吳 婷，王夢迪，黃情兒，朱 波*，秦路平*

延胡索不同組織器官中內生真菌菌群結構與多樣性分析

吳 婷1, 2，王夢迪1，黃情兒1，朱 波1*，秦路平1*

1. 浙江中醫(yī)藥大學藥學院，浙江 杭州 311402 2. 浙江省麗水市人民醫(yī)院藥學部，浙江 麗水 323000

明確延胡索不同組織器官中內生真菌菌群結構與多樣性。通過形態(tài)和分子手段相結合的方法對延胡索塊莖、葉、莖、根中的內生真菌進行分離、鑒定及菌群結構分析。共分離得到內生真菌2161株，根據菌株的形態(tài)學特征劃分成106個形態(tài)型，分子鑒定為57個分類單元，歸屬到41個屬，其中木霉屬、毛鏈孢屬為塊莖的專有屬，腐霉屬、白僵菌屬為葉的專有屬，亞球殼屬、核瑚菌屬為莖的專有屬，小囊菌屬為根的專有屬；相似性分析表明，延胡索不同組織器官內生真菌組成結構上存在差異；Shannon-wiener 多樣性指數及Simpson指數分析顯示延胡索根和莖中內生真菌多樣性指數、豐度均顯著高于塊莖和葉。延胡索組織器官中內生真菌資源豐富，為延胡索內生真菌資源的開發(fā)利用提供了基礎資料和參考依據。

延胡索；內生真菌；組織器官；菌群結構；多樣性

延胡索W. T. Wang是罌粟科紫堇屬植物，藥用部位為干燥塊莖，具有活血、行氣、止痛的功效，可用于胸脅、脘腹疼痛、胸痹心痛、經閉痛經、產后瘀阻、跌撲腫痛[1]。延胡索分布于浙江、安徽、陜西、重慶、河南等地，臨床應用廣泛，市場需求巨大。現代研究還發(fā)現，延胡索具有催眠、抗心肌缺血、擴張冠狀動脈、降壓以及抗胃腸潰瘍、抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、提高抗應激能力等藥理作用[2-3]。

植物內生真菌（plant endophytic fungi）是指能與植物體共生存，但不會引起植物產生明顯病癥的一類微生物[4]。已有研究表明，植物內生真菌遍及植物體當中，普遍分布在植物的根、莖、葉、塊莖、花、果實和種子等組織器官或細胞間隙中，形成了植物體內的微生態(tài)體系[5]。

目前關于延胡索內生真菌的研究較少，馬韋韋等[6]對陜西城固縣的延胡索塊莖進行分離鑒定，篩選出代謝產功能酶菌株；楊陽等[7]對8個產地延胡索塊莖的內生真菌資源進行分離鑒定，發(fā)現塊莖中存在豐富的內生真菌資源。已有研究發(fā)現，廣東化橘紅、麻花秦艽等菌群結構特征在不同組織部位存在差異性與特異性[8-9]，且與藥用植物品質密切相關。因此，本實驗對內生真菌在延胡索塊莖、葉、莖、根的菌群結構和多樣性進行分析，明確延胡索不同組織器官內生真菌的分布，旨在為延胡索內生真菌的應用提供理論依據，為進一步開發(fā)延胡索內生真菌及提高延胡索藥材品質奠定基礎。

1 材料與試劑

1.1 材料

2021年4～5月，采收浙江、陜西、重慶、安徽、河南延胡索新鮮健康植株，分別為安徽宣城（S1）、重慶開縣（S2）、陜西董家營（S3）、河南信陽（S4）、陜西三合鎮(zhèn)（S5）、浙江縉云（S6）、浙江東陽（S7）、浙江磐安（S8），經浙江中醫(yī)藥大學藥學院張巧艷教授鑒定為罌粟科多年生草本延胡索W. T. Wang。

1.2 試劑與儀器

PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊20 g，1000 mL，pH自然）；Takara9770A試劑盒購自美谷生物科技（浙江）有限公司；SW-CJ-1D型超凈工作臺（蘇州凈化有限公司）；YXQ-LS-75S Ⅱ型立式壓力蒸汽滅菌器（上海博訊有限公司）；恒溫培養(yǎng)箱、手術剪、手術刀、濾紙等。DYCP-31DN型瓊脂糖水平電泳槽（北京六一有限公司）；ABI Proflex型PCR（賽默飛世爾科技中國有限公司）；GelDocXR型凝膠成像儀（北京科譽興業(yè)科技發(fā)展有限公司）；Eppendorf 5427R型離心機（Eppendorf中國有限公司）。無水乙醇（分析純，國藥集團），次氯酸鈉（分析純，國藥集團），青霉素鈉（上海索寶來有限公司）。

2 方法

2.1 不同形態(tài)型內生真菌菌株的分離與純化

將收集的延胡索植株自來水下沖洗30 min除去表面的泥土和雜質，用無菌濾紙吸干其表面水分，進行3步表面消毒處理（75%乙醇1 min，2.5%次氯酸鈉5 min，75%乙醇1 min），用無菌水洗滌延胡索植株表面殘留酒精后再用無菌濾紙吸干其表面水分。接著用無菌手術刀將延胡索根、莖、葉、塊莖切成小組織塊（0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm），置于含50 mg/L青霉素的PDA平板中，密封，25 ℃培養(yǎng)，定期觀察。待內生真菌充分長出后，采用尖端挑取法進行純化，直至出現形態(tài)單一的菌落。

2.2 不同形態(tài)型菌株的DNA提取與PCR擴增

采用Takara9770A試劑盒對內生真菌進行基因組DNA提取。PCR擴增采用引物ITS（5’-GGAA- GTAAAAGTCGTAAGG-3’）和ITS5（5’-TCCTCCG- CTTATTGATATGC-3’）進行PCR擴增。PCR反應體系（50 μL）組成：模板DNA，2 μL；引物ITS4，1 μL；引物ITS5，1 μL；2×TapPCR MasterMix（含染液），25 μL；ddH2O，21 μL。PCR反應循環(huán)參數與步驟：95 ℃初始變性3 min；95 ℃變性40 s；52 ℃退火50 s；72 ℃延伸 1 min；變性-退火-延伸循環(huán)35次；最后72 ℃延伸 10 min。擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳檢測后送上海生工生物有限公司進行序列測定。

2.3 序列數據分析

登陸NCBI（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）利用BLAST將測序獲得的各菌株IT S和5.8 S基因序列與GenBank中的已知序列進行比對，查找相似性最高的菌種，結合形態(tài)學特征，確定分離菌株的分類地位。

2.4 內生真菌多樣性及相似性分析

定殖率指植物受到內生真菌侵染的組織塊數占所有組織塊數的百分比；分離率指分離得到的某個指定類型的內生真菌菌株數占分離樣本組織塊總數的百分比；相對頻率（relative frequency，RF）表示所有樣本中分離得到的某種內生真菌的菌株數占分離的總菌株數的百分比；運用Shannon-Wiener多樣性指數（’）與Simpson多樣性指數（）來分析內生真菌菌群的生物多樣性；運用Soenson相似性指數來計算比較不同組織器官之間內生真菌種類組成的相似性程度。優(yōu)勢屬或優(yōu)勢目的判定方法為P＞1/。P為內生真菌的菌株數占全部內生真菌菌株數的比值，為每個組織器官內生真菌種類數，當P＞1/時即可判定為優(yōu)勢屬或優(yōu)勢目[10]。

3 結果與分析

3.1 延胡索不同組織器官的內生真菌分布

從延胡索健康植株共分離得到內生真菌2161株，其中根109株、莖114株、葉196株，塊莖1742株，見表1。4個組織器官內生真菌的定殖率和分離率，見表2。結果表明，不同組織器官的內生真菌的定殖率和分離率均具有統(tǒng)計學意義。塊莖、葉、莖、根的定殖率高低為塊莖＞葉＞莖＞根，分離率高低為塊莖＞葉＞莖＞根，表明延胡索植株不同組織器官中內生真菌的侵染程度與豐富程度存在顯著差異。

表1 延胡索中內生真菌的分離

Table 1 Endophytic fungi isolated from C. yanhusuo

代號分類參考序列相似度/%分離數量/株總計 S1S2S3S4S5S6S7S8 T5腐皮鐮刀菌Fusarium solaniMK027264100.00108(Rh)61(Rh)79(Rh)98(Rh)100(Rh)70(Rh)79(Rh)50(Rh)645(Rh) T7木賊鐮刀菌Fusarium equisetiMK764999100.0069(Rh),2(Ra)56(Rh)50(Rh),2(Fo)41(Rh),2(Ra)50(Rh),1(Ra)49(Rh), 2(Ca),6(Ra)63(Rh)30(Rh),2(Fo),3(Ca)408(Rh),4(Fo),5(Ca),11(Ra) T79銳頂鐮刀菌Fusarium acuminatumMH782585100.00016(Rh)03(Ra)5(Rh),2(Ra)9(Rh)6(Rh),2(Ca)8(Rh)44(Rh),2(Ca),5(Ra) T89層出鐮刀菌Fusarium proliferatumMH933697100.0000007(Rh)11(Rh)0018(Rh) T97粉紅螺旋聚飽霉Clonostachys roseaMH911376100.002(Ra)71(Rh)41(Rh)12(Rh)30(Rh)20(Rh),3(Ra)22(Rh)21(Rh)217(Rh),5(Ra) T83木霉屬Trichoderma sp.KU93347589.1601(Ca)8(Rh)004(Rh),2(Ca)9(Rh)10(Rh)31(Rh),3(Ca) T86Volutella consorsMH89258197.96014(Rh)0004(Rh)6(Rh)024(Rh) Y81緊密帚枝霉Sarocladium strictumMF497404100.00000003(Fo)003(Fo) Y92球孢白僵菌Beauveria bassianaMG34508199.380000002(fo)02(fo) T25Monilochaetes melastomaeNR16112497.6649(Rh)26(Rh)27(Rh)24(Rh)20(Rh)31(Rh)27(Rh)20(Rh)224(Rh) G94黃瓜織球殼菌Plectosphaerella cucumerinaMH855387100.00003(Ca)0001(Ra)03(Ca),1(Ra) J86變黑輪枝菌Gibellulopsis nigrescensMH856082100.00003(Ca)000003(Ca) T17球毛殼Chaetomium globosumMK120280100.000000016(Rh)6(Rh)20(Rh),10(Ra)42(Rh),10(Ra) Y77Chaetomium lentumMH861858100.000007(fo)00007(fo) J88Arcopilus aureusMG889930100.003(Ca)00000019(Ra)3(Ca),19(Ra) G78Dichotomopilus variostiolatusMG889985100.004(Ra)00000004(Ra) T11菜豆間座殼Diaporthe phaseolorumMH78258999.04000000011(Rh)11(Rh) T99Microdochium bolleyiMH860598100.000009(Rh)00009(Rh) Y89Peroneutypa scopariaMK99342299.6100000002(Fo)2(Fo) Y82帚霉屬Scopulariopsis sp.LM65247972.6600002(Fo)0002(Fo) G81Microascus alveolarisKX923834100.001(Ra)00000001(Ra) T15Ophiosphaerella agrostidisKM43427298.5500000007(Rh)7(Rh) T22土棲棘殼孢Setophoma terrestrisKY56133799.1700002(Ra)3(Ca)6(Rh)06(Rh),3(Ca),2(Ra) Y75菊異莖點霉Paraphoma chrysanthemicolaMH24508299.7901(Fo)2(Fo)000003(Fo) Y10Stemphylium solainMH14245699.59000001(Fo)001(Fo) Y85新西蘭匍柄霉Stemphylium eturmiunumMH843731100.0000002(Fo)0002(Fo) Y95鏈格孢菌Alternaria alternataMK881030100.0096(Fo),16(Ca)03(Fo),3(Ca)9(fo),1(Ca)2(Fo),2(Ra)4(Ra)02(Fo),1(Ca)112(Fo),21(Ca),6(Ra) Y96極細鏈格孢霉Alternaria tenuissimaKF99674899.3920(Ca)2(Ca)6(Fo),4(Ca),1(Ra)15(fo),2(Ca)2(Fo),1(Ca)4(Ra)5(fo),2(Ca)2(Ca)28(fo),33(Ca),5(Ra)

續(xù)表1

代號分類參考序列相似度/%分離數量/株總計 S1S2S3S4S5S6S7S8 Y96極細鏈格孢霉Alternaria tenuissimaKF99674899.3920(Ca)2(Ca)6(Fo),4(Ca),1(Ra)15(fo),2(Ca)2(Fo),1(Ca)4(Ra)5(fo),2(Ca)2(Ca)28(fo),33(Ca),5(Ra) J96Dokmaia monthadangiiKJ18870999.3200000002(Ca)2(Ca) Y100小球腔菌Leptosphaeria microscopicaMK304184100.0010(Ca)03(Fo)002(Fo),2(Ca)6(fo),3(Ca)2(Fo)13(Fo),15(Ca) Y94Didymella ellipsoideaNR15825799.7602(Ra)0001(Ca)002(Ra),1(Ca) Y93亞隔孢殼屬Didymella americanaKY099740100.000000002(fo)02(fo) Y97Phaeosphaeriaceae sp.MF58887399.201(Ca)0002(Ra)2(Fo)002(Fo),1(Ca),2(Ra) J99Sphaerulina cercidisMH86506199.780000001(Ca)01(Ca) T91Penicillium raphiaeMH186002100.0000008(Rh)8(Ra)03(Ca),7(Ra)8(Rh),3(Ca),15(Ra) Y80湯姆青霉Penicillium thomiiMH865966100.0003(Ca)0002(Fo)002(Fo),3(Ca) G98微紫青霉菌Penicillium janthinellumKP88146299.80000004(Ra)004(Ra) J87光孢青霉Penicillium glabrumMH865723100.000002(Ca),1(Ra)02(Ca)004(Ca),1(Ra) Y83曲霉菌Aspergillus cibariusMK267410100.0000002(Fo)0002(Fo) J90亮白曲霉Aspergillus candidusMH398524100.0002(Ca)0000002(Ca) G77費希爾曲霉Aspergillus f ischeriMK775036100.001(Ra)0003(Fo)0003(Fo),1(Ra) T1糙刺藍狀菌Talaromyces trachyspermusLC31779899.901(Ra)00000001(Ra) G79Talaromyces tratensisKY991066100.001(Ra)000001(Ra)02(Ra) J84Talaromyces diversiformisNR147446100.0003(Ca)0000003(Ca) G99蘭淡領瓶霉Cadophora orchidicolaKX44015299.82002(Ra)000002(Ra) G74Helotiales sp.HQ649975100.0000002(Ra)0002(Ra) G80Oidiodendron setiferumNR077127100.0000000005(Ra)5(Ra) G93Oidiodendron truncatumLC317709100.0001(Ra)0000001(Ra) T13絲核菌屬Rhizoctonia sp.MG54790789.59000009(Rh)009(Rh) T96絲核菌屬Rhizoctonia sp.MH85568589.760000007(Rh)07(Rh) T4黑管菌屬Bjerkandera sp.FJ81014795.59000008(Rh)008(Rh) Y88粗毛栓菌Trametes hirsutaMH11489999.5000000002(Fo)2(Fo) Y98Peniophora nudaDQ41153399.630000002(fo)02(fo) J98Typhula sp.MF61503491.5500002(Ra)001(Ca)2(Ra),1(Ca) T82總狀毛霉Mucor racemosusKX06058598.2500019(Rh)000019(Rh) T102犁頭霉Absidia spJX50176561.58005(Rh)002(Ca)005(Rh),2(Ca) Y87異絲腐霉Pythium diclinumJQ89845999.7600000002(Fo)2(Fo)

Ra-根 Ca-莖 Fo-葉 Rh-塊莖

Ra-root Ca-stem Fo-leaf Rh-tuber

表2 不同組織器官內生真菌定殖率與分離率

Table 2 Colonization rate and isolation rate of endophytic fungi in different tissues of C. yanhusuo

組織定殖率/%分離率/% 根10.6112.04 莖10.6211.88 葉17.0820.41 塊莖83.65 181.45

根據菌株的培養(yǎng)特征將其劃分為106個形態(tài)型，通過5.8S和ITS區(qū)片段序列的相似性對比和系統(tǒng)學分析，其中有57個鑒定到種，41個鑒定到屬，30個鑒定到科，18個鑒定到目。66.67%的延胡索內生真菌表現出組織特異性，但未發(fā)現4個部位共有菌種。

延胡索內生真菌的分布具有明顯的組織特異性。在目的分類水平上，塊莖的優(yōu)勢目為肉座菌目（Hypocreales，RF＝79.62%）和球團目（Glomerellales，RF＝12.86%）；葉的優(yōu)勢目為腔菌目（Pleosporales，RF＝82.14%）；莖的優(yōu)勢目為腔菌目（Pleosporales，RF＝65.79%）、散囊菌目（Eurotiales，RF＝13.16%）、肉座菌目（Hypocreales，RF＝8.77%）；根的優(yōu)勢目為腔菌目（Pleosporales，RF＝13.76%）、肉座菌目（Hypocreales，19.27%）、散囊菌目（Eurotiales，RF＝22.02%）、糞殼菌目（Sordariales，RF＝30.28%）。在屬的分類水平上，塊莖的優(yōu)勢屬為粘帚霉屬（RF＝12.46%）、鐮刀菌屬Link ex Fr.（RF＝64.01%）、毛鏈孢屬Halst. ex Harter（RF＝12.86%）；葉的優(yōu)勢屬為鏈格孢屬Nees（RF＝71.43%）、小球腔菌屬Ces.（RF＝6.63%）；莖的優(yōu)勢屬Nees為鏈格孢屬（RF＝47.37%）、小球腔菌屬Ces.（RF＝13.16%）、鐮刀菌屬Link ex Fr.（RF＝6.14%）；根的優(yōu)勢屬為鏈格孢屬Nees（RF＝10.09%）、鐮刀菌屬Link ex Fr.（RF＝14.68%）、青霉菌屬Link（RF＝18.35%）、（RF＝17.43%）、毛殼屬（RF＝9.17%）（圖1和圖2）。其中木霉屬Pers.、毛鏈孢屬Halst.ex Harter為塊莖的專有屬，腐霉屬Pringsh.、白僵菌屬Vuillemin為葉的專有屬，亞球殼屬Sacc.、核瑚菌屬(Pers.) Fr.為莖的專有屬，小囊菌屬為根的專有屬。

圖1 4個組織器官中優(yōu)勢目的RF值

圖2 4個組織器官中優(yōu)勢屬的RF值

3.2 內生真菌多樣性及豐度分析

方差分析和結果表明，4個組織器官延胡索內生真菌豐度和值具有極顯著差異，多樣性指數（’）具有顯著性差異，見表3。延胡索根和莖中內生真菌多樣性指數、豐度均明顯高于塊莖和葉，根中的內生真菌’是葉的1.62倍。這表明植物不同組織器官內生真菌菌群的分布及組成不同。

表3 4個組織器官多樣性指數和豐度

Table 3 Diversity index and relative frequency of endophytic fungi in different tissues of C. yanhusuo

組織SH’D 塊莖191.857 50.773 8 葉201.709 60.645 1 莖212.407 70.854 7 根242.767 50.913 3

3.3 不同組織器官內生真菌相似性比較

相似性指數（s）用于比較2個不同組織器官的內生真菌種類組成的相似程度。在種水平上，不同組織器官的s在0.051 3～0.577 8，莖部與根部內生真菌菌群相似度最高，塊莖部與葉部相似性最低；在屬的水平上，不同組織器官的s在0.062 5～0.666 7，莖部與根部相似度最高，塊莖部和葉部相似性最低?？偟膩砜?，各組織器官內生真菌類群之間存在較大的差異，組織差異性明顯，見表4和表5。

4 討論

本實驗從延胡索塊莖、葉、莖、根4個組織器官中分離得到2161株內生真菌，通過5.8 S和ITS區(qū)片段序列的相似性對比和系統(tǒng)學分析，鑒定歸屬為41個屬，顯示出豐富的內生真菌多樣性。在延胡索不同的組織器官中，莖部與根部內生真菌菌群相似度最高，塊莖部與葉部相似性最低。內生真菌的分布規(guī)律可能與宿主本身的特性及內生真菌的種類相關，因此在宿主的不同組織器官中具有不同的分布和結構。延胡索各組織器官既有特殊的菌群，也有廣泛存在的菌群，體現了延胡索不同組織器官內生真菌的特異性和差異性，原因可能是各組織器官的結構差異和營養(yǎng)物質的差異影響了內生真菌的種類、侵染能力、方式與生存能力。

表4 不同組織器官在種水平上的內生真菌Cs

Table 4 Similarity index of endophytic fungi in different tissues of C. yanhusuo at species level

組織器官Cs 塊莖葉莖根 塊莖1.000 0 葉0.051 31.000 0 莖0.300 00.292 71.000 0 根0.279 10.227 30.577 81.000 0

表5 不同組織器官在屬水平上的內生真菌Cs

Table 5 Similarity index of endophytic fungi in different tissues of C. yanhusuo at generic level

組織器官Cs 塊莖葉莖根 塊莖1.000 0 葉0.062 51.000 0 莖0.312 50.294 11.000 0 根0.294 10.222 20.666 71.000 0

鏈格孢屬、鐮刀菌屬、粘帚霉屬、毛鏈孢屬、毛殼屬為延胡索的優(yōu)勢菌株。優(yōu)勢屬中，鐮刀菌屬和毛鏈孢屬內生真菌可引起植物病害，而粘帚霉屬和毛殼屬內生真菌已經廣泛用于生物防治。鏈格孢屬廣泛存在于土壤及植物組織中，在枸杞[11]、鐵皮石斛[12]等多種植物中都有發(fā)現，鏈格孢屬是生態(tài)系統(tǒng)中最為常見的病原菌，但同時也是一種新的微生物資源，在抑菌、殺蟲和抗原生生物方面發(fā)揮著重要作用，蘊藏巨大潛在應用價值[13]。鐮刀菌屬會侵染多種植物，引起嚴重的根腐病，造成巨大的經濟損失[14]。目前對毛鏈孢屬的研究較少，趙永強等[15]發(fā)現毛鏈孢屬能導致甘薯黑皮病。近年來，人們利用粘帚霉屬真菌對立枯絲核菌、腐霉菌等土傳植物病原菌的抗菌、溶解、競爭、寄生等作用來防治它們對植物造成的脫落、根腐等病害。在國外，鏈孢粘帚霉和綠粘帚霉已被開發(fā)成生防制劑產品[16]。毛殼屬真菌是常見的內生真菌類群，也是具有重要應用價值的資源真菌,其能夠通過誘導宿主植物產生系統(tǒng)抗性、重寄生作用以及產生次級代謝產物拮抗病原菌等方式防治植物病害[17]。

不同產地間延胡索內生真菌多樣性存在差異，浙江縉云產延胡索內生真菌多樣性指數最高，’達2.734 8；而安徽宣城多樣性最低，’值僅為1.729 7。菌群結構方面，各產地延胡索最優(yōu)勢屬均為鐮刀菌屬，其他優(yōu)勢屬略有區(qū)別，但以毛鏈孢屬、鏈格孢屬、粘帚霉屬為主。供試8個產地延胡索均存在產地特有菌群，如安徽宣城延胡索特有菌為（RF＝1.04%）、（RF＝0.26%）等；河南信陽特有菌為（RF＝2.86%）、（RF＝3.67%）等；浙江縉云特有菌為草莓花枯病菌（RF＝3.17%）、煙管菌（RF＝2.82%）等。這些產地特異性菌群可能與該產地土壤、降水量、濕度、溫度等生境因子相關，為延胡索道地性形成機制提供了參考依據。

根據’、指數表明延胡索根、塊莖中的內生真菌種類較豐富。延胡索的藥用部位是塊莖，木霉屬為塊莖的特有種群，楊陽等[7]研究發(fā)現木霉屬內生真菌T83與延胡索鎮(zhèn)痛活性成分延胡索乙素積累存在密切關系。木霉菌被認為是防治真菌性植物病害的潛在生防菌，它們可以直接與根相互作用，增加植物生長，抵抗疾病和對非生物脅迫的耐受性[18]。因此，下一步的工作中將重點研究延胡索內生真菌對宿主植物生長發(fā)育的作用，對藥用部位活性物質形成、含量變化的影響。目前，關于內生真菌對藥用植物活性成分的影響仍處于探索階段，本研究通過對延胡索不同組織器官進行內生真菌群落結構分析，為進一步研究內生真菌與延胡索藥材品質關系奠定了良好的基礎。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Fungal community and diversity of endophytic fungi in different tissues of

WU Ting1, 2, WANG Meng-di1, HUANG Qing-er1, ZHU Bo1, QIN Lu-ping1

1. School of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 311402, China 2. Department of Pharmacy, Lishui People's Hospital, Lishui 323000, China

To clarify fungal community and diversity of endophytic fungi in different tissues of.Endophytic fungi in tubers, leaves, stems and roots ofwere isolated, identified and analyzed by morphological and molecular methods.A total of 2162 endophytic fungal strains were isolated and divided into 106 morphological types. Through molecular systematical analysis, they were divided into 57 taxons, belonging to 41 genera, whileandwere the exclusive genera of tubers,andwere the exclusive genera of leaves, andandwere the exclusive genera of stems,is a proprietary genus in roots. Similarity analysis showed that there were significant differences in the endophytic fungal community in different tissues. Shannon Wiener diversity index and Simpson index analysis showed that the diversity index and abundance of endophytic fungi in roots and stems were significantly higher than those in tubers and leaves.There are abundant endophytic fungi in varioustissues. The paper provides basic information and scientific reference for the development and utilization of endophytic fungal resources in.

W. T. Wang; endophytic fungi; tissues; fungal community; diversity

R286.2

A

0253 - 2670(2023)16 - 5372 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.16.025

2023-03-03

浙江中醫(yī)藥大學人才專項（2021ZR09）；浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生青年創(chuàng)新人才支持計劃（2022RC052）

吳 婷（1983—），女，在讀研究生，研究方向為植物內生菌。E-mail: 513303983@qq.com

朱 波，博士，副研究員，碩士生導師，研究方向為植物內生菌。E-mail: zhubo@zcmu.edu.cn

秦路平，博士，教授，博士生導師，研究方向為中藥資源及品質評價。E-mail: lpqin@zcmu.edu.cn

[責任編輯 時圣明]