會(huì)心理因素等有關(guān)[1,2],是一種復(fù)雜的多因素疾病。正常情況下,人體主要通過(guò)飲食中攝入富含蛋氨酸、維生素B6、B12及葉酸的食物等控制Hcy水平,但在年齡相關(guān)的病理情況下,如神經(jīng)退行性疾病,血漿及腦脊液中的Hcy水平會(huì)異常升高,較高水平的Hcy可通過(guò)氧化應(yīng)激等機(jī)制增加老年人罹患阿爾茨海默病的風(fēng)險(xiǎn)[3]。血脂異常主要是低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平增高,后者被認(rèn)為具有血管和神經(jīng)毒性作用,并與阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)[4]。尿酸(Uric acid,UA)作為人體內(nèi)強(qiáng)大的抗氧化劑,雖然可引起痛風(fēng),且后者與心血管代謝性共病及其后遺癥相關(guān),但UA的抗氧化能力可能具有神經(jīng)保護(hù)作用[5,6]。盡管如此,適當(dāng)高水平的UA是否能成為阿爾茨海默病的一個(gè)保護(hù)因素,目前結(jié)論仍存在爭(zhēng)議。本研究旨在分析廣西地區(qū)60歲以上老年阿爾茨海默病患者、非長(zhǎng)壽與長(zhǎng)壽健康體檢老人體內(nèi)Hcy、血脂四項(xiàng)和腎功三項(xiàng)水平的變化趨勢(shì),探討上述指標(biāo)與阿爾茨海默病的相關(guān)性。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年12月至2022年10月廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院門(mén)診及神經(jīng)內(nèi)科住院65歲以上阿爾茨海默病患者60例作為AD組,其中男性36例,女性24例,年齡(77.77±8.57)歲。AD組納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合美國(guó)國(guó)立神經(jīng)病語(yǔ)言障礙卒中研究所-阿爾茨海默病及相關(guān)疾病協(xié)會(huì)(NINCDS-ADRDA)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn):①由臨床認(rèn)知量表測(cè)試與神經(jīng)心理檢查確定是癡呆,②記憶及其他認(rèn)知功能進(jìn)行性減退,無(wú)意識(shí)障礙,③有兩項(xiàng)及以上認(rèn)知功能缺損,④不存在導(dǎo)致認(rèn)知功能和記憶進(jìn)行性缺損的軀體或腦部疾患;(2)無(wú)痛風(fēng)、肝腎疾病、心腦血管疾病、腫瘤等病史。選擇健康管理中心65～89歲非長(zhǎng)壽健康體檢老人60例作為非長(zhǎng)壽組,其中男性36例,女性24例,年齡(76.13±7.15)歲。非長(zhǎng)壽組納入標(biāo)準(zhǔn):①無(wú)記憶障礙、認(rèn)知障礙及精神病家族史;②無(wú)痛風(fēng)、肝腎疾病、心腦血管疾病、腫瘤等病史。選擇經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)的調(diào)查員于2016年5月入戶調(diào)查廣西桂林市永?？h90歲及以上的長(zhǎng)壽健康體檢老人60例作為長(zhǎng)壽組,其中男性22例,女性38例,年齡(97.12±4.03)歲。長(zhǎng)壽組納入標(biāo)準(zhǔn):①在本地居住1年以上;②無(wú)記憶障礙、認(rèn)知障礙及精神病家族史;③無(wú)痛風(fēng)、肝腎疾病、心腦血管疾病、腫瘤等病史。

上述3組老年人均未接受他汀類藥物或其他降膽固醇藥物治療。AD組與非長(zhǎng)壽組的性別和年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);AD組與長(zhǎng)壽組的性別差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。所有入選對(duì)象知曉本研究,并簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2 血清指標(biāo)檢測(cè)

抽取研究對(duì)象清晨空腹外周靜脈血4ml置于無(wú)抗凝劑試管,靜置10～15分鐘后離心10分鐘(3500轉(zhuǎn)/分鐘),取上清液測(cè)定Hcy、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、LDL-C、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和UA含量。

1.3 儀器與試劑

檢測(cè)儀器為BECKMAN COULTER AU5800全自動(dòng)生化分析儀。TC試劑盒(酶試劑法,批號(hào):60143036)、TG試劑盒(酶試劑法,批號(hào):60147495)和HDL-C試劑盒(免疫抑制直接法,批號(hào):60153373)均由德賽診斷系統(tǒng)(上海)有限公司生產(chǎn);LDL-C試劑盒(直接法-表面活性劑清除法,批號(hào):22041204)、BUN試劑盒(尿素酶-谷氨酸脫氫酶法,批號(hào):22062503)、Cr試劑盒(肌氨酸氧化酶法,批號(hào):22080304)和UA試劑盒(尿酸酶法,批號(hào):22101005)均由北京利德曼生化股份有限公司生產(chǎn);Hcy試劑盒(酶循環(huán)法,批號(hào):22-0815)由北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0軟件和GraphPad Prism 8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。血清學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)的正態(tài)性檢驗(yàn)使用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn),不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)(P25,P75)表示,組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn),組間多重比較使用Bonferroni法。采用二元Logistic回歸分析TC、TG、HDL-C、LDL-C、BUN、Cr、UA、Hcy與AD的關(guān)系。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 3組血清學(xué)指標(biāo)水平比較

除UA、TC和HDL-C外,3組其余血清學(xué)指標(biāo)水平差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1 3組血清學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)水平比較

2.2 3組間血清學(xué)指標(biāo)水平比較

將3組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的血清學(xué)指標(biāo)進(jìn)行組間兩兩比較,結(jié)果顯示,與非長(zhǎng)壽組比較,AD組Cr、LDL-C、Hcy水平更高,長(zhǎng)壽組BUN、TG、LDL-C、Hcy水平更高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.001);與長(zhǎng)壽組相比,AD組Cr水平更高,BUN、TG水平更低,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖1。

圖1 3組間血清學(xué)指標(biāo)水平兩兩比較結(jié)果

2.3 血清學(xué)指標(biāo)水平與AD的相關(guān)分析

以是否為發(fā)生AD為因變量(否=0,是=1),以性別、年齡、TC、TG、HDL-C、LDL-C、BUN、Cr、UA、Hcy為自變量,所有變量賦值見(jiàn)表2。二元Logistic回歸模型(單獨(dú)納入非長(zhǎng)壽組為模型1;非長(zhǎng)壽組合并長(zhǎng)壽組為模型2)結(jié)果顯示,經(jīng)校正性別和年齡后,模型1中TG水平增高(OR=12.367,95%CI 2.206～69.330,P=0.004)、LDL-C水平增高(OR=27.305,95%CI 4.264～174.850,P<0.001)、Hcy水平增高(OR=5.167,95%CI 1.882～14.185,P=0.001),均顯著增加了阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);模型2中Cr水平增高(OR=3.355,95%CI 1.175～9.580,P=0.024)、LDL-C水平增高(OR=5.765,95%CI 1.449～22.943,P=0.013)、Hcy水平增高(OR=4.810,95%CI 1.933～11.969,P=0.001),均顯著增加了阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。見(jiàn)表3。

表2 變量賦值表

表3 血清學(xué)指標(biāo)水平與阿爾茨海默病的二元Logistic回歸分析

3.討論

根據(jù)慢性腎臟疾病流行病學(xué)協(xié)作(CKD-EPI)方程,血清Cr水平可用于計(jì)算估算的腎小球?yàn)V過(guò)率(eGFR),后者是慢性腎臟病(CKD)診斷和分期的重要指標(biāo)之一[7],本研究中AD組血清Cr水平顯著高于非長(zhǎng)壽組和長(zhǎng)壽組,而非長(zhǎng)壽組和長(zhǎng)壽組之間的Cr水平無(wú)顯著差異。二元Logistic回歸分析顯示,在校正性別和年齡后,模型2血清Cr水平升高顯著增加阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),提示eGFR降低可能與阿爾茨海默病相關(guān),這與最近研究的結(jié)論相似[8]。研究發(fā)現(xiàn),尿毒癥毒素可能具有直接的神經(jīng)毒性作用,eGFR、尿白蛋白肌酐比值(UACR)(慢性腎臟病的標(biāo)志物)與海馬萎縮、血漿Aβ水平升高有關(guān)[9,10]。然而有研究指出,老年人群eGFR[<60ml/(min·1.73m2)]與認(rèn)知功能下降之間無(wú)顯著關(guān)聯(lián)[11]。因此,eGFR降低或患慢性腎臟病的老年人群與阿爾茨海默病的確切關(guān)系仍不清楚。此外,本研究結(jié)果顯示,在3組老年人群中,阿爾茨海默病組血清UA水平最低,但3組間比較無(wú)顯著差異,二元Logistic回歸分析也提示模型1和模型2的UA水平升高均減低阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多項(xiàng)研究表明,阿爾茨海默病患者血清UA水平降低或呈下降趨勢(shì),UA水平升高可能對(duì)阿爾茨海默病有保護(hù)作用,因?yàn)槠渚哂袕?qiáng)大的抗氧化特性,可降低發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),延緩病程[5,6,12]。然而,Wang等[13]發(fā)現(xiàn),由遺傳決定的UA水平與阿爾茨海默病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān),甚至出現(xiàn)相反結(jié)論,即認(rèn)為遺傳預(yù)測(cè)的高水平UA可能增加阿爾茨海默病的風(fēng)險(xiǎn)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),長(zhǎng)壽組的TG水平顯著高于AD組和非長(zhǎng)壽組,AD組的TG水平稍高于非長(zhǎng)壽組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;AD組和長(zhǎng)壽組的LDL-C水平均顯著高于非長(zhǎng)壽組,長(zhǎng)壽組LDL-C水平高于AD組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示TG和LDL-C水平升高均與阿爾茨海默病有一定的相關(guān)性,但由于收集各組的例數(shù)偏少、部分老人使用降脂藥等原因,可能導(dǎo)致長(zhǎng)壽組TG和LDL-C水平均高于AD組的假性偏差。二元Logistic回歸分析顯示,校正性別和年齡后,模型1的TG水平升高明顯增加阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);模型1和模型2的LDL-C水平升高均顯著增加阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于血清TG水平與阿爾茨海默病的相關(guān)性,目前研究結(jié)果并不一致。有研究指出,與健康對(duì)照組相比,AD組血清TG水平更高[14],TC、TG、LDL-C水平升高及HDL-C水平降低與Aβ增加相關(guān),被認(rèn)為可作為生物標(biāo)志物用于阿爾茨海默病的早期診斷[15]。也有研究發(fā)現(xiàn)TG水平對(duì)阿爾茨海默病的影響不顯著[16],健康對(duì)照組與AD組之間的TG水平無(wú)顯著差異,認(rèn)為其可能不是認(rèn)知障礙的潛在因素[17]。眾所周知,LDL-C在血管中合成,在肝臟中降解,是一種將膽固醇攜帶到外周組織細(xì)胞的脂蛋白顆粒,可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病。膽固醇治療試驗(yàn)證明,使用他汀類藥物每降低LDL-C 1mmol/L,重大血管事件的風(fēng)險(xiǎn)降低21%[18]。前瞻性流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn),中年人群的高脂血癥是遲發(fā)性阿爾茨海默病的危險(xiǎn)因素,在尸檢和體內(nèi)成像研究中觀察到LDL-C水平升高與大腦中Aβ負(fù)荷增加有相關(guān)性[19],認(rèn)為高水平的LDL-C具有血管和神經(jīng)毒性作用,與阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。臨床試驗(yàn)也表明,使用他汀類藥物可能使阿爾茨海默病患者受益,特別是那些ApoE4純合子患者的治療效果可能更好[20]。盡管如此,有研究指出阿爾茨海默病患者與健康對(duì)照組之間的LDL-C水平并無(wú)顯著性差異[21],隨機(jī)臨床試驗(yàn)結(jié)果也顯示,與接受安慰劑的患者相比,接受他汀類藥物以降低LDL-C水平的患者在認(rèn)知能力下降方面并無(wú)差異,提示降低LDL-C水平與認(rèn)知能力無(wú)關(guān)[22,23]。因此,LDL-C水平增高與阿爾茨海默病是否存在確切關(guān)聯(lián),目前仍存在不同觀點(diǎn)。

Hcy是一種非編碼氨基酸,在轉(zhuǎn)硫途徑中,由于胱硫醚-β-合成酶缺乏或活性降低可引起Hcy過(guò)量蓄積,從而導(dǎo)致高Hcy血癥。本研究結(jié)果顯示,長(zhǎng)壽組和AD組的Hcy水平均較非長(zhǎng)壽組顯著增高,而長(zhǎng)壽組與AD組之間Hcy水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。二元Logistic回歸分析顯示,校正性別及年齡后,模型1和模型2的Hcy水平升高均顯著增加阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),這與Zuin M等[3]研究的結(jié)論相一致。最近研究[24]發(fā)現(xiàn)高劑量的Hcy具有神經(jīng)毒性作用,降低突觸蛋白的水平,增加氧化應(yīng)激并引起興奮性傳遞亢進(jìn),還觀察到高濃度的Hcy會(huì)加速Aβ聚集。盡管血漿Hcy水平升高常被認(rèn)為是認(rèn)知功能下降和癡呆發(fā)展的一個(gè)強(qiáng)大而獨(dú)立的危險(xiǎn)因素,但迄今為止具體機(jī)制尚無(wú)定論。

綜上所述,血清Cr、TG、LDL-C和Hcy水平升高均可顯著增加阿爾茨海默病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),提示控制好體內(nèi)上述生物標(biāo)志物的水平,對(duì)于老年人群預(yù)防阿爾茨海默病的發(fā)生具有重要意義。