祝鐵鋼 蘇長青 王 茜 祁 亮
(河北衡水學(xué)院生命科學(xué)系 河北 衡水 053000)
我國是農(nóng)業(yè)大國,水稻、小麥等都是主要的農(nóng)作物,其中小麥更在人們?nèi)粘5娘嬍持姓紦?jù)著重要地位。小麥從種植到收獲的過程中會受到病蟲害的干擾,對常見的病蟲害需要做到早發(fā)現(xiàn)早防治,且不同時期針對不同病蟲害需要不同的處理方法,否則會對小麥的品質(zhì)和產(chǎn)量造成嚴(yán)重影響[1],小麥病蟲害主要有黑穗病、赤霉病、白粉病、蚜蟲等[2]。其中麥長管蚜是一種廣泛分布的優(yōu)勢種,遍及我國的河南等眾多產(chǎn)麥區(qū),成為了為害小麥的主要害蟲[3]。
1.1 試驗材料
1.1.1 供試麥苗。麥種為百農(nóng)矮抗58,市場購買。
1.1.2 供試蟲源。麥長管蚜由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所小麥害蟲組提供,衡水學(xué)院生命科學(xué)系實驗室進(jìn)行飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件為光周期L∶D=16∶8,溫度20 ℃±2 ℃,濕度60%~80%。
1.1.3 試驗藥品及器材。①藥品:高氯吡蟲啉(山東曹達(dá)化工有限公司)、1-氯-2,4-二硝基苯、還原型谷胱甘肽、乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)、NaH2PO4、Na2HPO4。②器材:噴霧瓶(小型)、20 ml 燒杯、礦泉水瓶、一次性塑料杯、培養(yǎng)皿、滴管、量筒、移液槍、細(xì)毛筆、電子天平、離心機(jī)、分光光度計、水浴鍋。
1.2 試驗方法
1.2.1 噴施不同稀釋倍數(shù)的5%高氯吡蟲啉,麥長管蚜的死亡情況測定及致死效果。試驗設(shè)5 個處理1 個對照。處理1 ~5 分別為5 個不同稀釋濃度的5%高氯吡蟲啉(處理1 稀釋為20 mg/L,處理2 稀釋為10 mg/L,處理3 稀釋為5 mg/L,處理4 稀釋為2.5 mg/L,處理5 稀釋為1.25 mg/L),分別噴施麥苗上的麥長管蚜,在1 h、2 h、3 h、4 h、12h 和24 h 內(nèi)觀察麥長管蚜死亡數(shù)量。
1.2.2 毒力測定。觀察蚜蟲最終的死亡數(shù)量,死亡標(biāo)準(zhǔn):用毛筆輕觸腹部不動即記錄為死亡。相對死亡率(%)=[(處理死亡率-對照死亡率)/(1-對照死亡率)]100%。
1.2.3 酶活力測定。①酶提?。喝C101.066 mg/L 處理個體作為酶源,冰浴備用(取LC10處理過的蚜蟲用杵搗碎,然后離心,取出后用移液槍吸取上清液放于新的離心管中,置于冰塊上保持低溫,防止酶活性受到影響)。②打開電腦和分光光度計,在340 nm 下用時間驅(qū)動程序監(jiān)測其吸光值在2 min 內(nèi)的變化,計算反應(yīng)速度。每個處理設(shè)3 次重復(fù),每重復(fù)平行測定3次。
1.2.4 數(shù)據(jù)處理。利用SPSS16.0 軟件錄入死亡數(shù)、總數(shù)和濃度,選擇Probit Analysis 分析數(shù)據(jù),得出毒力回歸方程,根據(jù)毒力回歸方程,計算出亞致死濃度LC10。測定高氯吡蟲啉亞致死劑量下麥長管蚜谷胱甘肽解毒酶的吸光度。
2.1 5%高氯吡蟲啉不同稀釋倍數(shù)下麥長管蚜的死亡情況。從表1 可以看出,在一定的濃度范圍內(nèi),隨著濃度的加大和時間延長,麥長管蚜的死亡數(shù)呈上升趨勢。在1 ~4 h 內(nèi),2.5 mg/L 和1.25 mg/L 的高氯吡蟲啉處理的麥長管蚜死亡數(shù)量變化不明顯,但其它濃度在1 ~4 h 內(nèi)處理的蚜蟲死亡數(shù)量迅速增長。4 ~12 h內(nèi),20 mg/L、10 mg/L、5 mg/L、2.5 mg/L 處理的蚜蟲死亡數(shù)都平穩(wěn)增加,1.25 mg/L 的處理也在第12 h出現(xiàn)死亡。12 ~24 h 內(nèi),20 mg/L 和10 mg/L 處理的蚜蟲死亡數(shù)出現(xiàn)明顯上升。最后2 個濃度處理蚜蟲死亡數(shù)量變化不明顯。以上結(jié)果表明,5%高氯吡蟲啉對麥長管蚜有毒殺作用,且與濃度呈一定的正比關(guān)系。
表1 5%高氯吡蟲啉不同處理下麥長管蚜死亡數(shù)(頭)
2.2 不同稀釋濃度5%高氯吡蟲啉處理對麥長管蚜的室內(nèi)致死效應(yīng)。根據(jù)公式計算相對死亡率,用5%高氯吡蟲啉20 mg/L、10 mg/L、5 mg/L、2.5 mg/L、1.25 mg/L處理蚜蟲,相對死亡率分別是86.67%、66.67%、53.33%、30.00%、10.00%(表2)。隨著5%高氯吡蟲啉濃度的上升,麥長管蚜的相對死亡率逐漸上升,不同稀釋倍數(shù)的5%高氯吡蟲啉對麥長管蚜的防治效果不同。高氯吡蟲啉稀釋為20 mg/L 時,24 h 內(nèi)麥長管蚜的死亡數(shù)量最多,10 mg/L、5 mg/L 的稀釋藥劑處理24h 下,蚜蟲的死亡數(shù)量較多,其相對死亡率達(dá)到66.67%和53.33%,其它濃度藥劑處理下,相對死亡率在0 ~30%(表2)。上述結(jié)果表明,5 種稀釋濃度的高氯吡蟲啉對麥長管蚜均有不同程度的防治作用,5%高氯吡蟲啉防治麥長管蚜的最佳濃度為5 ~20 mg/L。
表2 5 個不同濃度下麥長管蚜24 h 的相對死亡率
2.3 SPSS 分析。從SPSS 軟件菜單中得出毒力回歸方程為:Y = -1.334 + 1.872X。對該方程的擬合優(yōu)度Chi-square 檢驗的X2=0.676<X20.05=7.81,從皮爾遜擬合優(yōu)度的卡方檢驗顯著水平為0.879,可以判斷方程式對數(shù)據(jù)的擬合優(yōu)度是滿意的。根據(jù)上述結(jié)果,表明5%高氯吡蟲啉處理麥長管蚜具有明顯的殺蟲效果,SPSS 分析的致死濃度LC10為1.066 mg/L。為后續(xù)麥長管蚜的田間防治以及亞致死劑量對其翅型分化和生長發(fā)育研究提供了研究基礎(chǔ)。
2.4 高氯吡蟲啉亞致死劑量處理蚜蟲后谷胱甘肽吸光值。由表4 可知,用高氯吡蟲啉亞致死劑量LC10處理蚜蟲后,第1 組3 個重復(fù)吸光值依次為0.074、0.099和0.091,第2 組3 個重復(fù)吸光值為0.109、0.102 和0.104;對照組的吸光值為0.018、0.016 和0.017??梢娧料x經(jīng)過高氯吡蟲啉亞致死劑量LC10處理后,吸光值明顯變大,表明谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的比活力增大。
表4 高氯吡蟲啉亞致死劑量下麥長管蚜吸光度
根據(jù)5%高氯吡蟲啉對有翅麥長管蚜的室內(nèi)毒力測定,獲得數(shù)據(jù)運(yùn)用于小麥等農(nóng)作物的防治中,同時也為藥劑的田間施用和麥蚜的防治工作提供科學(xué)的理論依據(jù)。采用室內(nèi)毒力測定評價5%高氯吡蟲啉對麥長管蚜的防治效果,結(jié)果表明,麥長管蚜對5%高氯吡蟲啉的敏感性較強(qiáng),明確了5%高氯吡蟲啉的最佳濃度在5 ~20 mg/L,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的安全用藥提供了參考依據(jù)。
目前國內(nèi)關(guān)于5%高氯吡蟲啉復(fù)配劑對麥長管蚜的室內(nèi)毒力測定試驗的研究報道很少,張舒[4]的21 d持續(xù)觀察以及林永的不同復(fù)配比,通過對5%高氯吡蟲啉殺蟲劑不同稀釋濃度對麥長管蚜的防治效果的差異研究,對比張舒的前期研究結(jié)果,發(fā)現(xiàn)結(jié)論一致,其中5 ~20 mg/L 的防治效果較佳。另外,蚜蟲經(jīng)過高氯吡蟲啉亞致死劑量LC10處理后吸光值明顯變大,從而表明谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的比活力增大。
試驗結(jié)果表明,高氯吡蟲啉復(fù)配劑對蚜蟲的防治效果很好,二者復(fù)配明顯有效提高了對蚜蟲的毒殺作用,不僅降低了毒性而且擴(kuò)大了殺蟲譜,大大降低了對人和環(huán)境的危害??梢酝茢?,高氯吡蟲啉在農(nóng)業(yè)防治工作中具有廣闊的前景。