李守漢，高文峰，崔治家

（1.蘭州大學(xué)體育教研部，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000）

糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）是一種具有長(zhǎng)期性的代謝紊亂疾病，并伴有多種并發(fā)癥[1]，其特點(diǎn)是血糖高，是由胰島素（insulin，INS）分泌缺陷、INS功能下降或兩者同時(shí)引起的。INS分泌不足和血液中高濃度葡萄糖的產(chǎn)生還可能造成一些器官衰竭，甚至功能喪失[2]。DM可通過(guò)代謝應(yīng)激、組織損傷和細(xì)胞死亡的自催化循環(huán)而導(dǎo)致自由基產(chǎn)生的抑制作用及清除機(jī)制受損，從而進(jìn)一步加劇氧化應(yīng)激[3]。糖尿病治療的主要目標(biāo)是使血糖、血脂和脂蛋白水平接近正常水平，并清除自由基，使各組織功能得到恢復(fù)。糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病患者最重要的并發(fā)癥之一。糖尿病的微血管并發(fā)癥與高血糖有關(guān)，其原因是高血糖通過(guò)代謝紊亂導(dǎo)致DN的發(fā)生與發(fā)展[4]。DN由多因素導(dǎo)致，而以高血糖、晚期糖基化終產(chǎn)物和氧化應(yīng)激為主要因素，造成的免疫細(xì)胞浸潤(rùn)和腎臟慢性炎癥是公認(rèn)的病理機(jī)制[5]。

從植物中提取的多糖由于其低毒性和多種藥理活性而受到研究人員的廣泛關(guān)注[6]。多糖由單糖單元組成并通過(guò)糖苷鍵連接，其具有的抗糖尿病特性已成為一個(gè)重要的研究領(lǐng)域[7]。已有研究表明，百合多糖既可提高糖代謝酶的活性，促進(jìn)葡萄糖的攝取和利用；又可增加INS分泌，調(diào)節(jié)1型糖尿病大鼠的血糖[8]。蘭州百合（Lilium davidiivar.unicolor）為多年生鱗莖類草本植物，是百合科百合屬川百合的一個(gè)變種，僅適宜在蘭州周邊二陰山區(qū)種植；研究發(fā)現(xiàn)，蘭州百合多糖（Lanzhou lily polysaccharide，LLP）含有乙酰基葡萄糖與甘露糖結(jié)合的結(jié)構(gòu)[9]，具有治療支氣管擴(kuò)張、抗腫瘤、抗疲勞、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、抗氧化、抑菌等作用[10]。目前，運(yùn)動(dòng)療法是一種安全、簡(jiǎn)單、有效的治療糖尿病的方法，其有效性已在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中得到證實(shí)[11]。然而對(duì)LLP與有氧運(yùn)動(dòng)（aerobic exercise，AE）降血糖及對(duì)糖尿病并發(fā)癥作用的研究報(bào)道較少。本研究旨在研究LLP與AE結(jié)合對(duì)糖尿病鏈脲佐菌素所致糖尿病大鼠空腹血糖、脂質(zhì)過(guò)氧化及腎臟保護(hù)作用的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

清潔級(jí)健康成年雄性W i s t a r 大鼠，體質(zhì)量200～220 g，來(lái)自甘肅中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，合格證號(hào)：N062000800000023，生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK（甘）2020-0009。

蘭州百合購(gòu)自蘭州市黃河藥材市場(chǎng)。

LLP的制備方法：蘭州百合廢棄鱗莖→粉碎（過(guò)100 目篩）→干燥→稱質(zhì)量→超聲波協(xié)同復(fù)合酶提取→酶滅活→抽濾、取上清液→4 000 r/min離心15 min，取上清液→減壓濃縮→真空干燥至恒質(zhì)量→蘭州百合多糖[12]。實(shí)驗(yàn)前以蒸餾水為溶劑配制成一定濃度樣品，4 ℃低溫保存，備用。

鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ） 美國(guó)Sigma公司；檸檬酸 北京華越洋生物科技有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、INS試劑盒 南京建成生物工程研究所；蘇木精-伊紅（hematoxylin and eosin，HE）試劑盒、Western blot二抗 北京索萊寶科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Accu-Chek血糖測(cè)定儀 瑞士羅氏集團(tuán)；血糖儀美國(guó)強(qiáng)生公司；7600-010全自動(dòng)生化分析儀 日本日立公司；H54AR分析天平 瑞士梅特勒-托利多公司；Biofuge fresco低溫離心機(jī) 德國(guó)Heraeus公司；Vanox光學(xué)顯微鏡 日本Olympus公司；RY-2235病理切片機(jī)徳國(guó)Leica公司。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)分組

選取大鼠50 只，遵循相關(guān)倫理學(xué)要求，所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均在標(biāo)準(zhǔn)籠中飼養(yǎng)并保持室溫（24±1）℃、相對(duì)濕度（50±10）%，自然光照，自由飲食飲水。動(dòng)物房及用具等定期用紫外燈消毒滅菌。適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周之后隨機(jī)分為正常對(duì)照組（n＝10）和DM模型組（n＝40），前者腹腔注射一定劑量（60 mg/kgmb）0.1 mol/L pH 4.2檸檬酸緩沖液，后者腹腔內(nèi)注射STZ（60 mg/kgmb）誘發(fā)糖尿病，48 h后，大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿，尿液檢驗(yàn)試紙檢測(cè)尿糖為＋＋＋到＋＋＋＋，再以空腹尾靜脈采血，用血糖儀測(cè)定大鼠空腹血糖濃度在16.67～26.00 mmol/L之間則確認(rèn)糖尿病建模成功。之后將糖尿病組再分為糖尿病對(duì)照組（DM）、有氧運(yùn)動(dòng)組（DM＋AE）、LLP給予組（DM＋LLP）和綜合治療組（DM＋LLP＋AE）4 組。

1.3.2 動(dòng)物運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練與喂藥

注射STZ 1 周后，DM＋AE組和DM＋LLP＋AE組大鼠進(jìn)行6 周游泳訓(xùn)練，水池水溫在34～36 ℃左右，水深50 cm，為保證游泳期間能夠持續(xù)活動(dòng)，大鼠在水面活動(dòng)的面積平均為250 cm2。每周游泳5 d，游泳時(shí)間為：第1～2周每日40 min，第3～4周每日60 min，第5～6周維持在90 min。這兩組每日進(jìn)行游泳訓(xùn)練結(jié)束后，用吸水紙將大鼠身體上水擦干并用電吹風(fēng)機(jī)烘干大鼠毛發(fā)。

糖尿病建模成功后，DM＋LLP組和DM＋LLP＋AE組以LLP 150 mg/kgmb灌胃，用蒸餾水將LLP配制成質(zhì)量濃度為15 mg/mL溶液，灌服量為1 mL/l00 gmb，每天1 次；正常對(duì)照組、DM組、DM＋AE組每天灌服蒸餾水1 mL/100 gmb。

1.3.3 樣本采集

第6周訓(xùn)練結(jié)束后，休息24 h。然后所有組大鼠利用2.5%戊巴比妥納注射液以50 mg/kgmb注射量腹腔注射麻醉。處死、破腹、左心室取血，離心（3 500 r/min）20 min，取上清液，－4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

血液采集后，進(jìn)行腹部切口取雙腎，一部分腎組織固定于4%中性甲醛溶液中，其余腎組織于－80 ℃液氮中保存，以備腎臟組織學(xué)觀察。

1.3.4 生化指標(biāo)測(cè)定

血糖測(cè)定儀檢測(cè)空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn) B G）濃度，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）和血清肌酐（serum creatinine，SCr）濃度；利用試劑盒檢測(cè)血清INS濃度、SOD活力和MDA濃度。

1.3.5 腎臟組織病理學(xué)觀察

在室溫下，腎組織在4%中性甲醛溶液中固定24 h后，從不同的組中采集小部分腎組織，通過(guò)梯度乙醇（體積分?jǐn)?shù)分別為70%、80%、90%、95%、100%）系列脫水，然后在二甲苯中脫水透明，嵌入石蠟中，切成4 mm厚的切片。組織切片用HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。

1.3.6 Western blot法測(cè)定Bax/Bcl-2和Caspase-3的表達(dá)量

按照總蛋白提取試劑盒說(shuō)明書(shū)裂解腎組織細(xì)胞，提取總蛋白。BCA法測(cè)定總蛋白濃度。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulphatepolyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）分離蛋白質(zhì)；經(jīng)濕轉(zhuǎn)將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜上；然后將膜用TBST溶液（含質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%脫脂奶粉、0.1% Tween-20）室溫封閉2 h。置于稀釋一抗中，4 ℃振蕩過(guò)夜，用TBST溶液洗4 次，在二抗中孵育30 min后，用TBST溶液洗3 次；在暗室中將顯色液ECLA和ECLB以體積比1∶1混合后覆蓋在膜上，1～2 min后去盡殘液，進(jìn)行曝光。曝光后的膠片用顯影、定影試劑進(jìn)行顯影和定影。依不同的發(fā)光強(qiáng)度調(diào)整曝光條件。用圖像分析系統(tǒng)對(duì)Western Blot結(jié)果進(jìn)行灰度掃描，以目的蛋白條帶灰度值和內(nèi)參蛋白條帶灰度值的比值作為相應(yīng)樣本的蛋白表達(dá)量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 19軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，利用單因素方差分析（one-way analysis of variance，ANOVA）檢驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 LLP和AE對(duì)DM大鼠FBG與INS濃度的影響

由圖1可知，與正常對(duì)照組相比，STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠FBG濃度顯著升高（P＜0.05），INS濃度顯著降低（P＜0.05）。與DM組比較，DM＋AE組、DM＋LLP組和DM＋LLP＋AE組FBG濃度顯著降低（P＜0.05），DM＋LLP組和DM＋LLP＋AE組INS濃度顯著升高（P＜0.05）。表明LLP與有氧運(yùn)動(dòng)都具有降低血糖和提高INS水平的作用，而LLP與有氧運(yùn)動(dòng)同時(shí)干預(yù)對(duì)降低血糖的效果更明顯。

2.2 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠的血清SCr、BUN、TC和TG濃度的影響

圖2顯示，注射STZ后，SCr、BUN、TC和TG濃度顯著高于正常對(duì)照組大鼠（P＜0.05）。與DM組相比，DM＋AE組、DM＋LLP組和DM＋LLP＋AE組血清SCr、TC和TG濃度顯著降低（P＜0.05），DM＋LLP組和DM＋LLP＋AE組BUN濃度顯著降低（P＜0.05），DM＋AE組BUN濃度變化不顯著。表明服用LLP和長(zhǎng)期進(jìn)行有氧運(yùn)動(dòng)可降低糖尿病高血脂癥，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的形成，減輕對(duì)腎臟組織的損傷。

圖2 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠的血清SCr（A）、BUN（B）、TC（C）和TG（D）濃度的影響Fig.2 Effect LLP and AE on SCr (A), BUN (B), TC (C) and TG (D) in diabetic rats

2.3 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠腎組織SOD活力和MDA濃度的影響

圖3 顯示，與正常對(duì)照組比較，D M 組大鼠中SOD活力顯著降低（P＜0.05），MDA濃度顯著升高（P＜0.05）。與DM組大鼠相比，DM＋LLP＋AE組SOD活力顯著升高（P＜0.05），DM＋AE組、DM＋LLP組SOD活力無(wú)顯著變化，DM＋LLP組與DM＋LLP＋AE組MDA濃度顯著降低（P＜0.05），DM＋AE組MDA濃度無(wú)顯著變化。

圖3 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠腎組織SOD活力（A）和MDA濃度（B）的影響Fig.3 Effects of LLP and AE on SOD activity (A), and MDA content(B) in kidney tissue of diabetic rats

2.4 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠腎組織病理學(xué)的影響

圖4顯示，正常對(duì)照組腎小球的結(jié)構(gòu)正常，毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)完整、清晰，系膜區(qū)無(wú)增生，基底膜完整無(wú)增厚，未見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。DM組腎臟中的腎小球硬化、間質(zhì)纖維化、脂質(zhì)積累，出現(xiàn)細(xì)胞凋亡和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。與DM組相比，LLP和有氧運(yùn)動(dòng)治療及二者結(jié)合治療的糖尿病大鼠中，腎小球的結(jié)構(gòu)和形態(tài)特征得到改善和恢復(fù)。表明LLP和有氧運(yùn)動(dòng)可改善腎小球肥大和腎小球系膜擴(kuò)張。

圖4 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠腎組織病理學(xué)的影響（×400）Fig.4 Effects of LLP and AE on kidney injury in diabetic rats (× 400)

2.5 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠腎組織細(xì)胞Bax/Bcl-2及Caspase-3相對(duì)表達(dá)量的影響

Western blot結(jié)果顯示（圖5），與空白對(duì)照組比較，DM大鼠腎臟的Bax/Bcl-2及Caspase-3相對(duì)表達(dá)量均顯著上調(diào)（P＜0.05）。與DM組大鼠相比，DM＋LLP組與DM＋LLP＋AE組Bax/Bcl-2相對(duì)表達(dá)量顯著降低（P＜0.05），DM＋AE組Bax/Bcl-2相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著變化，DM＋LLP＋AE組Caspase-3相對(duì)表達(dá)量顯著降低（P＜0.05），DM＋AE組、DM＋LLP組Caspase-3相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著差異。

圖5 LLP和AE對(duì)糖尿病大鼠腎組織細(xì)胞Bax/Bcl-2及Caspase-3表達(dá)量的影響Fig.5 Effects of LLP and AE on protein expression of Bax/Bcl-2 and Caspase-3 in kidney tissue of diabetic rats

3 討 論

3.1 LLP和AE對(duì)DM大鼠FBG與INS及脂質(zhì)代謝的影響

DM是一種代謝紊亂疾病，其特征是由于身體產(chǎn)生激素或?qū)NS的反應(yīng)能力受損而導(dǎo)致的高血糖癥[13]。造成INS效力不足的原因包括胰導(dǎo)β細(xì)胞分泌INS的量不足或INS氨基酸排列異常、在血液中有INS拮抗物質(zhì)存在、組織對(duì)INS有拮抗性。研究發(fā)現(xiàn)，有氧運(yùn)動(dòng)能顯著降低DM大鼠FBG水平，增加INS敏感性[14]。運(yùn)動(dòng)能改善人類和動(dòng)物的INS抵抗和葡萄糖敏感性，可能是因?yàn)榇龠M(jìn)了AMPK、PGC-1α和其他參與線粒體生物發(fā)生的基因的表達(dá)[15]。本實(shí)驗(yàn)中，單獨(dú)給予LLP和有氧運(yùn)動(dòng)都能使DM大鼠FBG濃度顯著下降（P＜0.05），單獨(dú)給予LLP及補(bǔ)充LLP的同時(shí)進(jìn)行有氧運(yùn)動(dòng)均能顯著增加INS的分泌量（P＜0.05），這可能是由于有氧運(yùn)動(dòng)或LLP的生物活性改善了機(jī)體的INS敏感性。表明長(zhǎng)期補(bǔ)充LLP的同時(shí)進(jìn)行有氧運(yùn)動(dòng)能更加減輕DM大鼠的胰島β細(xì)胞的損傷，使INS的分泌量增加，從而降低了血糖。同時(shí)服用LLP和進(jìn)行有氧運(yùn)動(dòng)能顯著降低DM大鼠血清TG、TC濃度（P＜0.05），這可能是LLP和氧運(yùn)動(dòng)通過(guò)增加DM大鼠INS的釋放使3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶水平升高，從而達(dá)到降脂的作用。

3.2 LLP和AE對(duì)DM大鼠腎組織SOD活力及MDA含量的影響

氧化應(yīng)激可促進(jìn)DN發(fā)病及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展[16]，主要原因之一是活性氧（reactive oxygen species，ROS）會(huì)損傷細(xì)胞內(nèi)DNA并最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的發(fā)生[17]。ROS還可通過(guò)激活DM患者中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激促進(jìn)腎小管細(xì)胞凋亡[18]。DM患者體內(nèi)多余的血糖通過(guò)葡萄糖自動(dòng)氧化、多元醇途徑和蛋白質(zhì)的非酶糖化誘導(dǎo)自由基形成從而引起氧化應(yīng)激[19]。研究發(fā)現(xiàn)，STZ誘導(dǎo)的DM大鼠表現(xiàn)出大多數(shù)DM并發(fā)癥，通過(guò)介導(dǎo)氧化應(yīng)激產(chǎn)生破壞β細(xì)胞的自由基[20]。Hui Heping等從蘭州百合的鱗莖中分離純化得到一種含O-乙?；母事镀暇厶牵˙HP-1），發(fā)現(xiàn)其具有明顯的體外抗氧化活性和抗菌活性[21]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，DM大鼠抗氧化酶SOD活力顯著下降，MDA濃度顯著增加，而LLP和有氧運(yùn)動(dòng)均可改善這兩個(gè)指標(biāo)，可能是通過(guò)抑制ROS的生成降低了氧化應(yīng)激水平，從而保護(hù)DM大鼠的β細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，抑制DN的進(jìn)一步發(fā)展。

3.3 LLP和AE對(duì)DM大鼠腎組織的保護(hù)作用

在DM的進(jìn)展期間，高血糖和高脂血癥的代謝失調(diào)會(huì)引發(fā)DN，DN伴有白蛋白尿，其特征是腎小球?yàn)V過(guò)率降低、腎小球肥大、蛋白尿、腎小球基底膜增厚、系膜擴(kuò)張、足細(xì)胞丟失、腎小球硬化和間質(zhì)纖維化[22]。高脂血癥可通過(guò)激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transforming growth factor，TGF）-β1通路來(lái)誘導(dǎo)腎損傷，從而促進(jìn)腎內(nèi)活性氧的生成，并導(dǎo)致單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的腎小球浸潤(rùn)[23]。研究表明，2型DM大鼠經(jīng)黑洋蔥粗多糖灌胃后，肌酐水平顯著降低，腎小球形態(tài)較完整，說(shuō)明多糖對(duì)DM大鼠的腎臟組織具有一定的保護(hù)和修復(fù)作用[24]。牡丹皮多糖能明顯改善DN大鼠腎臟組織病理?yè)p傷及相關(guān)腎臟指標(biāo)，主要通過(guò)調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激和調(diào)節(jié)炎癥因子達(dá)到保護(hù)DN大鼠腎臟的作用[25]。在本研究中觀察到DM大鼠腎小球損傷、慢性炎癥和固有細(xì)胞壞死。在LLP與有氧運(yùn)動(dòng)單獨(dú)治療DM組的腎臟切片中觀察到腎微結(jié)構(gòu)輕微變形，腎小管結(jié)構(gòu)大部分改變，在LLP聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)的情況下，大鼠腎小球的結(jié)構(gòu)和形態(tài)特征得到改善和恢復(fù)；表明LLP和有氧運(yùn)動(dòng)可改善STZ誘導(dǎo)的DM大鼠腎臟腎小球肥大和腎小球系膜擴(kuò)張，有效保護(hù)腎臟。

3.4 LLP和AE對(duì)DM大鼠腎臟Bax、Bcl-2及Caspase-3表達(dá)的影響

細(xì)胞凋亡是一種受調(diào)節(jié)和程序化的細(xì)胞自主死亡[26]。細(xì)胞凋亡途徑主要包括線粒體途徑（或稱內(nèi)在途徑）和死亡受體途徑（或稱外在途徑）[27]。細(xì)胞凋亡涉及多種蛋白質(zhì)，包括Bcl-2和Caspase家族。線粒體介導(dǎo)的凋亡通路受Bcl-2家族蛋白的調(diào)控，其中Bcl-2和Bax分別是主要的抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白[28]。研究表明，Bax/Bcl-2表達(dá)量比值在確定細(xì)胞凋亡的執(zhí)行方面可能比單獨(dú)的任一蛋白質(zhì)的表達(dá)更重要，因?yàn)锽ax/Bcl-2表達(dá)量增加會(huì)上調(diào)Caspase-3表達(dá)量，后者會(huì)激活DNA酶，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[29]。在多種病理?xiàng)l件下Caspase活化且最終使細(xì)胞凋亡過(guò)程完成[30]。Caspase-3被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡過(guò)程中的關(guān)鍵執(zhí)行者，它通過(guò)切割各種蛋白質(zhì)底物，包括細(xì)胞核、細(xì)胞骨架、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞溶膠中的蛋白質(zhì)，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[31]。由于氧化應(yīng)激和炎癥協(xié)同作用誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，通常認(rèn)為Caspase-3是參與細(xì)胞凋亡蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)的必需蛋白質(zhì)，因此Caspase-3的活化是凋亡進(jìn)入不可逆階段標(biāo)志[32]。黃芪多糖可促進(jìn)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡及轉(zhuǎn)分化，其機(jī)制與下調(diào)Janus激酶（Janus kinase，JAK）/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子（signal transducer and activator of transcription，STAT）信號(hào)通路有關(guān)[33]。從本實(shí)驗(yàn)的Western blot結(jié)果可知，與正常對(duì)照組相比，STZ誘導(dǎo)的DM腎臟細(xì)胞Caspase-3和Bax/Bcl-2相對(duì)表達(dá)量顯著上調(diào)。LLP聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)降低腎臟細(xì)胞Caspase-3及Bax/Bcl-2的相對(duì)表達(dá)量最有效。結(jié)果提示，LLP和有氧運(yùn)動(dòng)能有效地下調(diào)Bax/Bcl-2和Caspase-3的表達(dá)，明顯抑制DM大鼠腎臟細(xì)胞凋亡。

綜上，LLP聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)能降低DM大鼠空腹血糖，增加INS的分泌，有效降低DM大鼠血脂水平，增加腎組織抗氧化酶的活性，使腎組織的結(jié)構(gòu)和形態(tài)特征得到改善和恢復(fù)，明顯抑制糖尿病腎臟細(xì)胞凋亡。