周漢琛，楊霽虹，劉亞芹，王 輝，雷攀登

（安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所 安徽黃山 245000）

茶葉香氣是評(píng)價(jià)茶葉品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，目前在各茶類中已鑒定出約700 多種揮發(fā)性物質(zhì)[1]。其中，萜類化合物是茶葉中一類重要的呈香物質(zhì)[2]，尤其是單萜、倍半萜類等揮發(fā)性化合物對(duì)茶葉香氣品質(zhì)有著重要貢獻(xiàn)[1]。它們大多具有花果香及較低的香氣閾值，容易被人類嗅覺(jué)感知，比如香葉醇、芳樟醇、橙花叔醇等。香葉醇和芳樟醇作為單萜類香氣物質(zhì)在各類茶葉中普遍含量較高，橙花叔醇對(duì)烏龍茶花果香的形成具有重要貢獻(xiàn)[3]。

香葉醇具有典型的玫瑰花香，在紅茶、綠茶產(chǎn)品中含量豐富。Wang 等[4]研究表明香葉醇是祁門紅茶中含量最高的萜烯類化合物。日本的Takeo研究表明，茶樹(shù)品種（C.sinensis var.sinensis）鮮葉中香葉醇含量顯著高于茶樹(shù)品種（C.sinensis var.assamica），后者中的芳樟醇含量則較高[5-6]。Kang等[7]研究顯示，祁門紅茶中的香葉醇相對(duì)含量（6.89%）顯著高于大吉嶺紅茶（4.28%）、錫蘭紅茶（0.5%）及阿薩姆紅茶（0.32%），這表明香葉醇對(duì)祁門紅茶的特征香氣形成具有重要貢獻(xiàn)[7]。此外，關(guān)于太平猴魁、龍井綠茶、滇紅紅茶的研究顯示，香葉醇對(duì)各類茶的香氣品質(zhì)形成同樣具有重要貢獻(xiàn)[8-11]。

在茶樹(shù)中，香葉醇主要以糖苷態(tài)儲(chǔ)存于細(xì)胞中，且主要以櫻草糖苷形式儲(chǔ)存，還有一部分以葡萄糖苷態(tài)儲(chǔ)存[12]。這類萜類糖苷物質(zhì)作為茶葉香氣前體，在茶葉加工過(guò)程中由葡萄糖苷酶、櫻草糖苷酶等水解酶催化并釋放出苷元物質(zhì)[12]。研究顯示茶樹(shù)中香葉醇的生物合成受季節(jié)變化以及機(jī)械損傷的影響[4-6]。此外，研究表明香葉醇糖苷含量隨季節(jié)的變化波動(dòng)較大，春季含量最高，香葉醇糖苷為47.5（峰面積之比），夏季次之（26.6），而秋季最低（13.3）[4]。香葉醇糖苷含量在不同葉片發(fā)育狀態(tài)下也表現(xiàn)出不一致，其中幼嫩葉片中含量最高，表現(xiàn)出幼嫩葉片＞莖＞成熟葉片＞枝條[12]。

香葉醇作為重要的茶香物質(zhì)，深入研究其在茶樹(shù)中的積累特性及對(duì)茶葉香氣的貢獻(xiàn)，能夠促進(jìn)后續(xù)系統(tǒng)研究茶葉香氣形成機(jī)制。本研究對(duì)不同茶樹(shù)品種、不同茶樹(shù)器官、不同時(shí)間的香葉醇積累特性進(jìn)行分析，同時(shí)對(duì)不同茶樹(shù)品種鮮葉加工的紅茶及加工過(guò)程中香葉醇的變化進(jìn)行研究，旨在為后續(xù)研究香葉醇對(duì)茶葉香氣品質(zhì)的貢獻(xiàn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本研究中供試茶樹(shù)品種（C.sinensis var.sinensis）“鳧早2 號(hào)”（FZ2）、“舒茶早”（SCZ）、“皖茶91”（WC91）、“中茶108”（ZC108）、“浙農(nóng)117”（ZN117）、“皖茶4 號(hào)”（WC4）、“櫧葉種”（ZYZ）取材于安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所；供試阿薩姆變 種（C.sinensis var.assamica）“勐庫(kù)大葉”（MKDY）、“清水3 號(hào)”（QS3）、“紫鵑”（ZJ）、“云抗14”（YK14）、“云抗37”（YK37）、“云抗43”（YK43）取材于云南省農(nóng)科院茶葉研究所；祁門紅茶加工過(guò)程樣（鮮葉、萎凋葉、揉捻葉、不同發(fā)酵時(shí)間葉）取材于安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所；茶樹(shù)品種“舒茶早”第一葉、第二葉、第三葉及莖取材于5 月份，花、根等器官取材于9 月份；不同月份取樣均在每月份的下旬。

試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)品香葉醇購(gòu)買于Sigma 公司；香葉基櫻草糖苷委托山東大學(xué)國(guó)家糖工程技術(shù)研究中心合成。

1.2 儀器與設(shè)備

本試驗(yàn)中香葉醇含量分析使用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀Agilent 7697A-7890A（美國(guó)Agilent 公司）；香葉基櫻草糖苷分析使用液相-四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀Agilent 1290-Agilent 6545 LC/QTOF（美國(guó)Agilent 公司）。

1.3 香葉醇提取方法

參考文獻(xiàn)中方法[13-14]，采用頂空固相微萃取（headspace solid phase microextraction，HS -SPME）對(duì)樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行吸附。紅茶中的揮發(fā)性物質(zhì)提取方法為：準(zhǔn)確稱取0.2 g 茶粉末，加入10 mL 沸水（茶水比1∶50），于70 ℃水浴平衡5 min 后，利用65 μmol/L PDMS/DVB SPME萃取頭（美國(guó)Supelco 公司）于70 ℃水浴吸附30 min，后用于GC-MS 分析。

鮮葉樣揮發(fā)物提取時(shí)，利用液氮將鮮葉研磨粉碎后稱取0.2 g，加入5 mL 超純水，于70 ℃水浴平衡5 min 后，利用65 μmol/L PDMS/DVB SPME 萃取頭于70 ℃水浴吸附30 min，后用于GC-MS 分析。

1.4 GC-MS 分析、香葉醇鑒定及定量

氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀Agilent 7697A-7890A 用于本研究中揮發(fā)性物質(zhì)分析，其中氣相色譜柱為DB-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm；美國(guó)Agilent 公司），氣相不分流，流速為1.0 mL/min，載氣為氦氣，色譜柱升溫程序?yàn)椋撼跏紲囟?0 ℃，保持1 min；以10 ℃/min 速率上升到100 ℃，并保持1 min；后以4 ℃/min 速率上升到200 ℃，并保持1 min；以16 ℃/min 速率上升到280 ℃，并保持7 min。

香葉醇鑒定依據(jù)NIST 數(shù)據(jù)庫(kù)、化合物保留指數(shù)（retention indices，RI）及標(biāo)準(zhǔn)品。香葉醇定量方法為使用標(biāo)準(zhǔn)品定量，準(zhǔn)確吸取1 μL 300 μg/mL 香葉醇標(biāo)準(zhǔn)品加入5 mL 或10 mL 超純水，于70 ℃水浴平衡5 min 后，利用相同SPME 萃取頭于70 ℃水浴吸附30 min 后上機(jī)分析。香葉醇含量計(jì)算方式為：利用樣品中峰面積與標(biāo)準(zhǔn)品峰面積之比計(jì)算含量，其中紅茶樣品中香葉醇含量表示為μg/L，鮮葉中香葉醇含量表示為μg/g（鮮重，fresh weight，F(xiàn)W）。

1.5 香葉基櫻草糖苷提取

利用液氮將鮮葉樣品、紅茶加工過(guò)程樣研磨粉粹，準(zhǔn)確稱取0.100 g，并立即加入750 μL 預(yù)冷的含0.1%甲酸的甲醇，充分振蕩15 s 后超聲15 min，后在10 000 r/min 下離心10 min，取上清液稀釋10 倍后，采用0.22 μm 有機(jī)系濾膜過(guò)濾，并用于液相質(zhì)譜分析。

1.6 UPLC/Q-TOF 分析

Agilent 1290 超高效液相色譜儀結(jié)合Agilent 6545 LC/Q-TOF 四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀用于樣品中的香葉基櫻草糖苷分析；色譜柱為Zorbax revese-phase 柱（RRHD SB-C18 3×150 mm，1.8 μm）。離子源為Dual ESI，A 相洗脫液為含0.1%甲酸的蒸餾水，B 相洗脫液為含0.1%甲酸的乙腈。LC-MS/MS 運(yùn)行時(shí)洗脫總時(shí)間為35 min：首先5% B 保持8 min；后10 min 內(nèi)B 相梯度由5%上升到45%；5 min 內(nèi)B 相梯度從45%上升到65%，并保持4 min；3 min 內(nèi)B 相梯度從65%下降到40%；3 min 內(nèi)B 相梯度從40%下降到5%，并保持2 min。流速始終為0.4 mL/min，樣品進(jìn)樣量為2 μL，色譜柱溫度設(shè)為35 ℃。MS 采集率為1 spectra/s，采集范圍設(shè)為100～700。Auto 模式下MS/MS采集率為2 spectra/s。離子源碰撞能量為25 和35 eV 兩種。

本研究中樣品在負(fù)離子模式下運(yùn)行，負(fù)離子模式下香葉基櫻草糖苷提取母離子（m/z）為493.22。本試驗(yàn)條件下，香葉基櫻草糖苷出峰時(shí)間約為17.6 min。采用Agilent Masshunter（B.07.00版本）和Agilent 定量軟件Qualitative Analysis（B.07.00 版本）進(jìn)行化合物的分析。樣品中香葉基櫻草糖苷通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品MS/MS 峰圖進(jìn)行鑒定，并通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品峰面積之比進(jìn)行化合物的定量，含量表示為μg/g（FW）。

1.7 香葉醇生物合成候選基因篩選與功能分析

利用開(kāi)放網(wǎng)站TPIA（http：//tpdb.shengxin.ren/）獲得“舒茶早”二代基因組組裝數(shù)據(jù)。依據(jù)Xia 等[15]研究結(jié)果顯示，二代基因組CSS2.0 中共有72 個(gè)候選萜類合成酶基因。通過(guò)基因結(jié)構(gòu)[16]、蛋白結(jié)構(gòu)域解析（http：//pfam.xfam.org/）獲得具有全長(zhǎng)功能的單萜類合成酶基因或雙功能萜類合成酶基因。

全長(zhǎng)克隆候選基因，并與植物雙元表達(dá)載體PBI121 連接，以農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系瞬時(shí)過(guò)表達(dá)于本氏煙草葉片中，3 d 后收取葉片。其中以侵染緩沖液（MES 10 mmol/L，MgCl220 mmol/L，乙酰丁香酮200 μmol/L）處理葉片為陰性對(duì)照，瞬時(shí)過(guò)表達(dá)羅勒（Sweet Basil）香葉醇合成酶基因ObGES 葉片為陽(yáng)性對(duì)照。將瞬時(shí)表達(dá)葉片液氮研磨后，稱取0.2 g，加入5 mL 超純水以及200 mg/mL AR2000（廣譜糖苷酶）于37 ℃水浴平衡20 min 后，利用65 μmol/L PDMS/DVB SPME 萃取頭于70 ℃水浴吸附30 min，后用于GC-MS 分析。

1.8 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0 軟件對(duì)試驗(yàn)樣品間的差異進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA），其中運(yùn)算方法為最小顯著性差異法（LSD），以檢驗(yàn)不同樣品間的顯著性（P＜0.05）。相關(guān)性分析利用GraphPad Prism9軟件（GraphPad，USA）完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 香葉基櫻草糖苷在茶樹(shù)中的積累特性

香葉醇在茶樹(shù)中主要以糖苷態(tài)儲(chǔ)存在細(xì)胞中，且主要以櫻草糖苷型儲(chǔ)存，約占70%～78%[17]。為量化香葉醇積累差異，本研究分析了香葉基櫻草糖苷在不同茶樹(shù)品種間、茶樹(shù)不同組織器官中的含量變化。結(jié)果顯示6 個(gè)供試中國(guó)變種（C.sinensis var.sinensis）鮮葉中顯著積累更多的香葉基櫻草糖苷，分布范圍為1.4～3.3 μg/g，而6 個(gè)阿薩姆變種（C.sinensis var.assamica）葉片中香葉基櫻草糖苷的含量普遍較低，約為0.1～0.6 μg/g（圖1a）。在12 個(gè)供試茶樹(shù)品種中，茶樹(shù)品種WC4嫩梢中的香葉基櫻草糖苷含量最為豐富，其次為祁門櫧葉種ZYZ（圖1a）。

圖1 不同茶樹(shù)品種及“舒茶早”不同組織器官中香葉基櫻草糖苷積累變化Fig.1 The accumulation patterns of geraniol and its primeveroside in the fresh leaves of different tea cultivars and in the different tissues of the SCZ cultivar

以茶樹(shù)品種“舒茶早SCZ”為對(duì)象，分析了茶樹(shù)不同組織器官中香葉基櫻草糖苷含量變化。結(jié)果顯示，香葉基櫻草糖苷在第一葉中含量最高，為1.17 μg/g；在茶樹(shù)根部的含量最低，為0.02 μg/g（圖1b）；茶樹(shù)葉片幼嫩部位積累更多的香葉基櫻草糖苷，而在發(fā)育程度高的葉片中，香葉基櫻草糖苷含量較低。在茶樹(shù)花器官中，花瓣中的香葉基櫻草糖苷含量最低，約為0.07 μg/g，隨著茶花逐漸盛開(kāi)，香葉基櫻草糖苷含量顯著下降（圖1b）。在茶樹(shù)不同組織器官中，香葉基櫻草糖苷含量變化總體為：葉＞花＞根。

2.2 不同月份中香葉醇積累特性

為探究不同月份下茶樹(shù)中香葉醇的積累特性，本研究分析了不同茶樹(shù)品種嫩梢在不同月份中的香葉醇含量。在所測(cè)4 個(gè)茶樹(shù)品種中，香葉醇均在3 月份嫩梢中的含量最為豐富（圖2）。尤其是茶樹(shù)品種WC4，在3 月份嫩梢中，香葉醇含量達(dá)到8.01 μg/g，而其在2 月份嫩梢中含量只有0.54 μg/g；與2 月份相比，3 月份WC4 嫩梢中香葉醇積累量約增加了15 倍，然后隨著月份增加，香葉醇含量逐漸降低；不同月份下，茶樹(shù)品種FZ2 和SCZ 嫩梢中香葉醇變化規(guī)律與茶樹(shù)品種WC4 基本相同，均在3 月份嫩梢中含量最高，而茶樹(shù)品種ZC108 在5 月份嫩梢中的香葉醇含量略高于4 月份中的含量（圖2）。在所測(cè)茶樹(shù)品種中，6、7、8 月份嫩梢中的香葉醇含量變化不大，基本持平（圖2）。

圖2 不同月份下茶樹(shù)鮮葉中香葉醇的含量變化Fig.2 The accumulation patterns of geraniol in the fresh leaves of different varieties in different months

2.3 香葉醇對(duì)紅茶香氣的貢獻(xiàn)分析

本研究分析了祁門紅茶加工進(jìn)程中的萎凋葉、揉捻葉、不同時(shí)間發(fā)酵葉中香葉基櫻草糖苷的含量變化，結(jié)果顯示香葉基櫻草糖苷在萎凋進(jìn)程中開(kāi)始下降，在揉捻過(guò)程中劇烈減少，約減少了90%，隨著發(fā)酵進(jìn)程延長(zhǎng)，香葉醇櫻草糖苷進(jìn)一步被水解，發(fā)酵完成時(shí)，只有鮮葉中的3.8%（圖3a），這與已有的報(bào)道結(jié)果相一致[18-19]。

圖3 香葉醇及其櫻草糖苷在祁門紅茶加工中不同品種紅茶中的含量及OAV 值Fig.3 The contents of geraniol and its primeveroside in the processing stage of Keemun black tea and the tea infusions of six black tea samples and the odor activity value of geraniol in six tea infusions

以黃山地區(qū)6 個(gè)茶樹(shù)品種紅茶為例（圖3b），氣相質(zhì)譜分析結(jié)果顯示6 個(gè)品種紅茶中香葉醇豐度均較高，其中WC4 品種紅茶中的香葉醇豐度顯著高于其它品種紅茶（圖3b）。含量計(jì)算結(jié)果顯示W(wǎng)C4 品種紅茶茶湯中香葉醇含量最高，約為187.34 μg/L，其次為SCZ 紅茶茶湯，香葉醇含量為49.27 μg/L；櫧葉種ZYZ 紅茶茶湯中香葉醇含量為45.06 μg/L；WC91 紅茶茶湯中的香葉醇含量最低，為26.01 μg/L（圖3c）。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道顯示，香葉醇在水中的閾值約為3.2～75 μg/L，不同研究中所用閾值有較大差異，常用的有3.2 μg/L[1]，40 μg/L[10]，75 μg/L[11]。根據(jù)L.J.van Gemert 新書(shū)中的標(biāo)注，最近文章中的研究表明香葉醇閾值為6.6 μg/L[20]。因此，本研究中以閾值6.6 μg/L 計(jì)算了香葉醇在6 個(gè)紅茶茶湯中的香氣活性值（odor activity value，OAV）。結(jié)果表明，WC4 品種紅茶茶湯中香葉醇香氣活性值最高，為28.38，其次為SCZ 茶湯，為7.47（圖3d）。一般認(rèn)為香氣化合物OAV 值＞1 是對(duì)茶湯香氣有貢獻(xiàn)[11]，而在本研究中的6 個(gè)紅茶茶湯中，香葉醇OAV 值均＞1，約為3.93～28.38，這表明香葉醇對(duì)紅茶香氣構(gòu)成具有重要貢獻(xiàn)。

2.4 香葉醇生物合成相關(guān)萜類合成酶候選基因分析

基于二代基因組數(shù)據(jù)，顯示共有72 個(gè)候選茶樹(shù)萜類合成酶基因，通過(guò)與已發(fā)表并鑒定功能的萜類合成酶基因結(jié)構(gòu)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，推測(cè)具有全長(zhǎng)的單萜合成酶/雙功能萜類合成酶基因共有23個(gè)。本研究利用茶樹(shù)不同組織器官中香葉基櫻草糖苷的含量與各候選基因表達(dá)量進(jìn)行Pearson 相關(guān)性分析（圖4a），結(jié)果顯示共有7 個(gè)萜類合成酶基因表達(dá)量與香葉基櫻草糖苷含量變化顯著相關(guān)，分別為CSS0012478（R=0.984），CSS0006343（R=0.865），CSS0007975（R=0.978），CSS0012706（R=0.979），CSS0013756（R=0.817），CSS0027229（R=0.820）和CSS0025755（R=0.984），其中CSS0012478、CSS0007975、CSS0012706 和 CSS00 25755 表達(dá)模式與香葉基櫻草糖苷含量變化達(dá)到極顯著相關(guān)（R＞0.9 且P＜0.01）。

圖4 茶樹(shù)中香葉醇生物合成萜類合成酶候選基因篩選與功能分析Fig.4 The identification of geraniol synthase candidate genes and the functional verification

通過(guò)全長(zhǎng)克隆，將CSS0007975、CSS0012478和CSS0025755 瞬時(shí)過(guò)表達(dá)于本氏煙草葉片中，其中以侵染緩沖液瞬時(shí)表達(dá)葉片為陰性對(duì)照，以已鑒定功能的羅勒香葉醇合成酶ObGES 為陽(yáng)性對(duì)照。結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照相比，CSS0007975、CSS0012478 和CSS0025755 瞬時(shí)過(guò)表達(dá)本氏煙葉片中香葉醇豐度雖略有增加但未達(dá)到顯著水平，而瞬時(shí)過(guò)表達(dá)ObGES 本氏煙葉片中，香葉醇豐度顯著提升（圖4b）。

3 討論與結(jié)論

香葉醇在不同茶樹(shù)品種中的差異已經(jīng)多有報(bào)道[2，4-5]，且目前常以萜烯指數(shù)（芳樟醇+芳樟醇氧化物/芳樟醇+芳樟醇氧化物+香葉醇）來(lái)表明茶樹(shù)品種間香葉醇與芳樟醇積累的差異[5]。日本Takeo[5]的研究顯示，斯里蘭卡地區(qū)阿薩姆種（Assamica）茶樹(shù)變種萜烯指數(shù)可達(dá)到1；雜交變種約為0.2～0.7，而中國(guó)種（Sinensis）茶樹(shù)變種萜烯指數(shù)普遍較低，最低可達(dá)到0.07。Xia 等[15]的研究表明我國(guó)云南地區(qū)18 個(gè)常見(jiàn)栽培茶樹(shù)品種主要是阿薩姆種茶樹(shù)變種，與安徽、浙江地區(qū)栽培品種（系）差異較大。本研究中，6 個(gè)供試中國(guó)種茶樹(shù)變種為安徽、浙江地區(qū)選育及當(dāng)?shù)卦耘嗥贩N，其香葉基櫻草糖苷含量顯著高于6 個(gè)供試阿薩姆種茶樹(shù)變種，這與茶樹(shù)變種的遺傳背景密切相關(guān)。Xia 等[15]的研究即表明，栽培品種在遺傳馴化中存在選擇性，兩個(gè)變種間共有的馴化基因只有206 個(gè)，而阿薩姆種茶樹(shù)變種獨(dú)有馴化基因?yàn)?48 個(gè)，中國(guó)種茶樹(shù)變種獨(dú)有馴化基因538 個(gè)，這表明不同茶樹(shù)栽培品種（系）在遺傳馴化中逐漸產(chǎn)生差異，使得內(nèi)源次級(jí)代謝途徑改變，并導(dǎo)致代謝產(chǎn)物積累不同。

茶樹(shù)葉片中積累較多的香葉醇與萜類合成酶表達(dá)模式密切相關(guān)[21]。前期研究顯示，茶樹(shù)單萜類合成酶表達(dá)量在葉片中積累較高，而倍半萜類合成酶則在花中表達(dá)較高[21]。不同月份中，3 月份嫩梢中香葉醇積累更豐富，這與王華夫研究較一致[4]。隨著月份增加，光照增強(qiáng)、溫度升高，茶樹(shù)次級(jí)代謝受到調(diào)控，影響了香葉醇生物合成量。

本研究中顯示，祁門紅茶在加工揉捻階段，香葉基櫻草糖苷含量極顯著下降。已有的研究表明糖苷類物質(zhì)可能主要儲(chǔ)藏在液泡中[22]，而櫻草糖苷酶基因已被證明定位于細(xì)胞壁中[23]。在鮮葉采摘后，水分充足，細(xì)胞形態(tài)完整，隨著萎調(diào)進(jìn)程的增加，水分逐步散失，細(xì)胞透性增加[24]，部分香葉基糖苷水解并釋放出苷元；在紅茶加工揉捻階段，酶與底物充分接觸，結(jié)合態(tài)的香葉醇幾乎全部轉(zhuǎn)成游離態(tài)，進(jìn)而對(duì)紅茶香氣產(chǎn)生貢獻(xiàn)。本研究中6個(gè)品種紅茶中香葉醇的香氣活性值均＞1，且最高達(dá)到約28。祁門紅茶的“祁門香”被認(rèn)為具有濃郁的玫瑰花香、甜香等[25]，顯著有別于中國(guó)云南地區(qū)的滇紅紅茶，可能存在香葉醇貢獻(xiàn)率的差異。

本研究中，初步對(duì)香葉醇生物合成相關(guān)萜類合成酶基因進(jìn)行了篩選與功能驗(yàn)證，結(jié)果顯示與ObGES 過(guò)表達(dá)相比，3 個(gè)茶樹(shù)萜類合成酶候選基因合成香葉醇功能較弱且可能為假陽(yáng)性，有待進(jìn)一步分析。

綜上所述，香葉醇在茶樹(shù)葉片中富集，且以糖苷態(tài)儲(chǔ)存在細(xì)胞中，在紅茶加工過(guò)程的揉捻工序中，因細(xì)胞破碎水解釋放并對(duì)其香氣產(chǎn)生貢獻(xiàn)。不同月份下、不同茶樹(shù)品種中的香葉醇積累特性均有不同，推測(cè)這與香葉醇生物合成途徑受溫度、光照調(diào)控相關(guān)，以及存在遺傳背景的差異。本研究結(jié)果為后續(xù)研究香葉醇生物合成及調(diào)控機(jī)制提供了理論依據(jù)。