楊陽，曹俊陽，周協(xié)琛，李濤，李炎，趙蕊

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，大慶 163319）

腸易激綜合征（irritable bowel syndrome，IBS）是一中常見的功能性胃腸道疾病，其臨床特征為慢性間歇性腹痛并伴有排便習(xí)慣改變或排便性狀的改變[1]。根據(jù)羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)以及患者疼痛部位、糞便稠度的不同，IBS 主要分為腹瀉型腸易激綜合征（IBS with diarrhea，IBS-D）、便秘型腸易激綜合征（IBS with constipation，IBS-C）、腹瀉和便秘交替型腸易激綜合征（IBS with mixed symptomology，IBS-M）及未分類型腸易激綜合征（IBS-unclassified）四種亞型[2]。IBS-D 作為IBS 的主要亞型，占據(jù)IBS 病例的23.3%～65%[3]。IBS-D 在中、青年中多見，但近年來IBS-D 老年患者數(shù)量也在攀升。反復(fù)發(fā)作的IBS-D 可誘發(fā)多種慢性疾病，并嚴(yán)重影響患者情緒健康和生理功能，對(duì)生活質(zhì)量產(chǎn)生負(fù)面影響。

中醫(yī)有“無濕不成泄”之說。歷代醫(yī)者多認(rèn)為IBS-D 的病發(fā)主要與濕熱、肝郁、脾瀉相關(guān)。馬齒莧（Portulaca oleracea Linn，POL）形似馬齒，全草可入藥，由清熱祛濕、健脾止瀉、涼血止血之功[4]。作為一種傳統(tǒng)治療腸炎及腹瀉的中藥材，馬齒莧早在北宋時(shí)期就已被發(fā)現(xiàn)并得到運(yùn)用?！妒セ莘健吩鴳?yīng)用馬齒莧煮粥以治血痢，馬齒莧治紅痢癥也早記載于《生草藥性備要》中[5]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，馬齒莧可通過抑制腸粘膜的氧化應(yīng)激及腸上皮細(xì)胞的凋亡發(fā)揮對(duì)腸道的保護(hù)作用[6-7]。馬齒莧因其富含黃酮、有機(jī)酸、多糖等多種抗菌成分而被譽(yù)為“天然抗生素”[8-10]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明馬齒莧具有抗氧化、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖等生物學(xué)功能[11-13]。目前，馬齒莧已成為治療急、慢性細(xì)菌性痢疾的要藥，但其治療IBS-D 的作用機(jī)制研究還不深入。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一個(gè)融合了生物學(xué)、藥學(xué)、數(shù)學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的新興學(xué)科。因?yàn)榧繕?biāo)化合物篩選、多靶點(diǎn)預(yù)測(cè)、網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建于一體，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)已成為探究中藥潛在活性成分及防治疾病作用機(jī)制的綜合工具[14]。研究以馬齒莧為對(duì)象，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)手段探究馬齒莧治療IBS-D 潛在的作用機(jī)制，為馬齒莧治療IBS-D 提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 馬齒莧化學(xué)成分的收集與篩選

利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)TCMSP（http：//tcmspw.com/tcmsp.php）檢索中草藥馬齒莧的有效化學(xué)成分。設(shè)置口服利用度（OBioaval，OB）和類藥性（drug-likeness，DL）為篩選條件。以“馬齒莧”為關(guān)鍵詞，篩選出OB≥30%及DL≥0.18 的化學(xué)成分即為馬齒莧的有效成分。

1.2 IBS-D 靶點(diǎn)的收集與篩選

以“Diarrhea irritable bowel syndrome”“Diarrheairritable bowel syndrome”“D -irritable bowel syndrome”“irritable bowel syndrome-Diarrhea”“irritable bowel syndrome-D”“IBS-D”“D-IBS”為關(guān)鍵詞在GeneCard 數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org/）中查找腹瀉型腸易激綜合征的相關(guān)靶點(diǎn)，匯總并刪除重復(fù)靶點(diǎn)。以IBS 為關(guān)鍵詞在CTD 數(shù)據(jù)庫中查找腸易激綜合征相關(guān)的靶點(diǎn)。CTD 數(shù)據(jù)庫與GeneCard 數(shù)據(jù)庫的交集靶點(diǎn)即為IBS-D 對(duì)應(yīng)的疾病靶點(diǎn)。

1.3 馬齒莧治療IBS-D 靶點(diǎn)互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

借助Venny 分析工具（http：//jvenn.toulouse.inra.fr/app/index.html）獲取馬齒莧與IBS-D 的交集靶點(diǎn)。將交集靶點(diǎn)蛋白導(dǎo)入STRING（https：//string-db.org/）數(shù)據(jù)庫，在參數(shù)欄中設(shè)定置信分?jǐn)?shù)高于0.9，去掉游離節(jié)點(diǎn)后導(dǎo)出PPI（Protein-protein interaction，PPI）蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖。將網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2，根據(jù)度值對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)鋵W(xué)分析并利用cytoscape 中cytohubba 插件篩選核心治療靶點(diǎn)，根據(jù)篩選結(jié)果繪制POL 治療IBS-D 核心靶點(diǎn)的PPI 網(wǎng)絡(luò)圖。

1.4 GO 富集分析

利用DAVID 數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/）對(duì)核心靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（Gene ontology，GO）富集分析。將核心靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID 數(shù)據(jù)庫，設(shè)置物種為“Homo sapiens”，運(yùn)行并保留核心靶點(diǎn)生物學(xué)過程（Biological Process，BP）、細(xì)胞組分（Cellular Component，CC）及分子功能（Molecular Function，MF）三方面的分析結(jié)果。將分析結(jié)果上傳至Bioinformatics 平臺(tái)（http：//www.bioinformatics.com.cn/），以基因數(shù)為縱坐標(biāo)繪制BP、CC、MF 三合一條形圖。

1.5 KEGG 富集分析

使用Cytoscape 中的clueGO 插件對(duì)核心靶點(diǎn)進(jìn)行京都基因與基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）信號(hào)通路富集分析。上傳馬齒莧治療IBS-D 的核心靶點(diǎn)，將物種設(shè)為“Homo sapiens”，以p-value＜0.01 為篩選條件進(jìn)行KEGG 富集分析并利用CluePedia 插件調(diào)整ClueGO分析網(wǎng)絡(luò)圖。

1.6 分子對(duì)接

在TCMSP 數(shù)據(jù)庫下載馬齒莧活性成分mol2 格式的結(jié)構(gòu)。從PDB 數(shù)據(jù)庫（http：//www.rcsb.org/）獲取核心蛋白的3D 結(jié)構(gòu)。利用分子對(duì)接軟件AMDock 計(jì)算分子對(duì)接的結(jié)合能并借助Pymol 軟件將對(duì)接結(jié)果可視化。

2 結(jié)果與分析

2.1 馬齒莧活性化合物篩選

以O(shè)B≥30%、DL≥0.18 為條件在TCMSP 數(shù)據(jù)庫對(duì)馬齒莧活性成分進(jìn)行篩選。如表1 所示，篩選后共得到10 個(gè)馬齒莧活性化合物，包括花生四烯酸（Arachidonicacid）、環(huán)阿喬醇（Cycloartenol）、β-胡蘿卜素（Beta-carotene）、β-谷甾醇（Beta-sitosterol）、山柰酚（Kaempfero）、木犀草素（Luteolin）、異甜菜素（Isobetanidin）、脫糖苷異豆素（Isobetanin_qt）、槲皮素（Quercetin）等。馬齒莧活性化合物對(duì)應(yīng)化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1。

2.2 IBS-D 疾病靶點(diǎn)獲取

如圖2 所示，從GeneCard 數(shù)據(jù)庫中共搜集到IBS-D 相關(guān)靶點(diǎn)2 344 個(gè)，從CTD 數(shù)據(jù)庫中共搜集到IBS 相關(guān)靶點(diǎn)464 個(gè)。將GeneCard 數(shù)據(jù)庫與CTD數(shù)據(jù)庫的靶點(diǎn)取交集，共得到222 個(gè)IBS-D 疾病靶點(diǎn)。

圖2 馬齒莧與IBS-D 交集靶點(diǎn)韋恩圖Fig.2 Venn Diagram of intersection target of POL and IBS-D

2.3 馬齒莧治療IBS-D 的潛在靶點(diǎn)

通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫獲取馬齒莧的靶點(diǎn)，并利用UniProt 數(shù)據(jù)庫（https：//www.Uniprot.org/）將馬齒莧靶點(diǎn)名稱標(biāo)準(zhǔn)化。利用韋恩圖分析工具對(duì)馬齒莧靶點(diǎn)與IBS-D 靶點(diǎn)取交集。如圖2 所示，馬齒莧活性成分靶點(diǎn)共194 個(gè)，其中與IBS-D 相關(guān)的有68 個(gè)，包括IL10、MAPK8、VEGFA 等。

2.4 馬齒莧治療IBS-D 潛在靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)分析

將馬齒莧治療IBS-D 的68 個(gè)潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入String 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行分析。如圖3 所示，PPI 網(wǎng)絡(luò)由68個(gè)節(jié)點(diǎn)和219 條邊構(gòu)成，其中有6 個(gè)靶點(diǎn)與其他靶點(diǎn)無交集。將互作網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cytoscape 軟件，刪除無交集靶點(diǎn)后依據(jù)度值對(duì)剩余靶點(diǎn)進(jìn)行排序。度值越高的靶點(diǎn)表示與該靶點(diǎn)相互作用的蛋白數(shù)量越多。由圖4 可知，JUN、RELA、IL6、TNF、IL10 度值較高，在網(wǎng)絡(luò)中起主導(dǎo)作用。

圖3 馬齒莧治療IBS-D 潛在靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)圖Fig.3 PPI network of potential target of POL in the treatment of IBS-D

圖4 潛在靶點(diǎn)蛋白互作拓?fù)鋵W(xué)分析圖Fig.4 Topology analysis results of potential targets interaction

2.5 馬齒莧治療IBS-D 核心靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)分析

利用Cytoscape 軟件中CyoHubba 插件進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，獲取馬齒莧治療IBS-D 的核心靶點(diǎn)。如圖5 所示，馬齒莧治療IBS-D 的核心靶點(diǎn)包括白細(xì)胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor，TNF）、白細(xì)胞介素-8（Interleukin-8，CXCL8/IL-8）、單核細(xì)胞趨化蛋白1（Monocyte chemotactic protein-1，CCL2/MCP-1）、白細(xì)胞介素-1B（Interleukin-1B，IL-1B）、白細(xì)胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素-1A（Interleukin-1A，IL-1A）、白細(xì)胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB p65，RELA）等。

圖5 馬齒莧治療IBS-D 核心靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)圖Fig.5 PPI network of POL core target in the treatment of IBS-D

2.6 馬齒莧治療IBS-D 核心靶點(diǎn)GO 富集分析

GO 富集分析涵蓋BP、CC、MF 三方面。設(shè)定閾值為P＜0.05，在此條件下共獲取123 個(gè)GO 條目，其中BP 111 個(gè)，CC 4 個(gè)，MF 8 個(gè)。如圖6 所示，前10 條BP 涉及炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控、細(xì)胞對(duì)脂多糖的反應(yīng)、細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號(hào)通路、衰老及對(duì)藥物的反應(yīng)等。CC 分析結(jié)果表明這些靶蛋白多分布在細(xì)胞外間隙、胞外區(qū)及質(zhì)膜外側(cè)上。MF 分析結(jié)果表明：這些靶蛋白的分子功能主要為細(xì)胞因子活性、生長(zhǎng)因子活性、趨化因子活性等。

圖6 GO 富集分析結(jié)果Fig.6 Analysis results of GO enrichment

2.7 馬齒莧治療IBS-D 核心靶點(diǎn)KEGG 富集分析

利用Cytoscape 軟件中ClueGO 插件對(duì)馬齒莧治療IBS-D 的核心靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG 富集分析。以P＜0.01 為條件進(jìn)行篩選，共篩選出40 條POL-IBS-D潛在信號(hào)通路。ClueGO 網(wǎng)絡(luò)圖中每一個(gè)節(jié)點(diǎn)代表一個(gè)term，同種顏色則表示相近的term 聚類。由圖7 所示，馬齒莧治療IBS-D 的機(jī)制主要涉及NOD 樣受體信號(hào)通路（NOD-like receptors signaling pathway）、NF-κB 信號(hào)通路（Nuclear factor-kappa B signaling pathway）、白細(xì)胞介素-17 信號(hào)通路（Interleukin-17 signaling pathway）等。這些信號(hào)通路與細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體的作用、造血細(xì)胞系、產(chǎn)IgA 的腸道免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)控等密切相關(guān)。此外，這些信號(hào)通路也參與了脂質(zhì)動(dòng)脈粥樣硬化、非酒精性脂肪肝、炎癥性腸病、哮喘等疾病。

圖7 KEGG 信號(hào)通路富集分析結(jié)果Fig.7 KEGG pathway enrichment analysis results

2.8 分子對(duì)接結(jié)果

將馬齒莧活性化合物分別與RELA、CCL2、CXCL8、IL-1A 等核心靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證。對(duì)接得分越小，表明受體蛋白與配體分子結(jié)合的越穩(wěn)定。如表2 所示，馬齒莧活性化合物與大部分核心靶點(diǎn)均有較好的結(jié)合。其中，花生四烯酸與IL-1A蛋白結(jié)合較好；環(huán)阿喬醇和β-胡蘿卜素與RELA蛋白結(jié)合效果較好；β-谷甾醇與TNF 蛋白結(jié)合較好；山奈酚、橙皮苷、木犀草素及槲皮素均與JUN 蛋白結(jié)合較好，異甜菜素及脫糖苷異豆素與IL-10 蛋白結(jié)合較好，這表明IL-1A、RELA、TNF、JUN 及IL-10 可能是馬齒莧治療IBS-D 的關(guān)鍵靶點(diǎn)。將對(duì)接結(jié)果用Pymol 進(jìn)行可視化分析并繪制分子對(duì)接模式圖。由圖8 可知，馬齒莧活性化合物多通過氫鍵作用力與核心蛋白氨基酸殘基發(fā)生相互作并結(jié)合至蛋白活性位點(diǎn)。

圖8 分子對(duì)接模式圖Fig.8 Molecular docking diagram

表2 核心靶點(diǎn)與馬齒莧化合物的分子對(duì)接結(jié)果Table 2 Molecular docking results of core active ingredients of POL

3 討論

IBS-D 是一種慢性復(fù)發(fā)性胃腸道疾病，發(fā)病機(jī)制尚未明確。國(guó)外有學(xué)者指出，IBS-D 常見于細(xì)菌性胃腸炎癥后，并多伴隨腸粘膜持續(xù)的免疫激活[15]。目前，治療IBS-D 的藥物主要包括止痛類藥物及止瀉類藥物，如硝苯吡啶、苯乙哌啶等，但這些藥物均存在一定的毒副作用，不適宜長(zhǎng)期服用。傳統(tǒng)中藥因其高效低毒的特性而被廣泛應(yīng)用于治療多種疾病[16]。馬齒莧是一種民間傳統(tǒng)中草藥，多用于治療腹瀉、腹痛等癥。然而，馬齒莧的活性成分及其治療IBS-D 的作用機(jī)制目前仍不清楚。在研究中，利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)手段篩選了馬齒莧的活性成分并探究了馬齒莧治療IBSD 的分子靶點(diǎn)和機(jī)制。

通過TCSMP 數(shù)據(jù)庫檢索馬齒莧的成分并以類藥性及口服利用度為條件進(jìn)行篩選，最終得出10 種馬齒莧主要活性成分，包括β-胡蘿卜素、橙皮苷、山柰酚、木犀草素、槲皮素等。作為維生素A 的前體，β-胡蘿卜素具有明顯的自由基清除特性。臨床研究表明，服用β-胡蘿卜素可以緩解IBS-D 的炎癥狀態(tài)，改善IBS-D 患者的腹痛強(qiáng)度和排便頻率[17]。Yosuke等[18]研究發(fā)現(xiàn)，20 mg·kg-1木犀草素可以保護(hù)葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎并顯著抑制巨噬細(xì)胞和CD4T 細(xì)胞向結(jié)腸粘膜的浸潤(rùn)，說明木犀草素具有腸道抗炎活性。此外，槲皮素、橙皮苷、山柰酚等成分也可通過抑制氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)腸粘膜功能、平衡腸道微生物等途徑維持腸道穩(wěn)態(tài)[19-20]。以上結(jié)果表明，這些成分可以作為馬齒莧的活性成分并進(jìn)行后續(xù)抗IBSD 相關(guān)機(jī)制的探究。

基于馬齒莧活性化合物篩選得到與IBS-D 相關(guān)靶點(diǎn)共68 個(gè)。對(duì)68 個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析后發(fā)現(xiàn)，JUN、RELA、TNF、IL-10、IL-1B、IL-1A 等靶點(diǎn)度值較高，與其他靶點(diǎn)相互作用較為密切，為馬齒莧治療IBS-D 的核心靶點(diǎn)。富集分析結(jié)果表明核心靶點(diǎn)參與的生物學(xué)過程主要與炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、衰老、細(xì)胞增殖以及細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)相關(guān)。有研究表明，腸粘膜持續(xù)的低度炎癥可能是IBS-D 發(fā)病的重要原因[21]。在馬齒莧調(diào)節(jié)IBS-D 的核心靶點(diǎn)中，與調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)相關(guān)的靶點(diǎn)蛋白數(shù)量占據(jù)80%，主要包括IL-1A、IL-1B、TNF、CXCL8、RELA、IL-10 等。IL-1A 和IL-1B 是IL-1 家族的重要成員。作為有效的炎癥細(xì)胞因子，IL-1A 和IL-1B 可激活炎癥過程并引發(fā)局部和全身炎癥反應(yīng)[22]。然而與健康人群相比，IBSD 患者體內(nèi)IL-1A、IL-1B 水平顯著升高。腸內(nèi)穩(wěn)態(tài)的紊亂被證明是IBS-D 患者腸道炎癥的基礎(chǔ)。作為一種強(qiáng)大的炎癥誘導(dǎo)劑，TNF 可通過破壞緊密連接蛋白、誘導(dǎo)上皮細(xì)胞分泌炎性因子、激活NF-κB 等方式廣泛參與細(xì)胞分化、凋亡并誘發(fā)炎癥反應(yīng)[23]。有研究表明，小檗堿能夠下調(diào)IBS-D 小鼠模型中TNF-α/NF-κB/MLCK 通路的異常激活，從而保護(hù)腸上皮緊密連接并修復(fù)IBS-D 對(duì)腸上皮屏障造成的損傷[24]。Chu Hao-Ran 等[25]在探究艾灸對(duì)IBS-D 大鼠結(jié)腸TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路的影響時(shí)也發(fā)現(xiàn)，艾灸治療后血清中的TNF-α 水平顯著降低，炎癥情況明顯緩解。此外，從富集分析結(jié)果中可知，大部分核心靶點(diǎn)也與衰老密切相關(guān)。由此可見，馬齒莧可通過作用于炎癥相關(guān)靶點(diǎn)并抑制衰老相關(guān)基因表達(dá)從而對(duì)ISB-D 老年患者起到保護(hù)作用。

KEGG 通路分析結(jié)果顯示馬齒莧治療IBS-D 的關(guān)鍵通路主要包括NOD 樣受體信號(hào)通路、NF-κB 信號(hào)通路、白細(xì)胞介素-17 信號(hào)通路、TNF 信號(hào)通路、TLR 信號(hào)通路等。目前，已知宿主NOD 樣受體蛋白6（NOD-like receptor family pyrin domain containing 6，NLRP6）炎癥信號(hào)通路與IBS 密切相關(guān)。有研究結(jié)果表明，溫和灸可以通過控制NLRP6 炎性體信號(hào)傳導(dǎo)來緩解IBS 的炎癥和內(nèi)臟超敏反應(yīng)[26]。NF-κB 由一系列轉(zhuǎn)錄因子組成，可參與調(diào)節(jié)炎癥、先天免疫等多種生物反應(yīng)。通瀉藥方已被證明對(duì)IBS-D 患者有效。研究表明，通瀉藥方可增強(qiáng)腸黏膜屏障功能，其機(jī)制與抑制炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)及抑制NF-κB 信號(hào)通路有關(guān)[27]。由KEGG 結(jié)果可知，馬齒莧主要通過影響炎癥信號(hào)通路、天然免疫信號(hào)通路等抵抗IBS-D。此外，可以看出同一靶點(diǎn)可參與調(diào)控多條信號(hào)通路，這也印證了中藥同病異治的治療特點(diǎn)。

將馬齒莧活性化合物與關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接并計(jì)算結(jié)合能。結(jié)合能分值≥－4.00，則表明配體與靶點(diǎn)無法自發(fā)結(jié)合；結(jié)合能分值小于－4.00 且大于－7.00，則認(rèn)為配體與靶點(diǎn)的結(jié)合活性較好；≤－7.00，則認(rèn)為配體與靶點(diǎn)結(jié)合活性更為良好。研究分子對(duì)接結(jié)合能結(jié)果表明，馬齒莧活性化合物均可與關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白自發(fā)結(jié)合，且結(jié)合活性較好。從分子對(duì)接結(jié)合模式圖可知，馬齒莧活性化合物多通過氫鍵作用力與靶蛋白相互作用。由于β-胡蘿卜素不存在H 供體及受體，無法形成氫鍵，因此其主要通過范德華力、疏水結(jié)合Pi-Alkyl 作用等方式與靶蛋白結(jié)合。分子對(duì)接結(jié)果進(jìn)一步說明馬齒莧主要活性成分可通過調(diào)控上述核心靶點(diǎn)對(duì)IBS-D 發(fā)揮治療作用，驗(yàn)證了上述網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果的可靠性。馬齒莧活性成分對(duì)核心蛋白良好的結(jié)合能力也表明馬齒莧具有多靶點(diǎn)、多途徑的治療特點(diǎn)。

綜上所述，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測(cè)了馬齒莧主要的活性成分、治療IBS-D 的潛在作用靶點(diǎn)及通路并利用分子對(duì)接手段進(jìn)行了驗(yàn)證，一定程度上揭示了馬齒莧治療IBS-D 的作用機(jī)制。研究后續(xù)將進(jìn)一步通過體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)對(duì)所得的馬齒莧成分及IBS-D靶點(diǎn)加以驗(yàn)證，為馬齒莧防治ISB-D 的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。